RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
he_IL
Menu
Menu
Menu
Menu
DOI: 10.3791/50660-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
יצירת הפרדות רשתית ניסיונית עם גובה לשעתק ומתמשך של ניתוק, וללא דימום subretinal, היא חשובה ללימוד הפתופיזיולוגיה של אובדן תאי קולטי אור ברשתית מחלה והערכה של התערבויות טיפוליות פוטנציאליות. כאן אנו מדווחים שיטה כזו בפירוט.
המטרה הכוללת של הליך זה היא ליצור היפרדות רשתית ניסיוניות עם גובה ניתוק הניתן לשחזור ומתמשך ללא דימום תת-רשתית. זה מושג על ידי אינצ'י ראשון, הלחמית הטמפורלית בלימבוס האחורי כדי להפריד את הלחמית מהסקלרה. בשלב השני, קצה מחט בגודל 30 משמש לביצוע חתך סקלרלי אטום עצמי וניקוב בקרנית.
לאחר מכן, נתרן מוזרק לחלל התת-רשתית כדי לנתק את הרשתית הנוירו-סנסורית מאפיתל הפיגמנט הבסיסי של הרשתית. בשלב האחרון, דבק ציאנואקרילט מונח על הפצע הסקלרלי והלחמית מחוברת מחדש למקומה המקורי, מה שמפחית את הסיכון לדליפת שתן נתרן הול. בסופו של דבר, הפונדוס נבדק באמצעות זכוכית כיסוי כדי לאשר יצירת היפרדות רשתית בולוס ללא דימום תת-רשתית.
שיטות קיימות להפחתת היפרדות רשתית במכרסמים עלולות לגרום לשונות בגובה ובהתמדה של היפרדות הרשתית, מה שמוביל למדידת שיעורי תמותה לא עקביים של תאים. בטכניקה זו, ניתן ליצור ניתוק רשתית בולוסי ומתמשך הניתן לשחזור עם סיכון מופחת לטחורים תת-רשתיים, מה שמאפשר מודל אמין של היפרדות רשתית במכרסמים. היפרדות רשתית ניסיונית במכרסמים היא פשוטה יחסית לביצוע, יש לה מהלך זמן סביר והיא די דומה למחלה האנושית.
אז זה מודל נהדר לחקר מנגנונים של מוות תאי קולטני אור וטיפולים למניעת אובדן ראייה. בהפרעות ניווניות ברשתית בידיעה כי מוות תאי קולטני האור המשתנה ברשתית המנותקת, יש יתרון ליצור ניתוק הניתן לשחזור ללא דימום תת-רשתית. הסיבה לכך היא שמשך הזמן המוגבר של היפרדות הרשתית או התרחשות של דימום תת-רשתית יכולים להשפיע על מוות של תאי קולטני אור.
לאחר הרדמת עכבר בן שמונה שבועות יש לקצץ את השפם של החיה, ואז להרחיב את האישון בתמיסה המכילה 5% פניל רין, ו-0.5% טרופי תחת מיקרוסקופ כירורגי. חותכים את קליא החיה, מרחו הרדמה מקומית, תמיסת עיניים 0.5% פרופאן הידרוכלוריד. הנח את העכבר במצב רוחבי עם האף לכיוון המנתח, ולאחר מכן חתך את הלחמית הטמפורלית בלימבוס האחורי, והפריד את הלחמית מהסקלרה באמצעות זוג מלקחיים.
אחוז בלחמית בלימבוס כדי לשלוט בעין. ואז החזיק מחט בגודל 30 עם שיפוע מחודד כלפי מעלה. השתמש בקצה המחט כדי ליצור מנהרה דרך הסקלרה, לחדור את הסקלרה לתוך הכורואיד מבלי לחדור לרשתית.
לאחר מכן, החזק את המחט בקוטר 30 במקביל לקשתית, נקב את הקרנית כדי להפחית את הלחץ התוך עיני. עכשיו מצביע על השיפוע כלפי מטה. הכנס מחט בגודל 33 המחוברת למזרק המילטון 10 מיקרוליטר לחלל התת-רשתית, והזריק 3.5 מיקרוליטר נתרן משתן.
זה ינתק כ-50% מהרשתית הנוירו-סנסורית מאפיתל הפיגמנט הבסיסי של הרשתית. בעזרת מלקחיים, דחפו את הקרנית סביב ניקוב הקרנית כדי לאפשר להומור המימי לזרום החוצה מהנקב בקרנית, ולאחר מכן השתמשו בחנית תאית כירורגית כדי לאשר את היעדר הדליפה מהפצע הסקלרלי כדי להפחית את הסיכון לדליפת שתן נתרן. הניחו דבק ציאנואקרילט על הפצע הסקלרלי ולאחר מכן הצמידו את הלחמית למקומה המקורי.
השתמש בזכוכית כיסוי כדי לבדוק את הפונדוס ולאשר יצירת היפרדות רשתית בולוס ללא דימום תת-רשתית. לבסוף, מרחו משחה אנטיביוטית על העין כדי להפחית את הסיכון לזיהום. שמור את העכבר על כרית חימום כדי למנוע טמפרטורת גוף נמוכה.
לאחר לחץ דם נמוך. החזירו את החיה לכלוב שלה לאחר שהיא מתעוררת מההרדמה. כדי להעריך את ההתמדה של ניתוק הרשתית שבוצע על ידי פרוטוקול זה, בוצעו חתכי קריו בימים השלישי, השביעי וה-14 לאחר גיוס הניתוק.
שש עיניים שימשו לכל נקודת זמן, המטין ואאוזין. צביעה שימשה כדי להמחיש את הקטעים שכל אחד מהם הראה בולוס. היפרדות רשתית מתקרבת לעדשה.
אף עיניים לא הראו סימנים של זיהום או פגיעה בעדשות. לאחר שליטה, ניתן לבצע ניתוח זה תוך כחמש דקות בזמן ניסיון הליך זה, חשוב לבצע כל שלב בעדינות כדי למנוע גרימת דליפת נתרן, דימום תת-רשתית בעל תאורה גבוהה או פגיעה בעדשה, שכולם יכולים להשפיע על מוות תאי הקולטן ברשתית המנותקת. לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד ליצור היפרדות רשתית ניסיונית במכרסמים עם גובה ניתוק הניתן לשחזור ומתמשך ללא דימום תת-רשתית.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Related Videos
04:13
Related Videos
567 Views
06:04
Related Videos
18.2K Views
12:31
Related Videos
16K Views
07:13
Related Videos
13.9K Views
12:45
Related Videos
10K Views
10:10
Related Videos
9.8K Views
11:03
Related Videos
10.5K Views
11:20
Related Videos
4.3K Views
07:37
Related Videos
1.7K Views
04:16
Related Videos
958 Views