Name: בידוד של לימפוציטים מעכבר גניטלי חוברות רירית (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-09-03T13:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 46 s
Description: למדו שיטה יעילה לבידוד לימפוציטים ממערכת הרבייה העכברית באמצעות עיכול אנזימטי ומדרגת פרקול. השיטה מאפשרת אפיון תאים בציטומטריית זרימה ומסייעת בהבנת התנהגות לימפוציטים ברקמות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

אנו רוצים להודות לNIH למימון מענקי R01-AI026328 (קאק) וR01-AI079004 (קאק).

1. הסרת איברי המין <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדים את העכבר באמצעות הנחיות מאושרות. הפוך חתך קו אמצע נמוך ולחזור בו עור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מבודד ולהסיר דרכי מין מלאות, מצינור השחלה לפתח נרתיק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פתח את כל דרכי longitudinally עם מספריים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותך את איבר המין עם מספריים כירורגית עדינים לחתיכות (כ &lt;1 מ&quot;מ) בצלחת פטרי עם RPMI-10/EDTA מלא (ראה את הנוסחא בהמשך) ומערבב את הרקמה בבקבוק 125 מ&quot;ל בטמפרטורת חדר על stirrer מגנטי מוגדרים עבור 15 דקות. הליך זה חוזר על עצמו פעמים ולאחר מכן את supernatant, המכיל האפיתל ופסולת אחרת, נמחק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יוצק תכולת הקנקן דרך מסננת תא (40μm). לשטוף את שאריות EDTA עם מדיום שלם. RPMI/10 מלא: RPMI 500 מ&quot;ל (Gibco), 10% בסרום שור עוברי (FBS), חום מומת-, 5 המ&quot;ל פניצילין / סטרפטומיצין, 5 1M HEPES מ&quot;ל. RPMI-10/EDTA מלא: 10% RPMI (כאמור לעיל) עם E 5μMDTA </li></ol> 2. מעכל את רקמות מערכת מין <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להעביר פיסות רקמה לבקבוק חדש עם RPMI-10/collagenase טרי 20 מ&quot;ל (ראה מתכון בהמשך) ולעכל את הרקמה על 37 מעלות צלזיוס במשך שעה 1 ב stirrer מגנטי מוגדרים נמרצות כדי לעורר את הרקמה. RPMI-10/collagenase מלא: ממש לפני השימוש, collagenase לשקם סוג שמיני (סיגמא; חנות ב -20 ° C, או לפי הוראות היצרן.), להוסיף לRPMI/10 מלא לריכוז סופי של 450-500U/ml. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר העיכול הראשון, לאסוף supernatants דרך מסננת תא 100 מיקרומטר, לשמור על תאים על קרח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העברת הרקמות המעוכלות בבקבוק חדש ולחזור על 2.1 פעמים נוספות באמצעות צעד RPMI-10/collagenase מלא טרי עבור סכום כולל של 3 digestions הנפרד. בשלב זה, ללא חלקי רקמה גלויות צריכים להיות בפתרון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברכה את כל supernatants יחד ממדגם ואוסף דרך מסננת תא 100 מיקרומטר. ספין גאמות למטה. כדורים סלולריים יופרדו באמצעות גרדיאנטים Percoll. </li></ol> 3. הפרדת תאי מערכת מין באמצעות גרדיאנטים Percoll <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן את כל ריכוז של Percoll לפני שימוש: <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 100% Percoll איזוטוני: התמהיל 9:01 המנייה Percoll (Pharmacia Biotch) לעומת PBS 10x. חומציותו ל 7.4 באמצעות HCL. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 40% פתרון Percoll: לערבב 40 מ&quot;ל של Percoll איזוטוני 100% ו 60 מ&quot;ל של RPMI המלא. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 70% פתרון Percoll: לערבב 70 מ&quot;ל של Percoll איזוטוני 100% עם 30 מ&quot;ל של RPMI המלא. </li></ul></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Resuspend כל תא גלולה מהשלב 6 בפתרוני Percoll 40%. נפח שווה של Percoll 70% יהיה בשימוש על מנת להפוך את השיפועים. ישנן שתי דרכים להגדיר צינורות הדרגתיים: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תחת שכבה: להוסיף השעית תא עם Percoll 40% לצינור שיפוע ראשון, ואז בזהירות מתחת לשכבה 70% Percoll. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מעל השכבה: להוסיף Percoll 70% לצינור ראשון, ואז בזהירות ובאיטיות לטעון Percoll 40% המכיל את התאים עלעליון. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דגימות שיפוע תהיינה centrifuged @ 900 XG, בטמפרטורת החדר, במשך 20 דקות עם הבלם כבוי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הלימפוציטים יהיו בשכבת הממשק שבין 40% ושכבות Percoll 70%. זהירות לקצור את שכבת הממשק, לשטוף עם RPMI 01:03 וספין למטה ב740 XG. הלימפוציטים יהיו בתא הכדורי ומוכנים לשימוש נוסף. </li></ol> 4. נציג תוצאות דוגמה לבידוד של לימפוציטים מדרכי מין עכבר וcytometry ניתוח תזרים (FACS) מוצגת באיור 1. דרכי מין הוסרו מכלמידיה muridarum עכבר נדבק intravaginally 7 ימים לאחר הדבקה. שני מסלולי גניטלי היו נקווים יחד כדי שיהיו מספיק לימפוציטים לבדיקה פונקציונלית ופנוטיפ ידי FACS. רקמות גזורות עובדו על ידי העיכול וצעדי בידוד כפי שתואר לעיל. השעית התא הבודדה הייתה מוכתמת לfluorochrome מצומדות השונהנוגדנים חד שבטי כנגד CD3 עכבר, CD4 וCD8. איור 1 מציג מצגת הדוט עלילה של תאי T מסוג CD4 חיוביים לעומת תאי T CD8 חיוביים מגודרים בלימפוציטים מסוג T CD3 חיובי. ההליך שלנו יכול לבחון לימפוציטים שבודדו משטחי אברי מין של מודלים שונים מחלה להעריך תאים חיסוניים מאפיינים שונים ופונקציונליים הפנוטיפי במחלות שונות במודל עכבר. אלה כוללים תאים חיסוניים מגוונים, כגון תאים דנדריטיים, נויטרופילים, מקרופגים NK, NKT, תאי T (תאי T Ag ספציפיים), תאי B וכו 3-10. <img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/4391/4391fig1.jpg" /> האיור 1. ימפוציטים בודדו משטחי אברי מין של עכברים נגועים בכלמידיה muridarum, בשיטה שהוצגה כאן. לאחר הליך ההפרדה המוחלטת, לימפוציטים הוכתמו CD3 fluorochrome-מצומדות, CD4 וCD8. הנתונים של הרביע היו מגודרים בCD3 הלימפוציטים +,מראה מסוג CD4 + לעומת CD8 + ובאחוז התאים מגודרים.

<ol><li>M, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+impact+of+perinatal+immune+development+on+mucosal+homeostasis+and+chronic+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev+Immunol%22%5BJournal%5D)">The impact of perinatal immune development on mucosal homeostasis and chronic inflammation.</a> Nat. Rev Immunol. 12, 9-23 (2011).</li>
<li>Centers for Disease Control and Prevention. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%222010+Sexually+Transmitted+Diseases+Surveillance%22">2010 Sexually Transmitted Diseases Surveillance</a>. , Centers for Disease Control and Prevention. (2010).</li>
<li>Jain, S., Patrick, A. J., Rosenthal, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiple+tandem+copies+of+conserved+gp41+epitopes+incorporated+in+gag+virus-like+particles+elicit+systemic+and+mucosal+antibodies+in+an+optimized+heterologous+vector+delivery+regimen%5BTitle%5D)+AND+%22Vaccine%22%5BJournal%5D)">Multiple tandem copies of conserved gp41 epitopes incorporated in gag virus-like particles elicit systemic and mucosal antibodies in an optimized heterologous vector delivery regimen.</a> Vaccine. 28, 7070-7080 (2010).</li>
<li>Tang, V. A., Rosenthal, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intravaginal+infection+with+herpes+simplex+virus+type-2+%28HSV-2%29+generates+a+functional+effector+memory+T+cell+population+that+persists+in+the+murine+genital+tract%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Reprod.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Intravaginal infection with herpes simplex virus type-2 (HSV-2) generates a functional effector memory T cell population that persists in the murine genital tract.</a> J. Reprod. Immunol. 87, 39-44 (2010).</li>
<li>Gillgrass, A. E., Tang, V. A., Towarnicki, K. M., Rosenthal, K. L., Kaushic, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protection+against+genital+herpes+infection+in+mice+immunized+under+different+hormonal+conditions+correlates+with+induction+of+vagina-associated+lymphoid+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Virol%22%5BJournal%5D)">Protection against genital herpes infection in mice immunized under different hormonal conditions correlates with induction of vagina-associated lymphoid tissue.</a> J. Virol. 79, 3117-3126 (2005).</li>
<li>Sajic, D., Patrick, A. J., Rosenthal, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mucosal+delivery+of+CpG+oligodeoxynucleotides+expands+functional+dendritic+cells+and+macrophages+in+the+vagina%5BTitle%5D)+AND+%22Immunology%22%5BJournal%5D)">Mucosal delivery of CpG oligodeoxynucleotides expands functional dendritic cells and macrophages in the vagina.</a> Immunology. 114, 213-224 (2005).</li>
<li>Jiang, J. Q., Patrick, A., Moss, R. B., Rosenthal, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD8%2B+T-cell-mediated+cross-clade+protection+in+the+genital+tract+following+intranasal+immunization+with+inactivated+human+immunodeficiency+virus+antigen+plus+CpG+oligodeoxynucleotides%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Virol%22%5BJournal%5D)">CD8+ T-cell-mediated cross-clade protection in the genital tract following intranasal immunization with inactivated human immunodeficiency virus antigen plus CpG oligodeoxynucleotides.</a> J. Virol. 79, 393-400 (2005).</li>
<li>Gill, N., Chenoweth, M. J., Verdu, E. F., Ashkar, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NK+cells+require+type+I+IFN+receptor+for+antiviral+responses+during+genital+HSV-2+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Immunol%22%5BJournal%5D)">NK cells require type I IFN receptor for antiviral responses during genital HSV-2 infection.</a> Cell Immunol. 269, 29-37 (2011).</li>
<li>Thatte, A., DeWitte-Orr, S. J., Lichty, B., Mossman, K. L., Ashkar, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+critical+role+for+IL-15+in+TLR-mediated+innate+antiviral+immunity+against+genital+HSV-2+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Immunol.+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">A critical role for IL-15 in TLR-mediated innate antiviral immunity against genital HSV-2 infection.</a> Immunol. Cell Biol. 89, 663-669 (2011).</li>
<li>Kwant-Mitchell, A., Ashkar, A. A., Rosenthal, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mucosal+innate+and+adaptive+immune+responses+against+herpes+simplex+virus+type+2+in+a+humanized+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Virol%22%5BJournal%5D)">Mucosal innate and adaptive immune responses against herpes simplex virus type 2 in a humanized mouse model.</a> J. Virol. 83, 10664-10676 (2009).</li>
<li>Gallichan, W. S., Rosenthal, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+the+estrous+cycle+on+local+humoral+immune+responses+and+protection+of+intranasally+immunized+female+nice+against+herpes+simplex+virus+type+2+infection+in+the+genital+tract%5BTitle%5D)+AND+%22Virology%22%5BJournal%5D)">Effects of the estrous cycle on local humoral immune responses and protection of intranasally immunized female nice against herpes simplex virus type 2 infection in the genital tract.</a> Virology. , 224-487 (1996).</li>
</ol>

אין ניגודי האינטרסים הכריזו.

בפרוטוקול זה, הוא הראה כיצד להתכונן לימפוציטים משטחי עכבר אברי מין והוא שולט בקלות. הנקודה הקריטית ביותר של תהליך זה היא לשמור על כדאיויות תא על ידי שמירה על התאים על קרח. תשואת התא משיטה זו תלויה בטכניקה, מיומנות טיפול, מצב המדבק של העכבר (נאיבי או יום אחרי הדבקה), פתוגן (חיידקים, נגיפים, פטריות) ובקטע של רביית הדרכים הנבחנות העכברית (צינור שחלה, רחם, קטע נרתיק או דרכי מין כולו). הקבוצה ואחרים פרסמו מחקרים שונים באוכלוסיות לימפוציטים שונות מדרכי מין עכבר 5-7. בידות שלנ...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> שם </td><td> חברה </td><td> מספר קטלוגים </td><td></td></tr><tr><td> Collagenase </td><td> סיגמא מדעי חיים </td><td> C2139-1G </td><td></td></tr><tr><td> Percoll </td><td> GE Healthcare ביו מדעים </td><td> 17-0891-01 </td><td></td></tr><tr><td> RPMI1640 </td><td> Gibco ידי טכנולוגיות חיים </td><td> 11875 </td><td></td></tr></tbody></table>

בידוד של לימפוציטים מעכבר גניטלי חוברות רירית

Isolation of Lymphocytes from Mouse Genital Tract Mucosa

משטחים ריריים, כולל בשטחים במערכת העיכול, ואברי מין, ונשימה, מספקים פורטלים של כניסה לפתוגנים, כגון וירוסים וחיידקים 1. Mucosae גם אתרים אינדוקטיביים במארח לייצר חסינות מפני פתוגנים, כגון תיקוני Peyers עובר במעי ורקמות lymphoreticular אף הקשורים בדרך הנשימה. תכונה ייחודית זו מביאה חסינות רירית כשחקן חשוב מאוד במערכת ההגנה של המארח. מחקרים רבים שהתמקדו באתרי רירית מערכת עיכול ומערכת נשימה. עם זאת, יש כבר חקירה קטנה של אתרים ריריים רבייה. אברי המין בדרכי הרירית היא אתר הזיהום העיקרי למחלות המועברות במגע מיני (STD), כולל זיהומים חיידקיים ונגיפיים. מחלות מין הן האחד האתגרים הבריאותיים הקריטיים ביותר העומד בפני עולם כיום. מרכז לבקרת מחלות ומניעתן מעריך כי יש 19,000,000 מדבקת בכל שנה חדשה בארצות הברית. STDs עולה למערכת הבריאות בארה&quot;ב 17 מליארד דולרים בכל שנה 2, ואנשים עוד יותר בעלות השלכות בריאותיות מיידיות וחיים ארוכים. על מנת להתמודד עם אתגר זה, הבנה טובה יותר של חסינות רירית רבייה יש צורך והבידוד לימפוציטים הוא מרכיב חיוני של לימודים אלה. כאן, אנו מציגים שיטת reproducibly לבודד ימפוציטים משטחי Murine מין נשי ללימודים אימונולוגיים כי ניתן לשנות להסתגלות למינים אחרים. השיטה המתוארת להלן מבוססת על עכבר אחד.

דרך יעילה לבודד את הלימפוציטים מדרכי מין עכבר מתוארת. שיטה זו מנצלת עיכול אנזים והפרדת השיפוע Percoll לאפשר בידוד יעיל. טכניקה זו היא גם להתאמה לשימוש במינים אחרים

משטחים ריריים, כולל במערכות העיכול, השתן-מין והנשימה, מהווים פתחי כניסה עבור פתוגנים, כגון נגיפים ו...

המטרה הכללית של הליך זה היא לבודד לימפוציטים ממערכת הרבייה של עכבר. הדבר מבוצע תחילה על ידי הסרה של כל דרכי הרבייה וקיצוץ הרקמה לחתיכות קטנות כדי לשחרר את הלימפוציטים מהרקמה. הרקמה הקצוצה דקק עוברת עיכול באמצעות collagenase eight ובערבוב נמרץ של הרקמה בטמפרטורה של 37 °C.בעזרת ערבוב מגנטי, הלימפוציטים מבודלים לאחר מכן באמצעות מדרג צפיפות (percoll gradient). לבסוף, ניתן לאפיין את הלימפוציטים באמצעות ציטומטריה של זרימה. השלכותיה של טכניקה זו התרחבו לאבחון ולטיפול במחלות של מערכת הרבייה, שכן שיטה זו מאפשרת לנו להבין את התנהגות הלימפוציטים ברקמה, אשר לעיתים קרובות שונים מהלימפוציטים המבודדים ממערכת הדם.על אף ששיטה זו מספקת תובנות לגבי מערכת הרירית הרבייתית, ניתן ליישמה גם על מערכות אחרות כגון מערכות הרירית של המעי ומערכת הנשימה. לאחר ביצוע הדומיה לעכברה, השתמש במספריים כירורגיים כדי לבצע חתך נמוך בקו האמצע ולאחר מכן פתח את העור. הזז בעדינות את המעיים הצידה, זהה את ה-ucs, ולאחר מכן בודד והוצא את כל דרכי הרבייה מה-ucs ועד לפתח הנרתיק.הניחו את דרכי הרבייה בתוך צלחת פטרי. השתמשו במספריים כדי לפתוח את כל הנתיב לאורכו. לאחר מכן, העבירו את הרקמה לצלחת פטרי המכילה מצע RPMI 10 מלא.כעת חתכו את דרכי הרבייה לחלקים קטנים, והעבירו את החלקים לבקבוק המכיל RPMI 10 מלא ו-EDTA. הניחו את הבקבוק על בוחש מגנ

isolation-of-lymphocytes-from-mouse-genital-tract-mucosa

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

אימונולוגיה וזיהומים

בידוד של לימפוציטים באמצעות MACS Miltenyi ערכת מהווה דרך אמינה לטהר תאים שלמים homogenates רקמת הלימפה. תאים מטוהרים באמצעות מערכת Miltenyi הם בדרך כלל ≥ 96% טהור. הנה, אנחנו מדגימים את הצעדים שננקטו כדי לבודד תאים מסוג CD4 + T, אחת ערכות רבים המוצעים על ידי Miltenyi.

בידוד של תאים מסוג CD4 + T מ בלוטות לימפה עכבר באמצעות טיהור Miltenyi MACS

בסרטון זה, אנו מדגימים את הבידוד של לימפוציטים ממדבקה של עכבר שנקטף. הלימפוציטים המבודדים יכולים לשמש לניתוח נוסף.

בידוד לימפוציטים ממדבקה של עכבר

יש התעניינות הולכת וגובר בהבנת הפונקציות החיסוניות של אוכלוסיות מסוימות של תאים בתיקונים של Peyer (PPS), אתרים אינדוקטיביים העיקריים של רקמות הלימפה מעיים כרוכות בכך. כאן אנו מתארים פרוטוקולים מקבילים להכנת PP הכנות תא בודדות לניתוח cytometric זרימה וcryosections PP לimmunostaining.

וגם בידוד Immunostaining ימפוציטים ותאי דנדריטים מהתיקונים של Peyer Murine

עם פונקציות מפעיל להבדיל מתת תא T אחר, תאי Th17 היו מעורבים באופן מרכזי באוטואימוניות דלקתיות. במבחנה פרוטוקול בידול Th17 זו מספק אמצעי כדי לקבוע אם לימפוציטים מסוג CD4 + T נאיביים יכולים להתמיין לתאי Th17, ולבחון את תפקידם באוטואימוניות ותגובת מארח נוסף.

בידוד ובידול של Th17 הנאיביים T מסוג CD4 לימפוציטים

בידוד של תאי סטרומה של בלוטות הלימפה הוא הליך רב-שלבי הכולל עיכול אנזימטי ופירוק מכני להשגת תאי רשתית פיברובלסטיים, תאי לימפה ותאי אנדותל בדם. בהליך המתואר, עיכול קצר משולב עם פירוק מכני אוטומטי כדי למזער את פירוק סמני פני השטח של תאי סטרומה של בלוטות לימפה קיימות.

בידוד של תאי Murine לימפה צומת סטרומה

אנו מתארים כאן פרוטוקול לבידוד תאים מיאלואידים מעור העכבר וניקוז בלוטות הלימפה לאחר הזרקה תוך עורית של Plasmodium sporozoites. ציטומטריית זרימה של תאים שנאספו מספקת בדיקה אמינה לאפיון העור וניקוז התגובה הדלקתית של בלוטות הלימפה לטפיל.

בידוד תא מיאלואידית מעור העכבר וניקוז הלימפה הצומת בעקבות החיסון תוך-עורית עם נחלש חי<em&gt; Plasmodium</em&gt; Sporozoites

יש עניין גובר באפיון הכמותי של לימפוציטים במעי עקב ההכרה הגוברת בכך שתאים אלה ממלאים תפקיד קריטי במגוון מחלות מעיים ומערכתיות. בפרוטוקול זה, אנו מתארים כיצד לבודד אוכלוסיות תאים בודדים מתאי מעי דק שונים לאפיון ציטומטרי זרימה לאחר מכן.

אפיון בידוד תזרים Cytometric של Murine קטנים מעיים לימפוציטים

לימפוציטים הם השחקנים העיקריים בתגובות חיסוניות נרכשות. כאן, אנו מציגים פרוטוקול טיהור לימפוציטים כדי לקבוע את הפונקציות הפיזיולוגיות של המולקולות הרצויות בהפעלת לימפוציטים במבחנה וב-vivo. הליכי הניסוי המתוארים מתאימים להשוואת יכולות תפקודיות בין לימפוציטים בקרה ללימפוציטים מהונדסים גנטית.

בידוד ההפעלה של Murine לימפוציטים

כאן נתאר פרוטוקול מפורט על הבידוד של לימפוציטים האתרים אינדוקטיבית כולל בלוטות לימפה mesenteric המנקזים ותיקונים של פייה רקמת הלימפה הקשורים הבטן, ואת האתרים אפקטור כולל את פרופריה. מוסקולריס ו אפיתל המעי של המערכת החיסונית קטנים במעיים.

לימפוציטים בידוד מן העכבר קטן המעי המערכת החיסונית

במחקר זה, אנו מציגים הרומן ונוהל יעיל הבידוד של לימפוציטים מ טלאים של פייה (PPs), בו ניתן להשתמש לאחר מכן ב- vivo ו- in vitro לקשרי מבחני פונקציונלי, כמו גם מחקרים cytometric זרימה של הזקיקים T עוזר, מרכז נבטי B תאים.

שחקני המפתח unraveling Humoral חסינות: מתקדם וממוטב לימפוציט בידוד פרוטוקול טלאים מאתר של Peyer

מאמר זה מתאר שיטה לבידוד מבוסס חרוזים מגנטיים של תאי אנדותל מורין מנימי לימפה עוריים. תאי האנדותל הלימפטיים המבודדים יכולים לשמש לניסויים במבחנה במורד הזרם ולניתוח ביטוי חלבונים.

Murine Dermal Lymphatic Endothelial Cell Isolation

למדו שיטה יעילה לבידוד לימפוציטים ממערכת הרבייה העכברית באמצעות עיכול אנזימטי ומדרגת פרקול. השיטה מאפשרת אפיון תאים בציטומטריית זרימה ומסייעת בהבנת התנהגות לימפוציטים ברקמות.

בידוד של לימפוציטים מעכבר גניטלי חוברות רירית

גלה סרטונים נוספים