אספקה תוך-אפית של siRNA למוח העכבר באמצעות מכשיר מיקום

התחל עם עכברים מורדמים המונחים על מכשיר מיקום כשגבם מקביל לתמיכת גב הכיסא ובניצב למושב.

העכברים ממוקמים בתנוחת ראש למטה וקדימה ומאובטחים באמצעות חגורות כיסא.

באמצעות מיקרופיפטה עמוסה בקומפלקס פפטיד-siRNA ממוקד נוירונים, הניחו טיפה ליד נחיר אחד, ואפשרו לעכבר לשאוף את התמיסה באופן טבעי.

לחץ בעדינות על ראש העכבר כלפי מטה במהלך השאיפה כדי למנוע מהתמיסה להתנקז לריאות.

עצרו לרגע, ואז חזרו על המתן בנחיר השני.

חזור על ההליך עבור העכברים הנותרים.

הקומפלקס חודר לרירית האף, משם הוא נכנס לעצבי הריח והטריגמינל ועובר דרכם כדי להגיע למוח.

בתוך המוח, הקומפלקס נקשר לקולטנים עצביים, עובר אנדוציטוזיס ומקל על העברת siRNA תוך תאית.

ה-siRNA הופך לחלק מקומפלקס RISC, אשר עם קשירה ל-mRNA המטרה, גורם להשתקת גנים.

כדי להתחיל בהליך זה, הערך את רמת ההרדמה של רפלקס הדו-רגלי של העכברים על מנת לשמור על המישור הכירורגי. לאחר מכן, הנח את מכשיר המיקום במרחק ובגובה מתאימים כדי לאפשר גישה נוחה לכל הריאגנטים הנדרשים.

לאחר מכן מרחו משחה על עיני החיה. חגור עכבר אחד בחגורות כיסא, וודא שהגפיים הקדמיות של העכבר מספקות תמיכה טבעית בזמן שהוא במצב רגוע ללא כל אי נוחות. חזור על ההליכים עבור העכברים הנותרים. הנח בעדינות כל עכבר על הכיסא המיועד על ידי הנחת גבו במקביל לתמיכת הגב של הכיסא, וב-90 מעלות למושב הכיסא.

תנו לבעל החיים לשכב באופן ט