RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
he_IL
Menu
Menu
Menu
Menu
DOI: 10.3791/50173-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
חסימת עורק תרדמה דו צדדית בשילוב עם ירידה בלחץ דם מערכתי מייצרת איסכמיה המוחית העולמית בחולדה, וכתוצאה מכך לנזק ליפוקמפוס בחומרה לשחזור. נושאי בעלי החיים הם לקויים עם דפוסים צפויים של נזק מוחי, הם להתאושש expediently, ושיעורי תמותה הם נמוכים יחסית.
המטרה הכוללת היא לגרום לאירוע איסכמי חולף במוח כדי לדמות את העלבון המוחי הנגרם מדום לב והחייאה. ראשית, תת לחץ דם מערכתי נגרם על ידי נסיגת דם מעורק הירך. לאחר מכן, עורקי הצוואר חסומים כדי להגביל את זרימת הדם למוח.
המוח נשמר במצב איסכמי במשך שמונה דקות על ידי שליטה הדוקה בלחץ הדם המערכתי. לבסוף, הקליפים מוסרים והדם שנשאב מוכנס מחדש. בסופו של דבר, ניתן לכמת נזק עצבי בנקודות זמן שונות לאחר איסכמיה.
היתרון העיקרי של טכניקה זו על פני שיטות קיימות כמו דום לב והחייאה, הוא שניתן לדמות את האירוע האיסכמי המוחי ללא התמותה והמחלות הנלוות הקשורות לאיסכמיה מערכתית. הדגמה חזותית של ניתוח זה מאפשרת לנו להדגיש את החשיבות של ניואנסים פרוצדורליים מסוימים כדי להבטיח שחזור התחל בהכנת קטטר כלי דם. לשם כך, חותכים צינור פוליאתילן 50 באורך שמונה אינץ' ומכניסים מחט קהה בגודל 23 לקצה אחד.
אבטח את המחט הזו ליציאה אחת של זין עצירה תלת-כיווני והנח. עוד זין עצירה תלת-כיווני בנמל הנגדי. הפרין את תרנגולי העצירה והצנתר על ידי הפעלת תמיסת מלח הפרין לאורך כל הדרך.
לאחר מכן, חבר מזרק מי מלח של 10 מיליליטר על זין העצירה, בניצב ודיסטלי לקטטר. חבר את זין העצירה דיסטלי לצנתר לצינור מתמר הלחץ. מלאו את המערכת במי מלח והסירו את כל בועות האוויר.
אינטובציה של חולדה מורדמת כדי לאפשר מתן רציף של הרדמה. לאחר מתן הזרקת IP של קטמין, הפחיתו את איזו הפלואור ל-1.5% ועקבו אחר רמת ההרדמה לאורך כל ההליך. לאחר ההרדמה יש לגלח את אזור הצוואר ואת האגן הימני שבו הירך פוגשת את הבטן, להניח את החולדה במצב שכיבה על שמיכה מחוממת.
לאחר מריחת חומר סיכה על העיניים והחדרת מדחום רקטלי, שפשפו את אזורי החתך במריחות חוזרות ונשנות של בטדין ואתנול 70%. הנח שדה כירורגי מעל החולדה וחתוך חורים כדי לחשוף את אזורי החתך. לאחר אישור עומק ההרדמה המתאים, אזמל לביצוע חתך בקו האמצע לאורך הצוואר מנתח דרך הרקמה כדי להגיע להיואיד הסטרנו ולשרירי המסטואיד של החזה.
הפרד בזהירות את השריר על ידי דיסקציה קהה עד להדמיה של עורק הצוואר המשותף. בודד את עורקי הצוואר משני הצדדים על ידי העברת תפר משי מתחת. נקה כל פאשיה מכלי הדם בשקע שבו שרירי הגפה האחורית פוגשים את הבטן.
בצע חתך שני. נתח מתחת לשריר הבטן לאורך שרירי הירך עד שתגיע לרצועה המפשעתית. חשיפת הצרור העצבי וסקולרי של עצם הירך.
בודד בזהירות את עורק הירך על ידי העברת תפר משי מתחתיו והרחיק כל פאשיה ולהשאיר חמישה עד שבעה מילימטרים של כלי חשוף. לאחר החשיפה, קשרו קשר קבוע בקצה הדיסטלי של העורק. הניחו תפר משי נוסף סביב הקצה הפרוקסימלי של העורק וקשרו קשר רופף.
לאחר מכן, יש למרוח מתיחה על התפר בקצה הפרוקסימלי כדי לחסום את זרימת הדם ולבצע חתך קטן על פני החלק העליון של הכלי בעזרת מספריים עיניים. השתמש במכניס כלי דם כדי להכניס את צינור הקטטר לתוך הכלי. לאחר שהקטטר נמצא במקומו, קשרו קשר רופף סביב כלי הדם והצנתר כדי לאבטח
.הכנס את צינור הצנתר לתוך הכלי, שבעה עד תשעה מילימטרים מעבר לחתך הכלי ולכיוון קו האמצע. הסר את המתיחה מהכלי ואפשר לה להתיישר באופן טבעי. לאחר מתן 0.3 מיליליטר הפרין, יש לשטוף את כל הדם מהקטטר בכמות קטנה של מי מלח כדי למנוע קרישה.
לבסוף, הפעל את צג הלחץ וכיול את הציוד. כדי להבטיח עקביות בין ההליכים, חשוב לשמור תיעוד מפורט של טמפרטורת הליבה, לחץ הדם ומשתנים פיזיולוגיים אחרים במהלך הניתוח. כאשר אתה מוכן להתחיל, חבר מזרק הפריני לזין העצירה בניצב ופרוקסימלי לקטטר.
הגדר טיימר לדקה אחת ופתח את זין העצירה כך שניתן יהיה להוציא דם. משוך את הדם לאט. תוך דקה אחת יש להסיר שבעה עד תשעה מילימטרים של דם.
לאחר מכן ה-MAP אמור לרדת לכ-30 מילימטרים של כספית, לחץ הדם היעד להשגת איסכמיה. לאחר מכן, החל קליפים המוסטטיים על עורקי הצוואר והפעל טיימר המוגדר לשמונה דקות. בדוק מיד את לחץ הדם אם ה- MAP אינו ב -30 מילימטר כספית, להחדיר או להוציא דם לאט עד להגעה לרמה הנכונה.
בצע התאמות לאורך האיסכמיה כדי לשמור על רמה זו. שמור על הדם בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס כדי למנוע התקררות לפני שניתן יהיה להחדיר אותו מחדש בתום התקופה האיסכמית של שמונה דקות. החזר את הדם החם, שנמשך מוקדם יותר לזלוף מחדש, הסר את הליקוי ההמוסטטי והחדיר מחדש את הדם לאט במהירות של כשני מיליליטר לדקה כאשר הדם הוכנס מחדש, הסר את הצינורית מעורק הירך ואבטח שני קשרים נפרדים הקרובים לחתך בעורק.
לתפור את החתכים בתבנית לא רציפה באמצעות מחט חיתוך הפוכה עם תפר 5.0 ויקריל. כאשר הפצע סגור, כבה את האיזו פלואור כדי לגמול את החולדה ממכונת ההנשמה ולתת משכך כאבים. כאשר הנשימה מרצון חוזרת.
הוציאו את החיה והכניסו לכלוב התאוששות מחומם. עקוב אחר בעל החיים לאיתור סימני מצוקה עד להחלמה מלאה בנקודת הזמן הרצויה. לאחר איסכמיה, יש לתקן את המוח ב-4% אלדהיד פרפורם.
לאחר זלוף לב טרנס, דגימת המוח נחתכת מאוחר יותר לחלקים ומוכתמת בתמונה סגולה קרסטלית. J.תוכנית חינמית המוצעת על ידי המכונים הלאומיים לבריאות משמשת לכימות הנוירונים הקיימים המייצגים את היקף הנזק המוחי. ראשית, פתח את התמונה באמצעות התוסף מונה התאים.
לאחר מכן, בחר צבע סימון וספור את הנוירונים בגבולות הסולם. נוירוני בר נספרים על סמך קריטריוני הכללה פשוטים למורפולוגיה עצבית. זוהי צורת פרמטאל גדולה או קריטריונים להחרגה עבור מיקרוגליה, מורפולוגיה של אסטרוציטים, או צורות עגולות קטנות או צינוריות ארוכות.
לאחר רישום ספירת הנוירונים שמור את חלון מונה התאים. הממוצע של כל התמונות מכל חיה יספק ספירת נוירונים ממוצעת אחת, שהיא המדד הכמותי של נזק להיפוקמפוס CA אחד. הדוגמה מציגה את הפגיעה שנוצרה על ידי שמונה דקות של איסכמיה מוחית גלובלית 14 יום לאחר הרפרפוזיה.
כאן ההיפוקמפוס מחולדה המופעלת במזויפ מציג מורפולוגיה נורמלית, כולל כזו שלמה. לעומת זאת, נזקים מקומיים באזור אחד של ההיפוקמפוס. בחולדות עם איסכמיה ורפרפוזיה מוצגים כאן חלונות ספירה מייצגים בחיית ביקורת המופעלת על ידי דמה ובעל חיים שנחשף לאיסכמיה מוחית גלובלית.
ה-CA one הפגוע מציג צביעה הכוללת מיקרוגליה ואסטרוציטים, שנראים קטנים וצינוריים או בצורת דמעה. ניתן להבחין ביניהם לבין נוירונים שלמים בהיפוקמפוס, שהם גדולים עם צורה מעגלית או פרמטאלית. לבסוף, נתונים אלה מדגימים כי ספירת העצבים נמוכה בהרבה באזור CA אחד של בעלי חיים איסכמיים בהשוואה לביקורת.
אחרי הצפייה בסרטון הזה, אתם אמורים להבין כיצד ליצור איסכמיה מוחית גלובלית חולפת בחולדה וכיצד לכמת את הפגיעה הקשורה אליה. הצלחה דורשת מיומנויות כירורגיות עדינות ותחזוקה קפדנית של הרדמה, המודינמיקה ופרמטרים פיזיולוגיים לאחר התפתחותה. טכניקה זו סללה את הדרך לחוקרים לחקור את האירועים המוחיים המתרחשים בעקבות איסכמיה מוחית גלובלית בחולים הסובלים.
דום לב ואחריו החייאה.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Related Videos
13:50
Related Videos
81K Views
03:33
Related Videos
697 Views
05:12
Related Videos
505 Views
12:15
Related Videos
23.8K Views
08:22
Related Videos
15.7K Views
06:01
Related Videos
15.6K Views
12:19
Related Videos
12.1K Views
07:34
Related Videos
12.4K Views
06:10
Related Videos
1.2K Views
03:37
Related Videos
1.1K Views