אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 3:33 דק׳ • June 17th, 2025
מלאו מזרק בתמיסה המכילה נגיפים הקשורים לאדנו, או AAV, ולידוקאין, חומר הרדמה מקומי.
הנח עכבר ער במצב שכיבה וכסה את פלג גופו העליון.
החזק את חגורת האגן של העכבר וגלח את הגב התחתון שלו כדי לחשוף את העור. עקר אותו עם יוד ואתנול.
אתר את הפער בעמוד השדרה התחתון ולחץ בעדינות כדי לסמן אותו.
סובב את הזנב כדי ליישר את עמוד השדרה והכנס את המזרק אנכית.
כוונן את הזווית עד שמתרחשת תנועת זנב, המאשרת את כניסת המחט לחלל התוך-תקלי שבו זורם נוזל המוח או CSF.
הזרקו לאט את התמיסה להפצה אחידה.
החלקיקים הנגיפיים נקשרים לתאי עצב, נכנסים פנימה ומשחררים את החומר הגנטי שלהם לתוך הגרעין, מה שמאפשר ביטוי גנים ממוקד.
לידוקאין חוסם באופן זמני אותות עצביים, גורם לשיתוק רגליים לטווח קצר, ומאשר לידה מוצלחת ב-CSF.
פרוטוקול זה מבסס אספקה תוך-תקלית כשיטה יעילה לטיפול במחלות מערכת העצבים המרכזית.
לפני תחילת ההליך, חבר מחט בגודל 27 למזרק המילטון בנפח 25 מיקרוליטר ויישר את הקצה המשופע של המחט עם הסולם הנפחי על המזרק, ולאחר מכן טען בזהירות 8 מיקרוליטר של 4 כפול 10 לעותקי הגנום העשירי של תמיסת הנגיף לתוך המזרק, תוך הקפדה על הימנעות מבועות.
לאחר מכן, הניחו עכבר ער בן 30 עד 70 יום, במשקל 12 עד 30 גרם על חתיכת מיטה במצב נוטה במכסה מנוע בטיחות ביולוגית וכסו את פלג הגוף העליון בגזה סטרילית כדי להרגיע את העכבר ולהימנע מנשיכה. אחזו בחוזקה
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים