JoVE Encyclopedia of Experiments
מדעי המוח
0 צפיות • 2:15 דק' • June 17th, 2025
התחל עם תאי שוואן או SCs, תאי גליה מיאליניים של מערכת העצבים ההיקפית, שגודלו במדיה.
העבירו את התאים לכלי קולורימטרי המצויד באלקטרודות משני הצדדים.
הנח את המנה על שדה חשמלי פועם ננו-שנייה או מכשיר nsPEF והגדר את עוצמת השדה החשמלי הרצויה.
החל פולסים nsPEF על ידי סיבוב זהיר של האלקטרודות עד להופעת ניצוצות.
מיד לאחר הגירוי, הפרד את האלקטרודות והמשך בתרבית התאים.
nsPEF משבש את ממברנות ה-SC, ויוצר ננו-נקבוביות חולפות המאפשרות זרימת סידן. הממברנות בסופו של דבר נאטמות מחדש.
סידן תוך-תאי מפעיל חלבונים קושרי סידן, ומפעיל מסלולי איתות המווסתים את הגנים המעורבים בהתקדמות מחזור התא.
איתות סידן מתמשך מפעיל גם גורמי שעתוק המניעים את הדה-דיפרנציאציה של SCs לפנוטיפ תיקון, ואחריו התפשטות.
בנוסף, הפרשת גורמים נוירוטרופיים התומכים בהישרדות ובצמיחה של תאי עצב עולה.
המודל מוכן כעת לחקור את תפקידם של SCs מגורים nsPEF בהתחדשות עצבים היקפיים לאחר פציעה.
כדי להתחיל, השעו מחדש את תאי ה-RSC96 המתורבתים ב-1 מיליליטר של מדיום תרבית DMEM, והעבירו אותם לצלחות קולורימטריות עם אלקטרודות משני הצדדים. הפעל את מתג ההפעלה של המכשיר, וסובב את הכפתור כדי להגדיר את עוצמות השדה החשמלי. סובב בזהירות את האלקטרודות עד להופעת ניצוצות, מה שמאפשר לתאים לקבל 5 פולסים של שדות חשמליים פועמים ננו-שניות בהתאם לעוצמות עוצמת השדה שנקבעו מראש. הפרד מיד את שתי האלקטרודות לאחר הטיפול.