29 ביוני 2014
אנו מתארים הליך בשלבים ליצירת עומס יתר לחץ והיפרטרופיה של חדר שמאלי בחולדות Wistar ידי התכווצות של אב העורקים עולים באמצעות קליפ מתכתי קטן. דגם זה נעשה שימוש נרחב ללימוד שינויי שיפוץ במהלך היפרטרופיה לבבית ולזיהוי והערכה של אסטרטגיות לנסיגה של שינויים כאלה.
היי, אני אג'י קומאר GS מהחטיבה לביולוגיה של מחלות לב וכלי דם ראג' גנדי, המרכז לביוטכנולוגיה בהודו. אני עובד בהנחיית תהליך קרתא ובסרטון זה נדגים הליך שלב אחר שלב לבניית I OTE עולה בחולדות. במעבדה שלנו, אנו משתמשים במודל שנתי זה כדי לחקור את הפתופיזיולוגיה והמנגנונים המולקולריים הבסיסיים בהיפרטרופיה של הלב ואי ספיקת לב מתקדמת.
אנו משתמשים במודל זה גם כדי לחקור יתר לחץ דם ריאתי הקשור לאי ספיקת לב. אז בואו נתחיל ונאסתטי את החיה ונשמור אותה במצב שכיבה. בצע אינטובציה אנדוטרכיאלית על ידי ביצוע חתך באמצע הדרך בין שתי טבעות קנה הנשימה והחדרת צינורית קנה הנשימה, אשר בתורה מחוברת למאוורר מכרסמים.
לאחר מכן בצע חתך עור באורך של כשני סנטימטרים באזור החזה השמאלי בין הצלעות השנייה והשלישית והפריד את שכבות השריר. כדי לדמיין את התכווצות היוטה של החלק העולה של היוטה יש לבצע באמצעות קליפ טיטניום בגודל קטן עם מוליך, להתנגד לצלעות ואז לתפור את שכבות השריר והעור בתבנית מופרעת. לאחר הסרת הצינור האנדוטרכיאלי, סגור את שריר קנה הנשימה, השכבות והעור ואפשר לבעל החיים להתאושש.
ההליך נעשה לאחר קבלת אישור מוועדת האתיקה המוסדית לבעלי חיים. לפני הניתוח יש לחטא את שדה הניתוח ב-70% אלכוהול ולשמור על כרית החימום באופן אספטי. שמור את מכונת ההנשמה ויחידת ההרדמה של המכרסמים מוכנים לניתוח.
עקר את המכשירים הכירורגיים על ידי חיטוי. כלים כירורגיים עיקריים להתכווצות אוטית עולה הם כפפות סטריליות, מלקחיים לאגודל, מספריים, להבים כירורגיים, קליפסים טיטניום בגודל קטן ומלקחיים עורק אפליקטור עם גזה במקרה של דימום, חומר תפר פרולין מחזיק מחט, תפר משי קלוע ומחט. שמור על החולדה תחת מטריה אנטיביוטית למשך 24 שעות ואסתטי את החולדות בתא אינדוקציה עם 3% ISO פלואור מעורבב עם מאה אחוז חמצן.
הסר את הפרווה מקו הצוואר ומאזור החזה השמאלי של החולדה והשאר את החיה בראש. כרית חימום. שמור על ההרדמה עם רפלקס דוושת בדיקת פלואוריד ISO של 1.5% לאישור הרדמה מוצלחת.
יש לחטא את אזור הניתוח בתמיסת יוד פובידון ואחריה 70% אלכוהול. חזור על ההליך שלוש פעמים. הניחו וילון סטרילי על החיה וחושפים את מקום הניתוח בלבד.
בצע חתך בעור במקביל לקנה הנשימה והפרד את הרקמה הבסיסית. על מנת לחשוף את קנה הנשימה. מרחו עניבת חוט משי מתחת לקנה הנשימה והרימו אותה בעדינות כלפי מעלה.
בצע חתך באמצע הדרך בין שתי טבעות סחוס והכנס את צינורית קנה הנשימה. חבר את צינורית קנה הנשימה למאוורר מכרסמים. יש לכוון את מכונת ההנשמה לקצב נשימה של 50 נשימות בדקה.
נפח גאות 1.7 מ"ל והשראה כפול 0.6 שניות. בצע חתך באזור החזה השמאלי בין הצלעות השנייה לשלישית. יש להפריד את השרירים הבין-צלעיים שכבה אחר שכבה.
יש להקפיד על מניעת פגיעה בריאות בזמן ביצוע החתך בין הצלעות. לאחר נסיגת הצלעות, אתר בזהירות את החלק העולה של היוטה על ידי מניפולציה עדינה של רקמת השומן. החץ מציין את החלק העולה של האיוטה.
הניחו קליפ טיטניום בגודל קטן סביב היוטה העולה בעזרת אפליקטור, ובכך צמצמו את היוטה ב-50 עד 60% מהקוטר המקורי. לאחר התכווצות אוטית, מקם מחדש את הלב וקירב את הצלעות עם תפר פרולין השהה בו זמנית את מכונת ההנשמה למשך כשתיים עד ארבע שניות על מנת לנפח מחדש את הריאות. הצב את השרירים בשכבות עם פרולין, ואחריו עור עם תפרי משי בתבנית תפר קטועה.
הפחת בהדרגה את קצב הנשימה שנקבע במכונת ההנשמה והתבונן בבעל החיים לנשימה ספונטנית. הסר את צינורית קנה הנשימה לאחר שהנשימה הספונטנית והסדירה הוחזרה. כעת ההרדמה נשמרת דרך חרוט האף.
סגור את הפתח בין טבעות קנה הנשימה בעזרת תפרי פרולין. סגור את שכבות השרירים והעור בעזרת תפרי פרולין ומשי בהתאמה. מרחו תמיסת יוד פובידון על אזור הניתוח כהזרקת משככי כאבים לאחר הניתוח.
ניתן לתת תמיסת מלח תוך-צפקית של טרמדול תוך צפקית. אם מופיעים סימני התייבשות נמוכים בהדרגה ההרדמה למצב כבוי לאחר שהחיה מתאוששת, הועברה לכלוב ומתן אמוקסיצילין מעורבב דרך הפה עם מי שתייה למשך שבעה ימים. ניתן לקבוע את עוצמת עומס הלחץ הנוצר על ידי התכווצות של יוטה עולה על ידי התבוננות בשיפוע הלחץ על פני אתר ההתכווצות I otic על ידי אקו לב דו מימדי.
הפאנל השמאלי של האיור מראה הד דופלר של חולדה מכווצת אבי העורקים עם שיפוע לחץ של 63 מ"מ כספית. והפאנל הימני מייצג חולדה מבוקרת מזויפת ללא שיפוע לחץ משמעותי על פני האיוטה. הפאנל העליון מציג אקו לב במצב M של החדר השמאלי בחולדות, שמונה שבועות לאחר הניתוח, והפאנל התחתון מייצג בקרת דמה, עובי המחיצה הבין-חדרית ועובי הדופן האחורית של החדר השמאלי הוגדלו משמעותית בעוד שהקוטר הפנימי של החדר השמאלי הצטמצם משמעותית בחולדות שעברו התכווצות אוטית.
בהשוואה לקבוצות ביקורת שעברו ניתוח דמה, נצפתה היפרטרופיה לבבית משמעותית בחולדות שעברו התכווצות אוטית עולה לאחר שמונה שבועות של ניתוח בהשוואה לקבוצות ביקורת שבוצעו בדמה. היי, אני ראג'. כאן אנו מסבירים את הנוהל להתכווצות יוטה עולה בחולדה.
היתרון העיקרי של מודל זה הוא התפתחות הדרגתית של היפרטרופיה לבבית ואי ספיקת לב. בדומה למצב הקליני ביתר לחץ דם כרוני באם זו יש לנקוט בזהירות ביישום קליפ טיטניק לכיווץ היוטה. הדבר החשוב ביותר הוא שיישום קליפ טיטניק צריך להיות מספיק כדי לייצר התכווצות יוטה קריטית עבור 20 שמאל פלוס לחץ, אך לא חמור מספיק כדי לייצר כשל אלקטרוני חריף ובצקת ריאות ויש לנקוט בזהירות גם כדי למנוע כל פגיעה בריאות בזמן ביצוע חתך בין הצלעות.
יש להציב את מכונות ההנשמה למשך שלוש עד ארבע שניות תוך כדי התנגדות לצלעות על מנת לנפח מחדש את הריאות. אז תודה שצפיתם בסרטון הזה ובהצלחה בניסויים שלכם.
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים
מאמר זה מתאר הליך מדורג להשראת עומס לחץ והיפרטרופיה של החדר השמאלי בעכברי Wistar באמצעות היצרות של אבי העורקים העולה. מודל זה נמצא בשימוש נרחב לחקר היפרטרופיה לבבית ולהערכת אסטרטגיות פוטנציאליות לנסיגה.
הצרת אובטרה סשיידנטית (Ascending aortic constriction) בחולדות מספקת מודל פרה-קליני חסון להיפרטרופיה של הלב המושרית על ידי עומס לחץ, המאפשרת הפחתת סיכונים מכניסטיים ותיקוף של מטרות בתהליך גילוי תרופות למערכת לב-דם. מודל זה תומך בביטחון חיזוי למחקרים תרגומיים על ידי שחזור ההתחלה ההדרגתית של ההיפרטרופיה ואי-ספיקת הלב הנצפית בהיpertension כרונית. יכולת השחזור שלו ותוצאותיו הכמותיות הופכות אותו לבעל ערך למיון תיקי פיתוח ולבדיקת היפותזות טיפוליות בשלבים מוקדמים.
מודל זה משתלב ברצף שבין השלב הגילוי לשלב הפרה-קליני, ומגשר בין מחקרים מכניסטיים מוקדמים לתיקוף תרגומי של מועמדים לתרופות קרדיווסקולריות.