MR הדמיה המולקולרית של סרטן הערמונית עם חומר ניגוד ממוקד המולקולרי קטן CLT1 פפטיד

המטרה הכוללת של הליך זה היא לבצע הדמיה מולקולרית של סרטן הערמונית בעכברים באמצעות חומר ניגוד פפטידי בטוח ויעיל עם תהודה מגנטית או MR. הדמיה מולקולרית. ראשית, ההתפתחות המוצלחת והגודל הנכון של גידולי ערמונית אורתוטופיים מאומתים במודל עכברי גידול הערמונית. לאחר מכן, ספציפיות קשירת הגידול של הפפטיד מאושרת באמצעות הדמיה פלואורסצנטית והיסטולוגיה במודל סרטן הערמונית האורתוטופי של העכבר.

לאחר מכן מוזרק חומר המטרה או הבקרה לאחר רכישת תמונת MR בסיסית לפני ההזרקה. לבסוף, תמונות MR משופרות ניגודיות נרכשות בנקודות זמן שונות עד 30 דקות. בסופו של דבר, ניתן להשיג תוצאות המראות כי חומר ניגוד RI ממוקד פפטיד אחד CLT יכול להיות יעיל לזיהוי ספציפי של גידולי ערמונית באמצעות טכניקות הדמיה מולקולרית.

היתרון העיקרי של MRI מולקולרי עם חומרי ניגוד MI ממוקדים על פני טכנולוגיה קיימת כמו MRI ו-MRI PET עם חומרי ניגוד קליניים הוא שטכנולוגיה זו יכולה לספק תמונות יעילות ומשופרות של גידולי ערמונית ברזולוציה גבוהה כשיטת הדמיה יחידה. נדגים כאן. ניתן להשיג MRI מולקולרי יעיל של גידול הערמונית על ידי בחירת סמן ביולוגי בשפע במדדים חוץ-תאיים של גידול ושימוש בחומרי ניגוד ממוקדים מולקולריים קטנים מיומנויות טובות בטיפול בבעלי חיים ובקנולציה של זנב ו-MRI הן גם קריטיות להשגת תמונות MRR באיכות גבוהה של גידולים באמצעות סינתזת פפטיד פאזה מוצקה סטנדרטית, לסנתז ולאחר מכן לאפיין את קומפלקסי המונו-אמיד GD DOTA כפי שמוצג כאן לאחר יצירת גידול ערמונית PC 3G FP מודל בעלי חיים, על פי פרוטוקול הטקסט, מרדימים עכברים עם 2% ISO פלואור בחמצן בתא אינדוקציה ומבצעים צביטת זנב כדי לוודא טשטוש.

לאחר מכן השתמש בהדמיה פלואורסצנטית כדי לאמת את נוכחותם של גידולים בעכבר. להזריק 10 מול לכל עכבר של פפטידים עם תווית אדומה של טקסס לעכברים נושאי הגידול. שעתיים לאחר מכן, לאחר שהקריבו את העכברים על ידי פריקת צוואר הרחם, אספו את הגידול והאיברים העיקריים ודמו מיד באמצעות הדמיה פלואורסצנטית.

לאחר מכן, לאחר קיבוע רקמות הגידול בפורמלין והקפאה לחמש פרוסות מיקרומטר, השתמש בטיפת DPI המכילה מדיום הרכבה כדי להרכיב את הרקמה. לאחר מכן צלמו את השקופיות באמצעות מיקרוסקופ סריקת לייזר קונפוקלי כארבעה שבועות לאחר החיסון, הגידולים היו צריכים לגדול בקוטר של 0.3 עד 0.6 סנטימטרים. לאחר הרדמת העכבר עם 2% איזו פלואור בחמצן בתא אינדוקציה, יש למרוח משחה עיניים כדי לשמור על לחות בעיני העכבר ולבצע צביטת זנב כדי לוודא טשטוש.

לאחר מכן, הכנס מחט בגודל 30 לצינור באורך מטר אחד מלא במי מלח הפריניים. לאחר מכן הנח את הצנתר מתוצרת עצמית לווריד זנב העכבר באמצעות סורק MRI 70 עם סליל תדר רדיו עוצמת קול. הנח את העכבר לתוך המגנט, ולאחר מכן חבר חרוט אף והטמיע 1.5% כמות פלואור בחמצן כדי לנטר את קצב ועומק הנשימה.

הנח חיישן נשימה המחובר למערכת ניטור על בטן החיה. שמור על טמפרטורת הגוף של החיה על 37 מעלות צלזיוס עם אספקה קבועה של אוויר חם למגנט. כעת, הכניסו את החיה ל-MRI כדי לזהות את מיקום הגידול.

התחל עם תמונות חתך סגיטלי באמצעות רצף לוקליזציה. לאחר מכן, השתמש ברצף דיכוי שומן משוקלל של שני DT אחד משוקלל כדי לרכוש תמונות ציריות דו-ממדיות לשיפור ניגודיות או CE MRI. לאחר רכישת תמונות בסיסיות של הגידול התחל להזריק את החומר הממוקד או חומר הבקרה במינון של 0.03 מילימול גדוליניום לקילוגרם.

המשך לרכוש תמונות CE MRI בנקודות זמן שונות עד 30 דקות כדי להתפרש לחלוטין ולקבל תמונות של הגידול כולו. אסוף 12 פרוסות לאחר השלמת ההדמיה, המתת חסד של החיה בפחמן דו חמצני ונתח ועבד את התמונות בהתאם לפרוטוקול הטקסט כפי שמוצג כאן, הדמיית מאסטרו מאשרת את הקישור הספציפי החזק של CLT אחד עם תווית אדומה של טקסס לגידול GFP PC 3 עם קשירה מועטה לאיברים ורקמות נורמליים. בעוד שהפפטיד המקושקש הלא ספציפי מראה מעט מאוד קשירת גידול.

איור זה מציג תמונות משוקללות טיפוסיות לפני ואחרי ההזרקה. הסוכן הממוקד מביא לשיפור גדול וארוך יותר ברקמת הגידול בהשוואה לחומרים מקושקשים לא ממוקדים. שיפור הניגודיות בשלפוחית השתן עולה בהדרגה עם הזמן, מה שמצביע על כך שחומרי הניגוד הופרשו באמצעות סינון כלייתי.

ניתוח אותות כמותי מגלה כי החומר הממוקד ייצר שיפור אות משמעותי יותר ברקמת הגידול מאשר חומר הבקרה עד 30 דקות. מחקר ההפצה הביולוגית מראה שלחומר יש אגירת גדוליניום מינימלית באיברים וברקמות העיקריות יומיים לאחר ההזרקה. הראשוניים שלנו מראים כי ניתן להעביר חומרי ניגוד MRI ממוקדים CLT אחד באופן ספציפי לגידול במינון נמוך יחסית.

כן, הדגמנו כאן שניתן להשיג MRI מולקולרי יעיל של סרטן הערמונית על ידי בחירת סמן ביולוגי שופע מתאים במיקרו-סביבת הגידול ושימוש בחומר ניגוד MRI ממוקד מולקולרי קטן. לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד לפתח טכניקות מתאימות ל-MI מולקולרי יעיל או לגידולים ממאירים קטנים במודלים של בעלי חיים באמצעות חומר ניגוד MI ממוקד.