הזרקת וקטור ויראלי לחוט השדרה של החולדה למעקב עצבי לאחור

קח מיקרו-מזרק עם מיקרו-מחט המכילה הובלה לאחור יעילה ביותר או וקטור ויראלי HiRet.

הגליקופרוטאינים במעטפת נגיף ה-HiRet מקלים על כניסתו לתאי עצב באמצעות סינפסות. הנגיף נושא גם גן המקודד חלבון פלואורסצנטי.

קח חולדה מורדמת עם חוט שדרה מותני חשוף 1 עד 4.

השתמש בקו האמצע של חוט השדרה כהפניה, מקם את המחט מעל אתר ההזרקה.

הורד את המחט לחוט השדרה.

התחל לתת את הנגיף בקצב מבוקר.

אפשר מספיק זמן לדיפוזיה ויראלית לפני הוצאת המחט.

קולטנים עצביים נקשרים לגליקופרוטאינים נגיפיים, מה שמקל על כניסת הנגיף דרך הסינפסה והובלה דרך האקסון לסומה, תהליך הנקרא הובלה לאחור.

הגן הנגיפי משתלב בגנום המארח, ומאפשר ביטוי של חלבונים פלואורסצנטיים.

נגיפים אלה עוברים גם דרך נוירונים מחוברים, ומאפשרים מעקב אחר מסלולים עצביים.

הנח את המחט בקו האמצע של חוט השדרה והשתמש בסולם ורנייה על המיקרומניפולטור כדי לכוון את המחט לרוחב 0.8 מילימטרים. לאחר מכן הורד את המחט לחוט השדרה עד שהיא נכנסת, אך לא מנקבת את הדורה. והשתמש בתנועת סיבוב מהירה כדי לנקב את הדורה עם המחט עד שקצה המחט שקע לעומק של 1.5 מילימטרים.

לאחר שהמחט נמצאת במקומה, תכנת את המזרק להעביר את הנגיף בקצב של 400 ננו ליטר לדקה ואשר שהנגיף נכנס לחוט השדרה על ידי התבוננות בהתקדמות חזית הצבע. לאחר סיום ההזרקה, אפשר למחט לנוח בחוט השדרה למשך שתיים עד חמש דקות כדי להקל על התפשטות הנגיף, לפני שתמשוך לאט את המחט למיקום באתר ההזרקה הבא.