JoVE Encyclopedia of Experiments
טכניקות ביולוגיות
0 צפיות • 6:41 דק' • January 15th, 2026
התחל עם חולה זכר עם אזוספרמיה, מצב בו הזרע חסר גמטות זכריות או זרעונים.
אזור איברי המין מחוטא ומכוסה בווילון כדי לחשוף רק את שק האשכים, האיבר המאכלס את האשכים, המייצרים זרעונים.
האירו את האזור וזהו את האפידידימיס, מבנה האחראי על התבגרות ואחסון הזרעונים.
הכנס מזרק המכיל תמיסת תרבית מיוחדת לגמטות לרקמת האפידידימל.
הפעל לחץ שלילי תוך כדי ניקוב הרקמה כדי לחלץ נוזל אפידידימלי המכיל זרע.
העבירו את הנוזל שנאסף לכלי המכיל את תמיסת התרבית כדי לשמר את כדאיות הזרע.
בעזרת מיקרוסקופ ספרו את הזרעונים הבוגרים והבריאים המציגים תנועתיות.
העבירו את התמיסה לצינור, ואז צנטריפוגה כדי להפריד את הזרעונים ולהסיר את הסופרנטנט.
השעו מחדש את התאים בתמיסת תרבית טרייה.
הזרעונים המבודדים מוכנים כעת לשימוש בהליכי טיפולי פוריות.
כדי להתחיל, אספו חבילת מכשירים כירורגיים, שני מזרקים, תמיסת חיטוי, כפפות גומי סטריליות וחבישה דביקה. בדוק את חבילת המכשירים הכירורגיים שעברה עיקור קיטור בלחץ גבוה לאיתור נזק. הניחו את החבילה על שולחן המכשירים ופתחו את השכבה החיצונית. לאחר מכן, בקש מהאנדרולוגים ללבוש כפפות גומי סטריליות.
פתח את השכבה הפנימית של חבילת המכשירים הכירורגיים ובדוק את סרט חיווי העיקור לעיקור תקין. לאחר מכן, הכינו שני מזרקים של 5 מיליליטר המצוידים במחטים של 0.7 מיליליטר להרדמה וניתוח. פתח את האמפולה המכילה זריקת לידוקאין. השתמש במזרק סטרילי של 5 מיליליטר כדי לשאוב את תמיסת הלידוקאין ולסלק את בועות האוויר מהמזרק.
כעת, מקם את המטופל המוכן על שולחן הניתוחים בתנוחת ליטוטומיה. לאחר הסרת המכנסיים, אבטח את הבגד העליון מעל הטבור כדי לחשוף את הפרינאום והבטן התחתונה מתחת לטבור במלואו. לאחר מכן, כוונן את זווית המנורה ללא צל כדי להאיר את שק האשכים של המטופל.
השתמש במלקחיים סגלגלים כדי לאחוז בכדור גזה סטרילי. טבלו את כדור הגזה במלואו בתמיסת חיטוי. ולחטא את העור, החל מהבטן התחתונה ונע לכיוון הירכיים הקדמיות והפנימיות, אזור הפרינאום, הפין ושק האשכים. לאחר מכן, הניחו מגבת מרובעת סטרילית מתחת לישבן המטופל. פרשו מגבת סטרילית סביב אזור הניתוח, וחשפו לחלוטין את שק האשכים בכל האזור.
בעזרת פיפטה פסטר סטרילית, העבירו כ -2 מיליליטר של תמיסת תרבית G-MPOS-PLUS לצלחת התרבות. לאחר סגירת המכסה, העבירו את הצלחת לאחות בחדר הניתוח דרך חלון ההעברה. כעת, הניחו את צלחת התרבות על המגבת הסטרילית על שולחן המכשירים ופתחו את המכסה.
בעזרת מזרק נוסף של 5 מיליליטר, שאפו כ-0.2 מיליליטר של תמיסת תרבית G-MPOS-PLUS והסירו את בועות האוויר. לאחר מכן, החזק את שק האשכים של המטופל ביד שמאל, ואבטח את האפידידימיס הדורש ניקוב. משש את האפידידימיס ביד ימין כדי לאשר את מיקום הניקוב הניתוחי.
לאחר מכן, עם מזרק של 5 מיליליטר המכיל תמיסת תרבית G-MPOS-PLUS ביד ימין, נקב בניצב לעור לתוך רקמת האפידידימלית. תוך שמירה על לחץ שלילי, נקב שוב ושוב את רקמת האפידידימליה כדי לאפשר לנוזל להיכנס דרך המחט, ולאחר מכן משוך את מחט הניקוב.
הזרקו את הנוזל האפידידימלי המופק לתוך צלחת התרבית. לאחר מכן, שאפו תמיסת תרבית G-MPOS-PLUS בקרבת מקום כדי לשטוף את המזרק כדי למקסם את כמות הנוזל האפידידימלי שנאסף. כעת, העבירו את צלחת התרבית המכילה נוזל תרבית G-MPOS-PLUS ונוזל אפידידימלי לטכנאי מעבדת העוברים דרך חלון ההעברה.
הניחו את צלחת התרבות על במת מיקרוסקופ אופטי הפוך ואבטחו אותה. הפעל את מתג ההפעלה של המיקרוסקופ והתאם את עוצמת האור בהתאם. לאחר מכן, סובב את הממיר של המיקרוסקופ האופטי ההפוך. בחר את עדשת האובייקט פי 10, וסובב את ספירלות המיקוד הגסות והעדינות כדי לכוונן את אורך המוקד.
לאחר איתור הזרעונים האפידידימליים, התבונן בהם בהגדלה של פי 40 כדי להעריך את מספרם ואיכותם. בעזרת פיפטה פסטר סטרילית, העבירו את הנוזל מצלחת התרבות לצינור צנטריפוגה של 15 מיליליטר לאחר התבוננות בזרעונים פעילים מספיקים. הנח את צינור הצנטריפוגה על מגש האיזון והשתמש בצינור צנטריפוגה מאותו מפרט המכיל מים סטריליים עד ליישור.
ואז פתח את דלת הצנטריפוגה. הנח את הצינורות בחריץ הכרטיס בצורה סימטרית וסגור את הדלת. לחץ על כפתור התחל כדי להתחיל את תהליך הצנטריפוגה. לאחר השלמת התהליך, הסר את הצינור המכיל את הנוזל האפידידימלי מהצנטריפוגה. לאחר מכן, שאפו בעדינות את הסופרנטנט עם פיפטה פסטר סטרילית והשליכו את הסופרנטנט המצויר.
בעזרת פיפטת פסטר סטרילית, העבירו את המשקעים מתחתית צינור הצנטריפוגה לצינור צנטריפוגה חדש המכיל כ-2 מיליליטר של תמיסת תרבית G-IVF Plus. פיפטה בעדינות את התמיסה כדי להשעות היטב את המשקעים. העבירו כ-0.5 מיליליטר של תמיסת תרבית G-IVF Plus לצינור הצנטריפוגה. נשפו בעדינות את הזרע האפידידימלי בתחתית כדי להשעות אותו ביסודיות, והשתמשו בהם להליך ICSI.