אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 2:29 דק׳ • August 7th, 2025
קח עכבר מורדם עם מונופילמנט המוחדר לעורק המוח האמצעי שלו כדי לגרום לחסימה.
זה חוסם את זרימת הדם למוח, ומעורר איסכמיה מוקדית.
החסימה מגבילה את אספקת החמצן והגלוקוז, וגורמת לדלדול ATP ולדפולריזציה עצבית.
נוירונים דה-פולריים משחררים עודף גלוטמט, שנקשר לקולטנים פוסט-סינפטיים, וגורם לזרם סידן מסיבי.
סידן תוך-תאי מוגבר משבש את תפקוד המיטוכונדריה ומקדם ייצור ROS, מה שגורם לנזק עצבי.
להרדים מחדש את העכבר.
פתח מחדש את החתך והסר את המונופילמנט כדי להשיג רפרפוזיה.
החדרת חמצן פתאומית מייצרת עודף ROS ממיטוכונדריה לא מתפקדת, ומחמירה את הפגיעה העצבית.
כדי להפחית זאת, חשוף את העכבר לתערובת גז עשירה בפחמן דו חמצני לצורך התניה חומצית או APC לאחר תחילת הזלוף.
זה מגביר את ריכוז הפרוטונים במוח, מעכב קולטנים, מפחית את זרימת הסידן ומונע אקסיטוטוקסיות בתיווך סידן.
בנוסף, APC מייצב את המיטוכונדריה ומעכב את ייצור ה-ROS, ובכך מספק הגנה עצבית.
55 דקות לאחר תחילת הסתימה, יש להרדים מחדש את החיה באיזופלורן ולמקם את החיה כמו קודם. לאחר מכן פתח את חתך הצוואר וחשוף מחדש את עורק הצוואר המשותף. לאחר תקופת החסימה, השתמש במלקחיים עיניים כדי לשלוף בעדינות את החוט כדי להשיג רפרפוזיה. ואז הפוך את התפר הזמני לקבוע, על ידי הידוק הקשר. לטיפול בחמצת, שנה את הגז הנשאף על ידי חרוט האף ל-20% פחמן דו חמצני, 20% חמצן ו-60% חנקן למשך חמש דקות. לאחר סגירת החתך בתפר כירורגי קטוע, הנח את העכבר בכלוב מחומם של 30 מעלות צלזיוס עד שהעכבר יחזור להכרה.