שחרור נוירוטרנסמיטר הדמיה באמצעות נוירוטרנסמיטר מבוסס תאים מדווחים מהונדסים פלואורסצנטיים

קחו עכבר עם חלון גולגולת המכיל שכבת גולגולת דקה כדי לאפשר הדמיה של המוח.

תנועת הראש מוגבלת באמצעות מוט ראש מחובר.

קליפת המוח מוזרקת מראש עם מדווחים מהונדסים פלואורסצנטיים מבוססי תאים, או CNiFERs, שהם תאים מדווחים המאפשרים זיהוי בזמן אמת של שחרור נוירוטרנסמיטרים.

ה-CNiFERs מבטאים קולטן נוירוטרנסמיטר מצומד לחלבון G וגלאי סידן ציטופלזמי, המורכב מתחום קושר סידן המאוחה לפלואורופורים תורמים ומקבלים.

באמצעות מיקרוסקופ דו-פוטוני, עורר את הגלאי כדי לגרום לפליטת פלואורסצנטיות של תורם, ואפשר הדמיה של CNiFER.

פעילות עצבית המגיעה לקליפת המוח גורמת לשחרור נוירוטרנסמיטרים.

נוירוטרנסמיטורים אלה נקשרים לקולטני CNiFER ומפעילים מסלולי איתות הגורמים לשחרור סידן מהרטיקולום האנדופלזמי.

הסידן הציטופלזמי המוגבר נקשר לגלאי, וגורם לשינוי קונפורמציה שמביא את הפלואורופורים לקרבה.

התורם מעביר אנרגיה למקבל כדי לעורר את פליטת הקרינה של המקבל, מה שמעיד על שחרור נוירוטרנסמיטרים.

הנח את פלטפורמת ההדמיה עם העכבר המרוסן בראש מתחת למטרת טבילה במים פי 10 במיקרוסקופ הדמיה של שני פוטונים. הכנס את קוביית המסנן להדמיית שריג בעלת מראה דיכרואית ב-505 ננומטר ומסנני פס-פס המשתרעים על פני 460 ננומטר עד 500 ננומטר למדידת ECFP ו-520 ננומטר עד 560 ננומטר למדידת אתרוג.

לאחר מכן הוסף ACSF לבאר, המכיל את חלון הגולגולת הדק, והורד את יעד הטבילה