Name: In vivo Assay לבדיקת חדירות כלי דם (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-03-16T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 3 s
Description: למד שיטת מבחן חדירות כלי דם in vivo בעכברים באמצעות צבע כחול המיקשר לאלבומין. השיטה מאפשרת הדמיה של חדירות אנדותלית מוגברת ומסייעת בחקר מחלות כלי דם ופתולוגיות וסקולריות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

עבודה זו נתמכה על ידי מענק מהמכון הלאומי לבריאות, R01CA142928.

1. הזרקה תוך ורידית של אוונס הכחול בוריד זנב העכבר לרוחב <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן 0.5% תמיסה סטרילית של אוונס הכחול ב PBS. במידת צורך, מסנן-לעקר את הפתרון כדי להסיר כל חומר חלקיקים שאינו מומס. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשאוב פתרון 200 μl אוונס הכחול לתוך מזרק. הימנע מכל בועות האוויר שאולי נמלטו לתוך המזרק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עכברי מקום שהם ישנים 8-12 שבועות לתוך מכשיר איפוק כדי שבעל החיים אינם חופשי ניידים אבל זנבו ניתן לטפל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את מכשיר איפוק העכבר על צידו כך וריד הזנב לרוחב הוא נראה בקלות והם פונים כלפי מעלה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להחזיק את הזנב עם היד הלא הדומיננטית בין האגודל לאצבע המורה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס את המחט (מד קטן, 27-30) בזווית של 10-15 מעלות, שיפוע למעלה, מראש לתוך וריד הזנב לרוחב לכיוונו של הראש. שמור מקביל מחט מזרק ועד הזנב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Do לא תחול שוב לחץ לאישור המיקום נכון שכן דבר עלול לכווץ את הווריד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאט לאט להזריק פתרון 200 μl אוונס הכחול בוריד הזנב של העכבר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הקפד על קלות שבה התקדמות הבוכנה, כמו זה היא ההוכחה למיקום נכון של המחט בווריד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שים את העכבר בחזרה לכלוב שלו ולבחון אותו למשך 30 דקות. </li></ol> 2. אוסף איברים והפקת אוונס הכחול מהאיברים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להקריב את העכברים דרך נקע בצוואר רחם. למטרות assay מיילס נקע צוואר רחם מומלץ משום שהוא מגביל את התערבות משמעותית בחדירות כלי דם. להקריב את כל העכברים באותו הזמן, מהר ככל האפשר. עבודה עם קבוצות של 6 עכברים או פחות, משום שזמן קצר לאחר שכלי הדם של מוות נעשים חדירים יותר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקם את העכברים על גבם ולהצמיד את רגליהם על לוח לבן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פתח את חלל הבטן ובית החזה כדי לחשוף Thorאיברי acic ובטן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קח תמונות מייצגות כדי להראות הבדלים בextravasation הכחול אוונס. כלול את כל העכברים באותו השדה כדי שתהיה לי תנאי תאורה זהות לכל העכברים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> איסוף איברים של עניין ולשים אותם בצינורות 1.5 מ&quot;ל </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שוקל צינור ריק ולהביא את ערך האיזון לאפס. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העברת דגימת הרקמה ומשקלו. חזור על פעולה עבור כל דגימות הרקמה. רקמות יכולות להיות אוויר יבש כדי לחסל את שונות תכולת המים בין איברים שונים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> . הוסף פוראמיד μl 500 לכל צינור דגימת רקמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להעביר את כל הצינורות לאמבטית 55 ° C מים או בלוק חום. דגירה במשך 24-48 שעות כדי לחלץ אוונס הכחול מרקמות. </li></ol> 3. כימות של אוונס הכחול Extravasated ברקמות ביניים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צנטריפוגה פוראמיד / התערובת הכחולה אוונס לגלולה כל ברי רקמה נותרות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מדוד ספיגה ב610ננומטר. השתמש פוראמיד μl 500 כריקים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חישוב ng אוונס הכחול extravasated לרקמת מ&quot;ג. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עלילה כל הנתונים בגרף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ביצוע ניתוח סטטיסטי כדי לקבוע הבדלים משמעותיים. </li></ol>

<ol><li>Beck, K. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inducible+NO+synthase%3A+role+in+cellular+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Biol%22%5BJournal%5D)">Inducible NO synthase: role in cellular signaling.</a> J. Exp. Biol. 202, 645-653 (1999).</li>
<li>Bertglia, S., Giusti, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+nitric+oxide+in+capillary+perfusion+and+oxygen+delivery+regulation+during+systemic+hypoxia%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Heart+Circ.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Role of nitric oxide in capillary perfusion and oxygen delivery regulation during systemic hypoxia.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 288, H525-H531 (2005).</li>
<li>Miles, A. A., Miles, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+reactions+to+histamine%2C+histamine-liberator+and+leutaxine+in+the+skin+of+guinea+pigs%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Physiol.+%28London%29%22%5BJournal%5D)">Vascular reactions to histamine, histamine-liberator and leutaxine in the skin of guinea pigs.</a> J. Physiol. (London). 118, 228-257 (1952).</li>
<li>Weis, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+permeability+in+cardiovascular+disease+and+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Opin.+Hematol%22%5BJournal%5D)">Vascular permeability in cardiovascular disease and cancer.</a> Curr. Opin. Hematol. 15, 243-249 (2008).</li>
<li>Kumar, P., Shen, Q., Pivetii, C. D., Lee, E. S., We, M. H., Yuan, S. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+mechanisms+of+endothelial+hyperpermeability%3A+implications+in+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Rev.+Mol.+Med%22%5BJournal%5D)">Molecular mechanisms of endothelial hyperpermeability: implications in inflammation.</a> Expert Rev. Mol. Med. 30, 11-19 (2009).</li>
<li>Viazzi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+permeability%2C+blood+pressure%2C+and+organ+damage+in+primary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertens.+Res%22%5BJournal%5D)">Vascular permeability, blood pressure, and organ damage in primary hypertension.</a> Hypertens. Res. 31, 873-879 (2008).</li>
<li>Scheppke,, et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinal+vascular+permeability+suppression+by+topical+application+of+a+novel+VEGFR2%2FSrc+kinase+inhibitor+in+mice+and+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Invest%22%5BJournal%5D)">Retinal vascular permeability suppression by topical application of a novel VEGFR2/Src kinase inhibitor in mice and rabbits.</a> J. Clin. Invest. 118, 2337-2346 (2008).</li>
<li>Blanchet, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Loss+of+CD34+Leads+To+Exacerbated+Autoimmune+Arthritis+through+Increased+Vascular+Permeability%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Loss of CD34 Leads To Exacerbated Autoimmune Arthritis through Increased Vascular Permeability.</a> J. Immunol. 184, 1292-1299 (2010).</li>
<li>Dvorak, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mast+cell-derived+mediators+of+enhanced+microvascular+permeability%2C+vascular+permeability+factor%2Fvascular+endothelial+growth+factor%2C+histamine%2C+and+serotonin%2C+cause+leakage+of+macromolecules+through+a+new+endothelial+cell+permeability+organelle%2C+the+vesiculo-vacuolar+organelle%5BTitle%5D)+AND+%22Chem.+Immunol.+Allergy%22%5BJournal%5D)">Mast cell-derived mediators of enhanced microvascular permeability, vascular permeability factor/vascular endothelial growth factor, histamine, and serotonin, cause leakage of macromolecules through a new endothelial cell permeability organelle, the vesiculo-vacuolar organelle.</a> Chem. Immunol. Allergy. 85, 185-204 (2005).</li>
<li>Le Guelte, A., Gavard, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+endothelial+cell-cell+junctions+in+endothelial+permeability%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol.+Biol%22%5BJournal%5D)">Role of endothelial cell-cell junctions in endothelial permeability.</a> Methods Mol. Biol. 763, 265-279 (2011).</li>
<li>Martins-Green, M., Petreaca, M., Yao, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+assay+system+for+in+vitro+detection+of+permeability+in+human+%22endothelium%22%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Enzymol%22%5BJournal%5D)">An assay system for in vitro detection of permeability in human "endothelium".</a> Methods Enzymol. 443, 137-153 (2008).</li>
</ol>

המחברים אין סכסוך או אינטרסים כלכליים מתחרים.

חדירות כלי דם היא סמן קריטי למצב כלי דם. חדירות כלי דם מוגבר הוכחה להיות נוכח בכמה מחלות מערכתיות, כולל סוכרת, יתר לחץ דם, ומחלות אוטואימוניות 6,7,8. חדירות כלי דם מוגבר הוכחה להיות מתווכות על ידי מאמץ גזירה, גורמי גדילת כלי דם האנדותל כמו גורם גדילה ופקטור גדילה פיברובלסטים, מתווכים דלקתיים כמו סרוטונין, היסטמין וbradykinin 9. Extravasation של מים ומולקולות קטנות הוא חשב להתרחש דרך פתחים קטנים בין תאי האנדותל. כוחו של צומת תא לתא מווסת בקפדנות על ידי אינטראק...

גיבוש ותחזוקה של מחסומים חדירים סלקטיבית הם חיוניים להתפתחות איבר תקין ו1,2 ביצועים. תאי האנדותל קו לום כלי הדם ויוצרים מחסום חדיר למחצה כי הוא חיוני בהובלה סלקטיבית בין הדם למרחב ביניים של כל האיברים. מחסום חדירות נאותות נשמר באמצעות צומת תא לתא צפופים הנשלטים בקפידה על ידי גורמי גדילה, ציטוקינים ומולקולות הקשורות מתח אחרות 3. שיבוש של מכשול התא האנדותל יכול לגרום לחדירות מוגברות ודליפה של כלי דם. תופעות אלו נצפות במצבי מחלה שונים וההבנה של האיתות המולקולרית הקו התחתונה דורשת שיטות רבות תחומיות 4,5. במאמר זה, אנו מתארים בשיטת vivo למדוד חדירות כולים תוך שימוש במודל עכבר. הבדיקה שאנחנו מתארים, הידוע גם כassay מיילס, היא-establ גםished שיטה לבדיקת חדירות כלי דם בגוף חי. הבדיקה מתבססת על העובדה שבתנאים פיסיולוגיים בסיסיים, אלבומין אינו חוצה את מחסום אנדותל. אוונס הכחול, צבע אזו עם זיקה חזקה לאלבומין, מוזרק לזרם הדם של בעלי חיים הניסיונות, ובתנאים פיסיולוגיים, אך הוא צפוי להיות מוגבל בתוך כלי דם. כאשר גירוי חדירות כלי דם נוסף, או topically או מערכתי, כלי דם מתחילים לדלוף חלבון ובכך, גם הכחול אוונס שהוא חייב אלבומין. התוצאה היא גוון כחלחל מהיר של רקמות שיש להם כולים חדירים. זריקה מוצלחת של הצבע בוריד זנב העכבר לרוחב היא קריטית לתוצאות הטובות של הניסוי. טכניקת הזרקת וריד זנב דורשת תרגול רב וצריכה להיות שולטת לפני תחילת הניסוי. חדירות כלי תלויות מאוד בגיל ובמשקל שלimal, ולכן כאשר משווים זנים שונים של עכברים הוא הכרחי כי העכברים או נושאים אחרים יש מבחן קרוב לתאריכי לידה זהים ומשקל. גורמים אחרים המשפיעים על החדירות של מחסום אנדותל הם תנאים סביבתיים כגון טמפרטורה, לחות, ומאוד חשוב, מתח הטיפול בעכבר. בשל ריבוי גורמים שיכולים להשפיע על התוצאה של הניסוי זה תמיד רצוי שהניסוי חוזר על עצמו לפחות שלוש פעמים וניתוחים סטטיסטיים בוצעו. בדיקה זו יכולה לשמש או להשוואת חדירות כלי של עכברים שעברו שינוי גנטי, כמו גם עכברים עם רקע גנטי שונה. חדירות ניתן להעריך בנוכחותו או היעדריו של גירוי, בהתאם לפונקציה של הגן שהוא מווסת. assay זה יכול לשמש גם או כדי לבדוק את ההשפעה של תרכובות שונות בחדירות כלי דם.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td></td><td></td><td></td><td> מגיב </td></tr><tr><td> אוונס כחול </td><td> SIGMA </td><td> E2129 </td><td></td></tr><tr><td> פוראמיד </td><td> Invitrogen </td><td> 15515-026 </td><td></td></tr><tr><td> PBS </td><td></td><td></td><td> פוספט 0.2m 1.5M NaCl pH 7.4 </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> ציוד </td></tr><tr><td> ספקטרופוטומטרים </td><td> אפנדורף </td><td> 952000006 </td><td></td></tr><tr><td> התקן ריסון MOUSE </td><td> הרווארד מכשיר </td><td> 340012 </td><td></td></tr><tr><td> מזרק </td><td> BD </td><td> 309659 </td><td></td></tr><tr><td> מחטים </td><td> BD </td><td> 305106 </td><td> המד של המחט תלוי בגודלו של בעל החיים. </td></tr><tr><td> מאזן </td><td> מכשיר דנבר </td><td> TP-64 </td><td></td></tr></tbody></table>

<em&gt; in vivo</em&gt; assay לבדיקת חדירות כלי דם

An in vivo Assay to Test Blood Vessel Permeability

שיטה זו מבוססת על הזרקה תוך ורידית של אוונס הכחול בעכברים כמודל חית המבחן. אוונס הכחול הוא צבע שנקשר אלבומין. בתנאים פיסיולוגיים האנדותל בלתי חדיר לאלבומין, כך שרידי אלבומין כריכה כחולה אוונס מוגבל בתוך כלי דם. בתנאים פתולוגיים שמקדמים חדירות תאי אנדותל כלי דם מוגבר באופן חלקי לאבד הקשר הקרוב שלהם והאנדותל הופך חדיר לחלבונים קטנים כגון אלבומין. מצב זה מאפשר לextravasation של אוונס הכחול ברקמות. האנדותל בריא מונע extravasation של הצבע ברקמות כלי הדם הסמוכות. איברים עם חדירות מוגברות יציגו צבע כחול גדל באופן משמעותי בהשוואה לאיברים עם האנדותל בשלמותה. רמת חדירות כלי דם יכולה להיות מוערכת על ידי הדמיה פשוטה או על ידי מדידת כמותית של הצבע המשולבת למיליגרם של רקמה של שליטה מול חיים / רקמות ניסיוניות. שני poweהיבטי rful של assay זה הם הפשטות שלו ומאפייני כמותיים. אוונס הכחול צבע ניתן לחלץ מרקמות על ידי דוגר כמות מסוימת של רקמה בפוראמיד. מרבית הספיגה הכחולה אוונס הוא בעמ &#39;620 ננומטר וספיגה מינימאלית היא ב740 ננומטר. באמצעות עקומת סטנדרט עבור אוונס הכחול, מדידות צפיפות אופטיות ניתן להמיר את צבע מיליגרם כבש למיליגרם של רקמה. ניתוח סטטיסטי יש להשתמש כדי להעריך הבדלים משמעותיים בחדירות כלי דם.

<html> אנחנו השתמשנו בבדיקת חדירות vivo לבדוק זליגת כלי בעכברים 8-12 שבועות ישנים. בדיקה זו היא שימושית בהשוואת חדירות כלי דם היחסיות בין בעלי חיים של רקע גנטי שונה או בזן אחד של עכברים הנתונים לטיפולים המשפיעים על מערכת כלי הדם. התוצאות שלנו מראות כי זן של עכברים מהונדסים גנטי שנוצרנו במעבדה שלנו יש האנדותל חדיר יותר בהשוואה לעכברי סוג פראי. שינויים אלה ניכרים ברמת מקרוסקופית באיברים רבים (איור 1). <p class="jove_content" style=";text-align:r...

אנו מציגים<em&gt; In vivo</em&gt; בדיקה לבדיקת חדירות כלי דם. בדיקה זו מבוססת על הזרקה תוך ורידית של הדמיה לצבוע ולאחר מכן של דיפוזיה שלו למרחבי ביניים.

<em&gt; In vivo</em&gt; Assay לבדיקת חדירות כלי דם

This method is based on the intravenous injection of Evans Blue in mice as the test animal model. Evans blue is a dye that binds albumin. Under ...

סרטון זה מציג בדיקה in vivo לבחינת חדירות כלי דם. בעכברים, תאי אנדותל מרפדים את כלי הדם ויוצרים מחסום חדיר למחצה. בתנאים פיזיולוגיים, האנדותל אינו חדיר לרוב החלבונים, כך שהם מוגבלים לזרימת הדם.במצבים פתולוגיים המעודדים עלייה בחדירות כלי הדם, תאי האנדותל מאבדים חלקית את הקשר ביניהם. האנדותליום הופך לחדיר לחלבונים קטנים כגון albumin. במערך זה, אנו מזריקים תוך-ורידית צבע כחול הנקשר ל-albumin בתנאים של חדירות אנדותליאלית מוגברת.ה-D חוצה את המחסום האנדותלי ומדיף אל החלל הבין-תאי. דבר זה מוביל בסופו של דבר לגוון כחלחל של הרקמה הפגועה לפני תחילת הניסוי. הכינו את כל החומרים הנדרשים, פיפטה וטיפים סטריליים.Evans blue, שפכטל סטרילי, PBS סטרילי, מזרק ומחטים סטריליים. עכברים, מקבע לעכברים, מכשירים לניתוח, לוח ניתוחים וסיכות. מאזניים מדויקים, בלוק חימום למסבך מים בטמפרטורה של 55 °C.שקלו אבקת Evans blue באמצעות ספקטרופוטומטר C.Vet והעבירו אותה למבחנה סטרילית. הוסיפו PBS סטרילי כדי להגיע לריכוז עבודה של 0.5%. שאבו באיטיות 200 microliters של תמיסת Evan Blue לתוך המזרק.הימנעו מכל בועות אוויר והסירו כל בועת אוויר שנותרה במזרק. הניחו את העכבר במכשיר קיבוע כך שהחיה לא תהיה ניידת, אך ניתן יהיה לטפל בזנבה. הניחו את מכשיר הקיבוע על צדו, כך שוריד הזנב הצדי יהיה נראה בבירור ופונה כלפי מעלה.החזיקו את הזנב בי

an-in-vivo-assay-to-test-blood-vessel-permeability

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

סרטון זה מתאר בדיקת חדירות להערכת החדירות של מחסום דם-מוח במבחנה באמצעות מולקולות נתרן פלואורסצאין.

מחסום דם-מוח מחקה בדיקת חדירות: בדיקת מבחנה להערכת החדירות של חיקוי BBB למולקולות עוקבות

אנו מציגים פרוטוקול ללמוד אינטראקציות אנדותל-pericyte אדם העכבר באמצעות וריאציה של assay אנגיוגנזה תקע ג'ל מטריקס.

In vivo לחקר האדם האנדותל-pericyte אינטראקציה באמצעות assay Plug מטריקס ג&#39;ל עכבר

שמירה על כיסוי מחסום דם מוחי היא המפתח להומיאוסטזיס של מערכת העצבים המרכזית. פרוטוקול זה מתאר טכניקות חוץ גופית כדי לתמצת את התהליכים הבסיסיים הפתולוגיים כי לווסת דם מוח המכשול הכיסוי.

ב מבחני מבחנה כדי להעריך דם מוח מחסום כמו רשת כלי שיטפון ושיבוש

שתי שיטות מוצגים כאן כדי לקבוע פונקציה מכשול המעי. מטר אפיתל (וולט/אוהם) משמש עבור מדידות של ההתנגדות החשמלית transepithelial של epithelia בתרבית ישירות בבארות תרביות רקמה. בעכברים, שיטת gavage FITC-לתוספי משמשת כדי לקבוע את חדירות המעי ויוו.

במבחנה , גישות In Vivo כדי לקבוע חדירות תאים אפיתל המעי

כאן נציג של assay חדירות כלי דם במוח העכבר באמצעות הזרקה בקרום הבטן של המשדרים פלורסנט ואחריו זלוף הרלוונטיים מודלים חייתיים של תפקוד לקוי של מחסום הדם - מוח. חמי-המוח משמש עבור הערכת חדירות באופן כמותי, והשני עבור מעקב חזותי/immunostaining. התהליך לוקח ב' 5-6-10 עכברים.

In Vivo מחסום הדם - מוח חדירות Assay בעכברים באמצעות Fluorescently עם התווית המשדרים

כאן, אנו מציגים פרוטוקול למדוד לדליפת דם הנגרם על ידי המינהל intradermal מהסוכנים קידום חדירות לתוך העור מאתר. ניתן להשתמש בטכניקה זו כדי לקבוע את היכולת של מולקולות מקדמים או מעכבים זליגת וסקולרית או לחקור את המנגנונים המולקולריים המסדירים חדירות כלי דם.

הערכת סוכנים בתדר Hyperpermeability כלי דם בעור עם וזמינותו Miles

הגישה של חומרים מזינים, microbiota מטבוליטים ותרופות אל מחזור הדם נשלטת על ידי למכשול בטן-דם (GBB). אנו מתארים שיטה ישירה למדידת ה GBB חדירות ויוו, אשר, בניגוד נפוץ שיטות עקיפות, כמעט אינה מושפעת פונקציות כבד וכליות.

שיטת In Vivo להערכת את מחסום הדם-הבטן ואת חילוף החומרים בכבד של מוצרים Microbiota

אנו מתארים שתי שיטות להערכת חדירות בכלי הדם ארעי הקשורים עם מיקרוסביבה הגידול של גרורות (tmem) הדלת הפתח ואת התא סרטן in, באמצעות הזרקה ורידית של משקל גבוה-מולקולרי (155 kda) תוספי בעכברים. השיטות כוללות הדמיה של האינטרטל בבעלי חיים חיים וניתוח רקמות קבועות באמצעות מאימונולובורנציה.

הערכת מיקרוסביבה הגידול של גרורה בתיווך החדירות כלי דם הקשורים להפצת תאים סרטניים באמצעות הדמיה Intravital וניתוח רקמות קבוע

פרוטוקול זה מדגים בדיקת טרנסציטוזה של תאי אנדותל במבחנה כמודל להערכת חדירות מחסום הדם-רשתית הפנימית על ידי מדידת יכולתם של תאי אנדותל מיקרו-וסקולריים ברשתית האנושית להעביר פרוקסידאז חזרת על פני תאים בתהליכי הובלה טרנס-תאיים בתיווך caveolae.

בדיקת טרנסציטוזה של תאי אנדותל כמודל In vitro להערכת חדירות מחסום הרשתית הפנימית בדם

בפרוטוקול הנוכחי, פונקציית מחסום האנדותל של הבלוטה התת-מנדיבולרית (SMG) הוערכה על ידי הזרקת עוקבים פלואורסצנטיים משוקללים מולקולריים שונים לוורידים הזוויתיים של מודלים של חיות ניסוי in vivo תחת מיקרוסקופ סריקת לייזר של שני פוטונים.

אין ויוו זיהוי חדירות כלי דם בבלוטה תת-מנדיבולרית של עכבר

השיטה המוצגת כאן יכולה להעריך את ההשפעה של ריאגנטים על אנגיוגנזה או חדירות כלי הדם in vivo ללא כתמים. השיטה משתמשת בהזרקת דקסטרן-FITC דרך וריד הזנב כדי לדמיין ניאו-כלי דם או דליפת כלי דם.

שונה בבדיקת תקע ג'ל מטריצת Vivo למחקרי אנגיוגנזה

למד שיטת מבחן חדירות כלי דם in vivo בעכברים באמצעות צבע כחול המיקשר לאלבומין. השיטה מאפשרת הדמיה של חדירות אנדותלית מוגברת ומסייעת בחקר מחלות כלי דם ופתולוגיות וסקולריות.

גלה סרטונים נוספים