Name: קבורת שיש וNestlet רטוש כבדיקות של התנהגויות חוזרות, כמו כפייתיות בעכברים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-12-24T13:45:00.000+00:00
Duration: 6 min 50 s
Description: חקור שיטות פשוטות להערכת התנהגויות כפייתיות בעכברים באמצעות מבחני קבורת שיש וקריעת Nestlet. שיטות אלו מספקות מדדים כמותיים לחקר הפרעות נפשיות אנושיות כמו הפרעה טורדנית כפייתית ואוטיזם.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכה על ידי מענקים מהמחלקה לענייני חיילים משוחררים והמכונים הלאומיים לבריאות.

כל הפרוטוקולים המשתמשים בבעלי חיים בוצעו בהתאם להמלצות במדריך לטיפול ושימוש בחיות מעבדה של המכונים הלאומיים לבריאות. הפרוטוקולים אושרו על ידי ועדת הטיפול והשימוש המוסדיים של אוניברסיטת וויין סטייט (מספר היתר A3310-01).
1. הכנת כלובים להטמנת שיש וגריסת נסטלט
<ol>
	<li>השתמש בכלובי חולדות סטנדרטיים מפוליקרבונט (26 ס"מ x 48 ס"מ x 20 ס"מ) עם כיסויי פילטר מותאמים לבדיקת קבורת שיש. הוסף חומר מצעי עכבר טרי וללא ריח לכל כלוב לעומק של 5 ס"מ ויישר את משטח המצע על ידי הכנסת כלוב נוסף באותו גודל על פני המצעים. יש לכך יתרון נוסף של הטבעה של תבנית של קווים מקבילים על משטח המצע שיכולים לשמש למיקום שיש.</li>
	<li>הניחו גולות צעצוע זכוכית סטנדרטיות (סגנונות וצבעים שונים, קוטר 15 מ"מ, משקל 5.2 גרם) בעדינות על פני המצעים ב-5 שורות של 4 גולות (ראה איור 1A). יש לשטוף גולות בחומר ניקוי מעבדה עדין, לשטוף באופן ממצה במים מזוקקים נטולי יונים ולייבש לפני כל שימוש.</li>
	<li>השתמשו בכלובי חולדות סטנדרטיים מפוליקרבונט (19 ס"מ על 29 ס"מ על 13 ס"מ) עם כיסויי פילטר מותאמים לבדיקת גריסת הקינון. הוסף חומר מצעי עכבר טרי וללא ריח לכל כלוב לעומק של 0.5 ס"מ וארז מצעים על ידי הכנסת כלוב נוסף באותו גודל על פני המצעים.</li>
	<li>שקלו קינון סיבי כותנה זמין מסחרית (5 ס"מ על 5 ס"מ, עובי 5 מ"מ, ~2.5 גרם כל אחד) על איזון אנליטי והניחו קן אחד מונח על גבי המצעים בכל כלוב בדיקה (ראה איור 3A).</li>
	<li>הגדר שעוני עצירה או טיימרים לתזמון אורכי מפגשים (30 דקות לכל מבחן).</li>
</ol>
2. טיפול בבעלי חיים לפני ניסויים
<ol>
	<li>יש לשכן עכברים בנפרד או בקבוצות בחדר עם מחזור אור/חושך של 12 שעות. ספק לכל העכברים מזון ומים אד ליביטום. יש לטפל בעכברים בעדינות במשך שלושה עד חמישה ימים לפני הבדיקה. השתמש בעכברים משני המינים לשתי הבדיקות.</li>
	<li>בצע בדיקות התנהגותיות בין השעות 9:00 בבוקר ל-16:00 והעביר את כל הכלובים הביתיים המכילים עכברים לחדר הבדיקה 60 דקות לפני תחילת הבדיקה.</li>
</ol>
3. מבחן קבורת שיש
<ol>
	<li>הנח עכבר אחד בפינת הכלוב המכילה גולות, הקפד להניח את העכבר על מצעים רחוק ככל האפשר משיש, והנח את מכסה המסנן העליון על הכלוב. הימנע מזון ומים במהלך הבדיקה. אפשר לעכבר להישאר בכלוב ללא הפרעה למשך 30 דקות.</li>
	<li>הסר את העכבר והחזיר אותו לכלוב הביתי שלו לאחר סיום הבדיקה, תוך הקפדה יתרה לא להזיז או לעקור את הגולות בתהליך הוצאת הנבדק מהכלוב.</li>
	<li>ציוני המטלות (2-3) עיוורים לתנאי הטיפול או הגנוטיפ של העכבר הנבדק כדי לספור את מספר הגולות שנקברו. ציון גולה כקבורה אם שני שליש משטח הפנים שלה מכוסה במצעים. ציונים ממוצעים למספר הגולות הקבורות עבור כל עכבר.</li>
	<li>הוציאו את כל 20 הגולות מהמצעים. השלך מצעים.</li>
</ol>
4. מבחן גריסה של נסטלט
<ol>
	<li>הכניסו עכבר אחד לכלוב המכיל קן יחיד שנשקל מראש והניחו את מכסה המסנן העליון על הכלוב. הימנע מזון ומים במהלך הבדיקה. השאירו את העכבר ללא הפרעה בכלוב עם הקן למשך 30 דקות.</li>
	<li>הסר את העכבר וחזור אליו לכלוב הביתי שלו לאחר סיום הבדיקה. הסר את חומר הקן השלם שנותר מהכלוב בעזרת מלקחיים והניח לייבוש O/N.</li>
	<li>שקלו את הקסטלט הלא מגורר שנותר וחלקו את המשקל הזה במשקל ההתחלתי כדי לחשב את אחוז הקסטלט הגרוס. אם תרצה, ציין את צורת הקן המיוצר על ידי העכבר הנבדק באמצעות סולם דירוג קן סופי של 5 נקודות17 אך מתוך הבנה שסולם זה נועד בדרך כלל לניקוד בניית קן, ולא לגריסה אובססיבית.</li>
	<li>יש להשליך את שאריות החומר והמצעים הגרוסים.</li>
</ol>

<ol><li>Chamberlain, S. R., Blackwell, A. D., Fineberg, N. A., Robbins, T. W., Sahakian, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+neuropsychology+of+obsessive+compulsive+disorder%3A+the+importance+of+failures+in+cognitive+and+behavioural+inhibition+as+candidate+endophenotypic+markers%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci.+Biobehav.+Rev%22%5BJournal%5D)">The neuropsychology of obsessive compulsive disorder: the importance of failures in cognitive and behavioural inhibition as candidate endophenotypic markers.</a> Neurosci. Biobehav. Rev. 29, 399-419 (2005).</li>
<li>McGuire, J. F., Lewin, A. B., Horng, B., Murphy, T. K., Storch, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+nature%2C+assessment%2C+and+treatment+of+obsessive-compulsive+disorder%5BTitle%5D)+AND+%22Postgrad.+Med%22%5BJournal%5D)">The nature, assessment, and treatment of obsessive-compulsive disorder.</a> Postgrad. Med. 124, 152-165 (2012).</li>
<li>Fineberg, N. A., Brown, A., Reghunandanan, S., Pampaloni, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence-based+pharmacotherapy+of+obsessive-compulsive+disorder%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Neuropsychopharmacol%22%5BJournal%5D)">Evidence-based pharmacotherapy of obsessive-compulsive disorder.</a> Int. J. Neuropsychopharmacol. 15, 1173-1191 (2012).</li>
<li>Dove, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Medications+for+adolescents+and+young+adults+with+autism+spectrum+disorders%3A+a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatrics%22%5BJournal%5D)">Medications for adolescents and young adults with autism spectrum disorders: a systematic review.</a> Pediatrics. 130, 717-726 (2012).</li>
<li>Doyle, C. A., McDougle, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacotherapy+to+control+behavioral+symptoms+in+children+with+autism%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Opin.+Pharmacother%22%5BJournal%5D)">Pharmacotherapy to control behavioral symptoms in children with autism.</a> Expert Opin. Pharmacother. 13, 1615-1629 (2012).</li>
<li>Albelda, N., Joel, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+animal+models+of+obsessive+compulsive+disorder%3A+an+update%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Current animal models of obsessive compulsive disorder: an update.</a> Neuroscience. 211, 83-106 (2012).</li>
<li>Albelda, N., Joel, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+obsessive-compulsive+disorder%3A+Exploring+pharmacology+and+neural+substrates%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci.+Biobehav.+Rev%22%5BJournal%5D)">Animal models of obsessive-compulsive disorder: Exploring pharmacology and neural substrates.</a> Neurosci. Biobehav. Rev. 36, 47-63 (2012).</li>
<li>Wang, L., Simpson, H. B., Dulawa, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+the+validity+of+current+mouse+genetic+models+of+obsessive-compulsive+disorder%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Assessing the validity of current mouse genetic models of obsessive-compulsive disorder.</a> Behav. Pharmacol. 20, 119-133 (2009).</li>
<li>Joel, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+animal+models+of+obsessive+compulsive+disorder%3A+a+critical+review%5BTitle%5D)+AND+%22Prog.+Neuropsychopharmacol.+Biol.+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Current animal models of obsessive compulsive disorder: a critical review.</a> Prog. Neuropsychopharmacol. Biol. Psychiatry. 30, 374-388 (2006).</li>
<li>Witkin, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+obsessive-compulsive+disorder%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Protoc.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Animal models of obsessive-compulsive disorder.</a> Curr. Protoc. Neurosci. 30, 1-9 (2008).</li>
<li>Deacon, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Digging+and+marble+burying+in+mice%3A+simple+methods+for+in+vivo+identification+of+biological+impacts%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Protoc%22%5BJournal%5D)">Digging and marble burying in mice: simple methods for in vivo identification of biological impacts.</a> Nat. Protoc. 1, 122-124 (2006).</li>
<li>Moy, S. S., Nadler, J. J., Magnuson, T. R., Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+models+of+autism+spectrum+disorders%3A+the+challenge+for+behavioral+genetics%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Med.+Genet.+C+Semin.+Med.+Genet%22%5BJournal%5D)">Mouse models of autism spectrum disorders: the challenge for behavioral genetics.</a> Am. J. Med. Genet. C Semin. Med. Genet. 142, 40-51 (2006).</li>
<li>Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+behavioral+assays+relevant+to+the+symptoms+of+autism%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Pathol%22%5BJournal%5D)">Mouse behavioral assays relevant to the symptoms of autism.</a> Brain Pathol. 17, 448-459 (2007).</li>
<li>Silverman, J. L., Yang, M., Lord, C., Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioural+phenotyping+assays+for+mouse+models+of+autism%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Behavioural phenotyping assays for mouse models of autism.</a> Nat. Rev. Neurosci. 11, 490-502 (2010).</li>
<li>Angoa-Perez, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+depletion+of+brain+5HT+reveals+a+common+molecular+pathway+mediating+compulsivity+and+impulsivity%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurochem%22%5BJournal%5D)">Genetic depletion of brain 5HT reveals a common molecular pathway mediating compulsivity and impulsivity.</a> J. Neurochem. 121, 974-984 (2012).</li>
<li>Kane, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mice+genetically+depleted+of+brain+serotonin+display+social+impairments%2C+communication+deficits+and+repetitive+behaviors%3A+possible+relevance+to+autism%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Mice genetically depleted of brain serotonin display social impairments, communication deficits and repetitive behaviors: possible relevance to autism.</a> PLoS One. 7, (2012).</li>
<li>Deacon, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+nest+building+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Protoc%22%5BJournal%5D)">Assessing nest building in mice.</a> Nat. Protoc. 1, 1117-1119 (2006).</li>
<li>Thomas, D. M., Angoa Perez,, Francescutti-Verbeem, D. M., Shah, M. M., Kuhn, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+endogenous+serotonin+in+methamphetamine-induced+neurotoxicity+to+dopamine+nerve+endings+of+the+striatum%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurochem%22%5BJournal%5D)">The role of endogenous serotonin in methamphetamine-induced neurotoxicity to dopamine nerve endings of the striatum.</a> J. Neurochem. 115, 595-605 (2010).</li>
<li>Gyertyan, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+the+marble+burying+response%3A+marbles+serve+to+measure+digging+rather+than+evoke+burying%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Analysis of the marble burying response: marbles serve to measure digging rather than evoke burying.</a> Behav. Pharmacol. 6, 24-31 (1995).</li>
<li>Thomas, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Marble+burying+reflects+a+repetitive+and+perseverative+behavior+more+than+novelty-induced+anxiety%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Marble burying reflects a repetitive and perseverative behavior more than novelty-induced anxiety.</a> Psychopharmacology. 204, 361-373 (2009).</li>
<li>Hayashi, E., Kuratani, K., Kinoshita, M., Hara, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacologically+distinctive+behaviors+other+than+burying+marbles+during+the+marble+burying+test+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Pharmacologically distinctive behaviors other than burying marbles during the marble burying test in mice.</a> Pharmacology. 86, 293-296 (2010).</li>
</ol>

המחברים מצהירים שאין להם אינטרסים פיננסיים מתחרים.

מבחני קבורת השיש וגריסת הקן הם דוגמאות טובות לשיטות התנהגותיות לחקר התנהגויות חוזרות וכפייתיות בעכברים. שני המבחנים מראים פנים מצוינים, מבנה ותוקף ניבוי להפרעות אנושיות שהם מודלים6-11. התנהגויות חוזרות אלו הן טבעיות וספונטניות במכרסמים ותדירותן ועוצמתן יכולות להשתנות לאחר שינויים גנטיים, כפי שמוצג כיום, או לאחר פגיעת ראש וטיפול בנבדקים בתרופות. הערך של שני המבחנים הללו נובע מהעובדה שהם מודלים מתוקפים של הפרעות פסיכיאטריות אנושיות כמו OCD ו-ASD, שניהם כרוכים בביטוי של התנהגויות חוזרות ונשנות ולא רצויות. שתי הבד...

מודלים עכבריים של התנהגויות אנושיות, ובמיוחד הפרעות פסיכיאטריות, מהווים גישות ניסיוניות חשובות וחיוניות לחקר מנגנוני מחלה ולפיתוח טיפולים חדשים. מחלות פסיכיאטריות רבות נותרו קשות מאוד למודלים בבעלי חיים (למשל סכיזופרניה). עם זאת, בעלי חיים מציגים מספר רב של התנהגויות טבעיות וייחודיות שניתן לקשר בקלות להתנהגויות דומות אצל בני אדם. תנועה או פעילות תנועתית היא דוגמה אחת להתנהגות אצל בעלי חיים שיש לה מקבילה בבני אדם. מכרסמים עוסקים לעתים קרובות במגוון התנהגויות שחוזרות על עצמן ודוגמאות כוללות טיפוח או חפירה. מצב פסיכיאטרי אחד הכרוך בהצגת התנהגויות חוזרות ולא רצויות בבני אדם הוא הפרעה טורדנית-כפייתית (OCD). התנהגויות האופייניות מאוד ל-OCD כוללות בדיקה, ספירה ושטיפה או טיפוח מוגזמים. OCD היא הפרעה פסיכיאטרית שכיחה מאוד (משפיעה על 1-3% מהאוכלוסייה) ומתישה1. מספר רב של גישות פרמקולוגיות והתנהגותיות שימשו לטיפול ב-OCD. רבים מהם אינם מספקים הקלה לטווח ארוך והישנות שכיחה בסוף משטר טיפול2,3. מצב פסיכיאטרי נוסף הכרוך בביטוי התנהגויות חוזרות ונשנות הוא הפרעת הספקטרום האוטיסטי (ASD). ASD מאופיינים בליקויים בתקשורת ובאינטראקציה חברתית ובהתנהגויות חוזרות ונשנות וסטריאוטיפיות הכוללות ספינינג, נדנדה, תנועות אצבעות או נפנוף ותנועות גוף מורכבות. המרכזים לבקרת מחלות ומניעתן העריכו כי כ-1 מכל 88 ילדים מאובחן עם ASD. אפשרויות הטיפול בהפרעה זו מוגבלות ביותר במספרן וביעילותן4,5. העוצמה והתדירות של התרחשותן של התנהגויות חוזרות ונשנות ב-OCD ו-ASD יכולות להיות גדולות מספיק כדי להחליף את רוב ההתנהגויות הנורמליות והאינטראקציות החברתיות האחרות בחולים עם מצבים אלה. לאור השכיחות והאופי המתיש של מצבים פסיכיאטריים המאופיינים בהתנהגויות חוזרות, ובהתחשב בהבנה הלקויה של הגורמים להם ואפשרויות הטיפול המוגבלות, השימוש במודלים של בעלי חיים לחקר התנהגויות אלה מקבל דחיפות נוספת.
מספר רב של מודלים של בעלי חיים של התנהגויות חוזרות ונשנות כפי שניתן לראות ב-OCD ו-ASD פותחו במהלך 30 השנים האחרונות וסקירות מצוינות רבות המתארות מודלים אלה פורסמו6-14. באופן כללי, ניתן לסווג את המודלים המבוססים הללו כגנטיים, פרמקולוגיים, נוירו-התפתחותיים והתנהגותיים ורובם מראים פנים טובות, מבנה ותוקף ניבוי6,7. השתמשנו בשני מודלים התנהגותיים - קבורת שיש וגריסת קינון - כדי להעריך התנהגויות חוזרות ונשנות בעכברים שהתרוקנו גנטית מסרוטונין15,16. לשיטות אלו יתרונות רבים, לא פחות מהם הם קלות השימוש בהן, הדיוק שבו ניתן לנקד את ההתנהגויות, התצוגה הספונטנית של התנהגויות אלה במכרסמים, והשימוש בהן בסינון תפוקה גבוהה של עכברים מהונדסים גנטית לפנוטיפים התנהגותיים חריגים. יתר על כן, כל בדיקה מתבצעת בכלובי שיכון מכרסמים סטנדרטיים ומוכרים המכילים את אותם מצעים המשמשים בכלובים הביתיים של הנבדקים, מה שממזער את הצורך בהרגלת עכברים לתאי בדיקה חדשים. הגבלת מזון ו/או מים אינה נדרשת כדי "להניע" עכברים להופיע. מבחן קבורת השיש מנצל את הנטייה של עכברים לחפור בסביבות טבעיות (למשל מחילות, מנהרות מילוט) ובמצעי כלוב סטנדרטיים, ומבחן גריסת הקן מנצל את העובדה שעכברים הם בעלי חיים מקננים מטבעם הבונים קינים להגנה על עצמם ועל צאצאיהם מפני תנאי הסביבה (למשל.צליל, אור, טמפרטורה). באמצעות חומרי דיור למכרסמים לא מיוחדים וזמינים בדרך כלל, משימות קבורת השיש וגריסת הקן הן מבחנים התנהגותיים פשוטים וחזקים של התנהגויות חוזרות ונשנות דמויות כפייתיות בעכברים.

<table><tbody><tr><td>זכוכית צעצוע שיש</td><td>חנות צעצועים מקומית</td><td>N/A</td><td>סגנונות מגוונים, צבעים, ברורים ואטומים</td></tr><tr><td>Nestlets</td><td>Ancare</td><td>NES3600</td><td></td></tr><tr><td>N10 כלוב עכבר מסדרת</td><td>Ancare</td><td>N10HT</td><td>כלוב מכרסמים סטנדרטי עם חוט עליון</td></tr><tr><td>R20 כלוב עכברוש מסדרת R20</td><td>Ancare</td><td>R20</td><td>כלוב מכרסמים סטנדרטי עם חוט עליון</td></tr><tr><td>Bed-o'Cobs</td><td>The Andersons</td><td>8B</td><td>מצעי מכרסמים סטנדרטיים בתפזורת, 1/8 אינץ'</td></tr></tbody></table>

קבורת שיש וnestlet רטוש כבדיקות של התנהגויות חוזרות, כמו כפייתיות בעכברים

Marble Burying and Nestlet Shredding as Tests of Repetitive, Compulsive-like Behaviors in Mice

הפרעה טורדנית-כפייתית (OCD) והפרעות על הספקטרום האוטיסטי (ASD) הן מצבים פסיכיאטריים חמורים ומתישים וכל אחד מהם מהווה דאגה משמעותית לבריאות הציבור, במיוחד אצל ילדים. שני המצבים הללו מודגשים על ידי ביטוי חוזר ונשנה של התנהגויות חסרות משמעות. אנשים עם OCD מראים לעתים קרובות בדיקה, שטיפת ידיים תכופה וספירה. ילדים עם ASD עוסקים גם בנקישות חוזרות ונשנות, נפנוף בזרוע או ביד ונדנדה. התנהגויות אלה יכולות להשתנות מאוד בעוצמה ובתדירות הביטוי. צורות אינטנסיביות יותר של התנהגויות חוזרות עלולות אפילו לגרום לפציעה (למשל טיפוח מוגזם, שטיפת ידיים וגירוי עצמי). לכן התנהגויות אלו מפריעות מאוד ומקשות על שיח חברתי נורמלי. אפשרויות הטיפול בהתנהגויות חוזרות ונשנות ב-OCD וב-ASD מוגבלות במקצת ויש עניין רב בפיתוח טיפולים יעילים יותר לכל מצב. מודלים רבים של בעלי חיים להערכת התנהגויות דמויות כפייתיות פותחו במהלך שלושת העשורים האחרונים. אולי דגמי בעלי החיים עם התוקף וקלות השימוש הגדולים ביותר הם מבחן קבורת השיש ומבחן גריסת הקינון. שתי הבדיקות מנצלות את העובדה שהתנהגויות המטרה מתרחשות באופן ספונטני בעכברים. במבחן קבורת השיש מסודרים 20 גולות על פני מצעים נקיים. מספר הגולות שנקברו בפגישה של 30 דקות נקבע על ידי חוקרים עיוורים לטיפול או למצב של הנבדקים. במבחן גריסת הקינים, נשקל מראש קן המורכב מסיבי כותנה עיסת ומונח על גבי מצעי הכלוב ונקבעת כמות הקנסט שנותרה שלמה לאחר מפגש בדיקה של 30 דקות. כיום, אנו מתארים פרוטוקולים ומציגים תיעוד סרטים של קבורת שיש וגריסת קינון. שני המבחנים מקבלים ניקוד קל ומדויק וכל אחד מהם רגיש לשינויים קטנים בביטוי של התנהגויות דמויות כפייתיות הנובעות ממניפולציות גנטיות, מחלות או פגיעת ראש.

יתרון מרכזי של מבחני קבורת הגולמיות וגריסת ה-nestlet הוא העובדה שכל אחד מהם נסמך על התנהגויות טבעיות וספונטניות של עכברים שניתן לכמת לאחר השלמת הבדיקה, מה שמאפשר לחוקר בודד להכין את הניסוי ולאחר מכן להישאר מחוץ לחדר הבדיקה עד לסיום המפגשים. מרכיב קריטי במבחן קבורת הגולמיות הוא ההוצאה זהירה של הנבדק מהכלוב לאחר הבדיקה. עכברים נוטים בדרך כלל לנסות להימנע מתפיסה ובמהלך התהליך עלולים להזיז או להוציא גולמיות שהיו קבורות חלקית, או לקבור חלקית גולמיות שלא היו קבורות בסוף מפגש הבדיקה. איור 1A מראה כלוב בדיקה רגע...

מחלה, פגיעת ראש, שינויים גנטיים וטיפול בעכברים בתרופות יכולים להיות בעלי השפעות עמוקות על ההתנהגות. תוך שימוש בגישות מאופיינות ומתוקפות היטב כגון קבורת שיש וגריסת קינון, ניתן לתעד במדויק התנהגויות דמויות כפייתיות בעכברים כמודלים של הפרעה טורדנית-כפייתית אנושית והפרעת הספקטרום האוטיסטי.

קבורת שיש וNestlet רטוש כבדיקות של התנהגויות חוזרות, כמו כפייתיות בעכברים

Obsessive-compulsive disorder (OCD) and autism spectrum disorders (ASD) are serious and debilitating psychiatric conditions and each constitutes a ...

המטרה הכוללת של פרוצדורה זו היא להדגים את הפשטות של קבורת גוליות וגריסת חומרי קינון כפרדיגמות מהימנות להערכה ולהדגמה של התנהגויות חזרתיות וכפייתיות. במכרסמים, עבור מבחן קבורת הגוליות, מכינים כלוב עם 20 גוליות המפוזרות במרווחים שווים על פני השכבה התחתונה של הכלוב. לאחר מכן מכניסים את העכבר לכלוב ומשאירים אותו ללא הפרעה עם הגוליות למשך 30 דקות.לאחר זמן זה, מוציאים את העכבר וסופרים את הגוליות הקבורות עבור מבחן ה-Nestle. לפני הכנסת העכבר, מניחים בכלוב קן Nestle שלם. לאחר 30 דקות, מוציאים את העכבר ומניחים ל-Nestle להתייבש למשך הלילה לפני חישוב אחוז השרידה של ה-Nestle.בסופו של דבר, ניתן להראות הבדלים בהתנהגות של גלגול גוליות, קבורה וגריסת קינון בין עכברים עם נוקאאוט לעכברים מסוג בר. את הפרוצדורות ידגימו דניס בריגס, סטודנטית לתואר שני, מריאנה אנגו פרז, פוסט-דוקטורנטית, ודין דה פרנצ'סקוטטי, עמית מחקר מהמעבדה שלי. כל בעלי החיים נשמרים במחזור של 12 שעות אור וחושך עם גישה חופשית למזון ולמים.לקבלת התוצאות הטובות ביותר, יש לטפל בכל עכבר בעדינות פעם אחת ביום, במשך שלושה עד חמישה ימים לפני הבדיקה. כאשר בעלי החיים מוכנים לבדיקה, יש להעביר את הכלובים לחדר הבדיקות 60 דקות לפני תחילת הבדיקה הראשונה.עבור בדיקת נשיאת הגוליות, השתמשו בכלובי חולדה סטנדרטיים מפוליקרבונט עם מכסי סינון מותאמים. הוסיפו לכל כלוב חומר מצע טרי ולא מבושם לעכביות של חמישה סנטימטרים והשוו את פני השטח של המצע על ידי הכנסת כלוב נוסף באותו גודל. לשיטה זו יתרון נוסף של יצירת תבנית של קווים מקבילים על פני השטח של המצע.שטפו.יש לשטוף היטב גוללי זכוכית סטנדרטיים במ detergent מעבדתי עדין, לשטוף במים מזוקקים ודה-יוניים ולייבש לפני כל שימוש. כאשר הם מוכנים, יש ללחוץ בעדינות את הגול lilies לתוך פני השטח של מצע המגורים. יש להכין שעוני עצר או טיימרים לתזמון המפגשים, בסידור של חמש שורות של ארבעה גוללי זכוכית בכל שורה.כדי להתחיל את הבדיקה, הפנו את העכבר לכיוון פינת הכלוב, רחוק ככל האפשר מהגוליות. הניחו את מכסה המסנן על הכלוב והשאירו את העכבר ללא הפרעה עם הגוליות למשך 30 דקות. בתום תקופת הבדיקה, הוציאו את העכבר והחזירו אותו לכלוב הבית שלו.הקפידו מאוד שלא להזיז או להוציא מהמקום את הגוליות במהלך הוצאת הנבדק מהכלוב. לאחר מכן, שניים עד שלושה חוקרים שאינם מודעים לתנאי הטיפול יעריכו את מספר הגוליות הקבורות. גוליה תיספר כקבורה.אם שני שלישים משטח הפנים מכוסים במצע, חשב את הממוצע של הציונים עבור מספר הגוליות שנקברו עבור כל עכבר. לבסוף, הוצא את כל 20 הגוליות והשלך את המצע. השתמש בכלובי עכברים סטנדרטיים מפוליקרבונט עם מכסי סינון מותאמים.עבור מבחן בניית הקן (Nestle), הוסיפו לכל כלוב חומר מצע טרי ולא מבושם לעכברים לעומק של 0.5 סנטימטרים ודחסו את המצע כפי שהודגם קודם לכן. לאחר מכן, שקלו רפידות כותנה מסחריות לבניית קן והניחו רפידה אחת על גבי המצע. בכל כלוב ניסוי, הכינו שעוני עצר או טיימרים לצורך תזמון הסשן.כאשר העכבר מוכן, הניחו אותו באחת מפינות הכלוב כשהוא פונה אל הקיר. הניחו את מכסה המסנן על הכלוב והשאירו את העכבר ללא הפרעה עם ה-Nestle למשך 30 דקות. בתום זמן זה, הוציאו את העכבר והחזירו אותו לכלוב המגורים שלו.הסיר מהכלוב את שאריות חומר קינון הקן שנשאר שלם והשאר אותו לייבוש למשך לילה. למחרת, שקול את חומר הקינון שלא גרוס וחלק משקל זה במשקל ההתחלתי כדי לחשב את אחוז גריסת חומר הקינון.לבסוף, יש להשליך את שאריות חומר בניית הקן הגרוס ואת המצע. מוצגות כאן כלובים מייצגים לפני ואחרי מבחן קבורת הגוליות. כאשר נבדקו עכברים מסוג בר (wild type), גוליות מעטות נקברו או הוזזו ממיקומן הראשוני.עם זאת, עכבר ה-TPH two knockout קבר 17 מתוך 20 הגוליות. הגוליות שנותרו לא קבורות מסומנות בחצים. מבט זה מהצד מדגים שינויים במשטח המצע.לאחר הבדיקה, השוו את פני השטח שנותרו ללא הפרעה יחסית בכלובי סוג הבר (wild type) למשטח הבלתי אחיד המכיל שקעים ופסגות גדולות אצל בעלי החיים עם נוק-אאוט (knockout). ביצועים טיפוסיים במבחן קבורת הגוליות מסוכמים כאן. עכברי נוק-אאוט של TPH two קברו משמעותית יותר גוליות בהשוואה לעכברי סוג בר.תמונות אלו מציגות קני קינון מייצגים לאחר גריסה. כאן נראה כי קנים של עכברים מסוג בר (wild type) מראים כמויות קטנות של גריסה בהשוואה לקני הקינון מכלובי עכברים עם נוק-אאוט של TPH two. גרף זה מציג את הביצועים הטיפוסיים של עכברים מסוג בר ועכברים עם נוק-אאוט של TPH two במבחן גריסת הקן.עכברים עם נוק-אאוט של TPH two גורסים משמעותית יותר מחומר Nestle מאשר עכברים מסוג wild type. לאחר רכישת מיומנות, ניתן לבצע טכניקות אלו תוך שעתיים אם הן מבוצעות כראוי. בעת ביצוע הליך זה, חשוב לזכור להישאר עקביים עם הקריטריונים להגדרת גולה כקבורה, ולהסיר חתיכות גרוסות של Nestle מהשארית היבשה שאינה גרוסה.בעקבות הליך זה, ניתן להזריק לעכברים תרופות המשמשות לטיפול בהפרעות טורדניות-כפייתיות בבני אדם, כגון SSRIs, וזאת כדי לקבוע אם תרופות אלו מפחיתות התנהגויות דמויות-כפייה בעכברים.

marble-burying-nestlet-shredding-as-tests-repetitive-compulsive-like

Research

JoVE Journal

Behavior

התנהגות

מתחפרת, קינון אגירה הם מינים טיפוסי פעילויות עכברים בקלות לבצע במעבדה. מאמר זה מתאר כיצד הם יכולים להעריך בקלות ובזול. פרוטוקולים אלה רגישים במיוחד זן העכבר, נגעים במוח ומחלות. יתר על כן הם מהווים "העשרה סביבתית" לעכברים, ואת לגלם את "חידוד" היבט של "3 Rs" 18.

הערכת מתחפרת, בניית קן, ו אגירה של עכברים

Inchworming היא תנועת חפירת סינכרוני חוזרת מאוד מוצגת על ידי עכברי BTBR T + Itpr 3tf / J (BTBR) כאשר הניחו בכלוב בדיקות עם מצעי נסורת מספיקים. ההליך הוא שינוי של פרוטוקול האינטראקציה חברתית לנוער ומשמש כאן על מנת להעריך stereotypies המוטורי חוזר על עצמו רלוונטי להפרעת ספקטרום האוטיזם.

Inchworming: מוטורי סטריאוטיפי רומן בBTBR<em&gt; T<sup&gt; +</sup&gt; Itpr3<sup&gt; TF</sup</em&gt; / J מודל עכבר של אוטיזם

התנהגויות מוגבלות וחוזרות על עצמן מסדר גבוה יותר משבשות את חייהם של אנשים מושפעים.  התנהגויות אלה מאתגרות למידול במכרסמים, מה שמקשה על מחקר ביו-רפואי בסיסי על טיפולים או התערבויות פוטנציאליים ל-RRBs.  כאן אנו מתארים חקר אובייקטים חדשים כמבחן פוטנציאלי ל-RRBs מסדר גבוה יותר בעכברים.

חיפושי אובייקט רומן בתור Assay פוטנציאל התנהגויות חוזרות מסדר גבוה של עכברים

תיאר כאן היא מבוימת, התנהגות ההקרנה התנהגותית שניתן להשתמש בהם כדי המסך עבור תרכובות כי התערוכה יעילות vivo על התנהגויות מוטוריות קוגניטיבית ופונקציונלית מודלים עכבר מהונדס של עמילואידוזיס β ו tauopathy. שיטות אלה מותאמות לתצוגת תרכובות עבור פעילות במשימות זיכרון לטווח קצר ולזיכרון עבודה.

הערכה של חלופה ספונטנית, זיהוי אובייקטים רומנטי ו Clbing איברים מודלים עכבר מהונדס של Amyloid-β ו נוירופתולוגיה טאו

פרוטוקול זה מודד מרחבי למידה וזיכרון באמצעות המבוך בארנס. פרדיגמה עלמה במצוקה הרומן משמשת להערכת פעילות גינקולוגיות והתנהגות פרוסוציאלית בעכברים.

ניתוח מרחבי למידה והתנהגות פרוסוציאלית בעכברים באמצעות בארנס מבוך פרדיגמות עלמה במצוקה

סוללה מבחן התנהגותי מקיף של מיומנויות מוטוריות, רוח — לרבות אינטראקציה חברתית, דיכאון וחרדה – קוגניציה מיועד המבדק חוזרות ונשנות של שינויים התנהגותיים הקשורים ניוון מוחיים הקשורים בעכברים.

סוללה בדיקה התנהגותית להערכה חוזרת ונשנית של מיומנויות מוטוריות, מצב רוח, קוגניציה בעכברים

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לכמת התנהגות בניין בעכברים, אשר ידוע כי לקויי מספר הפרעות נוירולוגיות ומחלות. פרוטוקול זה בוחן את כלי השירות של ארבעה חומרים ומציע את ההזדמנות לכמת את הסכם ה-דרג בניקוד, שיפור התוקף והאמינות של השיטת.

קן התנהגות בניין כאינדיקציה מוקדמת של התנהגות בעכברים

כתב יד זה מציג סדרה של מבחנים התנהגותיים הניתנים לשחזור כדי לאמת מודל עכבר של תסמונת אנג'למן.

אפיון התנהגותי של מודל עכבר תסמונת אנג'למן

מודלים של מכרסמים הם כלים רבי ערך לחקר התנהגויות ליבה הקשורות להפרעת הספקטרום האוטיסטי (ASD). במאמר זה, אנו מסבירים על שני מבחנים התנהגותיים למידול מאפייני הליבה של ASD בעכברים: טיפוח עצמי, המעריך התנהגות חוזרת, ומבחן אינטראקציה חברתית בן שלושה חדרים, המתעד ליקויים חברתיים.

אסטרטגיות להערכת התנהגויות דמויות אוטיסטיות בעכברים

מודל אכילה מופרזת הוקם בעכברים באמצעות גישה לסירוגין ל-M&amp;M's (מזון טעים מאוד העשוי משומן וסוכר). עכברים עם גישה לסירוגין למזון עתיר שומן וסוכר זה הראו התנהגויות דמויות לחץ, צריכת קלוריות מוגברת והעדפה למזון זה על פני צ'או רגיל בהשוואה לעכברים עם גישה רציפה או ללא גישה למזון.

מודל צריכת בולמוס לסירוגין בעכברים

כאן, אנו מציגים פרוטוקול להשראת היפוקסיה בעכברים יילודים על ידי מסירתם בסביבות מבוקרות עם ריכוזי חמצן משתנים. מודלים של עכברים שנחשפו לשינויי חמצן בלידה שינו לאורך זמן את הביטוי של miRNAs המעורבים באינדוקציה של שינויים פנוטיפיים התנהגותיים כגון אוטיזם.

היפוקסיה משנה את רמות ה-miRNAs המעורבים בתורשה לא מנדלית של הפרעת הספקטרום האוטיסטי בעכברים

חקור שיטות פשוטות להערכת התנהגויות כפייתיות בעכברים באמצעות מבחני קבורת שיש וקריעת Nestlet. שיטות אלו מספקות מדדים כמותיים לחקר הפרעות נפשיות אנושיות כמו הפרעה טורדנית כפייתית ואוטיזם.

קבורת שיש וNestlet רטוש כבדיקות של התנהגויות חוזרות, כמו כפייתיות בעכברים

גלה סרטונים נוספים