הערכת ההשפעות הנוירו-פרוטקטיביות של תרכובת בדיקה במודל עכבר חסימת עורק מוחי אמצעי

התחל עם עכברים מורדמים עם תפרים על עורק הצוואר החיצוני, או ECA, ועורק הצוואר הפנימי, או ICA, וחוט דק החוסם את עורק המוח האמצעי, או MCA.

מקם בדיקת דופלר לייזר כדי למדוד את זרימת הדם היחסית במוח ב-MCA. ירידה בזרימת הדם מאשרת חסימת MCA.

אבטח את החוט ב-ICA כדי לשמור על חסימת MCA.

חסימה זו מגבילה את אספקת הדם המחומצן למוח, מה שמוביל למוות עצבי ולהיווצרות רקמות מתות או אוטם.

לאחר תקופת החסימה, משוך את החוט כדי להחזיר את זרימת הדם.

תפרו את החתך ואפשרו לעכברים להתאושש.

חלקו את העכברים לשתי קבוצות ותנו תרכובת בדיקה דרך הפה לקבוצה המטופלת, בעוד קבוצת הביקורת נשארת ללא טיפול.

התרכובת נכנסת למחזור הדם, מגיעה למוח, מגבילה אפופטוזיס עצבי ומעכבת מוות עצבי נוסף בהשוואה לקבוצת הביקורת שלא טופלה.

אוטם קטן יותר בקבוצה שטופלה בהשוואה לקבוצת הביקורת מאשר את ההשפעה הנוירו-פרוטקטיבית של התרכובת.

כדי להגדיר מודל חסימת עורק מוח אמצעי של עכבר, או MCAO, יש לאשר חוסר תגובה לגירוי סיפורי בעכבר C57 שחור 6 מורדם בן שישה שבועות, במשקל 22 עד 25 גרם. והנח את העכבר על שמיכת אחיזה בטמפרטורת גוף של 36.5 מעלות צלזיוס המחוברת למדחום.

לאחר הסרת כל השיער מהחזה והצוואר של העכבר על ידי גילוח וקרם אפילציה, הניחו את העכבר מתחת למיקרוסקופ סטריאו ובצעו חתך עור של שני סנטימטרים במרכז הצוואר. בודד בזהירות את עורק הצוואר המשותף השמאלי, עורק הצוואר החיצוני וענף עורק הצוואר הפנימי מרקמות החיבור שמסביב. והשתמש בתפר משי 4-0 כדי לקשור את עורק הצוואר החיצוני ואת עורק הצוואר המשותף, עם קשר חצי תקלה כדי לחסום זמנית את זרימת הדם לעורק הצוואר הפנימי.

הכנס עובי 0.1 עד 0.12 מילימטר, אורך 11 מילימטר, ציפוי סיליקון, 8-0 מונופילמנט, 4-0 אפס תפר משי דרך עורק הצוואר הפנימי למקור עורק המוח האמצעי השמאלי. והשתמש במד זרימת דופלר לייזר כדי למדוד את הירידה בעורק זרימת הדם המוחי היחסי. תקן את החוט המוחדר לכלי הדם למשך שעתיים, בזמן שעורק המוח חסום.

בתום תקופת הסתימה, משוך בזהירות את החוט כדי להחזיר את זרימת הדם למשך 22 שעות של רפרפוזיה. והשתמש בתפרי משי 3-0 כדי לתפור את העור בחמישה מקומות עם שני קשרי חצאי תקלות. לאחר מכן, החזירו את העכבר לכלוב שלו להתאוששות מהרדמה. שעה לאחר סיום הרפרפוזיה, יש לתת 300 מיליגרם לק"ג משקל גוף G-Rex לחיות הניסוי רק דרך הפה.