Name: השרשה ותוך גולגולת Stereotactic בחי הדמית bioluminescent של xenografts גידול במערכת מודל עכבר של multiforme glioblastoma (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-09-25T11:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 52 s
Description: למדו שתל סטריאוטקטי מדויק של תאי גליובלסטומה מולטיפורמה בזיהום ביולומינסצנטי בעכברים עירומים. שיטה זו מאפשרת מעקב לא פולשני אחרי צמיחת הגידול ותגובה לטיפולים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

אנו מודים לד&quot;ר אנדרו הולנדר, שרה דייויס, לי שומן, טים ג&#39;נקינס, וד&quot;ר Xiangsheng שו לסיוע המומחה שלהם. אנו מכירים בתמיכתו של ד&quot;ר אן קנדי. BCB נתמך בהדרכת ביולוגית קרינת גרנט C5T32CA009677. JFD נתמך פרס קריירת Wellcome ורוז למדענים רפואיים (1006792) על. JLB נתמך על עליות המענק (5 R25 CA140116-03). ברצוננו להודות ד&quot;ר סטיב האן עידודו ותמיכה סייעה להפוך את המחקר שלנו אפשרי. אנחנו גם רוצים להודות לאוניברסיטת פנסילבניה Nano-יו ממשק המרכז (NBIC) ודניס ד&quot;ר Discher לעידוד והערותיו מועילות. אנו מכירים במתקן הדמית החיה הקטן (סייף) באוניברסיטת פנסילבניה לשימוש במתקני גרעין MRI ואופטיים / פליטת אור שלהם. טכניקות אלו פותחו כחלק מפרויקטים שנתמכו על ידי המכון הלאומי לבריאות (-NS076548 RC1 CA145075 וK0801).

<ol><li>Stupp, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radiotherapy+plus+concomitant+and+adjuvant+temozolomide+for+glioblastoma%5BTitle%5D)+AND+%22N.+Engl.+J.+Med%22%5BJournal%5D)">Radiotherapy plus concomitant and adjuvant temozolomide for glioblastoma.</a> N. Engl. J. Med. 352, 987-996 (2005).</li>
<li>Jacobs, V. L., Valdes, P. A., Hickey, W. F., De Leo, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+review+of+in+vivo+GBM+rodent+models%3A+emphasis+on+the+CNS-1+tumour+model%5BTitle%5D)+AND+%22ASN+Neuro%22%5BJournal%5D)">Current review of in vivo GBM rodent models: emphasis on the CNS-1 tumour model.</a> ASN Neuro. 3, e00063(2011).</li>
<li>Shelton, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+pre-clinical+in+vivo+mouse+model+for+malignant+brain+tumor+growth+and+invasion%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurooncol%22%5BJournal%5D)">A novel pre-clinical in vivo mouse model for malignant brain tumor growth and invasion.</a> J. Neurooncol. 99, 165-176 (2010).</li>
<li>Brehar, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+development+of+xenograft+glioblastoma+implants+in+nude+mice+brain%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Med.+Life%22%5BJournal%5D)">The development of xenograft glioblastoma implants in nude mice brain.</a> J. Med. Life. 1, 275-286 (2008).</li>
<li>Ozawa, T., James, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishing+Intracranial+Brain+Tumor+Xenografts+With+Subsequent+Analysis+of+Tumor+Growth+and+Response+to+Therapy+using+Bioluminescence+Imaging%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Establishing Intracranial Brain Tumor Xenografts With Subsequent Analysis of Tumor Growth and Response to Therapy using Bioluminescence Imaging.</a> J. Vis. Exp. (41), e1986(2010).</li>
<li>Radaelli, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunohistopathological+and+neuroimaging+characterization+of+murine+orthotopic+xenograft+models+of+glioblastoma+multiforme+recapitulating+the+most+salient+features+of+human+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Histol.+Histopathol%22%5BJournal%5D)">Immunohistopathological and neuroimaging characterization of murine orthotopic xenograft models of glioblastoma multiforme recapitulating the most salient features of human disease.</a> Histol. Histopathol. 24, 879-891 (2009).</li>
<li>Baumann, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhancing+the+efficacy+of+drug-loaded+nanocarriers+against+brain+tumors+by+targeted+radiation+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Enhancing the efficacy of drug-loaded nanocarriers against brain tumors by targeted radiation therapy.</a> , Submitted (2012).</li>
<li>Baumann, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+integrated+method+for+reproducible+and+accurate+image-guided+stereotactic+cranial+irradiation+of+brain+tumors+using+the+Small+Animal+Radiation+Research+Platform+%28SARRP%29%5BTitle%5D)+AND+%22Transl.+Oncol%22%5BJournal%5D)">An integrated method for reproducible and accurate image-guided stereotactic cranial irradiation of brain tumors using the Small Animal Radiation Research Platform (SARRP).</a> Transl. Oncol. , Forthcoming (2012).</li>
<li>Park, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MicroPET%2FCT+imaging+of+an+orthotopic+model+of+human+glioblastoma+multiforme+and+evaluation+of+pulsed+low-dose+irradiation%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Radiat.+Oncol.+Biol.+Phys%22%5BJournal%5D)">MicroPET/CT imaging of an orthotopic model of human glioblastoma multiforme and evaluation of pulsed low-dose irradiation.</a> Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 80, 885-892 (2011).</li>
<li>Szentirmai, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noninvasive+bioluminescence+imaging+of+luciferase+expressing+intracranial+U87+xenografts%3A+correlation+with+magnetic+resonance+imaging+determined+tumor+volume+and+longitudinal+use+in+assessing+tumor+growth+and+antiangiogenic+treatment+effect%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Noninvasive bioluminescence imaging of luciferase expressing intracranial U87 xenografts: correlation with magnetic resonance imaging determined tumor volume and longitudinal use in assessing tumor growth and antiangiogenic treatment effect.</a> Neurosurgery. 58, 365-372 (2006).</li>
<li>Dinca, E. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioluminescence+monitoring+of+intracranial+glioblastoma+xenograft%3A+response+to+primary+and+salvage+temozolomide+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosurg%22%5BJournal%5D)">Bioluminescence monitoring of intracranial glioblastoma xenograft: response to primary and salvage temozolomide therapy.</a> J. Neurosurg. 107, 610-616 (2007).</li>
</ol>

אין ניגודי האינטרסים הכריזו.

השיטה של השתלת stereotactic של תאים סרטניים בעכברים המתוארים במאמר זה reproducibly מייצרת גידולים, אשר סביר לסכם דפוס infiltrative ומהיר צמיחה של גליובלסטומה multiforme הקלינית 2, 6-8. טכניקה זו במיוחד היטב מתאימה לניסויי stratifying עכברים באופן שווה לקבוצות טיפול שונות בי גידולים לשעתק גודל דומה ומאפיינים ביולוגיים ובמקומות אנטומיים ספציפיים רצויים. השתלת Stereotactic של תאים סרטניים תוך שימוש בטכניקות שאנו מתארים אמורה להיות בקלות להשגה על ידי מעבדות מחקר translation...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> תיאור </td><td> ספק </td><td> מספר קטלוגים </td><td> תגובות </td></tr><tr><td> רק למכשירים דיגיטליים Stereotaxic מאוסים </td><td> Stoelting </td><td> 51730D </td><td> פלטפורמת Stereotactic להשתלת עכבר </td></tr><tr><td> קטמין / xylazine </td><td></td><td></td><td> הרדמה בזריקות </td></tr><tr><td> משחת וטרינר Puralube (עיניים) </td><td> Amazon.com </td><td></td><td> כדי למנוע התייבשות של העיניים של העכבר </td></tr><tr><td> בעל לקדוח עבור פלטפורמת stereotactic </td><td> Stoelting </td><td> 51681 </td><td></td></tr><tr><td> מקדחה חשמלית micromotor </td><td> Stoelting </td><td> 51449 </td><td> לקידוח דרך הגולגולת </td></tr><tr><td> מקדח .45 מ&quot;מ קרביד </td><td> Stoelting </td><td> 514551 </td><td></td></tr><tr><td> ספוגיות כותנה סטריליים </td><td> הפישר סיינטיפיק </td><td> 23-400-100 </td><td></td></tr><tr><td> חרוז זכוכית יבשה מעקר (Germinator 500) </td><td> בריינטרי מדעי </td><td> GER-5287 </td><td> לעקר מכשירים כירורגיים מתכת </td></tr><tr><td> עכבר רקטלית בדיקה </td><td> בריינטרי מדעי </td><td> RET-3-ISO </td><td> תואם עם בקר הטמפרטורה </td></tr><tr><td> בקר טמפרטורה (TCAT-2DF) </td><td> הרווארד Apparatus </td><td> 727561 </td><td> בקר טמפרטורה כדי לשמור על הטמפרטורה של בעל החיים במהלך הניתוח </td></tr><tr><td> צלחת חימום קטנה </td><td> הרווארד Apparatus </td><td> 727617 </td><td> לשימוש עם בקר הטמפרטורה לחמם עכבר במהלך ניתוח. צלחת החימום מתאים שמתחת לעכבר על פלטפורמת stereotaxic. </td></tr><tr><td> אזמלים פנויים </td><td> BD-ארד פרקר </td><td> 2015-11 </td><td> # 10 אזמל </td></tr><tr><td> 10 מזרק microliter </td><td> המילטון </td><td> 7635-01 </td><td> להזרקה של תאים סרטניים </td></tr><tr><td> 30 מחטי מד, 1 &quot;ארוכות, עם נקודה שטוחה </td><td> המילטון </td><td> שונה </td><td> חייב להיות תואם עם מזרק μl 10 </td></tr><tr><td> Nanomite משאבת מזרק לתכנות </td><td> הרווארד Apparatus </td><td> 704507 </td><td> דיגיטלי ממונע מזרק מזרק למכשיר stereotaxic </td></tr><tr><td> ספוגי חניתות כירורגיות סטריליות תאית </td><td> Ultracell </td><td> 40410 </td><td> כדי לייבש את שדה הניתוח </td></tr><tr><td> שעוות עצם </td><td> Ethicon </td><td> W31 </td><td> כדי לאטום את חור Burr </td></tr><tr><td> Tissumend השני דבק רקמות נספג סינטטי </td><td> מוצרי מעבדות וטרינרית </td><td> 3002931 </td><td> כדי לאטום את החתך </td></tr><tr><td> משאבת מים חמה עם כרית החימום </td><td> Gaymar </td><td> TP-650 </td><td> עכברים מחמם בתקופה שלאחר הניתוח </td></tr><tr><td> IVIS ומינה השנייה </td><td> Caliper מדעי חיים </td><td></td><td> Bioluminescent imager </td></tr><tr><td> מלח אשלגן D-luciferin </td><td> ביוטכנולוגיה זהב </td><td> LUCK-1 </td><td> Luciferin לbioluminescent הדמיה </td></tr></tbody></table>

השרשה ותוך גולגולת stereotactic<em&gt; בחי</em&gt; הדמית bioluminescent של xenografts גידול במערכת מודל עכבר של multiforme glioblastoma

Stereotactic Intracranial Implantation and In vivo Bioluminescent Imaging of Tumor Xenografts in a Mouse Model System of Glioblastoma Multiforme

multiforme glioblastoma (GBM) הוא סרטן מוח ראשוני בדרגה גבוהה עם הישרדות חציונית של 14.6 חודשים בלבד בבני אדם, למרות טיפול, שיטה תלת סטנדרטי המורכב של כריתה כירורגית, הקרנות לאחר הניתוח וכימותרפיה temozolomide 1. גישות טיפוליות חדשות באופן ברור יש צורך לשפר את ההישרדות ואת איכות חיי מטופל. הפיתוח של אסטרטגיות טיפול יעילות יותר יהיה בעזרת מודלים של בעלי חי GBM כי לסכם מחלה אנושית עדיין לאפשר הדמיה סידורית כדי לפקח על גדילת גידול ותגובה לטיפול. במאמר זה, אנו מתארים הטכניקה שלנו להשתלת stereotactic המדויקת של תאי סרטן GBM יו imageable לתוך מוחם של עכברים בעירום וכתוצאה מxenografts גידול שלסכם מאפיינים קליניים עיקריים של GBM 2. שיטה זו מניבה גידולים לשעתק וממוקמות במקומות אנטומיים מדויקים תוך מתן בתחום הדמית vivo bioluminescent סדרתי כדי לפקח על תוךצמיחת גולגולת xenograft ותגובה לטיפולים 3-5. שיטה זו גם נסבלת היטב על ידי בעלי החיים בעלי תחלואת perioperative נמוך ותמותה.

אנו מתארים שיטה משולבת להשתלה המדויקת, stereotactic של תאי multiforme glioblastoma אדם לתוך המוח של עכברים בעירום וסידורי עוקבים<em&gt; In vivo</em&gt; הדמיה כדי לפקח צמיחה ותגובה לטיפול בxenografts התוצאה.

השרשה ותוך גולגולת Stereotactic<em&gt; בחי</em&gt; הדמית bioluminescent של xenografts גידול במערכת מודל עכבר של multiforme glioblastoma

גליובלסטומה מולטיפורמה (GBM) היא סרטן מוח ראשוני בדרגה גבוהה, עם הישרדות חציונית של 14.6 חודשים בלבד בבני אדם, וזאת למרות טיפול סטנדרטי תלת-שיותי...

המטרה הכללית של פרוצדורה זו היא להשתמש בהשתלה סטריאוטקטית מדויקת של תאי סרטן מסוג glioblastoma multiforme הניתנים לדימות ביולוגי לתוך מוחות של עכברי nude, כדי לייצר קסנוגרפטים של גידולים המשחזרים מאפיינים קליניים מרכזיים של glioblastoma multiforme. דבר זה מושג תחילה על ידי הכנת תאי גידול של glioblastoma multiforme כך שיבטא באופן יציב לוציפראז לצורך דימות ביולומינסנציה לא פולשני וסדרתי. השלב השני הוא הרדמת העכבר והצבתו במכשיר הריסון הסטריאוטקטי.בשלב הבא, מבוצע חתך בעור ונקיב קידוח נקבס בנקודות הקואורדינטות המדויקות ביחס ל-B bgma. השלב האחרון הוא השתלה איטית של תאי גידול לתוך המוח באמצעות טכניקות סטריאוטקטיות, ולאחר מכן הוצאת המחט וסגירת החתך. לבסוף, נעשה שימוש בדימוי ביולומינסנטי ובדימוי תהודה מגנטית לביצוע סדרת בדיקות דימוי לא פולשניות למעקב אחר צמיחת הגידול והתגובה לטיפולים ניסיוניים.היתרון המרכזי של טכניקה זו בהשוואה לשיטות קיימות, כגון השתלה ידנית לא-סטריאוטקטית של תאי סרטן, הוא ששיטת ההשתלה הסטריאוטקטית התוך-גולגולית של תאי גידול בעכברים המתוארת כאן יוצרת גידולים הניתנים לשחזור במידה רבה יותר, אשר מדמים באופן סביר את דפוסי הצמיחה הפולשניים והמהירים של glioblastoma multiforme קליני. התחלואה והתמותה הפרי-אופרטיביות בפרוצדורה זו נמוכות מאוד, ושיעור קליטת הגידול גבוה מאוד. טכניקה ז

stereotactic-intracranial-implantation-vivo-bioluminescent-imaging

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

בלוציפראז, שונה אדם xenografts גידול במוח ניתן לקבוע intracranially בעכברים athymic, עם ניטור הבאים של הגידול ואת התגובה לטיפול באמצעות הדמיה פליטת אור. בשילוב עם ניתוח הישרדות, ניטור פליטת אור הוא כלי מחקר הכרחי לצורך בדיקות טרום קליניים של טיפולים נשקלת לטיפול בגידולים במוח.

הקמת גידול תוך גולגולתי xenografts המוח עם ניתוח בדיעבד של הגידול ואת התגובה לטיפול באמצעות הדמיה פליטת אור

ההשתלה תוך גולגולתי של תאים לתוך GL261 C57BL / 6 עכברים מייצרת gliomas ממאיר לשחזר רבים מסימני ההיכר של multiforme glioblastoma האדם. השתמשנו GL261 התאים ביציבות להביע בלוציפראז כדי לאפשר לנו...

השרשה תוך גולגולתי עם 3D לאחר In vivo Bioluminescent הדמיה של gliomas Murine

מקור: Clark, A.J., et al. הדמיית ביולומינסנציה של מודל בעלי חיים בעלי יכולת חיסונית לגליובלסטומה. J. Vis. Exp. (2016)סרטון זה מדגים הדמיית ביולומינסנציה כדי לעקוב אחר התקדמות גליובלסטומה במודל עכבר בעל יכולת חיסונית, תוך שימוש בתאי גידול המבטאים לוציפראז ולוציפרין כדי לכמת את צמיחת הגידול באופן לא פולשני.

הדמיה ביולומינסנציה של מודל עכבר בעל יכולת חיסונית לגליובלסטומה

הקמנו מודל גליובלסטומה orthotopic קליפת המוח בעכברים לשני הפוטונים במיקרוסקופ intravital שמשחזר אילוצי biophysical בדרך כלל במשחק במהלך הצמיחה של הגידול. חלון זכוכית כרוני החלפת הגולגולת מעל לגידול מאפשר המעקב של התקדמות הגידול לאורך זמן על ידי שני פוטונים במיקרוסקופ.

Glioblastoma עכבר דגם orthotopic שמירה על אילוצי המוח של רקמת ריאה, פיסיים ומתאים לשני פוטונים במיקרוסקופ Intravital

המוח הוא אתר ייחודי עם איכויות שאינם מיוצגות היטב על ידי במבחנה או ניתוחים מחוץ לרחם. מודלים עכבר orthotopic עם מאפייני מיקום וצמיחה לשחזור ניתן ליצור באופן אמין עם זריקות תוך גולגולתי באמצעות מכשיר קיבוע stereotaxic ומשאבת מזרק בלחץ נמוך.

יצירה אנטומית מדויק והשחזור תוך גולגולת xenografts של גידולים במוח אדם

תאי גליומה GL261 מספקים מודל שימושי של בעלי חיים בעלי יכולת חיסונית של גליובלסטומה. מטרות פרוטוקול זה הן להדגים טכניקות מתאימות לניטור צמיחת גידול תוך גולגולתי באמצעות הדמיית ביולומינסנציה in vivo, ולאמת את התועלת של תאי GL261 שעברו שינוי בלוציפראז לחקר אימונולוגיה של גידול וגישות אימונותרפיות לטיפול בגליובלסטומה.

הדמיה פליטת אור של דגם עם מערכת חיסון בבעלי חיים לגליובלסטומה

הזרקה תוך-גולגולתי Orthotopic של תאים סרטניים שימש בחקר הסרטן ללמוד ביולוגיה גידול במוח, התקדמות, התפתחות, תגובה טיפולית. כאן אנו מציגים פלורסצנטיות מולקולרית טומוגרפיה של גידול xenografts, אשר מספק הדמיה intravital בזמן אמת, כימות של גידול המוני במודלים פרה גליובלסטומה.

קרינה פלואורסצנטית טומוגרפיה מולקולרית עבור הדמיה In Vivo של גליובלסטומה Xenografts

במאמר זה אנו מתארים מודל עכבר אורתוטופי פרה-קליני עבור GBM, שהוקם על ידי הזרקה תוך-גולגולתית של תאים שמקורם בגידולי מודל עכבר מהונדסים גנטית. מודל זה מציג את סימני ההיכר של המחלה של GBM אנושי. עבור מחקרים תרגומיים, הגידול במוח העכבר נמצא במעקב על ידי MRI in vivo והיסטופתולוגיה.

מודלים אורתוטופיים תרגומיים של גליובלסטומה מולטיפורמה

אנו מציגים גישה חדשנית למיקרוסקופ דו-פוטוני של העברת הגידול של ננו-חלקיקי תחמוצת ברזל עם תווית פלואורסצנטית לגליובלסטומה במודל עכבר.

מיקרוסקופיה תוך-חיונית דו-פוטונית של גליובלסטומה במודל מורין

מטרת פרוטוקול זה היא לספק לחוקרים טכניקה שניתנת לשחזור גבוה להשתלות תוך-גולגולתיות.

השתלה תוך-גולגולתית סטריאוטקטית של גליובלסטומה קווי תאי זנוגרפט שמקורם בחולה בעכברים

למדו שתל סטריאוטקטי מדויק של תאי גליובלסטומה מולטיפורמה בזיהום ביולומינסצנטי בעכברים עירומים. שיטה זו מאפשרת מעקב לא פולשני אחרי צמיחת הגידול ותגובה לטיפולים.

השרשה ותוך גולגולת Stereotactic

גלה סרטונים נוספים