העברת גנים תת-פיאליים בחוט השדרה של העכבר כדי להעריך את ביטוי הגנים

קח עכבר מורדם, גלח את גבו וחטא את העור.

חתכו את העור, נתקו את השרירים מהחוליות ומשכו אותם באמצעות מלחציים.

קדחו לתוך הלמינה החולייתית כדי ליצור סדקים, ואז הסירו את שברי העצם כדי לחשוף את הדורה מאטר, קרום חוט השדרה החיצוני.

בעזרת מחט, צור פתח דוראלי ונקב את ה-pia mater הבסיסי כדי להיכנס לחלל התת-קרקעי לגישה ישירה לרקמת עמוד השדרה.

קח מחט אספקה המכילה תרחיף של נגיף אדנו-רקומביננטי הנושא גן המבטא חלבון פלואורסצנטי והזריק את התרחיף.

משוך את המחט, תפר את השרירים והעור ואפשר לעכבר להתאושש.

הנגיף נקשר לקולטנים על תאי עצב ותאי גליה ועובר אנדוציטוזה.

ברגע שנכנס לגרעין, הנגיף מעורר ביטוי גנים לייצור חלבונים פלואורסצנטיים.

מודל העברת הגנים התת-קרקעיים מוכן כעת להעריך את ביטוי גן המטרה בחוט השדרה.

התחל בהרדמה נכונה של בעל החיים לניתוח. משתמשים כאן באיזופלורן. ודא היעדר תגובת צביטה בכפות לפני שתמשיך. לאחר מכן כסו את העיניים במשחה עיניים. לאחר מכן, יש לגלח את גב החיה בעזרת קוצץ, ולנקות את העור עם 2% כלורהקסידין.

אם יש לבצע הזרקות תת-פיאליות מותניות, חתוך את העור המכסה את חוליות T8 עד L1 בעזרת אזמל. ואז השתמש במספריים כדי לנתק את השריר הפרה-חולייתי מחוליות עמוד השדרה T10 ל-T12. הרכיבו את החיה למסגרת סטריאוטקסית סטנדרטית באמצעות מהדקי עמוד השדרה של העכבר. לאחר מכן, השתמש במקדחה דנטלית כדי לגלח את שני צידי