January 5th, 2015
ייצוב השדרה הוא הכרחי לצמצום שונות, ולהפקת פגיעות בחוט השדרה עקבית ניסיונית. באמצעות מנגנון ייצוב מותאם אישית בשילוב עם מכשיר Impactor NYU / MASCIS, יש לנו הפגנו כאן הציוד ונוהל התקינים ליצירת פציעות שחזור חמי-contusive צוואר רחם (C5) בחוט השדרה בחולדות מבוגרות.
המטרה הכוללת של הליך זה היא ליצור פגיעה עקבית, מדויקת וניתנת לשחזור בחוט השדרה באמצעות מייצב חוליות חדשני, שניתן להשתמש בו עם מספר התקני SCI. זה מושג על ידי ניתוח קפדני של הרקמה המקיפה את חוליות צוואר הרחם, תוך שימוש בזהירות כדי למזער דימום. השלב השני הוא למקם את החיה במכשיר הייצוב ולייצב את החוליות באמצעות זרועות הייצוב המשוננות.
לאחר מכן, בצע כריתת למינקטומיה כדי לחשוף את האזור הממוקד של חוט השדרה. השלב האחרון הוא להרכיב את מכשיר הייצוב בצורת U למסות NYU, להשפיע ולבצע SCI בסופו של דבר נוצרת פגיעה עקבית בחוט השדרה הניתנת לשחזור עם מכשיר הייצוב החדשני. היום נדגים את השימוש במכשיר הייצוב הכירורגי הייחודי שלנו בליווי משפיע חוט השדרה של אוניברסיטת ניו יורק ליצירת פגיעות עקביות בחוט השדרה הניתנות לשחזור.
אנו משתמשים במכשיר ייצוב זה במעבדה שלנו ליצירת פגיעות בחוט השדרה וכן לניתוחי השתלה ומיקרו-הזרקה והדמיה. התחל הליך זה על ידי ניקוי משטח הניתוח עם 70% אתנול. הנח כרית חימום על אזור הניתוח והפעל את כרית החימום.
לאחר מכן הנח את צמר גפן גזה סטרילי וכלי ניתוח חיטוי באזור הניתוח. לאחר כיסוי המשטח בווילון כירורגי סטרילי, השתמש במעקר מיקרו-חרוזים לעיקור בין ניתוחים של כלים כירורגיים. נקו גם את המייצב עם אתנול 70% לפני ובין ניתוחים.
כעת הרדמו את החולדה על ידי הזרקה תוך-צפקית עם קטמין קסילזין, ואשרו את עומק ההרדמה על ידי גירוי צביטת הבוהן. לאחר מכן יש למרוח משחת מגן על עיני החיה כדי למנוע ייבוש בקרנית. לאחר מכן, יש לגלח את גב החולדה מאזור בית החזה האמצעי לראשה.
לאחר מכן הסר את הפרווה באמצעות ואקום המצויד בפילטר HEPA. לאחר מכן, מרחו בטדין על האזור המגולח כקרצוף כירורגי ונקו את האזור עם מגבוני אלכוהול איזופרופיל 70%. יש להזריק באופן תת עורי 0.01 עד 0.05 מיליגרם לק"ג בופרנורפין וחמישה מיליגרם לק"ג קרפרופן לפני ההליך הכירורגי.
לאחר מכן יש לתת בופרנורפין כל שמונה עד 12 שעות וקרפרופן פעם ביום במשך ארבעת עד שבעה הימים הראשונים לאחר הניתוח. השתמש בלהב אזמל כדי לבצע חתך של שלושה עד ארבעה סנטימטרים בקו האמצע על העור מבסיס הראש ועד אמצע בית החזה. לאחר מכן זהה את קו האמצע של הפאשיה והשרירים התת עוריים הקדמיים לבלוטת השינה בצוואר התחתון.
חותכים את הטרפז ושרירים אחרים לאורך קו האמצע כדי להפחית דימום. מצא את רקמת השומן הבסיסית לשרירים בקו האמצע. חותכים את השרירים הטפיליים בצורה קפדנית.
לאחר מכן הפרד את שכבות השריר באמצעות מפסק רקמות קטן עד להגעה לרמת ה- T החזי שני תהליך קוצני. לאחר מכן חתכו את השריר המחובר לתהליך הקוצני T 2 והשתמשו במבנה זה כנקודת ציון אנטומית. לאחר מכן, הסר את הקצה הסחוסי של התהליך הקוצני T two כדי לשפר את הנראות של חוליות צוואר הרחם.
הפרד את שרירי עמוד השדרה לרוחב מהתהליכים הקוצניים ולמינציה, עם זאת, חסוך את השריר המכסה את למינה C3 כדי למנוע דימום. לאחר מכן, חותכים את השרירים מעל הלמיני לרוחב לכיוון ההיבטים משני צידי עמוד השדרה. לאחר חשיפת הלמיני בעמוד השדרה, הנח את החיה בתעלה בצורת U של המייצב.
אתר את חוליית C חמש על ידי ספירת התהליכים הקוצניים מנקודת ציון T 2 ל-T 1 C 7, C 6 ולבסוף C 5. בהליך זה, מקם את שתי זרועות הנירוסטה של המייצב כדי לתלות את החיה על ידי הנחת הקצוות המשוננים של הזרועות מתחת לצדדים הצדדיים של חוליות C חמש עד שש. לאחר אבטחת הזרועות עם החוליות במקומן, כוונן את המנגנון המייצב כדי להבטיח שעמוד השדרה מפולס וממורכז.
לבסוף, נעל את הזרועות על ידי הידוק ברגי האגודל של המייצב שם. לאחר מכן חתכו את הרצועות בין תהליכי עמוד השדרה ללמיני ב-C ארבע עד חמש ו-C חמש עד שש. על מנת לאתר את שולי הלמינה C חמש באמצעות מיקרו רון, גזור מחצית מהלמינה בצד ימין C חמש עבור SCI.
לאחר כריתת למינקטומיה, העבירו את החיה עם המייצב משולחן הניתוחים למכשיר הפציעה. אבטח את החיה יחד עם המייצב על תושבת המודבקת למכשיר הפציעה. יישר במדויק את הבוכנה עם מטרת חוט השדרה באמצעות מיקרו מניפולטור רוחבי בהגדלה גבוהה.
אתר את אזורי הכניסה של שורש הגב C 5 ו-C 6 על פני חוט השדרה הגבי החשוף ללא אוטומיה דור. כוון את הבוכנה לאמצע שני ה-DRE Zs המזוהים ובאמצע הדרך בין קו האמצע לקצה הצדדי של חוט השדרה. באמצעות מכשיר פגיעה המוני של NYU עם קצה בקוטר 2.5 מילימטר, לייצר חבלה C five HEMI על ידי מוט של 10 גרם בגובה טיפה של 12.5 מילימטר.
אמת את הפגיעה חזותית על ידי החבורה על חוט השדרה ובדוק את פרמטרי הפציעה המסופקים על ידי תוכנת NYU. לאחר מכן תפר את השרירים והרקמות הרכות וסגור את חתך העור בעזרת סיכות כירורגיות. מרחו משחה אנטיבקטריאלית על מקום הניתוח ותנו 5.0 מיליליטר של תמיסת מלח סטרילית 0.9% תת עורית לבעל החיים להתייבשות.
לאחר מכן, הניחו את בעל החיים בסביבה מבוקרת חום עם מזון לח המסופק על המצעים ובקבוק מים עם פיה ארוכה לגישה נוחה המונח על רצפת הכלוב. דאג להבטיח התאוששות נאותה לפני החזרת בעל החיים לכלוב הביתי. איור זה ממחיש קריאה של השפעה טובה מאוד עם מדידות נתונים של אחוז שגיאה עבור פגיעה, מהירות מוט, גובה התחלתי וזמן התחלה, כל הערכים נופלים היטב בתוך חלון השגיאה המקובלת.
לעומת זאת, פאנל זה מדגים נתונים שהופקו על ידי פגיעה לא תקינה הנגרמת על ידי ייצוב לא תקין של עמוד השדרה והשגיאה במהלך איפוס מוט הפגיעה על פני חוט השדרה. לפני קביעת גובה מוט הפגיעה, מכשיר ייצוב זה משתק את חוט השדרה. עם זאת, יתרון גדול של מכשיר זה הוא הניידות שהוא מספק להובלת בעל החיים המיוצב משולחן ניתוחים לתחנת מיקרו-הזרקה להשתלה למכשיר פגיעה או תחנת הדמיה.
ייצוב תהליכי החוליות הצדדיות מאפשר ייצוב של החוליות הספציפיות המעניינות, מה שמאפשר פגיעה בחוט השדרה הניתנת לשחזור עקביות ושחזור הם גורמים מכריעים למודלים ניסיוניים של פגיעות בחוט השדרה על מנת למזער את השונות ולייעל את הבהרת השפעות הטיפול, כל אלה חשובים ליישום לקראת תרגום קליני ומציאת תרופה לפגיעה בחוט השדרה.
מאמר זה מציג שיטה לייצור פגיעות עקביות וניתנות לשחזור בעמוד השדרה אצל חולדות בוגרות באמצעות מייצב חוליות חדש. הנוהל נועד למזער את השונות בפגיעות עמוד השדרה הניסוייות על ידי שימוש במנגנון ייצוב מותאם לצד מכשיר ההשפעה NYU/MASCIS.
Reliable preclinical spinal cord injury (SCI) models are critical for translational neuroscience and therapeutic development. This vertebral stabilization method addresses a key reproducibility bottleneck by minimizing spinal column movement during contusive injury, directly impacting the predictive confidence of SCI studies. Enhanced model consistency supports robust target validation and risk-adjusted portfolio advancement in neuroregeneration pipelines.
This stabilization method integrates at the interface of early discovery, lead identification, and preclinical validation for SCI and neuroregeneration programs.