טיפול תוך מוחי-חדרי עם Resiniferatoxin להפחתת רגישות TRPV1 במוח העכבר
אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 2:54 דק׳ • August 7th, 2025
קח מיקרו-מזרק מלא ב-resiniferatoxin, אגוניסט בעל זיקה גבוהה של קולטני TRPV1, תעלות יונים רגישות לכאב המתבטאות בתאי עצב חושיים.
העבירו את המחט דרך צינור מתכת, וחשפו קצה קצר של הקצה למיקוד מדויק לחדר.
מקם עכבר מורדם נוטה וחטא את ראשו באמצעות אלכוהול. החזק את הראש בחוזקה כדי לייצב את הגולגולת.
הזיזו את המחט לרוחב על הקרקפת עד שהיא מתחברת לתפר הסגיטלי.
הזיזו את המחט ימינה, ואז זזו בחוזקה כדי להתחבר לתפר העטרה.
הכנס את המחט לחדר הצדדי הימני, ולאחר מכן הזריק את ה-RTX לאט.
החזק את המחט לזמן קצר כדי לאפשר דיפוזיה של RTX, ולאחר מכן משוך אותה לאט כדי למנוע זרימה חוזרת.
RTX נקשר לתעלות TRPV1 על נוירונים חושיים במוח, וגורם לזרם סידן מתמשך ודפולריזציה עצבית ממושכת.
זה מפעיל דה-סנסיטיזציה של TRPV1 בתיווך זרחון, ואחריו הפנמת TRPV1 ופירוק ליזוזומלי, מה שמפחית את ההיענות העצבית לגירוי כאב.
להרדים עכבר עם נתרן פנטוברביטל תוך הצפק ולבדוק אם יש אובדן רפלקס ישור. לטיפול תת עורי, יש להזריק RTX ב-20 מיקרוגרם למיליליטר לחלק האחורי של הצוואר בנפח של 0.1 מיליליטר לכל 10 גרם משקל גוף. עבור קבוצת הביקורת, הזרקו את הרכב באותו אופן. העבירו מחט חד פעמית בגודל 27 דרך צינור מתכת כדי לחשוף קצה של 3 עד 3.5 מילימטר של המחט.
ואז החזק את עצמות הקשקש של העכבר בחוזקה בעזרת האצבעות. הזיזו את המחט לרוחב על הקרקפת ומצאו את התפר הסגי
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים