Name: NADH Fluorescence הדמיה של Biventricular מבודדת עבודה לבבות ארנב (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-07-24T13:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 7 s
Description: למדו הדמיית פלואורסצנציה NADH לבחינת מצב רדוקס מיטוכונדריאלי בלבבות ארנב מבודדים במודל עבודה דו-חדרי. שיטה זו מאפשרת מעקב אחר שינויים מטבוליים בזמן אמת ובחינת הקשר בין זרימה כלילית לפעילות חשמלית.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכה על ידי מענק מ-NIH (R01-HL095828 כדי MW קיי).

<ol><li>Langendorff, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Untersuchungen+am+uberlebenden+saugethierherzen+%5Binvestigations+on+the+surviving+mammalian+heart%5D%5BTitle%5D)+AND+%22Arch.+Gesante+Physiol%22%5BJournal%5D)">Untersuchungen am uberlebenden saugethierherzen [investigations on the surviving mammalian heart].</a> Arch. Gesante Physiol. 61, 291-332 Forthcoming.</li>
<li>Skrzypiec-Spring, M., Grotthus, B., Szelag, A., Schulz, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolated+heart+perfusion+according+to+langendorff---still+viable+in+the+new+millennium%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Pharmacol.+Toxicol.+Methods%22%5BJournal%5D)">Isolated heart perfusion according to langendorff---still viable in the new millennium.</a> J. Pharmacol. Toxicol. Methods. 55, 113-126 (2007).</li>
<li>Neely, J. R., Liebermeister, H., Battersby, E. J., Morgan, H. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+pressure+development+on+oxygen+consumption+by+isolated+rat+heart%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Effect of pressure development on oxygen consumption by isolated rat heart.</a> Am. J. Physiol. 212, 804-814 (1967).</li>
<li>Feng, H. Z., Jin, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coexistence+of+cardiac+troponin+T+variants+reduces+heart+efficiency%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Heart+Circ.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Coexistence of cardiac troponin T variants reduces heart efficiency.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 299, H97-H105 (2010).</li>
<li>Clemens, M. G., Forrester, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Appearance+of+adenosine+triphosphate+in+the+coronary+sinus+effluent+from+isolated+working+rat+heart+in+response+to+hypoxia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Appearance of adenosine triphosphate in the coronary sinus effluent from isolated working rat heart in response to hypoxia.</a> J. Physiol. 312, 143-158 (1981).</li>
<li>Cole, M. A., Murray, A. J., Cochlin, L. E., Heather, L. C., McAleese, S., Knight, N. S., Sutton, E., Jamil, A. A., Parassol, N., Clarke, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+high+fat+diet+increases+mitochondrial+fatty+acid+oxidation+and+uncoupling+to+decrease+efficiency+in+rat+heart.+Basic+Res%5BTitle%5D)+AND+%22Basic+Res.+Cardiol%22%5BJournal%5D)">A high fat diet increases mitochondrial fatty acid oxidation and uncoupling to decrease efficiency in rat heart. Basic Res.</a> Basic Res. Cardiol. 106, 447-457 (2011).</li>
<li>Demmy, T. L., Curtis, J. J., Kao, R., Schmaltz, R. A., Walls, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Load-insensitive+measurements+from+an+isolated+perfused+biventricular+working+rat+heart%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biomed.+Sci%22%5BJournal%5D)">Load-insensitive measurements from an isolated perfused biventricular working rat heart.</a> J. Biomed. Sci. 4, 111-119 (1997).</li>
<li>Demmy, T. L., Magovern, G. J., Kao, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolated+biventricular+working+rat+heart+preparation%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+Thorac.+Surg%22%5BJournal%5D)">Isolated biventricular working rat heart preparation.</a> Ann. Thorac. Surg. 54, 915-920 (1992).</li>
<li>Kay, M., Swift, L., Martell, B., Arutunyan, A., Sarvazyan, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Locations+of+ectopic+beats+coincide+with+spatial+gradients+of+NADH+in+a+regional+model+of+low-flow+reperfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Heart+Circ.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Locations of ectopic beats coincide with spatial gradients of NADH in a regional model of low-flow reperfusion.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 294, 2400-2405 (2008).</li>
<li>Swift, L., Martell, B., Khatri, V., Arutunyan, A., Sarvazyan, N., Kay, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Controlled+regional+hypoperfusion+in+langendorff+heart+preparations%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+Meas%22%5BJournal%5D)">Controlled regional hypoperfusion in langendorff heart preparations.</a> Physiol. Meas. 29, 269-279 (2008).</li>
<li>High resolution contrast ultrasound and NADH fluorescence imaging of myocardial perfusion in excised rat hearts. Kay, M. W., Swift, L. M., Sangave, A., Zderic, V. 30th Annual International Conference of the IEEE Engineering in Medicine and Biology Society, , 1-4 (2008).</li>
<li>Chance, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pyridine+nucleotide+as+an+indicator+of+the+oxygen+requirements+for+energy-linked+functions+of+mitochondria%5BTitle%5D)+AND+%22Circ.+Res%22%5BJournal%5D)">Pyridine nucleotide as an indicator of the oxygen requirements for energy-linked functions of mitochondria.</a> Circ. Res. 38, I31-I38 (1976).</li>
<li>Mayevsky, A., Rogatsky, G. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+function+in+vivo+evaluated+by+NADH+fluorescence%3A+From+animal+models+to+human+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Cell+Physiol%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial function in vivo evaluated by NADH fluorescence: From animal models to human studies.</a> Am. J. Physiol. Cell Physiol. 292, C615-C640 (2007).</li>
<li>Barlow, C. H., Chance, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemic+areas+in+perfused+rat+hearts%3A+Measurement+by+NADH+fluorescence+photography%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Ischemic areas in perfused rat hearts: Measurement by NADH fluorescence photography.</a> Science. 193, 909-910 (1976).</li>
<li>Mayevsky, A., Chance, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oxidation-reduction+states+of+NADH+in+vivo%3A+From+animals+to+clinical+use%5BTitle%5D)+AND+%22Mitochondrion%22%5BJournal%5D)">Oxidation-reduction states of NADH in vivo: From animals to clinical use.</a> Mitochondrion. 7, 330-339 (2007).</li>
<li>Gillis, A. M., Kulisz, E., Mathison, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+electrophysiological+variables+in+blood-perfused+and+buffer-perfused%2C+isolated%2C+working+rabbit+heart%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Cardiac electrophysiological variables in blood-perfused and buffer-perfused, isolated, working rabbit heart.</a> Am. J. Physiol. 271, H784-H789 (1996).</li>
<li>Ôta, K., Peaker, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lactation+in+the+rabbit%3A+Mammary+blood+flow+and+cardiac+output%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Physiology%22%5BJournal%5D)">Lactation in the rabbit: Mammary blood flow and cardiac output.</a> Experimental Physiology. 64, 225-238 (1979).</li>
<li>Ashruf, J. F., Ince, C., Bruining, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regional+ischemia+in+hypertrophic+langendorff-perfused+rat+hearts%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Regional ischemia in hypertrophic langendorff-perfused rat hearts.</a> Am. J. Physiol. 277, H1532-H1539 (1999).</li>
<li>Ashruf, J. F., Coremans, J. M., Bruining, H. A., Ince, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increase+of+cardiac+work+is+associated+with+decrease+of+mitochondrial+NADH%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Increase of cardiac work is associated with decrease of mitochondrial NADH.</a> Am. J. Physiol. 269, 856-862 (1995).</li>
<li>Efimov, I. R., Nikolski, V. P., Salama, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optical+imaging+of+the+heart%5BTitle%5D)+AND+%22Circ.+Res%22%5BJournal%5D)">Optical imaging of the heart.</a> Circ. Res. 95, 21-33 (2004).</li>
<li>Rogers, J. M., Walcott, G. P., Gladden, J. D., Melnick, S. B., Kay, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Panoramic+optical+mapping+reveals+continuous+epicardial+reentry+during+ventricular+fibrillation+in+the+isolated+swine+heart%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys.+J%22%5BJournal%5D)">Panoramic optical mapping reveals continuous epicardial reentry during ventricular fibrillation in the isolated swine heart.</a> Biophys. J. 92, 1090-1095 (2007).</li>
<li>Qu, F., Ripplinger, C. M., Nikolski, V. P., Grimm, C., Efimov, I. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+panoramic+imaging+of+cardiac+arrhythmias+in+rabbit+heart%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biomed.+Opt%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional panoramic imaging of cardiac arrhythmias in rabbit heart.</a> J. Biomed. Opt. 12, 044019(2007).</li>
<li>Chinchoy, E., Soule, C. L., Houlton, A. J., Gallagher, W. J., Hjelle, M. A., Laske, T. G., Morissette, J., Iaizzo, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolated+four-chamber+working+swine+heart+model%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+Thorac.+Surg%22%5BJournal%5D)">Isolated four-chamber working swine heart model.</a> Ann. Thorac. Surg. 70, 1607-1614 (2000).</li>
<li>Hill, A. J., Laske, T. G., Coles, J. A., Sigg, D. C., Skadsberg, N. D., Vincent, S. A., Soule, C. L., Gallagher, W. J., Iaizzo, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+studies+of+human+hearts%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+Thorac.+Surg%22%5BJournal%5D)">In vitro studies of human hearts.</a> Ann. Thorac. Surg. 79, 168-177 (2005).</li>
<li>Schenkman, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+performance+as+a+function+of+intracellular+oxygen+tension+in+buffer-perfused+hearts%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Heart+Circ.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Cardiac performance as a function of intracellular oxygen tension in buffer-perfused hearts.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 281, H2463-H2472 (2001).</li>
<li>Pijl, A. J., Pfaffendorf, M., Mathy, M., Van Zwieten, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardioprotection+by+nifedipine+in+isolated+working+hearts%3A+A+comparative+study+on+three+different+types+of+experimental+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cardiovasc.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Cardioprotection by nifedipine in isolated working hearts: A comparative study on three different types of experimental ischemia.</a> J. Cardiovasc. Pharmacol. 21, 70-76 (1993).</li>
<li>Khatib, S. Y., Boyett, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+glyburide+%28glibenclamide%29+on+myocardial+function+in+langendorff+perfused+rabbit+heart+and+on+myocardial+contractility+and+slow+calcium+current+in+guinea-pig+single+myocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Cell+Biochem%22%5BJournal%5D)">Effects of glyburide (glibenclamide) on myocardial function in langendorff perfused rabbit heart and on myocardial contractility and slow calcium current in guinea-pig single myocytes.</a> Mol. Cell Biochem. 242, 81-87 (2003).</li>
<li>Kates, R. E., Yee, Y. G., Hill, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+albumin+on+the+electrophysiologic+stability+of+isolated+perfused+rabbit+hearts%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cardiovasc.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Effect of albumin on the electrophysiologic stability of isolated perfused rabbit hearts.</a> J. Cardiovasc. Pharmacol. 13, 168-172 (1989).</li>
<li>Combs, C. A., Balaban, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+imaging+of+dehydrogenase+activity+within+living+cells+using+enzyme-dependent+fluorescence+recovery+after+photobleaching+%28ED-FRAP%29%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys.+J%22%5BJournal%5D)">Direct imaging of dehydrogenase activity within living cells using enzyme-dependent fluorescence recovery after photobleaching (ED-FRAP).</a> Biophys. J. 80, 2018-2028 (2001).</li>
<li>Coremans, J. M., Ince, C., Bruining, H. A., Puppels, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%28Semi-%29quantitative+analysis+of+reduced+nicotinamide+adenine+dinucleotide+fluorescence+images+of+blood-perfused+rat+heart%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys+J%22%5BJournal%5D)">(Semi-)quantitative analysis of reduced nicotinamide adenine dinucleotide fluorescence images of blood-perfused rat heart.</a> Biophys J. 72, 1849-1860 (1997).</li>
<li>Scholz, T. D., Laughlin, M. R., Balaban, R. S., Kupriyanov, V. V., Heineman, F. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+substrate+on+mitochondrial+NADH%2C+cytosolic+redox+state%2C+and+phosphorylated+compounds+in+isolated+hearts%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Effect of substrate on mitochondrial NADH, cytosolic redox state, and phosphorylated compounds in isolated hearts.</a> Am. J. Physiol. 268, 82-91 (1995).</li>
<li>Holcomb, M. R., Woods, M. C., Uzelac, I., Wikswo, J. P., Gilligan, J. M., Sidorov, V. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+potential+of+dual+camera+systems+for+multimodal+imaging+of+cardiac+electrophysiology+and+metabolism%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Biol.+Med.+%28Maywood%29%22%5BJournal%5D)">The potential of dual camera systems for multimodal imaging of cardiac electrophysiology and metabolism.</a> Exp. Biol. Med. (Maywood). 234, 1355-1373 (2009).</li>
</ol>

אין ניגוד עניינים הצהיר.

הלב נשאר בודד Langendorff perfused כלי בולט לחקר הפיזיולוגיה לב 2. זה שימושי במיוחד מחקרים על הפרעות בקצב הלב, במיוחד אלה להשתמש דימות פלואורסצנטי פוטנציאל הטרנסממברני 20. היתרון הוא epicardium כל הלב בודד ניתן לראות 21, 22. יתרון נוסף הוא, בניגוד הדם, זלוף עם פתרון גבישן ברור חיץ לא להפריע אותות הקרינה. המגבלה היא טכניקה Langendorff לא מתאימים ללימודים של חילוף החומרים לב, אשר לעיתים קרובות דורשים הלב לבצע את העבודה בהקשר של preload פיזיולוגי ולחצים afterload. כדי להעלות את הרלוונטיות של ההכנות לב מבודדים ללימודי מטבוליות, הציג ונילי שינויים טכניקה Langendorff להקים המתאים חדר שמאל (LV) preload ולחצים afterload 3.המודל נקרא מודל מבודד בלב עבודה LV נעשה שימוש נרחב על מנת ללמוד את ביצועי LV ומטבוליזם 4-6. מודל עבודה LV לב עדיפה על מודל Langendorff על הערכות תפקודית, אך הוא אינו מספק החדר הימני טעון כראוי (RV). Demmy et al. 1 דיווח מודל biventricular (LV &amp; RV), כמו שינוי של המודל LV הלב עובד 7, 8. הם מצאו כי פיתוח נפח הפעימה, תפוקת הלב, ולחץ משופרת בלב המרה ממצב למצב LV עובד עובד biventricular 8. RV נטען כהלכה גם משפר את התפקוד במחיצה על ידי צמצום מפל הלחץ לא תקינים על פני מחצה. לבבות עבודה Biventricular הוכחו לשמור על התפוקה אבי העורקים, זרימה ריאתי, כלומר הלחץ אבי העורקים, כלומר לחץ ריאתי, קצב הלב ואת שריר הלב ATP, קריאטין פוספט רמות של עד 3 שעות 8. מחקרים Biventricular לב העובדים משתמשים בדרך כלל לבבות frאום חיות קטנות, כמו עכברים וארנבים, כי תפוקת הלב לבין נפח הנדרש perfusate הרבה פחות מזה על ליבם של בעלי חיים גדולים יותר. עם זאת, מחקרים biventricular לב העבודה נערכו באמצעות לבבות בין חזירים, כלבים, ואפילו בני אדם 23, 24. הדרישה המטבולית של לבבות בודדים במצב עבודה biventricular גבוה במידה ניכרת מזה של זלוף Langendorff. חשוב שהפתרון perfusate לספק מספיק חמצן ואת המצע חילוף החומרים לתמוך תפקוד הלב biventricular. פתרונות סטנדרטיים גבישן חיץ, כגון קרבס-Henseleit 16, 17, 25 או Tyrodes 26, 27, יש solubilities חמצן גבוה ככל 5.6 מ&quot;ג / ל &#39; כאשר אלה הם פתרונות בגז עם carbogen (תערובת גז של 95% O 2 ו - 5% CO 2) ומכילים המצע חילוף החומרים (גלוקוז, דקסטרוז, ו / או פירובט נתרן) מתאים, הם מתאימים לבבות עבודה biventricular מכים על הנורמהבאל בסינוסים שיעורי (כ 180 BPM עבור ארנב). הביקוש גדל חילוף החומרים של מקצבים מהירים וכמות החמצן המומס perfusates רגיל לא יכול להיות מספיק כדי תמיכה מלאה הלב עובד biventricular כי היא מתקשרת בשיעורים גבוהים. פתרונות גבישן חיץ המכילים אריתרוציטים או מעורבים עם דם מלא שימשו ההכנות לב העובדים על מנת להבטיח זמינות חמצן נאותה. מחקרים קודמים הראו כי הוספת אריתרוציטים לפתרון קרבס-Henseleit שיפור תפקוד הלב עובד במהלך פרוטוקולים צעדה מחמירות וכן להפחית את השכיחות של פרפור חדרים 16. הגבלה של שימוש אריתרוציטים או תערובות של דם מלא הוא המוגלובין מפריע אורכי גל האור המשמשים הקרינה הדמיה 13. מצעים אחרים, כמו אלבומין, ניתן גם להוסיף פתרונות perfusate להאריך את הכדאיות לב להפחית בצקת 28. במהלך דימות פלואורסצנטי עוצמת האור עירור צריך להיות גבוה חלוקת האור צריך להיות אחיד. להשיג תאורה אחידה לא תמיד קל בגלל העקמומיות של פני השטח epicardial. במחקרים שלנו, אנחנו התמונה fNADH ידי סינון אור (350 ± 25 nm) של מנורת כספית. סיבים אופטיים מפוצלת ספר אור משמש כדי לכוון את אור UV על פני השטח epicardial. תאורה אחידה יכולה להיות מושגת על ידי מיקום מתאים שני מתנוצץ בחישוקי המתכת פלט. UV-LED מקורות אור יכול לשמש גם, כפי שכבר הוכיח באיור 3. מקורות LED הם זולים יחסית כך ממקורות מרובים יכול להיות משולב בתוך מערכת הדמיה. נוריות ניתן גם באופניים לסירוגין בשיעורים גבוהים לסנכרן אור עירור עם רכישת התמונה. Photobleaching של NADH צריך להיות ממוזער 29 על ידי הקטנת הזמן של הארה רקמות. זה יכול להיעשות על ידי רכיבה על אופניים הארה לסירוגין באמצעות אלקטרוניםIC התריס המנורה או עם מערכת תאורת LED לבין בקר. אם התאורה מסונכרן עם מחזור לב, אז רכישת התמונה fNADH יכול להיות מוגבל תרויח, אשר יפחית את החפץ תנועה אותות הקרינה. תאורה Trigging ורכישת התמונה באמצעות אותות הלחץ, כגון לחץ LV, תהיה דרך אחת לעשות את זה. במחקרים שלנו ראינו כי שינויים fNADH ליחידת זמן יכול להיות יותר מ 5X ב 400 BPM גבוה יותר מאשר ב 200 BPM. זה מצביע על כך מקצבים מהירים לרומם את מצב חיזור של הלב. אם זה נגרם על ידי היפוקסיה או חוסר היכולת של מיוציטים לחמצן NADH ל NAD + מספיק מהר כדי למנוע הצטברות של NADH עדיין השאלה ללא מענה. הביצועים של הכנת הלב biventricular עבודה מותנית בגורמים רבים. אחד החשובים ביותר הוא להגדיר המתאימים לחצים preload ו afterload לחקות פיזיולוגיתתנאים הנמצאים תחת חקירה. בפרט, afterload LV (לחץ אבי העורקים) חייב להיות מותאם לייצג בלחץ מערכתי. אם הוא גבוה מדי, LV לא יוכלו להתגבר על הלחץ, וכתוצאה מכך regurgitation. הלחץ נמוך מדי יפגע זלוף כלילית. לחץ preload LV (לחץ פרוזדורים משמאל) צריך גם להיות מותאם לספק נפח דיאסטולי סוף שמתאימה פרוטוקול הניסוי. fNADH הדמיה של רקמות חיות הוא מצב מבוססת הדמיה של הקרינה 13. ויישומו ברקמת הלב הודגם בארלו סיכוי כאשר הם דיווחו על עליות מרשים של fNADH בתוך רקמת איסכמי אזורית לאחר קשירת 14 כלי כלילית. תמונות fNADH שלהם נרשמו על הסרט באמצעות מצלמה אוסצילוסקופ פיירצ&#39;יילד וצילום פלאש UV. Coremans et al. הרחיב על המושג הזה באמצעות יחס הקרינה / UV NADH ההחזרה כדי measurה מצב מטבולי של epicardium של Langendorff דם perfused לבבות חולדה 30. Videofluorimeter שימש הדמיה הנתונים נרשם באמצעות וידיאו. מאוחר יותר, שולץ ואחרים. השתמשו במערך הספקטרוגרף ו photodiode למדוד fNADH הממוצע מאזור גדול של LV. גישה זו צמצמה את ההשפעות של הקרינה heterogeneities epicardial ווריאציות מקומיות במחזור תוך חשיפת מאקרוסקופיים הקשורים לעבודה וריאציות של fNADH 31. גישה זו דומה לממוצע מחשוב רמות fNADH עבור אזור עניין בכל המסגרות של בסיס הנתונים fNADH הדמיה, כפי שמודגם באיור 2. כפי שכבר הוצג במאמר זה, הטכנולוגיה של היום מספק מהירות גבוהה מצלמות CCD ונשלט באופן דיגיטלי הספק גבוה זרקורים UV. טכנולוגיות אלה מאפשרות את הדינאמיקה של spatiotemporal fNADH ומטבוליזם לב להיחקר מנקודות מבט חדשות רבות. בעלות נמוכה יחסית של אופטיקה מקור האור עושה FNADH הדמיה אביזר שימושי לב במערכות קונבנציונליות מיפוי אופטי. 9, 32

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> כימי </td><td> חברה </td><td> מספר קטלוגי </td></tr><tr><td> NaCl </td><td> Sigma-Aldrich, סנט לואיס, מיזורי </td><td> S-3014 </td></tr><tr><td> KCl </td><td> Sigma-Aldrich, סנט לואיס, מיזורי </td><td> P3911-500 גרם </td></tr><tr><td> CaCl 2 </td><td> פישר סיינטיפיק, מדשאה הוגן, ניו ג &#39;רזי </td><td> C77-500 </td></tr><tr><td> MgSO 4 </td><td> Sigma-Aldrich, סנט לואיס, מיזורי </td><td> M-7506 </td></tr><tr><td> NaHCO 3 </td><td> פישר סיינטיפיק, מדשאה הוגן, ניו ג &#39;רזי </td><td> S-233 </td></tr><tr><td> KH 2 PO 4 </td><td> פישר סיינטיפיק, מדשאה הוגן, ניו ג &#39;רזי </td><td> 423-316 </td></tr><tr><td> גלוקוז </td><td> Sigma-Aldrich, סנט לואיס, מיזורי </td><td> 158968-500 גרם </td></tr><tr><td> NaPyruvate </td><td> Sigma-Aldrich, סנט לואיס, מיזורי </td><td> P2256-25 גרם </td></tr><tr><td> אלבומין </td><td> Sigma-Aldrich, סנט לואיס, מיזורי </td><td> A9418-100 גרם </td></tr></tbody></table>

nadh fluorescence הדמיה של biventricular מבודדת עבודה לבבות ארנב

NADH Fluorescence Imaging of Isolated Biventricular Working Rabbit Hearts

מאז הקמתה על ידי Langendorff 1, הלב נשאר בודד perfused כלי מרכזי ללימוד פיזיולוגיה של הלב 2. עם זאת, זה לא מתאים היטב מחקרים של חילוף החומרים של הלב, אשר דורשים הלב לבצע את העבודה בהקשר של preload פיזיולוגי ולחצים afterload. שינויים שהוכנסו ונילי לטכניקה Langendorff להקים המתאים חדר שמאל (LV) preload ולחצים afterload 3. המודל נקרא מודל מבודד בלב עבודה LV נעשה שימוש נרחב על מנת ללמוד את ביצועי LV ומטבוליזם 4-6. מודל זה, לעומת זאת, אינו מספק החדר הימני טעון כראוי (RV). Demmy et al. 1 דיווח מודל biventricular כמו שינוי של המודל LV הלב עובד 7, 8. הם מצאו כי פיתוח נפח הפעימה, תפוקת הלב, ולחץ משופרת בלב המרה ממצב למצב LV עובד עובד biventricular 8 </sup&gt;. RV נטען כהלכה גם מפחית מפל הלחץ לא תקינים על פני מחצה כדי לשפר את תפקוד במחיצה. לבבות עבודה Biventricular הוכחו לשמור על התפוקה אבי העורקים, זרימה ריאתי, אומר אבי העורקים בלחץ, קצב לב, שריר הלב רמות ה-ATP עד 3 שעות 8. כאשר לומדים את ההשפעות המטבוליות של פגיעה בשריר הלב, כגון איסכמיה, לעתים קרובות יש צורך לזהות את המיקום של הרקמה הפגועה. ניתן לעשות זאת על ידי הדמיה הקרינה של NADH (בצורה מופחתת של dinucleotide אדנין nicotinamide) 9-11, מצאו אנזים בכמויות גדולות במיטוכונדריה. NADH הקרינה (fNADH) מציג יחס הפוך באופן ליניארי ליד עם 12 חמצן בריכוז המקומי ומספקת מידה של המדינה חמזור המיטוכונדריה 13. הדמיה fNADH בתנאים hypoxic ו איסכמי שימש שיטת צבע ללא לזהות אזורים hypoxic 14, 15 ו לעקוב אחר התקדמותבתנאי חוסר חמצן לאורך זמן 10. מטרת השיטה היא לעקוב אחר מצב חמזור המיטוכונדריה של לבבות עבודה biventricular במהלך פרוטוקולים המשנים את קצב חילוף החומרים myocyte או לגרום היפוקסיה או ליצור שילוב של השניים. לבבות מניו זילנד ארנבים לבנים היו מחוברים למערכת הלב biventricular עובד (הוגו זקס Elektronik) ו perfused פתרון קרבס-Henseleit שונה 16 ב 37 ° C. אבי העורקים, LV, עורק הריאה, ולחצים פרוזדורי &amp; שמאל ימין נרשמו. הפעילות החשמלית נמדדה באמצעות אלקטרודה monophasic פוטנציאל פעולה. לתמונה fNADH, האור של מנורת כספית לא מסונן (350 ± 25 nm) ולהשתמש בהם כדי להאיר את epicardium. האור הנפלט היה מסונן (460 ± 20 ננומטר) צילמו באמצעות מצלמת CCD. שינויים fNADH epicardial הלבבות עבודה biventricular במהלך שיעורי צעדה שונים מוצגים. שילוב של מודל לב fNADH הדמיהמספק כלי ניסיוני חדש ובעל ערך לחקר מחלות לב חריפה בהקשר של תנאים פיסיולוגיים מציאותיים.

המטרה היא לפקח על המדינה חמזור המיטוכונדריה של לבבות בודדים בהקשר של preload פיזיולוגי ולחצים afterload. הלב biventricular לעבוד במודל ארנבת מוצג. רזולוציה גבוהה spatiotemporal הקרינה הדמיה של NADH משמש כדי לפקח על מצב חמזור המיטוכונדריה של הרקמה epicardial.

NADH Fluorescence הדמיה של Biventricular מבודדת עבודה לבבות ארנב

מאז שהוכנה לראשונה על ידי Langendorff1, נשאר הלב המבודד בפרפוזיה כלי מחקר מרכזי לבחינת פיזיולוגיה של הלב2. עם זאת, הוא אינו מתאים...

המטרה הכוללת של פרוצדורה זו היא לחקור את חילוף החומרים (metabolism). באמצעות דימות NADH בהכנה של לב פעיל, הדבר מושג תחילה על ידי בידוד לב של ארנבת. השלב השני של הפרוצדורה הוא קנולציה מוצלחת של כל ארבעה חללי הלב כדי להשיג מודל של לב פעיל.השלב הסופי הוא הגדרת ציוד הדימוי ואיסוף נתוני NADH בקצבי קצב שונים. בסופו של דבר, התוצאות יכולות להראות שינויים מטבוליים של הלב באמצעות דימוי של NADH פלואורסצנטי. היתרון המרכזי של טכניקה זו על פני שיטות קיימות כמו ה-lanor retro profusion, הוא שהלב פועל במצבו הפיזיולוגי עם זרימה בכיוון הנורמלי, כאשר הלב מספק בעצמו את הלחץ הדרוש לפרפוזיה קורונרית.שיטה זו יכולה לסייע במתן מענה לשאלות מפתח באלקטרופיזיולוגיה ובמנגנונים של הפרעות קצב קטלניות. הדבר מתבצע באמצעות אספקת מודל פיזיולוגי לבחינת הקשר בין מטבוליזם של זרימה כלילית לבין פעילות חשמלית. הדגמה חזותית של שיטה זו היא קריטית, מאחר ששלבי הקניולציה של כלי הדם ולשבת הלב הם קשים ללמידה.טכניקה לא נכונה עלולה לגרום לנזק ללב ולסכן את המשך הניסוי. לפני ביצוע הניסוי, יש לשטוף את כל השפופרות בתאי מערכת הלב הפועל במים מזוקקים, ולאחר מכן להוציא את המים מהמערכת באמצעות הפעלת המשאבות. יש להוסיף מסנני ממברנת תאית בקו עם משאבת הפרפוזיה של ה-LOR, משאבת הפרפוזיה של הלב השמאלי ומשאבת הפרפוזיה של הלב הימני.לאחר הוספת ה-perfuse eight למערכת, בצע כיול שתי נקודות עבור כל חיישן לחץ. הפעל את אמבט המים המחומם במחזוריות, המחמם את הצינורות עם מעטפת המים ואת מחליפי החום. הפעל את אמבט המים המשמש לחימום ה-PERFUSE eight.הפעילו את המשאבות המזרימות את ה-PERFUSE eight בלולאה סגורה, והפעילו את מיכל הסירקולציה כדי לחממנ את ה-Perfuse. Eight. ודאו שהחממנן המיקרו-סיבי או מסנני ההמופילטרים מספקים 95% oxygen ל-perfuse eight בלחץ של 80 kilopascals. לבסוף, ודאו שמחליפי החום שומרים על טמפרטורת ה-perfuse במחזור.בטמפרטורה של 37 °C, התחילו את כריתת הלב על ידי הגדרת מערכת עבודת הלב לפעולה בלחץ קבוע. מצב LRF. הגדירו את הלחץ של חסימת האביון בין 50 ל-60 לאחר הרדמת ארנב.הזריקו פנטובארביטול והפרין לווריד האוזן השולי או לווריד הספנוס הלטראלי בחלק הפנימי של הגפה האחורית. ברגע שהארנב אינו מגיב לרפלקס כאב, פתחו במהירות את חלל בית החזה. חתכו את הפריקרדיום, קבעו את האורטה באמצעות תסמיך והוציאו את הלב והריאות.הריאות נשארות מחוברות כדי להקל על בידוד הוורידים הראתיים. לאחר מכן, מלאו מזרק ב-60 milliliters של פתרון per F eight ו-200 units של heparin. חברו קנולה של 5 millimeter ובצעו קנולציה של האביון (aorta).קבע את האאורטה לקנולה באמצעות תפרי משי בגודל 0. לאחר מכן, לחץ באיטיות על המזרק כדי לשטוף את הדם דרך הלב. הגדר את מערכת הלב הפועל על ידי חיבור הלב לבלוק האאורטלי.התקרבו למחבר בזווית אלכסונית ואפשרו ל-Perfuse eight לטפטף בעדינות מהמחבר אל תוך הקנולה בעודו מחובר. פעולה זו מונעת חדירת אוויר לאורטה, ובכך מונעת תסמימות כלי דם כליליים בזמן שהלב עובר פרפוזיה בלחץ קבוע במצב L endorf.הסיר את השומן ורקמת החיבור ואתר את כלי הדם הבאים: vena cava inferior ו-superior, וריד ה-aose, העורק הריאתי והורידים הריאתיים. לאחר מכן, בצע ליגציה ל-superior vena cava.חתכו את העורק הריאתי ממש מתחת לנקודת הפיצול לעורקים הריאתיים הימני והשמאלי. כלי הדם הנותרים הם הוורידים הריאתיים. קבצו אותם בין הלב לריאות וקשרו את כולם באמצעות תפר אחד.דבר זה קריטי משתי סיבות. ראשית, קשירת הכליים המחוברים לריאות תבטיח שלא תהיה דליפה לאחר השלמת הקנולציה. ושנית, חשוב לבודד את שתי הוורידים החלולים (VNA cavas) לקנולציה מאוחרת יותר.כעת הוציאו את הריאות. גזרו חור בגודל מתאים בפינה של הנספח של העלייה השמאלית וודאו שהוא מלא ב-perfuse eight. לאחר מכן, בצעו קנולציה לנספח בעוד הקנולה מלאה לחלוטין ב-perfuse eight.לאחר מכן, תוך כדי החזקת הרקמה, תפרו את הקנולה לאוזניק. הרקמה של אוזניק שמאלי היא עדינה ביותר ועלולה להיקרע בקלות. לכן, חשוב לבצע את הקניולציה של העליה השמאלית בניסיון הראשון, שכן אחרת הדבר עשוי שלא להיות אפשרי.הפעל את משאבה מספר שתיים כדי לספק זרימה לעליה השמאלית. הגדר את הpreload לערך שבין 2 ל-6 tor לאורך כל הניסוי. ייתכן שיהיה צורך לכוון את הלחץ.שמרו על לחץ הנמצא בטווח של שני מילימטרים מהלחץ המטרה. כעת העבירו את הלב למצב לב פעיל (working heart mode) על ידי כיבוי רגעי של משאבה מספר אחת, משאבת ה-langor. הנמיכו את הלחץ האאורטלי ל-10 mmHg ואז העלו אותו לאט לטווח של 80 עד 100 mmHg.דבר זה מאפשר למסוע האורטלי להיפתח ולתפקד כפי שהיה קורה בתנאים פיזיולוגיים נורמליים. הגדרו את לחץ העומס האחורי הסופי לערך שהוא בערך 20% פחות מלחץ ה-LV השיא, באמצעות קנולה המחוברת ישירות למערכת.החדירו קנולה לעלייה הימנית דרך ה-inferior vena CVA ותפרו את הקנולה לווריד. הימנעו מהחדרת בועות אוויר. הפעילו את משאבה מספר שלוש, משאבת הצד הימני, כדי לספק זרימה לעלייה הימנית.כוון את הלחץ לכ-three tor. לבסוף, בצע קניולציה של החדר הימני תוך מניעת חדירת אוויר, ותפר את הקניולה לעורק הריאתי. בכך הושלמה הקניולציה הביוונטריקולרית.כעת עברו לרכישת האותות. הכניסו בזהירות את קטטר מתמר הלחץ לאורטה דרך קנולת האורטה. נווטו אותו בעדינות מעבר למסתם האורטלי ואל תוך ה-lv.אות הלחץ של ה-LV יופיע כמצופה כאשר קצה הקטטר ממוקם כראוי. לאחר מכן, הקהלו בעדינות את אלקטרודת פוטנציאל הפעולה המונופזי gegen an the ventricular epicardium. ארטיפקט תנועה קל באות האלקטרודה הוא תקין.בשלב הבא, מקמו אלקטרודת גירוי ביפולרית בעלייה הימנית כדי לקצב את הלב בהתאם למיקום שנקבע בתכנון הניסויי. התמקדו במצלמת ה-CCD באזור העניין של הלב. למצלמה צריכה להיות מחוברת מסננת פליטה.כדי להעביר פלואורסצנציית NADH, כבו את תאורת הסביבה כדי להאיר באופן אחיד את האפיקרדיום באמצעות מקור אור UV בתחנת העבודה, אליה מחוברת המצלמה. הגדירו את התוכנה לרכישת תמונות בקצב של שני פריימים לשנייה. לאחר מכן, בחרו במצב עדכון חי (live update) כדי לנטר את עוצמת הפיקסלים הממוצעת בתוך אזור העניין (region of interest).אם הפרפוזיה הייתה מספקת, רמות ה-NADH המיוצגות על ידי הפלואורסצנציה צריכות להיות נמוכות ויציבות על פני השטח של האפיקרד. כעת, הפסק את הניסוי כאשר הוא מסתיים. הוצא את הלב.רוקנו את ה-PERFUSE eight ואת צינורות ומסבי המערכת באמצעות מים מזוקקים. שטפו את המערכת מדי פעם בתמיסת mucosal TM או בתמיסת מי חמצן מדוללת בהתאם לפרוטוקול המתואר. הלבבות הופעלו באורכי מחזור של בין 200 ל-400 פעימות לדקה.ה-LVP הדיאסטולי היה בדרך כלל בין 0 ל-10 Tor, כאשר הלחץ האאורטלי הדיאסטולי המינימלי היה בקירוב 60 Tor. ה-LVP הסיסטולי בשיאו תלוי בלחץ המילוי וביכולת הכיווץ, ובאופן אופטימלי צריך להיות בין 60 ל-80 Tor; הלחץ האאורטלי המקסימלי וה-LVP המקסימלי צריכים להיות דומים מאוד. לפוטנציאלי פעולה מונופזיים האופייניים ללב של ארנב יש שלב דפולריזציה מהיר ושלב רפולריזציה מאפייני. פוטנציאלי פעולה הוקלטו בקלות מהתכשירים, אך לרוב נצפה בהם ארטיפקט תנועה קטן במהלך הדיאסטולה.ערכי פלואורסצנציית NADH ממוצעים מאזור עניין בתוך הריבוע האדום נמדדו כדי לנטר שינויים במצב החמצון-חיזור המיטוכונדרי במהלך שלושה מחזורי קצב בפרקי זמן של 300, 200 ו-150 מילישניות, כאשר קצב הגירוי היה קרוב לקצב הסינוס. רמת ה-NADH הבסיסית נותרה קבועה יחסית ככל שאורך המחזור התקצר. מתחת ל-300 מילישניות רמות ה-NADH הבסיסיות עלו, כאשר העלייה הגדולה ביותר נרשמה ב-150 מילישניות; האות תנודתי עם ההתכווצות ותדירות התנודה תואמת את קצב הלב.האמפליטודה של תנודות אלו הייתה תמיד נמוכה יותר מכל מגמה בלוח זמנים ארוך יותר שנגרמה על ידי איסכמיה או היפוקסיה. דימות פלואורסצנטי ברזולוציה גבוהה של NADH של כל המשטח הקדמי ב-200 פעימות לדקה הייתה קבועה והומוגנית מרחבית ב-400 פעימות לדקה. רמות ה-NADH עלו באופן משמעותי לאורך כל האפיקרדיום.נצפתה הגתרוגניות מרחבית משמעותית, כאשר העליות הגדולות ביותר התרחשו באזורי המחיצה של ה-RV וה-LV. לאחר השליטה בטכניקה, ניתן לבצעה בפחות מ-45 דקות אם היא מבוצעת נכון. בעת ניסיון ביצוע הליך זה, חשוב לזכור למנוע חדירה של בועות אוויר לאאורטה או לעלייה השמאלית לאחר הליך זה.ניתן להשתמש בשיטות נוספות, כגון טעינת הלב בצבע רגיש למתח, כדי לענות על שאלות נוספות, כמו קישור בין הפעילות החשמלית למטבולית על פני השטח של הלב במהלך תרחישים פתולוגיים כגון איסכמיה מקומית לאחר התפתחותה. טכניקה זו סללה את הדרך לחוקרים בפיזיולוגיה של הלב לחקור הפרעות במטבוליזם ובהולכה של הלב בתנאים פתולוגיים תוך שימוש במודל רלוונטי יותר מבחינה פיזיולוגית.

nadh-fluorescence-imaging-isolated-biventricular-working-rabbit

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

מאמר זה מתאר טכניקה גבוהה ברזולוציה של זמן ומרחב התנועה תמונה אופטית פעולה פוטנציאל על פני השטח של Langendorff-perfused הלבבות חולדה באמצעות צבע פוטנציומטרית (di-8-ANEPPS).

מיפוי אופטי של Langendorff-perfused לבבות עכברוש

מאמר זה מתאר את ההליכים הבסיסיים לעריכת ניסויים מיפוי אופטי בלב Langendorff-perfused הארנב באמצעות מערכת הדמיה פנורמית, ואת שיטת כפול (מתח סידן) הדמיה.

Multiparametric מיפוי אופטי של הלב Langendorff-perfused הארנב

מאמר זה מתאר את הפרוטוקול מפורט וציוד הכרחי למיפוי כפול אופטי של (מ 'V) פוטנציאל הטרנסממברני וחופשי רשתית תוך-sarcoplasmic (SR) Ca 2 + בלב ארנב Langendorff-perfused. שיטה זו מאפשרת לתצפית ישירה וכימות של מטר V ו2+ דינמיקת Ca SR בלב שלם.

מיפוי אופטי של Intra-sarcoplasmic reticulum Ca<sup&gt; 2 +</sup&gt; ופוטנציאל הטרנסממברני בלב ארנב Langendorff-perfused

ניתן להשתמש במודלים מבודדים של לב עובד כדי למדוד את ההשפעה של תנאי העמסה, קצב לב ותרופות על ביצועי שריר הלב וצריכת החמצן. אנו מתארים שיטות להכנת מודל עבודה של לב שמאל של מכרסמים המאפשר מחקר של ביצועים סיסטוליים ודיאסטוליים וצריכת חמצן בתנאים שונים.

מכרסם עבודת לב דגם לחקר ביצועי שריר לב ואת צריכת חמצן

בלב, אירועים מולקולריים לתאם את פונקצית חשמל התכווצות של האיבר. סט של טכניקות מיקרוסקופ פלואורסצנטי בשדה מקומיות הציגו כאן מאפשר ההקלטה של ​​משתני הסלולר לבבות שלמים. זיהוי מנגנונים בהגדרת תפקוד הלב הוא קריטי להבנה כיצד הלב עובד תחת מצבים פתולוגיים.

בשדה מקומי מיקרוסקופ פלואורסצנטי: הדמיה איתותי הסלולר לבבות שלמים

פרוטוקול זה מתאר הערכת אלקטרופיזיולוגיות אטריה מאתר ניצול מערכת מיפוי אופטי עם הגיאופוליטיות והמרחביות טמפורלית רזולוציה גבוהה, כולל הקלטות כפולה של מתח הממברנה, Ca2 + חולף תחת מתוכנת גירוי דרך קטטר אלקטרודה מיוחדת.

אלקטרופיזיולוגיות להערכת אטריה מאתר עם מיפוי אופטי ברזולוציה גבוהה

אסטרטגיות טיפוליות הרומן של רפואה רגנרטיבית הלב דורשים מקיף ומפורט הלימודים במודלים של בעלי חיים פרה גדולה לפני שהם יכולים להיחשב לשימוש בבני אדם. כאן, נדגים שיטה הזרקת intramyocardial מונחה אקוקרדיוגרפיה ניגודיות מלעורית בארנבים, וזה יקר עבור בדיקת יעילותם של טיפולים חדשניים כאלה השערות.

הזרקת Intramyocardial מונחה אקוקרדיוגרפיה ניגודיות מלעורית ואספקה תא בדגם פרה גדולה

כאן אנו מציגים שיטה לשימוש צנתר אופטי פנים-חדר בלבבות מעשה כדי לבצע ספקטרוסקופיה ספיגת על פני קיר הלב. הנתונים שהושגו מספק מידע חזק על מתח החמצן ברקמות, כמו גם ניצול מצע ופוטנציאל הממברנה במקביל עם ביצועים מדדים לב בהכנה זו בכל מקום.

מהצד הפנים-לב-אש קטטר אור עבור ניטור מטבוליזם הסלולר באמצעות בליעה בספיגת העבר של הלבבות המגברים

אנו מציגים את המתודולוגיה עבור בידוד של מוציטים מורטין וכיצד להשיג מתח או סימני הסידן במקביל עם הקיצור סרקומר באמצעות מכשירי האור הפלואורסצנטית עם מדידות הגיאומטריה הדיגיטלית בו.

הדמיה אופטית של מודציטים מבודדים המוח החדרית

מטרת מחקר זה הייתה ליצור שיטה לחקירת דינמיקה קרדיולוגית באמצעות מודל בעלי חיים טרנסלבותית. הגישה הניסיונית המתוארת משלבת אופקרדיוגרפיה כפולה בשילוב עם מחקר אלקטרולוגי להערכת פעילות החשמל במודל לב פורצין מבודד, שלם.

אופקרדיוגרפיה ולימודי אלקטרופיזיולוגיה של לשעבר Vivo נגדורף

המחקר הנוכחי מדגים מודל בעל חיים בעל יכולת שחזור גבוהה של איסכמיה אזורית חריפה של שריר הלב ופגיעה ברפרפוזיה בארנבים באמצעות מיני בית חזה שמאלי למקרי הישרדות או עצם סטרנטומיה בקו האמצע למקרים שאינם הישרדותיים.

מודל של איסכמיה ופגיעה רפרפוזיה בארנבים

למדו הדמיית פלואורסצנציה NADH לבחינת מצב רדוקס מיטוכונדריאלי בלבבות ארנב מבודדים במודל עבודה דו-חדרי. שיטה זו מאפשרת מעקב אחר שינויים מטבוליים בזמן אמת ובחינת הקשר בין זרימה כלילית לפעילות חשמלית.

NADH Fluorescence הדמיה של Biventricular מבודדת עבודה לבבות ארנב

גלה סרטונים נוספים