הדמיה בקטריאלי bioluminescent In Vivo

סרטון זה מתאר את השימוש בהדמיה ביולוגית של כל הגוף לחקר סחר חיידקים בעכברים חיים, בדגש על זיהוי גידול חיידקים בתוך חיידקי קסנוגרפט של גידול מהווים סוג אטרקטיבי של וקטור לטיפול בסרטן, בעלי יכולת טבעית לגדול באופן מועדף בתוך גידולים, לאחר מתן תוך ורידי הגדל מחוץ לתאי הגידול או בתוכם. זני חיידקים שהונדסו לבטא את קלטת הגן לוקס מקלים על איתור החיידקים וגידולים במקביל. הערך של ניטור אורך לא פולשני של זני חיידקים in vivo מקובל היטב, מפחית את השימוש בבעלי חיים ומייצר נתונים רלוונטיים יותר מבחינה סטטיסטית מאשר מבחני קצה.

הליך זה כולל אינדוקציה של גידולים תת עוריים בעכברים. גידולים מורשים להתפתח ומנוטרים לאורך זמן. חיידקים ניתנים ועכברים נתונים להדמיית ביולומינסנציה בנקודות זמן ייעודיות לניסויים המתוארים כאן.

גידולים תת עוריים מושרים בעכברים בעלי רקע חיסוני או תימי. בהתאם לבחירת קסנוגרפ, חיידקים מסוג לוקס מהמין הרצוי כגון אי קולי, גדלים כתרביות לילה. תאי חיידקים נשטפים ומושעיים מחדש בריכוז הרצוי למתן תוך ורידי.

10 לשישה. משתמשים באופן שגרתי בתאי חיידקים בנפח הזרקה של 100 מיקרוליטר. עכברים הנושאים גידולים תת עוריים באופן שגרתי 100 מילימטרים נפח קובני מוכנים לטיפול.

באמצעות מחט מזרק בקוטר 29, מזריקים את תרחיף החיידקים לווריד הזנב הרוחבי. החיידקים משוכפלים באופן מועדף בתוך מסת הגידול לאורך זמן. חיידקים תוך-גידוליים ממשיכים להשתכפל במשך מספר שבועות וניתנים לזיהוי על ידי הדמיית IVUS בין שלושה לשישה ימים.

לאחר מתן להדמיה ביולוגית עכברים חיים ומורדמים ממוקמים בתוך תא 37 מעלות של האיבוס. אם תרצה, ניתן לצלם מספר עכברים בו זמנית. תמונות צילום ואור זוהר נאספות באמצעות מצלמת CCD מקוררת בהגדרות התוכנה הרצויות.

בהתאם למכשיר ההדמיה, ניתן לבצע ניתוח דו או תלת מימדי. מושג קשר חזק ולינארי בין מספרי החיידקים התוך-גידוליים לבין רמות האור המופקות. הערכה אמינה של חיידקים מספרי חיידקים in vivo LX המבטאים חיידקים עשויים להתגלות גם מעומק הגוף.

לוקס המבטא חיידקים קומנסליים המתיישבים במעיים מוצגים במשך מספר שבועות. מתן לאחר מערות מדגים עוד יותר את התועלת של הדמיה ביולוגית לניתוח חיידקים המבטאים לוקס בחיות מחקר.