העברת תאי גזע מזנכימליים תוך-אף במודל עכבר של פגיעה מוחית טראומטית

התחילו עם עכבר מורדם עם פגיעה מוחית טראומטית.

באתר הפגיעה, דה-מיאלינציה אקסונלית ונזק עצבי מעוררים שחרור של ציטוקינים פרו-דלקתיים.

אבטח את העכבר והעביר תוך האף אנזים פרוטאוליטי.

לאחר מכן, מקם את העכבר עם הפנים כלפי מעלה למשך זמן קצר וחזור על אספקת האנזים.

האנזימים הפרוטאוליטיים מפרקים את המטריצה החוץ-תאית באפיתל האף ומשפרים את חדירות התאים.

לאחר מכן, יש לתת תוך-אף את תאי הגזע המזנכימליים המסומנים בתווית, או תמיסת MSC.

החזק את ראש העכבר זקוף לזמן מה כדי למנוע ניקוז מוקדם ולאפשר ספיגת MSC לרקמת האף.

חזור על תהליך אספקת MSC.

אפשר לעכבר להתאושש.

האותות הכימוטקטיים של ציטוקינים פרו-דלקתיים מכוונים MSCs לנדוד מחלל האף לאתר הפגיעה המוחית.

באתר הפציעה, MSCs מפרישים גורמים נוירוטרופיים המקדמים רמיאלינציה. זה מדגיש את הפוטנציאל הנוירותרפי של MSCs לתיקון עצבי.

להעברת תאים, לאחר אישור חוסר תגובה לצביטה בבוהן, קשקש את העכבר תוך כדי שיתוק הגולגולת. הנח את קצה הפיפטה המכילה 4 יחידות של היאלורונידאז למיקרוליטר PBS ליד ה-nare של העכבר בזווית של 45 מעלות והכנס 3 מיקרוליטר של תרחיף היאלורונידאז לכל נחיר. הניחו את בעל החיים עם הפנים כלפי מעלה על כרית נקייה למשך חמש דקות לפני שתחזרו על הטיפול ארבע פעמים ובסך הכל 100 יחידות של טיפול בהיאלורונידאז.

לאחר הטיפול האחרון, הנח את העכבר בחזרה על המשטח למשך 30 דקות לפני ריסון העכבר, כפי שהודגם זה עתה. כשהראש משותק, יש לתת 3 מיקרוליטרים של תרחיף תאי הגזע המזנכימליים לכל נחיר במשך תקופה של שלוש שניות לכל אספקת תמיסה, תוך החזקת העכבר במקומו למשך 30 שניות עד שהדגימה נופלת לחלוטין. לאחר שתי דקות, חזור על המשלוח עד שלוש פעמים עד שכל נפח תאי הגזע המזנכימליים מועבר. לאחר מכן החזר את העכבר לכלוב שלו עם ניטור עד לשכיבה מלאה.