השתלה דרך האף של תאי מיקרוגליאה אנושיים שמקורם בתאי גזע פלוריפוטנטיים מושרים למוח העכבר

קח עכבר מורדם שהוזן בתזונה המכילה מעכבים.

ברקמת המוח, מעכב זה מסלק באופן סלקטיבי תאי מיקרוגליה.

מרחו תמיסת היאלורונידאז על שני הנחיריים.

הנח את העכבר לזמן קצר במצב שכיבה כדי למנוע ניקוז של התמיסה.

היאלורונידאז מפרק את המטריצה החוץ-תאית של רירית האף, משחרר את התאים ומשפר את חדירת הרקמות.

יש לתת מיקרוגליה אנושית שמקורה בתאי גזע פלוריפוטנטיים או תרחיף תאי iPSMG לנחיר אחד.

הנח את העכבר במצב שכיבה. לאחר מכן, יש לתת את התרחיף לנחיר השני.

חזור על המתן מספר פעמים.

תאי ה-iPSMG חודרים לרירית האף ועוקבים אחר מסלול הריח כדי להגיע למוח, ובכך עוקפים את מחסום הדם-מוח.

אפשר לעכבר להתאושש.

להרדים את העכבר ולתת את אמצעי ההשתלה תוך האף במרווחי זמן קבועים.

גורמי גדילה במדיה תומכים בצמיחה ובהישרדות של תאי iPSMG מושתלים במוח העכבר.

כדי להכין עכברים להשתלה דרך האף, האכילו את העכברים הזכרים בתזונה המכילה PLX למשך שבעה ימים. בסוף היום השביעי, תפסו את דיאטת PLX והאכילו את העכברים בתזונה רגילה. שעה לפני השתלה דרך האף של iPSMG, יש לתת 2.5 מיקרוליטר של היאלורונידאז ב-PBS לכל נחיר פעמיים, תוך שימוש בקצה פיפטה של 10 מיקרוליטר כדי להגביר את החדירות לרירית האף.

הנח את העכברים במצב שכיבה לאחר מריחת ההיאלורונידאז. יש לתת 2.5 מיקרוליטר של היאלורונידאז 10 דקות לפני ההשתלה הטרנס-אף של iPSMG. מרחו 2.5 מיקרוליטר של תרחיף תאים לנחיר אחד של העכבר באמצעות קצה פיפטה של 10 מיקרוליטר. הנח את העכבר במצב שכיבה למשך חמש דקות לפני מתן תרחיף תאים לנחיר השני.

נהל את תרחיף התאים ארבע פעמים, תוך החלת נפח כולל של 20 מיקרוליטר לכל בעל חיים. 48 שעות לאחר הפסקת האכלת PLX, חזור על מתן היאלורונידאז ותרחיף תאים על אותם עכברים. למתן ציטוקינים, יש למרוח 2.5 מיקרוליטר ממדיום ההשתלה לנחיר אחד של העכבר באמצעות קצה פיפטה של 10 מיקרוליטר.