Name: אקו העוברי Murine (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-02-15T12:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 4 s
Description: למד אקו-קרדיוגרפיה בעוברי עכברים באמצעות אולטרסאונד בתדר גבוה לזיהוי מבנים לבביים ותפקוד בזמן אמת. שיטה זו מאפשרת זיהוי מוקדם של מומים מולדים לבביים ללא פלישה.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

GHK נתמך על ידי NIH / NHLBI K08-HL098565 והמכון לחקר לב וכלי דם באוניברסיטת שיקגו. כל השיטות הניסיוניות תוארו מאושרות על ידי בעלי החיים והטיפול המוסדי הוועדה השתמש באוניברסיטת שיקגו.

<ol><li>Wessels, A., Sedmera, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+anatomy+of+the+heart%3A+a+tale+of+mice+and+man%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+Genomics%22%5BJournal%5D)">Developmental anatomy of the heart: a tale of mice and man.</a> Physiol. Genomics. 15, 165(2003).</li>
<li>Snider, P., Conway, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Probing+human+cardiovascular+congenital+disease+using+transgenic+mouse+models%5BTitle%5D)+AND+%22Prog.+Mol.+Biol.+Transl.+Sci%22%5BJournal%5D)">Probing human cardiovascular congenital disease using transgenic mouse models.</a> Prog. Mol. Biol. Transl. Sci. 100, 83(2011).</li>
<li>Clark, K. L., Yutzey, K. E., Benson, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transcription+factors+and+congenital+heart+defects%5BTitle%5D)+AND+%22Annu.+Rev.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Transcription factors and congenital heart defects.</a> Annu. Rev. Physiol. 68, 97(2006).</li>
<li>Leatherbury, L., Yu, Q., Lo, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noninvasive+phenotypic+analysis+of+cardiovascular+structure+and+function+in+fetal+mice+using+ultrasound%5BTitle%5D)+AND+%22Birth+Defects+Res+C+Embryo+Today%22%5BJournal%5D)">Noninvasive phenotypic analysis of cardiovascular structure and function in fetal mice using ultrasound.</a> Birth Defects Res C Embryo Today. 69, 83(2003).</li>
<li>Spurney, C. F., Lo, C. W., Leatherbury, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fetal+mouse+imaging+using+echocardiography%3A+a+review+of+current+technology%5BTitle%5D)+AND+%22Echocardiography%22%5BJournal%5D)">Fetal mouse imaging using echocardiography: a review of current technology.</a> Echocardiography. 23, 891(2006).</li>
<li>Spurney, C. F., Leatherbury, L., Lo, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-frequency+ultrasound+database+profiling+growth%2C+development%2C+and+cardiovascular+function+in+C57BL%2F6J+mouse+fetuses%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Soc.+Echocardiogr%22%5BJournal%5D)">High-frequency ultrasound database profiling growth, development, and cardiovascular function in C57BL/6J mouse fetuses.</a> J. Am. Soc. Echocardiogr. 17, 893(2004).</li>
<li>Shen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiovascular+phenotyping+of+fetal+mice+by+noninvasive+high-frequency+ultrasound+facilitates+recovery+of+ENU-induced+mutations+causing+congenital+cardiac+and+extracardiac+defects%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+Genomics%22%5BJournal%5D)">Cardiovascular phenotyping of fetal mice by noninvasive high-frequency ultrasound facilitates recovery of ENU-induced mutations causing congenital cardiac and extracardiac defects.</a> Physiol. Genomics. 24, 23(2005).</li>
<li>Yu, Q., Leatherbury, L., Tian, X., Lo, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiovascular+assessment+of+fetal+mice+by+in+utero+echocardiography%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+Med.+Biol%22%5BJournal%5D)">Cardiovascular assessment of fetal mice by in utero echocardiography.</a> Ultrasound Med. Biol. 34, 741(2008).</li>
<li>Linask, K. K., Huhta, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+Doppler+echocardiography+to+monitor+embryonic+mouse+heart+function%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol.+Biol%22%5BJournal%5D)">Use of Doppler echocardiography to monitor embryonic mouse heart function.</a> Methods Mol. Biol. 135, 245(2000).</li>
<li>Hinton, R. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+heart+valve+structure+and+function%3A+echocardiographic+and+morphometric+analyses+from+the+fetus+through+the+aged+adult%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol+Heart+Circ.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Mouse heart valve structure and function: echocardiographic and morphometric analyses from the fetus through the aged adult.</a> Am. J. Physiol Heart Circ. Physiol. 294, H2480(2008).</li>
<li>Gui, Y. H., Linask, K. K., Khowsathit, P., Huhta, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Doppler+echocardiography+of+normal+and+abnormal+embryonic+mouse+heart%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatr.+Res%22%5BJournal%5D)">Doppler echocardiography of normal and abnormal embryonic mouse heart.</a> Pediatr. Res. 40, 633(1996).</li>
<li>Purssell, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noninvasive+high-resolution+ultrasound+reveals+structural+and+functional+deficits+in+dimethadione-exposed+fetal+rat+hearts+in+utero%5BTitle%5D)+AND+%22Birth+Defects+Res.+B+Dev.+Reprod.+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Noninvasive high-resolution ultrasound reveals structural and functional deficits in dimethadione-exposed fetal rat hearts in utero.</a> Birth Defects Res. B Dev. Reprod. Toxicol. , (2011).</li>
<li>Le, V. P., Kovacs, A., Wagenseil, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measuring+Left+Ventricular+Pressure+in+Late+Embryonic+and+Neonatal+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Measuring Left Ventricular Pressure in Late Embryonic and Neonatal Mice.</a> J. Vis. Exp. (60), e3756(2012).</li>
<li>Ji, R. P., Phoon, C. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noninvasive+localization+of+nuclear+factor+of+activated+T+cells+c1-%2F-+mouse+embryos+by+ultrasound+biomicroscopy-Doppler+allows+genotype-phenotype+correlation%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Soc.+Echocardiogr%22%5BJournal%5D)">Noninvasive localization of nuclear factor of activated T cells c1-/- mouse embryos by ultrasound biomicroscopy-Doppler allows genotype-phenotype correlation.</a> J. Am. Soc. Echocardiogr. 18, 1415(2005).</li>
<li>Kim, G. H., Samant, S. A., Earley, J. U., Svensson, E. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Translational+control+of+FOG-2+expression+in+cardiomyocytes+by+microRNA-130a%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Translational control of FOG-2 expression in cardiomyocytes by microRNA-130a.</a> PLoS One. 4, e6161(2009).</li>
<li>Momoi, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modest+maternal+caffeine+exposure+affects+developing+embryonic+cardiovascular+function+and+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Heart+Circ.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Modest maternal caffeine exposure affects developing embryonic cardiovascular function and growth.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 294, H2248(2008).</li>
<li>Tobita, K., Liu, X., Lo, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+modalities+to+assess+structural+birth+defects+in+mutant+mouse+models%5BTitle%5D)+AND+%22Birth+Defects+Res.+C+Embryo+Today%22%5BJournal%5D)">Imaging modalities to assess structural birth defects in mutant mouse models.</a> Birth Defects Res. C Embryo Today. 90, 176(2010).</li>
</ol>

אין ניגודי האינטרסים הכריזו.

היכולת לבצע מדידות סידוריות וכדי לזהות עוברים מוטנטים עם מומי לב מדגישה את התועלת של אקו לב וכלי דם לחקר התפתחות נורמלית ולא נורמלית. ניתוח של מבנה ותפקוד לב in vivo הפך חלק בלתי נפרד בתיאור שינויים גנטיים והלא גנטיים להתפתחות עוברת נורמלית. הזמינות של 2D-מודרך דופלר מאפשר לעקוב אחר קצב לב ודפוסי זרימת דם בעת קבלת תמונות בזמן אמת. מומי לב התפתחותיים כגון פגמי חדרית מחיצה יכולים להיות נוכחים וזיהוי. למרות היכולות ברזולוציה הגבוהה של פלטפורמות הדמיה נוכחיות, רכישת מהירויות ...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> Vevo 770 Imaging System </td><td> VisualSonics </td><td></td><td> (טורונטו, קנדה) </td></tr><tr><td> מתמר RMV707B.15-45 MHz </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Tec 3 מאדה isoflurane </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Isoflurane (-2-(2-כלורו difluoromethoxy)-trifluoro-אתאן -1,1,1) </td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

אקו העוברי murine

Murine Fetal Echocardiography

עכברים הטרנסגניים מציגים ליקויים בהתפתחות ובתפקוד לבבי מייצגים כלי רב עצמה להבנת המנגנונים המולקולריים שבבסיס הוא תפקוד לב וכלי דם נורמלי ובסיס pathophysiological של מחלות לב אנושיות. מוות עובר ולידה הוא תכונה נפוצה כאשר לומדים שינויים גנטיים המשפיעים על התפתחות 1-3 לב. כדי ללמוד את התפקיד של שינויים גנטיים או תרופתיים בהתפתחות המוקדמת של תפקוד לב, הדמית אולטרסאונד של העובר החי הפכה לכלי חשוב לזיהוי מוקדם של מומים ואורך מעקב. הדמית אולטרסאונד פולשנית היא שיטה אידיאלית לאיתור ולומד מומים מולדים וההשפעה על תפקוד לב לפני המוות 4. היא מאפשרת זיהוי המוקדם של מומים בעובר החי וההתקדמות של מחלה יכול להיות מלווה ברחם עם מחקרים ארוכי טווח 5,6.עד לאחרונה, הדמיה של לב עכבר עוברי כרוכה לעתים קרובות בשיטות פולשניות. העובר היה צריך להקריב כדי לבצע מיקרוסקופיה תהודה מגנטית ומיקרוסקופ אלקטרונים או ניתוח נמסר למיקרוסקופיה קוף. יישום של בדיקות בתדירות גבוהה עם קונבנציונלי 2-D ופעם גל דופלר הדמיה הוכח לספק מדידות של התכווצות לב וקצב לב במהלך התפתחות עוברית עם מסדי נתונים של שינויים התפתחותיים נורמלים עכשיו 6-10 זמינים. M-מצב הדמיה נוספת מספקת נתונים פונקציונליים חשובים, אם כי, מטוסי ההדמיה המתאימים הם לעתים קרובות קשים להשיג. הדמית אולטרסאונד בתדר גבוה של העובר השתפרה רזולוצית 2-D ויכולה לספק מידע מצוין על ההתפתחות המוקדמת של מבני לב 11.

מוות עובר ולידה הוא תכונה נפוצה כאשר לומדים שינויים גנטיים המשפיעים על התפתחות לב. הדמית אולטרסאונד בתדר גבוה השתפרה רזולוצית 2-D ויכולה לספק מידע מצוין על התפתחות מוקדמת ולב היא שיטה אידיאלית כדי לזהות את ההשפעה על מבנה ותפקוד לב לפני המוות.

אקו העוברי Murine

עכברים טרנסגניים המראים פגמים בהתפתחות ובבתפקוד הלב מהווים כלי רב עוצמה להבנת המנגנונים המולקולריים...

המטרה הכללית של הניסוי הבא היא לחקור את מבנה ותפקוד הלב ברחם באמצעות אולטרסאונד בתדר גבוה. דבר זה מושג באמצעות הרדמה והכנה נאותה של הנקבה. כשלב שני, זהו את העוברים בקרני הרחם.בשלב הבא, השג נתונים במצב B, מצב M ונתוני pulse stoper. על מנת לזהות ולכמת חריגות מבניות או תפקודיות, מתקבלים תוצאות המראות את מבנה ותפקוד הלב in vivo של עוברי עכברים עם שינויים גנטיים. היתרון המרכזי של טכניקה זו על פני שיטות קיימות כגון היסטופתולוגיה הוא שהד לב של עוברי עכברים מספק תובנה בזמן אמת לגבי תפקוד הלב ועשוי לזהות פגמים מבניים בלב in vivo.הכינו את העכבר לדימות על ידי הרדמתו תחילה ב-2% עד 3% isof fluorine בתא השראה. הניחו את העכבר המורדם במצב גב (supine) על פד חימום עם אלקטרודות ECG מובנות לשמירה על טמפרטורת הגוף, ואבטחו את הכפות עם סרט הדבקה. הוציאו את העכבר מהתא והשתמשו במכונת גילוח כדי להסיר את הפרווה מאזור מרכז החזה ועד הגפיים התחתונות.השתמשו בקרם להסרת שיער כדי להסיר את שיער הגוף שנותר. לאחר מכן, הניחו את האף בתוך קונוס אף המחובר למערכת ההרדמה כדי לשמור על רמת טשטוש יציבה לאורך הפרוצדורה. כווננו את רמת ההרדמה כדי לשמור על קצב לב יעד של 450 פלוס או מינוס 50 פעימות לדקה.לאחר מכן, מרחו ג'ל אלקטרודות על ארבע הכפות והדביקו אותן לאלקטרודות ה-ECG. לאחר מכן, שמנו והחדירו בעדינות גשש רקטלי לעכבר כדי לנטר

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

אקו Transthoracic מציעה שיטה לא פולשנית להערכת תפקוד הלב בעכברים. שילוב של אולטראסאונד דופלר שיטות הדמיה ניתן להשתמש כדי להשיג מדידות ממדי של הלב ואת זרימת הדם intracardiac, אשר יחדיו מספקים הערכה של הסיסטולי והדיאסטולי לב וביצועים.

אקו Transthoracic ב עכברים

וידאו זה מדגים שימוש רכבת רכוב בתדירות גבוהה בדיקה אולטרסאונד לבצע אקו על העכבר בהרדמה. שיטות מתארים הן מדידות דו מימדי ו-M-mode קונבנציונלי של תפקוד הלב בנוסף, הכלים החדשים חזקים יותר כגון צבע דופלר, ניתוח המתח, כמו גם בניגוד הדמיה בכלל ממוקדות.

אקו Murine והדמיה אולטראסאונד

סרטון זה מתאר פרוטוקול לביצוע אקוקרדיוגרפיה על עכבר מעבדה.

אקוקרדיוגרפיה של עכבר: טכניקה לא פולשנית להערכת מורפולוגיה של הלב

אנו מתארים בדיקה של תפקוד לב העובר עם אקו העוברי הפונקציונלי העכשווי ואולטרסאונד דופלר fetoplacental באמצעות microultrasound VisualSonics VEVO 2100 במודל מושרה בניתוח של הגבלת צמיחה העוברית תוך רחמי בארנב.

אקו העוברי ואולטראסאונד דופלר פעמו גל בדגם ארנב של הגבלת גדילה תוך רחמית

אולטרסאונד בתדירות גבוה במיוחד הוא כלי הדמיה חיה רב עוצמה כדי לבחון מומים לב בבעלי חיים קטנים. noninvasiveness שלו מאפשר שמירה על המצב הפיזיולוגי של עוברים. בזאת, אנו מציגים את השימוש באולטרסאונד M-mode כדי למדוד את קצב הלב של עוברים בE18.5 ברחם.

במדידת רחם של קצב לב בעכבר על ידי אקו M-המצב פולשנית

הפרוטוקול הבא מתאר את המתודולוגיה לרכישה וניתוח תמונות אקו על מנת לקבל את נפח פרוזדורי שמאל (LAV), אב עורקי קוטר (Ao), ואת עורק ריאה (PA) בקוטר בעכברים. טכניקה זו היא הליך פולשני, שאינו מסוף המאפשר הערכה של תפקוד לב-ריאה.

אקו Murine של השמאל אטריום, אבי העורקים, ו עורק הריאה

בדיקה echocardiographic משמש לעתים קרובות בעכברים. מכשירי אולטרסאונד ברזולוציה גבוהה יקר פותחו למטרה זו. פרוטוקול זה מתאר הליך echocardiographic סבירים בשילוב עם morphometric היסטולוגית ניתוחים כדי לקבוע מורפולוגיה לב.

בבדיקה היסטולוגית ו echocardiographic של מורפולוגיה לב העכבר

אולטראסאונד בתדירות גבוהה הדמיה של העכבר עוברית השתפרה דימות ברזולוציה, יכול לספק אפיון פולשני מדויק של התפתחות הלב, פגמים מבניים. פרוטוקול המתוארים במסמך זה מיועדת לביצוע בזמן אמת עוברי עכברים אקוקרדיוגרפיה ויוו.

הדמיה באמצעות מערכת סאונד בתדירות גבוהה (30 / 45MHZ) וכלי דם עוברי העכבר

הפרוטוקול הנוכחי מתאר הערכה אקוקרדיוגרפית של מורפולוגיה של חדר שמאל, תפקוד וזרימת דם כלילית בעכברים בני 7 ימים.

אפיון אקוקרדיוגרפי של מבנה החדר השמאלי, תפקודו וזרימה כלילית בעכברים ילודים

מאמר זה מפרט את שיטות האבחון של מחלת לב מולדת (CHD) באמצעות אקוקרדיוגרפיה עוברית, נקרופסיה, ולכידת תמונה פלואורסצנטית אפיסקופית (EFIC) באמצעות מיקרוסקופ קונפוקלי אפיסקופי (ECM) ואחריו שחזור תלת ממדי (3D).

צינור לאפיון מומי לב מבניים בעכבר העוברי

למד אקו-קרדיוגרפיה בעוברי עכברים באמצעות אולטרסאונד בתדר גבוה לזיהוי מבנים לבביים ותפקוד בזמן אמת. שיטה זו מאפשרת זיהוי מוקדם של מומים מולדים לבביים ללא פלישה.

אקו העוברי Murine

גלה סרטונים נוספים