Name: הדם אוסף של ניתוח ביוכימי דג הזברה למבוגרים בלבד (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-05-26T14:00:00.000+00:00
Duration: 3 min 11 s
Description: למדו טכניקת איסוף דם מזברה בוגרת מהאורטה הגבית לניתוח ביוכימי. השיטה כוללת הרדמה, חיתוך בחדק וסריקה לקבלת סרום לבדיקות כולסטרול וטריגליצרידים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

FIPE / HCPA - פונדו דה Incentivo דואר Pesquisa Eventos שכמיות - <a href="http://www.capes.gov.br/">Coordenação Aperfeiçoamento דה דה דה Pessoal Nível מעולה</a>

1. פרוטוקול טקסט <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפני איסוף הדם דג הזברה, יש צורך להכין מים anesthetizing. יוצקים ~ 200 מ&quot;ל של מים לתוך מיכל אקווריום עם קיבולת של 500 מ&quot;ל. הוסף את ~ 200 גרם של קוביות קרח. הטמפרטורה צריכה להיות על 4 ° C. כמו קוביות קרח נמס, יהיה צורך להוסיף קוביות קרח יותר כדי לשמור על טמפרטורה קבועה ליד 4 ° C. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כאשר המים anesthetizing מוכן, להכין את החומרים הדרושים לאיסוף דם. שים עצה השמירה נמוכה על pipettor P20 ולהשאיר pipettor שבו ניתן לגשת בקלות. אין לאפשר את קצה פיפטה ליצור קשר עם כל מקורות הזיהום. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מכסים בצלחת פטרי עם פיסת גזה יבש. להב פלדה עוד פיסת גזה צריך להיות ממוקם במקום נגיש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צנטריפוגה להתאים צינורות פלסטיק יהיה צורך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כאשר החומרים הנ&quot;ל מוכנים, לתפוס את דג הזברה 1 להיות שנינות הרדיםחה רשת דיג ולשחרר אותו למים כי הוכן הרדמה. דג הזברה דורשים 3-6 של במים צונן להיות מורדם, בהתאם דגים. שמור את הדגים במים קרים עד שהוא כבר לא מגיב לגירויים חיצוניים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות רשת דיג, הצב את הדג הרדים על דף שהוכן של גזה, והשאיר את הזנב של גזה. מקפלים את גזה על הראש של הדג והגוף משמיט רק את זנבו. מכניסים את הדג מכוסה גזה על צלחת פטרי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש בלהב פלדה לעשות חתך אלכסוני רק בין סנפיר אנאלי סנפיר הזנב. הדם יתחיל לצאת. בשלב זה, יש צורך לפעול במהירות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שואפים בעדינות את הדם שיוצא עם pipettor P20 (טעון מראש עם הטיפ השמירה נמוכה). כמות הדם, כי ניתן לאסוף תלוי בגודל של הדג ועד כמה שזה היה מורדם כראוי. זה בדרך כלל נע בין 5 ל μl 20. כאשר הדם מפסיק גoming החוצה, בעדינות להעביר את הדם שאף לתוך הצינור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי למנוע המוליזה, זה קריטי, כי צינור עם דם זה יטופל בזהירות רבה, ללא כל תנועות דרסטיות עד מכניסים לצנטריפוגה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי למנוע המוליזה, חשוב גם כי דגימת דם להיות מאובטח בצנטריפוגה בתוך 10 דקות של איסוף הדם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> במידת הצורך, ניתן לשלב בין דם חיה יותר, מה שהופך לבריכה. אספו דגימות יעבוד בסדר כל עוד עיכוב בין איסוף דם דגים צנטריפוגה הראשון אינו עולה על 10 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר איסוף הדם נעשה, בצנטריפוגה דם במשך 10 דקות על 0.5 גרם (צנטריפוגה Eppendorf 5415D). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר צנטריפוגה, סרום נמצא בשכבה העליונה של הצינור. עם פיפטה, לשאוב בדם, כדי לוודא לקבל רק את הסרום, תוך שמירה על שכבות הן חילקו גם ויציב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מעבירים את הנוזל לתוך microtube חדש והואהוא מוכן לשימוש בניתוחים ביוכימיים. הסרום ניתן לאחסן את הקרח בזמן שהוא מחכה בקוצר רוח להתחיל את ניתוח ביוכימיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם בסרום לא ישמש מיד, זה יכול להיות קפוא ב -18 ° C עד כ 3 חודשים. </li></ol> 2. נציג תוצאות אפשר היה לאסוף 5-20 μl של דם מלא מדגים כל מה מייצג הדם ואפילו 4 פעמים יותר מאשר הטכניקות המתוארות לעיל (טבלה 2). ניתוח ביוכימי של כולסטרול כללי, HDL כולסטרול, LDL-כולסטרול, טריגליצרידים בוצעו לאחר איסוף הדם באמצעות טכניקה זו. שתי קבוצות של שני המינים היו דגים צם במשך 24 שעות לפני איסוף הדם, כדי למנוע התערבות צריכת מזון. הניתוחים נעשו עם קטן מדורגים בדיקות colorimetric (Labtest Diagnóstica SA, ברזיל) עבור סכום כולל ניתוחים כולסטרול וטריגליצרידים, 3 μl של בסרום היו בשימוש. על כולסטרול ה-LDL וה-HDL-כולסטרול, ניתוח 4 μl ו 10 μl של סרום שימשו, בהתאמה. ניתוחים אלו בוצעו על דגימות משולב של דג הזברה 10 לדגימה. רמות בסרום lipidic הושוו בין דגים לגשת ביצים שלהם ואלה, באקווריום התחתון מכוסה, לא תהיה גישה הביצים שלהם למשך ניסיוני של 2 שבועות. ניתוח סרום הראו כי רמות בסרום של הכולסטרול הכללי (עם ביצים 362 ± 42 מ&quot;ג / ד&quot;ל, ללא ביצים 357 ± 13 מ&quot;ג / ד&quot;ל), HDL-כולסטרול (עם ביצים 91.22 ± 1.79 מ&quot;ג / ד&quot;ל, ללא ביצים 72.14 ± 2.89 מ&quot;ג / ד&quot;ל), ו-LDL-כולסטרול (עם ביצים 55.68 ± 10.88 מ&quot;ג / ד&quot;ל, ללא ביצים 44.18 ± 9.84 מ&quot;ג / ד&quot;ל) לא היו שונים משמעותית בין הקבוצות. עם זאת, רמות הטריגליצרידים היו נמוכים משמעותית בקבוצת הניסוי (ללא ביצים 292 ± 64 מ&quot;ג / ד&quot;ל) מאשר בקבוצת הביקורת (עם ביצים 457 ± 25 mg / dL, P = 0.03). <table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> &amp; Nbsp; </td><td> עם גישה ביצים </td><td> ללא גישה ביצים </td></tr><tr><td> הכולסטרול הכללי (מ&quot;ג / ד&quot;ל) </td><td> 362.82 ± 73.11 </td><td> 357.69 ± 23.08 </td></tr><tr><td> LDL - כולסטרול (מ&quot;ג / ד&quot;ל) </td><td> 55.69 ± 18.84 </td><td> 44.19 ± 17.05 </td></tr><tr><td> HDL - כולסטרול (מ&quot;ג / ד&quot;ל) </td><td> 91.23 ± 3.11 </td><td> 72.14 ± 5.01 </td></tr><tr><td> טריגליצרידים (מ&quot;ג / ד&quot;ל) </td><td> 457.64 ± 43.78 * </td><td> 292.36 ± 111.28 </td></tr></tbody></table> טבלה 1. Seric רמות כולסטרול וטריגליצרידים עבור שתי הקבוצות שנחקרו (עם גישה ביצים ללא גישה ביצים) לידי ביטוי בסטיית תקן ממוצע ±. * מובהק סטטיסטית (p = 0.03). מבחן t הסטודנטים. <table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> Aut<html> הסוס של כבודו </td><td> מקום החתך </td><td> קציר השיטה </td><td> הרדמה </td><td> כמות הדם הנאסף </td></tr><tr><td> Jagadeeswaran et. al., 1999 Murtha et al., 2003 </td><td> דיסקציה מיקרו האחורי סנפיר הגב </td><td> Micropipette </td><td> לא הוזכר MS222 3% במים קרים </td><td> 1 μl 5 5 μl 10 </td></tr><tr><td> איימס et al., 2010 </td><td> עריפת ראש </td><td> מיקרו נימים צינור </td><td> MS222 0,02% 28 ° C מים </td><td> 5 μl 10 </td></tr><tr><td> המחקר הנוכחי </td><td> חתך בין סנפיר אנאלי סנפיר הזנב </td><td> Micropipette וטיפים שמירה נמוכים </td><td> מים וקרח שבבי </td><td> 5 μl 20 </td></tr></tbody></table>&quot;e_content&gt; טבלה 2. השוואה בין אוסף הטכניקות המתוארות קודם לכן דם אחד תיאר את המחקר הנוכחי.

<ol><li>Schneider, A. C. R., dos Santo, J. L., Porawski, M., Schaefer, P. G., Maurer, R. L., Matte, U., da Silveira, T. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Implementa%C3%A7%C3%A3o+de+um+novo+modelo+de+experimenta%C3%A7%C3%A3o+animal+Zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Rev.+HCPA%22%5BJournal%5D)">Implementação de um novo modelo de experimentação animal Zebrafish.</a> Rev. HCPA. 29, 100-103 (2009).</li>
<li>Briggs, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+zebrafish%3A+a+new+model+organism+for+integrative+physiology%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Regulatory+Integrative+Comp.+Physiol%22%5BJournal%5D)">The zebrafish: a new model organism for integrative physiology.</a> Am. J. Physiol. Regulatory Integrative Comp. Physiol. 282, 3-9 (2002).</li>
<li>Menke, A. L., Sptsbergen, J. M., Wolterbeek, A. P. M., Woutersen, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Normal+anatomy+and+histology+of+adult+Zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicologic+Pathology%22%5BJournal%5D)">Normal anatomy and histology of adult Zebrafish.</a> Toxicologic Pathology. 000, 1-16 (2011).</li>
<li>Murtha, J. M., Qi, W., Keller, E. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hematologic+and+serum+biochemical+values+for+Zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Comp.+Med%22%5BJournal%5D)">Hematologic and serum biochemical values for Zebrafish.</a> Comp. Med. 53, 37-41 (2003).</li>
<li>Jagadeeswaran, P., Sheehan, J. P., Craig, F. E., Troyer, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+and+characterization+of+zebrafish+thrombocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Br.+J.+Haematol%22%5BJournal%5D)">Identification and characterization of zebrafish thrombocytes.</a> Br. J. Haematol. 107, 731-738 (1999).</li>
<li>Jagadeeswaran, P., Sheehan, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+blood+coagulation+in+the+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Blood+Cells+Mol.+Dis%22%5BJournal%5D)">Analysis of blood coagulation in the zebrafish.</a> Blood Cells Mol. Dis. 25, 239-249 (1999).</li>
<li>Eames, S. C., Philipson, L. H., Prince, V. E., Kinkel, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+sugar+measurement+in+zebrafish+reveals+dynamics+of+glucose+homeostasis%5BTitle%5D)+AND+%22Zebrafish%22%5BJournal%5D)">Blood sugar measurement in zebrafish reveals dynamics of glucose homeostasis.</a> Zebrafish. 7, 205-213 (2010).</li>
<li>Kilpatrick, E. S., Rumley, A. G., Rumley, C. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+haemolysis+on+blood+glucose+meter+measurement%5BTitle%5D)+AND+%22Diabet.+Med%22%5BJournal%5D)">The effect of haemolysis on blood glucose meter measurement.</a> Diabet. Med. 12, 341-343 (1995).</li>
<li>Gupta, T., Mullins, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dissection+of+Organs+from+the+Adult+Zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Dissection of Organs from the Adult Zebrafish.</a> J. Vis. Exp. (37), e1717(2010).</li>
<li>Kinkel, M. D., Eames, S. C., Philipson, L. H., Prince, V. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intraperitoneal+Injection+into+Adult+Zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Intraperitoneal Injection into Adult Zebrafish.</a> J. Vis. Exp. (42), e2126(2010).</li>
<li>Pugach, E. K., Li, P., White, R., Zon, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retro-orbital+Injection+in+Adult+Zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Retro-orbital Injection in Adult Zebrafish.</a> J. Vis. Exp. (34), e1645(2009).</li>
</ol>

אין ניגוד עניינים הצהיר.

מאמר זה מציג טכניקה פשוטה המאפשרת דם נוספת וניתוח סרום בניסויים דג הזברה. טכניקה זו יש פוטנציאל לתרום בעתיד מחקרים דג הזברה המטולוגיות הדורשים פרמטרים נתונים דם. זה צריך גם לאפשר ליישומים יותר של דג הזברה כמודל ניסיוני. טכניקה זו אינה דורשת כישורים מיוחדים או יישום של שיטה מדויקת. יתר על כן, היא מאפשרת את כמות כפולה של דם כדי לאסוף לעומת טכניקות אחרות, ובכך מאפשר שימוש של דגים פחות כדי להשיג את הסכום הדרוש של חומ...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> שם מגיב </td><td> חברה </td><td> מספר קטלוגי </td><td> תגובות </td></tr><tr><td> שמירה טיפים נמוכים </td><td> יישומי Biosystems </td><td> 022493020 </td><td></td></tr><tr><td> Eppendorf 5415D צנטריפוגה </td><td> Eppendorf </td><td> הופסק </td><td></td></tr></tbody></table>

הדם אוסף של ניתוח ביוכימי דג הזברה למבוגרים בלבד

Blood Collection for Biochemical Analysis in Adult Zebrafish

דג הזברה שימש במודל חיה ללימודים של מחלות אנושיות שונות. זה יכול לשמש פלטפורמה קליני רב עוצמה עבור מחקרים של אירועים מולקולריים ואסטרטגיות טיפוליות, כמו גם להערכת המנגנונים הפיזיולוגיים של כמה פתולוגיות 1. קיימים פרסומים מעטים יחסית הקשורים לפיזיולוגיה דג הזברה הבוגרת של איברים ומערכות 2, דבר שעלול להוביל את החוקרים להסיק את הטכניקות הבסיסיות הנדרשות על מנת לאפשר בדיקה של מערכות דג הזברה חסרים 3. ערכים ביוכימיים המטולוגית של דג הזברה דווחו לראשונה על ידי Murtha ו 4 עמיתים שהעסיק איסוף דם הטכניקה שתוארה לראשונה בשנת 1999 על ידי Jagadeeswaran ועמיתיו בשנת 2003. בקצרה, הדם נאסף דרך עצה micropipette דרך חתך לרוחב, כ 0.3 ס&quot;מ אורך, באזור של אבי העורקים הגב 5. בגלל הממדים הקטנים המעורבים, זההיא טכניקה דיוק גבוהה המחייבת רופא מיומן. טכניקה דומה שימשה באותה קבוצה בפרסום אחר באותה שנה 6. בשנת 2010, איימס ועמיתיו העריכו שלמים רמות הגלוקוז בדם על דג הזברה 7. הם קיבלו גישה דם על ידי ביצוע עריפות במספריים ולאחר מכן החדרת צינור heparinized אוסף microcapillary לשטף דיבור החזה. הם מזכירים קשיים המוליזה כי נפתרו עם טמפרטורת האחסון המתאים בהתבסס על העבודה קילפטריק et al. 8. כאשר מנסים להשתמש בטכניקה של Jagadeeswaran במעבדה שלנו, מצאנו כי זה היה קשה לבצע את החתך במקום הנכון בדיוק כפי שלא לאפשר כמות משמעותית של דם ללכת לאיבוד לפני האוסף אפשר להתחיל. לאחרונה, גופטה et al. 9 תיאר כיצד לנתח איברים דג הזברה למבוגרים, Kinkle et al. 10 תיאר כיצד לבצע intraperitonזריקות EAL ו Pugach et al. 11 תיאר כיצד לבצע רטרו מסלול זריקות. עם זאת, יותר עבודה נדרשת כדי לחקור באופן מלא יותר טכניקות בסיסיות לחקר דג הזברה. גודלו הקטן של דג הזברה מציב אתגרים לחוקרים להשתמש בו בתור מודל ניסיוני. יתר על כן, נתון זה המספר הקטן של הסקאלה, חשוב כי טכניקות פשוטות מפותחים כדי לאפשר לחוקרים לבחון את היתרונות של המודל דג הזברה.

מאמר זה מציג שיטה לאיסוף הדם באבי העורקים הגב של דג הזברה. כמו כן, מספק הוראות להשגת סרום לשימוש בניתוחים ביוכימיים, כגון בדיקות לקביעת רמות כולסטרול וטריגליצרידים.

דג הזברה שימש כמודל בעלי חיים למחקרים של מספר מחלות אנושיות. הוא יכול לשמש כפלטפורמה פרה-קלינית רבת עוצמה למחקרים של...

בסרטון זה, אנו שואפים להדגים טכניקה של איסוף דם בדגי זברה. טכניקה זו דורשת מיכל להרדמה, צלחת פטרי, סכין מנתחים, טיפים בעלי סיבוב נמוך ומיקרופיפט אוטומטי, P 20 ומבחנות מיקרו, וצנטריפוגה. לפני תחילת איסוף הדם, יש להרדימ את הדג באמצעות רשת דייג.מעבירים את הדג מהאקווריום למכל המכיל מי אקווריום ושבבי קרח. משך ההרדמה תלוי בכל דג. בדרך כלל הדבר אורך בין שלוש לשיש Seconds.הדג נחשב להרדמה. כאשר הוא אינו מגיב לגירוי בבית החזה, יש להעבירו בעדינות ממיכל ההרדמה אל גזה יבשה כדי להסיר את עודפי המים. לאחר שהדג הורדם ועודפי המים הוסרו, יש לעטוף אותו בעדינות בגזה יבשה המכסה את הגוף והראש, תוך השארת גישה חופשית לזנב.בעזרת סקאלפל, מבצעים חתך רוחבי רגע לפני הזנב והדם מתחיל לזרום. הדם שנאסף מועבר לאחר מכן למסורת מיקרו (micro tube). יש לטפל במבחנה בעדינות כדי למנוע המוליזה.לאחר איסוף הדם, יש לבצע סנטריפוגה כדי להפיק את הסרום. ניתן להשתמש במאגר של דגימות דם, בתנאי שהזמן שחלף בין איסוף הדם הראשון לבין הסנטריפוגה אינו עולה על 10 דקות. בנוסף, יש לסנטריפוג את הדם למשך 10 דקות.יש להקפיד על ביצוע שלבים אלו באופן קפדני כדי למנוע דמוליזציה של הדגימות I.

blood-collection-for-biochemical-analysis-in-adult-zebrafish

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

כאן אנחנו מראים איך לעשות רטרו מסלולית הזרקת דג הזברה מבוגר.

רטרו מסלולית הזרקה של דג הזברה למבוגרים

שיטה ברורה, תקנית לנתיחה ובידוד של הלב דג הזברה בשלבים התפתחותיים מרובים מתוארים. טכניקות ביאור וכימות הם דנו גם.

הלב Dissection ב הזחל, דג הזברה לנוער ו למבוגרים, Danio rerio</em

פרוטוקול זה מתאר את הטכניקה של בידוד תאי גידול בעלי תווית פלואורסצנטית של לוקמיה לימפובלסטית חריפה של תאי T (T-ALL) מדגי זברה בוגרים וכימות שלהם באמצעות צבע כחול טריפאן.

בידוד תאי T-ALL עם תווית פלואורסצנטית: שיטה לבידוד תאי T-ALL מדגי זברה בוגרים

הכליות מבוגרות דג הזברה היא מערכת מצוינת ללימודי התחדשות ומחלת כליות. היבט חיוני של מחקר כזה הוא ההערכה של מבנה נפרון ותפקוד. פרוטוקול זה מתאר כמה שיטות שניתן ליישם על מנת להעריך הרכב אבובית נפרון ולהעריך את ספיגה של כליות.

ניתוח של הרכב נפרון ותפקוד בכליות דג הזברה למבוגר

השימוש בדגי זברה למחקר קרדיווסקולרי מתרחב למחקר על לבבות בוגרים. עבור יישומים אלה, בידוד מהיר ופשוט של רקמות לב הוא המפתח למניעת שינויים לאחר המוות ולהשגת מספר מספיק של דגימות. כאן, אנו מתארים שיטה מהירה וניתנת לשחזור לניתוח לבבות דגי זברה בוגרים.

שחזור של לבבות למבוגרים דג הזברה עבור יישומי תפוקה גבוהה

דגימת דם חוזרת היא הכרחית וחשובה במחקר בבעלי חיים. פיתחנו שיטה חדשנית, לא קטלנית ואמינה לאיסוף דם חוזר מדגי זברה בוגרים, ויישמנו שיטה זו לחקר הביוכימיה של הדם, כולל מטבוליזם של גלוקוז.

איסוף דם חוזרים ונשנים לבדיקות דם בדג הזברה למבוגרים

בדיקה זו היא שיטה פשוטה לכמת תאים hematopoietic בפיתוח זברה עוברית. תאי דם של דגי זברה מנותקים נתונים לניתוח ציטומטריה זרימה. זה מאפשר גילוי של מומים בדם בבעלי חיים מוטנטים ולאחר שינוי גנטי.

שימוש בציטומטריית זרימה כדי לזהות ולכמת היווצרות דם שהשתנתה בדגי הזברה המתפתחים

פרוטוקול זה מתאר את ההליך להסרת האונה הגחונית של הכבד בדגי זברה בוגרים כדי לאפשר את המחקר של התחדשות הכבד.

כריתת הפטקטומיה חלקית בדגי זברה למבוגרים

הפרוטוקול הנוכחי מתאר בידוד חריף של תאי שריר לב וכלי דם חלקים בני קיימא מדגי זברה בוגרים, צעירים, זחליים ועובריים (Danio rerio), המתאימים למחקרים אלקטרופיזיולוגיים.

בידוד תאי שריר חלק לבביים וכלי דם מדגי זברה בוגרים, צעירים, זחליים ועובריים למחקרים אלקטרופיזיולוגיים

כאן, אנו מציגים פרוטוקול אופטימלי ויעיל להזרקה תוך ורידית של תאים או חומרים פרמקולוגיים לדג זברה בוגר, וכתוצאה מכך השתלת תאים משופרת ושיעורי הישרדות מוגברים של דג הזברה המטופל.

הזרקה תוך ורידית אופטימלית בדגי זברה בוגרים

פרוטוקול זה מציג שיטה אמינה להערכת תקינות מחסום הדם-מוח (BBB) במודל דג זברה בוגר (Danio rerio) באמצעות הערכה מבוססת צבע כחול של אוון, המאפשרת ניתוח איכותי וכמותי של הפרעה נוירו-וסקולרית.

הדמיה של שומר הסף: ההערכה מבוססת הצבע הכחול של אוון על חדירות מחסום דם-מוח בדג זברה בוגר

למדו טכניקת איסוף דם מזברה בוגרת מהאורטה הגבית לניתוח ביוכימי. השיטה כוללת הרדמה, חיתוך בחדק וסריקה לקבלת סרום לבדיקות כולסטרול וטריגליצרידים.

הדם אוסף של ניתוח ביוכימי דג הזברה למבוגרים בלבד

גלה סרטונים נוספים