8 בנובמבר 2013
שיפור ההבנה שלנו ואת היכולת שלנו לנהל רבים של הווירוסים המועברים בצמחי חרקים מחייב שימוש בווקטור. שידור חרקים של וירוסי צמחים הוא אינטראקציה tritrophic, ובתור שכזה דורש מניפולציה של חרקים, וירוסים, וצמחים. וקטורים חייבים להיות שגדלו במספרים גדולים ומניפולציות באופן שעל מנת להבטיח שיעור גבוה של העברת צמחים לבדיקה. את היסודות של גידול וטיפול בכנימות, Bemisa tabaci ( Hemiptera: Aleyrodidae), וקטור של וירוסי צמחים השייכים לכמה סוגי וירוס צמח מתעוררים, המייצגים את מספר גדול של וירוסים משמעותיים מבחינה כלכלית הוא מוצג.
המטרה הכוללת של הניסוי הבא היא להעביר וירוסים צמחיים באמצעות זבובים לבנים. זה מושג על ידי הקמה ותחזוקה של מושבה של זבובים לבנים המספקים זבובים לבנים בוגרים שזה עתה הופיעו על בסיס שבועי, שאינם מזוהמים בווקטורים ופתוגנים פוטנציאליים אחרים. המושבות נשמרו על ידי הוספה קבועה של זבובים לבנים לצמחים צעירים ללא חרקים שמהם נוצרים בוגרים חדשים.
לאחר 17 עד 20 ימים בשבוע, ניתן להעביר את הבוגרים החדשים למפעלי בדיקה כדי לרכוש או להעביר העברת נגיף. נצילות של כמעט 100% מתקבלת בדרך כלל, ושיעורי השידור יתחילו בדרך כלל נמוכים ויטפסו עם אופטימיזציה שיטתית. ההיבט המאתגר ביותר בשימוש בזבובים לבנים לחיסון וירוסים הוא גידול הזבובים הלבנים באופן כזה שלא ייכללו פתוגנים וחרקים לא רצויים.
פתוגנים, במיוחד פטריות נרקבות שורשים ודלקות עלים, יפחיתו את איכות הצמחים המארחים את הנגיף. חרקים לא רצויים כמו חסכונות יכולים לדכא את רביית הזבוב הלבן וכן לפגוע באיכות הצמח המארח את הנגיף. מי שתדגים את הנהלים תהיה הת'ר קאפה ביאנקו, טכנאית מהמעבדה שלי.
יש לשמור על מושבות זבוב לבן בחדר גידול נקי ומבוקר. שליטה בלחות יחסית, טמפרטורה, תקופת צילום ועוצמת אור חיוניים למושבה המתפתחת מביצה לבוגר תוך 18 יום, השתמש בהגדרות הבאות. יש להגדיר את הטמפרטורה בין 26 ל-30 מעלות צלזיוס, והלחות היחסית צריכה להיות באופן אידיאלי בין 30 ל-50%אם הלחות היחסית עולה על 70%, פתוגנים פטרייתיים של חרקים וצמחים עשויים להפוך לבעיה.
תקופת הצילום האידיאלית היא 14 שעות. עוצמת האור צריכה להיות גבוהה למדי, ונורות פלורסנט VHO יכולות לייצר נרות של 800 עד 1000 רגל בחופת הצמח. יש להפחית גם את שיעורי הדשן וההשקיה כדי להרתיע פתוגנים פטרייתיים, כמו גם הצטברות מלח כלובי Whitely חייבים לאפשר אוורור, קלות גישה ומספיק מקום לאוכלוסייה לבנה הולכת וגדלה.
תוצאות טובות הושגו עם אורגנזה של איברים בתוספת הקרנת אלומיניום, כמו גם הוכחה לבנה סינון מיני הצמח הוא שיקול חשוב. ראשית, הוא צריך לצמוח במהירות, אך לא לגדול יתר על המידה בחדר. שנית, הצמח צריך להיות חזק מספיק כדי לתמוך באוכלוסיית חרקים גבוהה מבלי להתמוטט.
מסיבות אלה, זני ננסיים או שיחים עושים בחירות צמחיות טובות. שלישית, הצמח חייב להיות מסוגל לארח או לא יכול לארח את הנגיף הנמצא בשימוש בהתאם לסוג המושבה שגדלה. מכיוון שהמושבה עלולה לקרוס בגלל קרדית, THPs, זבובים לבנים פראיים או חרקים פולשים אחרים, יש לגדל את הזנים שנבחרו בסביבה מוגנת כדי להוציא חרקים אחרים.
הזבובים הלבנים הראשונים של מושבה חדשה חייבים להיות נקיים מנגיפי צמחים, חרקים אחרים ופתוגנים של חרקים. אם נאספים זבובים לבנים מהשדה, גדלו אותם לפחות שמונה שבועות על צמחים שאינם מארחים את הנגיף במהלך תקופה זו, בדקו אם אין תסמינים צמחיים. לאחר קבלת זבובים לבנים נקיים, הכניסו בין 20 ל-100 לכלוב צמחים על ידי שאיבה או ניעור עדין מצמח מקור אחר.
כל שבוע צריך להקים כלוב חדש. בשלושת השבועות הראשונים, השתמשו בזבובים הלבנים על צמחים שאינם ST כדי להקים את הכלוב החדש. החל מהשבוע הרביעי, השתמשו בזבובים לבנים בוגרים צעירים מהכלוב בן שלושת השבועות כדי להקים את הכלוב הבא.
במהלך השבוע הראשון בכלוב, הזבובים הלבנים יטילו ביצים על החלק התחתון של משטחי עלי הצמח. בשבוע השני יתגלו זבובים לבנים לא בוגרים וחלק מהבוגרים עדיין יהיו בחיים. בשבוע השלישי יופיעו זבובים לבנים בוגרים חדשים רבים, וצפויה עלייה ניכרת מאוד באוכלוסיית הזבוב הלבן הבוגרת.
זבובים לבנים אלה יכולים לשמש לניסויי שידור. בשבוע הרביעי יש להעביר את הבוגרים בני השבוע לכלוב חדש. יש להסיר את הכלוב הישן ולהשליך את הצמחים שלו. מדויק.
העברה עדינה של זבובים לבנים מתבצעת באמצעות מכשיר שאיבה ובקבוקוני איסוף לעולם אינם שואפים. זבובים לבנים הניזונים מצמחים בעת האכלת הסגנונות הלבנים מוטבעים בצמח ויתנתקו אם יתרחקו מהצמח. כדי להפוך את הזבוב הלבן לחסר תועלת לאיסוף זבובים לבנים ביד אחת, החזיקו ביד השנייה מגן פלסטיק צהוב בתוך כלוב המושבה.
הקש בעדינות על הצמחים כדי לעודד את הזבובים הלבנים הבוגרים לעוף. זבובים לבנים יימשכו לכרטיס הצהוב שם ניתן יהיה לאסוף אותם. שימוש בשואב ויניקה עדינה מאוד מוסיפים לא יותר מ-20 זבובים לבנים לכל בקבוקון איסוף.
לאחר מכן הקש על הבקבוקון כדי לבלבל את הזבובים וכסה את הבקבוקון בפרם. כדי להבטיח העברה ויראלית מוצלחת, נסו 15 עד 40 מבוגרים צעירים מצמחים נגועים בנגיף לצמחים בריאים, תלוי בנגיף ובצמח המארח. פרוטוקולים אחרים כמו בדיקות סקר עמידות זקוקים לאוכלוסיות התחלתיות גדולות יותר.
במקרה זה, יש לנער את הצמחים הנגועים בנגיף, הנגועים בזבובים לבנים מעל הצמחים שצריך לחסן אותם. ברגע שהזבובים הלבנים מונחים על צמח נגוע בנגיף, אפשרו להם להאכיל במשך 48 עד 72 שעות כדי לרכוש נגיפים המועברים באופן מתמשך. יותר זמן בדרך כלל לא מגדיל את קצב ההעברה של וירוסים המועברים בצורה לא מתמשכת או מתמשכת.
תקופת גישה קצרה יותר של שעה ליום תספיק לניסויים הדורשים רכישה מעלים ספציפיים. ניתן להשתמש בכלובי קליפס, להגדיר את הכלוב כך שהחלק התחתון של העלים יהיה נגיש, ואל תשתמש ביותר מ-10 נקבות זבובים לבנים לכל כלוב בקוטר 2.5 סנטימטר, אחרת קצב ההדבקה יירד עקב צפיפות. לחיסון צמחים, בחר את הכלוב המתאים בהתחשב במספר הצמחים.
מפעל אחד, למשל, זקוק רק לכלוב קטן רק מעט גדול ממנו עבור מספר צמחים, בחר בין צינורות PVC קטנים יותר, כלוב ממוסגר או כלוב מסגרת אלומיניום גדול יותר. ככל שהחלל סביב חופת הצמח קטן יותר, כך ייטב. ברגע שהזבובים הלבנים מתווספים לצמח החדש, משך הזמן הדרוש לחיסון תלוי בנגיף ובצמח המארח.
בדיוק כמו ברכישה, משך הזמן הנדרש להעברה תלוי באופן ההעברה. שידור לא מתמשך דורש זמן גישה קצר בהרבה משידור חצי מתמשך או מתמשך. בדוק שהזבובים הלבנים מחטטים או ניזונים במהלך תקופת הגישה לחיסון.
פתחו את הכלוב וחקרו את הצד התחתון של כמה עלים על כל צמח. לחיסון ארוך יותר. תקופות גישה מפריעות מעת לעת בעדינות לצמחים כדי לעודד את ההפצה מחדש על הצמחים.
זה יגדיל את קצב ההדבקה על ידי התמודדות עם הנטייה הטבעית של זבובים לבנים להצטבר כדי לסיים את תקופת החיסון. הרגו את הזבובים הלבנים עם שני קוטלי חרקים, אחד אחרי השני. ראשית יש למרוח קוטל חרקים במגע כדי לחסל במהירות זבובים לבנים בוגרים כגון סבון קוטלי חרקים.
שנית, יש למרוח קוטל חרקים סיסטמי כדי לחסל זבובים לבנים שמתפתחים בשבועות הבאים. וכל המבוגרים שנותרו פולטים, צחיח או פירזין הם בחירות יעילות. באמצעות נהלים אלה, ניתן להשיג באופן שגרתי שיעורי העברת וירוסים של 100%שיעורי העברה גבוהים כאלה חיוניים בעת בדיקת מפעלי בדיקה לעמידות לנגיף והם רצויים בעת הערכת יעילותן של תרכובות כימיות ליכולתן להפריע להעברת הנגיף.
לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד לגדל זבובים לבנים ולהשתמש בהם להעברת וירוסים צמחיים. נהלים אלה יכולים לשמש למטרות מחקר או לפיתוח מסחרי של צמחים עמידים לנגיפים, או לבדיקת תרכובות ליכולתן להפריע להעברת הנגיף.
מחקר זה מתמקד בהעברת נגיפי צמחים באמצעות הזבוב הלבן, Bemisia tabaci. הוא מפרט את השיטות לגידול זבובי הלבן בסביבה מבוקרת כדי להבטיח שיעורי העברה גבוהים של וירוסים לצמחי בדיקה.
Establishing reliable whitefly colonies enables consistent plant virus transmission for antiviral compound screening and resistance breeding programs. High-efficiency transmission supports predictive confidence in target validation and mechanistic de-risking of plant-based therapeutic candidates. This method provides a scalable, reproducible system for evaluating virus-host interactions in early discovery workflows.
Positions whitefly-mediated virus transmission as a discovery-to-preclinical enabling technology for antiviral target validation and resistance mechanism elucidation.