Name: עולה אבי העורקים תעוקה בחולדות ליצירת עומס יתר לחץ לב היפרטרופיה הדגם (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-06-29T14:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 18 s
Description: למדו שיטה ליצירת היפרטרופיה של החדר השמאלי בעכברושי Wistar באמצעות היצרות עורק הזרוע העולה. מודל זה מאפשר חקר מנגנוני שינויי הלב ואסטרטגיות טיפוליות אפשריות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

המחברים מודים מחלקה לביוטכנולוגיה, ממשלת הודו לתמיכה כספית של הפרויקט הזה. Ajith קומאר GS נתמכה במענק מחקר בכיר ממועצה למחקר המדעי ותעשייתי, ממשלת הודו וBinil ראג&#39; עם עמית מחקר בכיר מהמועצה ההודית למחקר רפואי, ממשלת הודו.

ניסויים בבעלי חיים בוצעו לאחר קבלת אישור מוועדת האתיקה בבעלי חיים המוסדית. חולדות Wistar שוכנו תחת אפל שעות 12 למחזור אור, טמפרטורה קבועה בחדר (24 ± 2 ° C) עם אוכל ומים כרצונך (כמו לכל הנחיות CPCSEA). 1) טיפול טרום ניתוחי והרדמה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שמור על עכברוש (משקל גוף כ 200 ג&#39;) תחת מטריית שעה 24 אנטיביוטיקה לפני הניתוח על ידי מתן דרך הפה אמוקסיצילין (מינון: 500 מ&quot;ג / ליטר מים). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעקר את כל כלים כירורגיים (כמו מספריים, מלקחיים, המוליך קליפ, מחטי תפר, ובעל מחט) על ידי מעוקר ב 121 מעלות צלזיוס למשך 15 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש בכרית חימום כדי לשמור על טמפרטורת הגוף של בעלי חיים ברחבי 37 ° C כדי למנוע ירידה מהירה בקצב לב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תשמור על עצמך כדי למנוע התייבשות של בעלי החיים לפני ובמהלך ניתוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדים את העכברוש בחדר אינדוקציה עם isoflurane 3% מעורבבים עם0.5-1.0 ליטר / דקה 100% חמצן; לשמור על הרדמה עם isoflurane 1.5%. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדוק את רפלקס הדוושה כדי לאשר הרדמה מוצלחת. </li></ol> 2) הכנה של האתר כירורגית <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שמור את העכברוש על גבי כרית חימום בטמפרטורה מבוקרת במצב שכיבה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקם גומייה על השיניים הקדמיות של החולדה כדי לשמור על בעלי החיים בעמדה, תוך שמירה על הרדמה עם חרטומו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסרת פרווה מהצוואר והשארתי את אזור החזה של העכברוש (רצוי בעזרת מכונת גילוח חשמלי). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחטא את האתר כירורגית עם פתרון povidone-יוד ואז עם 70% אתיל אלכוהול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש בוילון סטרילי כדי לחשוף את האתר כירורגית רק במהלך ההליך הניתוחי. הערה: כאופציה נוספת לטיפול בבעלי החיים, 0.25% Bupivicaine מזהה (2.5 מ&quot;ג / קילוגרם) יכול להיות משולב לפני חריטה בכל אתר חתך להרדמה / אלחוש מקומי. </li></ol> 3) קנו הנשימה אינטובציה בחולדה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעשות חתך קטן בעור במקביל לקנה הנשימה באמצעות להב כירורגי סטרילי ולהפריד בזהירות את הרקמה הבסיסית במטרה לחשוף את קנה הנשימה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל עניבה של 4-0 חוט תפר משי מתחת לקנה הנשימה ובעדינות להעלות את העניבה כלפי מעלה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעשות חתך חצי דרך בין שתי טבעות סחוס והכנס את הצינורית לקנה הנשימה לתוך קנה הנשימה של החולדה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר הסר את הבלוטות לקנה הנשימה לנשמת מכרסמים לשמירה על קצב נשימה של 50 נשימות / דקה, נפח גאות של 1.70 מיליליטר וזמן השראה של 0.60 שניות (לעכברוש עם משקל גוף 200 ג&#39;). </li></ol> 4) היצרות של אב עורקים עולה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר שחש את המיקום של הצלעות עם אצבעות, לעשות חתך בעור של כ 2 סנטימטר על קיר החזה השמאלי בין הצלעות השניה ושלישית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפרד את שכבת השרירים הבינה אחר שכבה ועושה חתך ארוך על 1.5 סנטימטר בין הצלעות השניה ושלישית. (טיפול צריך להיות לקחתn, כדי למנוע כל פגיעה הריאות בעת ביצוע חתך בין הצלעות) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחזור בו הצלעות ולאתר את החלק העולה של אב העורקים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח קליפ טיטניום בגודל קטן סביב האאורטה עולה בעזרת המוליך לפי הצרת אב העורקים ל50-60% מהקוטר המקורי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעקבות ההתכווצות של אב העורקים, בקירוב את הצלעות השניה ושלישית עם 3.0 prolene בדפוס תפר קטע. במקביל, להשהות את מכונת ההנשמה למשך כ 2-4 שניות כדי מחדש לנפח את הריאות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Appose שכבות השריר עם 3.0 תפרי prolene ועור עם 4.0 תפרי משי בדפוס תפר קטע. ניתן להשתמש בם תפרים נספגים שאינם סינטטיים במקום משי לתפירת העור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את הצינורית לקנה הנשימה מעכברוש נשימה אחת ספונטנית הוא הוקם מחדש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לסגור את הפתח קנה הנשימה עם 3.0 תפרי prolene ואת שכבת העור עם 4.0 תפרי משי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאפשר לבעלי החיים כדי להתאושש על tהוא חימום כרית ידי הורדת ההרדמה והנשמה סייעה הנשמה בהדרגה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אצל בעלי חיים שליטת דמה גיל בהתאמה, לבצע הנשמה ופתיחת בית חזה ללא היצרות של אב העורקים עולים. </li></ol> 5) טיפול שלאחר הניתוח <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחטא את אזור ניתוח עם פתרון povidone-יוד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כשיכוך כאבים שלאחר ניתוח, מזריק tramadol התוך peritoneally (משקל גוף 10 מ&quot;ג / קילוגרם / יום) במשך שבוע 1. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הזרק התוך peritoneally מלח רגיל סטרילי אם מופיעים סימני ההתייבשות לאחר הניתוח (כ 1 מיליליטר). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנהל amoxycillin דרך הפה, מעורבב עם מים לשתייה, לשבעה ימים (מינון: 500 מ&quot;ג / ליטר מים). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את כל תפרי משי שנותרו מעור הודעה 10 ימים מניתוח תחת הרדמה משאיפת. </li></ol> 6) אישור על תעוקה מוצלחת של עולה אב עורקים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע שני דופלר-אקו ממדי טרנס בית החזה כדי לקבוע את כוונותsity של עומס יתר לחץ המיוצר על ידי ההתכווצות של אב העורקים עולים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדים את חולדות שבוע אחד לאחר ניתוח כפי שתואר קודם לכן (שלב 1.5) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את מתמר אולטרסאונד במיקום של עצם החזה לעיל כדי להקליט את מפל לחץ על פני החלק המכווץ של אב העורקים עולים. הערה: חולדות עם שיפוע לחץ של כ -60 מ&quot;מ של כספית באתר המכווץ אב העורקים יהיו לפתח היפרטרופיה לבבית חמורה בכ 8-10 שבועות לאחר ניתוח. </li></ol>

<ol><li>Patten, R. D., Hall-Porter, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Small+animal+models+of+heart+failure%3A+development+of+novel+therapies%2C+past+and+present%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Heart+Fail%22%5BJournal%5D)">Small animal models of heart failure: development of novel therapies, past and present.</a> Circ Heart Fail. 2, 138-144 (2009).</li>
<li>Weinberg, E. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Angiotensin-converting+enzyme+inhibition+prolongs+survival+and+modifies+the+transition+to+heart+failure+in+rats+with+pressure+overload+hypertrophy+due+to+ascending+aortic+stenosis%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Angiotensin-converting enzyme inhibition prolongs survival and modifies the transition to heart failure in rats with pressure overload hypertrophy due to ascending aortic stenosis.</a> Circulation. 90, 1410-1422 (1994).</li>
<li>Schunkert, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+rat+cardiac+angiotensin+converting+enzyme+activity+and+mRNA+expression+in+pressure+overload+left+ventricular+hypertrophy.+Effects+on+coronary+resistance%2C+contractility%2C+and+relaxation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Increased rat cardiac angiotensin converting enzyme activity and mRNA expression in pressure overload left ventricular hypertrophy. Effects on coronary resistance, contractility, and relaxation.</a> J Clin Invest. 86, 1913-1920 (1990).</li>
<li>Hasenfuss, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+human+cardiovascular+disease%2C+heart+failure+and+hypertrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc+Res%22%5BJournal%5D)">Animal models of human cardiovascular disease, heart failure and hypertrophy.</a> Cardiovasc Res. 39, 60-76 (1998).</li>
<li>Litwin, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serial+echocardiographic-Doppler+assessment+of+left+ventricular+geometry+and+function+in+rats+with+pressure-overload+hypertrophy.+Chronic+angiotensin-converting+enzyme+inhibition+attenuates+the+transition+to+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Serial echocardiographic-Doppler assessment of left ventricular geometry and function in rats with pressure-overload hypertrophy. Chronic angiotensin-converting enzyme inhibition attenuates the transition to heart failure.</a> Circulation. 91, 2642-2654 (1995).</li>
<li>Miyamoto, M. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adenoviral+gene+transfer+of+SERCA2a+improves+left-ventricular+function+in+aortic-banded+rats+in+transition+to+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Adenoviral gene transfer of SERCA2a improves left-ventricular function in aortic-banded rats in transition to heart failure.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 97, 793-798 (2000).</li>
<li>Kagaya, Y., Hajjar, R. J., Gwathmey, J. K., Barry, W. H., Lorell, B. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+angiotensin-converting+enzyme+inhibition+with+fosinopril+improves+depressed+responsiveness+to+Ca2%2B+in+myocytes+from+aortic-banded+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Long-term angiotensin-converting enzyme inhibition with fosinopril improves depressed responsiveness to Ca2+ in myocytes from aortic-banded rats.</a> Circulation. 94, 2915-2922 (1996).</li>
<li>Del Monte, F., Butler, K., Boecker, W., Gwathmey, J. K., Hajjar, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+technique+of+aortic+banding+followed+by+gene+transfer+during+hypertrophy+and+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Genomics%22%5BJournal%5D)">Novel technique of aortic banding followed by gene transfer during hypertrophy and heart failure.</a> Physiol Genomics. 9, 49-56 (2002).</li>
<li>Turcani, M., Rupp, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+failure+development+in+rats+with+ascending+aortic+constriction+and+angiotensin-converting+enzyme+inhibition%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Heart failure development in rats with ascending aortic constriction and angiotensin-converting enzyme inhibition.</a> Br J Pharmacol. 130, 1671-1677 (2000).</li>
<li>Kerem, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lung+endothelial+dysfunction+in+congestive+heart+failure%3A+role+of+impaired+Ca2%2B+signaling+and+cytoskeletal+reorganization%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Lung endothelial dysfunction in congestive heart failure: role of impaired Ca2+ signaling and cytoskeletal reorganization.</a> Circ Res. 106, 1103-1116 (2010).</li>
<li>Almeida, A. C., van Oort, R. J., Wehrens, X. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transverse+aortic+constriction+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Transverse aortic constriction in mice.</a> J Vis Exp. (38), (2010).</li>
</ol>

יש המחברים אין לחשוף.

ישנם מספר דגמים כירורגית לאינדוקציה של עומס יתר לחץ כמו גם היפרטרופיה של הלב ואי ספיקת לב. בבעלי חיים קטנים, Lorell ועמיתיו פיתחו את המודל שתארנו כאן, והם דיווחו על ההתרחשות של היפרטרופיה לב מפוצית 8 שבועות פסים של אב העורקים לאחר 5. שינויי לב להתקדם בהדרגה למצב מפוצה ולאחר מכן לגרום לאי ספיקת לב. היתרון העיקרי של מודל זה הוא ההתחלה ההדרגתית של עלייה בלחץ בחדר שמאל ובכך דומה למצבים קליניים בלחץ דם כרוני. זה גם מודל חיה מתאים ללימוד אי ספיקת לב עזבה קשורים ריאתי יתר לחץ ...

מודלים של בעלי חיים קטנים הם הכלי המועדף ביותר לחקר שינויים כרוניים בפיתוח של היפרטרופיה לבבית וההתקדמות שלה לאי ספיקת לב. מודלים אי ספיקת לב על ידי שיטות כירורגיות פותחו במקור בחולדות כבעלי חיים אלה הם מתאימים ביותר לניתוחי חזה פתוח, אקו והערכה של פרמטרים המודינמית. הם גם מספקים דגימות שלאחר המוות נאותים לרקמה, סלולרית ומחקרים ברמה מולקולריים 1. היצרות של אב העורקים עולים היא אחד הדגמים כירורגית השכיחים והמוצלחים ביותר ליצירת עומס יתר לחץ אי ספיקת לב 2, 3. מודל זה מתאים גם ללמוד את אירועי שיפוץ סלולארי הסלולריים ומשנה ותכונות התכווצות של הלב במהלך המעבר מהיפרטרופיה לאי ספיקת לב 4. יתרון עיקרי של מודל זה הוא ההתחלה ההדרגתית של עומס יתר לחץ על הלב 5, &lt;/ Sup&gt; 6. מודל זה הוא רלוונטי מבחינה קלינית בגלל ההתקדמות האיטית אך יציבה שלה מהיפרטרופיה לבבית פיצוי לשלב מפוצה וסופו של דבר לבמה אי ספיקת הלב. המשך להתקדמות של היפרטרופיה לב לאי ספיקת לב ושינויים הפיסיולוגיים הקשורים מושפע בעיקר ממידת היצרות הפיק 7. התכווצות אב העורקים עולה יכולה להתבצע בשתי דרכים, או על ידי שימוש בתפרים או על ידי יישום של קליפים מתכתיים 8, 9. היתרון העיקרי של שימוש קליפ מתכתי להתכווצות של אב העורקים הוא שההליכים כירורגיים מורכבים פחות. בשיטה זו יש לאתר את אב העורקים עולים מסתמית הנ&quot;ל ולהכניס את הקליפ סביב אב העורקים כדי להשיג רמה רצויה של התכווצות. מפשק חזה אין צורך בהליך זה. פסים של אב העורקים על ידי תפירה דורש יותר מניפולציות כירורגית להצבת מחט מד לצד אב העורקים עולים ותפירה סביבו כדילייצר את הרמה הרצויה של התכווצות של אב העורקים. הטכניקה האחרונה היא זמן רב יותר בהשוואה לשימוש בקליפים מתכתיים להתכווצות של אב העורקים. השיטה המתוארת בסרטון זה מדגימה את ההליך הניתוחי לעולה התכווצות של אב העורקים בעכברים המאפשרת יצירה של לחץ מודל היפרטרופיה של חדר השמאלי יתר על המידה.

<table><tbody><tr><td>חולדות וויסטאר מתוחזקות</td><td></td><td></td><td>ב-ARF, מערכות</td></tr><tr><td>הרדמה באינהלציה RGCB&nbsp;</td><td>VetEquip</td><td>AB19276</td><td></td></tr><tr><td>מאוורר מכרסמים</td><td>CWE Inc</td><td>SAR- 830/AP&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>צינורית קנה הנשימה של עכברוש</td><td>CWE Inc</td><td>13-21032</td><td></td></tr><tr><td>מערכת אולטרסאונד</td><td>פיליפס</td><td>HD7</td><td></td></tr><tr><td>מתמר אולטרסאונד</td><td>פיליפס</td><td>S 12</td><td></td></tr><tr><td>קליפ טיטניום (קטן)</td> <td>אופק</td><td>1204</td><td></td></tr><tr><td>מוליך קליפ</td><td>Weck</td><td>137081</td><td></td></tr><tr><td>מכונת גילוח חשמלית</td><td>Vinverth</td><td>VBT0817</td><td></td></tr><tr><td>להב BP (גודל: 11)</td> <td>מנתח</td><td>REF10111</td><td>הכנת אתר ניתוח</td></tr><tr><td>טרמדול</td><td>סחלב בריאות</td><td>טיפול רפואי OCH043</td><td></td></tr><tr><td>אמוקסיצילין הידרוכלוריד</td><td>Ranbaxy</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Piramal בריאות</td><td>A23M10A</td><td></td></tr><tr><td>מזרקים</td><td>BD</td><td>2015-09</td><td></td></tr><tr><td>4-0</td><td>יהלום</td><td></td> משי קלוע<td></td></tr><tr><td>3-0 פרולן</td><td>ג'ונסון & ג'ונסון</td><td>NW018</td><td></td></tr><tr><td>סרט כירורגי</td><td>Romsons</td><td>SH 6301</td><td></td></tr><tr><td>פובידון יוד</td><td>Win Medicare</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Temp. כרית חימום מבוקרת</td><td>פלמינגו</td><td>HC1003</td><td></td></tr></tbody></table>

עולה אבי העורקים תעוקה בחולדות ליצירת עומס יתר לחץ לב היפרטרופיה הדגם

Ascending Aortic Constriction in Rats for Creation of Pressure Overload Cardiac Hypertrophy Model

עולה התכווצות של אב העורקים הוא המודל כירורגית השכיח והמוצלח ביותר ליצירת עומס יתר לחץ המושרה היפרטרופיה של הלב ואי ספיקת לב. כאן אנו מתארים הליך כירורגי מפורט ליצירת עומס יתר לחץ והיפרטרופיה לבבית בחולדות על ידי התכווצות של אב העורקים עולים באמצעות קליפ מתכתי קטן. לאחר הרדמה, קנה הנשימה היא מחוברת לצינורות על ידי החדרת צינורית דרך חתך חצי דרך בין שתי טבעות סחוס של קנה הנשימה. לאחר מכן חתך בעור הוא עשה ברמה של מרחב הצלע השני על בית החזה מהשמאל ושכבות שרירים נמחקות כדי לאתר את החלק העולה של אב העורקים. אב העורקים עולים הוא מכווץ כדי 50-60% מהקוטר המקורי שלה על ידי יישום של קליפ טיטניום בגודל קטן. בעקבות התכווצות של אב העורקים, הצלעות השניה ושלישית נאמדו עם תפרי prolene. נשימה אחת ספונטנית הצינורית לקנה הנשימה מוסרת הוקמה מחדש. בעלי החיים מותר להתאושש on כרית החימום על ידי הפחתת הרדמה בהדרגה. האינטנסיביות של עומס יתר לחץ שנוצר על ידי התכווצות של אב העורקים עולים נקבעת על ידי הקלטת הפרש לחצים באמצעות שני דופלר-אקו ממדי טרנס בית החזה. בסך הכל פרוטוקול זה שימושי ללמוד את אירועי שיפוץ ותכונות התכווצות של הלב במהלך ההופעה ההדרגתית וההתקדמות מהיפרטרופיה לב מפוצית לבמה אי ספיקת לב.

בניסויים שלנו שאנחנו מסוגלים להשיג שיעורי הישרדות יותר מ -80%. היעילות של התכווצות אב העורקים אושרה על ידי ביצוע אקו דופלר. חולדות (n = 6) עם שיפוע לחץ של כ -60 מ&quot;מ של כספית באתר המכווץ אב העורקים נצפו במשך 8 שבועות והקריב כדי לנתח לפיתוח של היפרטרופיה לבבית (איור 1). לאחר 8 שבועות הערכת אקו לאחר הניתוח גילתה גידול משמעותי בפרמטרים של חדר שמאל כגון עובי מחיצה הבינה חדרית השאר, עובי קיר חדר שמאלי אחורי וירידה בקוטר הפנימי של חדר שמאל במדינת דיאסטולי, בבעלי חיי...

אנו מתארים הליך בשלבים ליצירת עומס יתר לחץ והיפרטרופיה של חדר שמאלי בחולדות Wistar ידי התכווצות של אב העורקים עולים באמצעות קליפ מתכתי קטן. דגם זה נעשה שימוש נרחב ללימוד שינויי שיפוץ במהלך היפרטרופיה לבבית ולזיהוי והערכה של אסטרטגיות לנסיגה של שינויים כאלה.

Ascending aortic constriction is the most common and successful surgical model for creating pressure overload induced cardiac hypertrophy and heart ...

שלום, אני Aji Kumar Gs מהחטיבה לביולוגיה של מחלות קרדיווסקולריות במרכז Raj Gandhi לביוטכנולוגיה, הודו. אני עובד תחת הדרכתו של process karta, ובסרטון זה נדגים הליך שלב אחר שלב ליצירת ascending I OTE בחולדות. במעבדתנו, אנו משתמשים במודל בעלי חיים זה כדי לחקור את הפתופיזיולוגיה ואת המנגנונים המולקולריים הבסיסיים של היפרטרופיה של הלב ואי-ספיקת לב פרוגרסיבית.אנו משתמשים במודל זה גם כדי לחקור יתר לחץ דם ריאתי הקשור לאי-ספיקת לב שמאל. אם כן, נתחיל בהרדמה של בעל החיים ושמירתו במצב שכיבה גב (supine). בצעו אינטובציה קנה הנשימה על ידי ביצוע חתך halfway בין שתי טבעות של קנה הנשימה והחדרת קנולה של קנה הנשימה, המחוברת בתורה למנשם למכרסמים.לאחר מכן, בצעו חתך בעור באורך של כ-two centimeter באזור החזה השמאלי בין הצלע השנייה לשלישית והפרידו את שכבות השריר. כדי להנחית את ה-iota constriction של החלק העולה של ה-iota, יש להשתמש בסיכה מטיטניום בגודל קטן עם אפליקטור; הרחיקו את הצלעות ואז תפרו את שכבות השריר והעור בתפרים נפרדים. לאחר הסרת הצינור האנדוטראכאלי, סגרו את שריר הקנה, השכבות והעור ואפשרו לבעל החיים להתאושש.ההליך בוצע לאחר קבלת אישור מוועדת אתיקה למחקר בבעלי חיים מוסדית. לפני הניתוח, חטא את שטח הניתוח ב-70% alcohol ושמור על פד החימום באופן אספטי. הכן את מכשיר ההנשמה למכרסמים ואת יחידת ההרדמה לקראת הניתוח.יש לעקר את כלי הניתוח באמצעות אוטוקלאב. כלי הניתוח העיקריים לצורך constrictio של ה-I otic כוללים כפפות סטריליות, פינצטה, מספריים, להבים כירורגיים, קליפסים מטיטניום בגודל קטן ופינצטת עורקים למריחת גזה למקרה של דימום, מחזיק מחט, חומר תפירה מסוג proline, חוט תפירה ממשי קלוע ומחט. יש להשאיר את החולדה תחת כיסוי אנטיביוטי למשך 24 שעות ולהרדימ אותן בתא השראה עם 3% ISO fluorine מעורבב עם מאה אחוז חמצן.הסר את הפרווה מאזור קו הצוואר והחזה השמאלי של החולדה והשאר את החיה בחלק העליון. השתמש במשטח חימום. שמור על ההרדמה באמצעות 1.5% ISO fluoride ובדוק את רפלקס הכף כדי לאשר את הצלחתו של תהליך ההרדמה.חטאו את אזור הניתוח באמצעות תמיסת פובידון יוד ולאחר מכן אלכוהול 70%. חזרו על הפעולה שלוש פעמים. הניחו סדין סטרילי על בעל החיים כך שרק אתר הניתוח יישאר חשוף.בצעו חתך בעור במקביל לקנה הנשימה והפרידו את הרקמה שמתחתיו כדי לחשוף את קנה הנשימה. קשרו חוט משי מתחת לקנה הנשימה והרימו אותו בעדינות כלפי מעלה.בצעו חתך במרכז המרווח שבין שתי טבעות סחוס והחדירו את הקנולה הקנהית. חברו את הקנולה הקנהית למנשם למכרסמים. יש לכוון את המנשם לקצב נשימה של 50 נשימות לדקה.נפח שאיפה (Tidal volume) של 1.7 ml וזמני שאיפה של 0.6 שניות. בצעו חתך באזור החזה השמאלי בין הצלע השנייה לשלישית. יש להפריד את השרירים הבינ-צלעיים שכבה אחר שכבה.יש לנקוט משנה זהירות כדי למנוע פגיעה בריאות בעת ביצוע החתך בין הצלעות. לאחר הרחקת הצלעות, יש לאתר בזהירות את החלק העולה של ה-iota על ידי מניפולציה עדינה של רקמת השומן. החץ מצביע על החלק העולה של ה-iota.הנח תפס טיטניום קטן סביב ה-iota העולה בעזרת אפליקטור, ובכך צמצם את ה-iota ב-50 עד 60% מקוטרה המקורי. לאחר צמצום ה-iota, החזר את הלב למקומו וקרב את הצלעות באמצעות תפר proline. במקביל, השהה את המנשם למשך כשתי עד ארבע שניות כדי לאפשר ניפוח מחדש של הריאות. תפר את השרירים בשכבות באמצעות proline, ולאחר מכן את העור באמצעות תפרי משי בתבנית תפריים נפרדים.הפחית בהדרגה את קצב הנשימה שהוגדר במנשם ועקוב אחר בעל החיים כדי לזהות נשימה ספונטנית. הסר את הקניולה מהקנה ברגע שנשימה ספונטנית וסדירה הושבה. כעת תחזק את ההרדמה באמצעות מסכת אף.סגרו את הפתח בין טבעות הקנה באמצעות תפרי proline. סגרו את שכבות השריר ואת העור באמצעות תפרי proline ומשי, בהתאמה. מרחו תמיסת פובידון יוד מעל האזור הכירורגי והזריקו משככי כאבים לאחר הניתוח.ניתן להנחיל תמיסת סלין עם Tremadol באופן תו-peritוני. אם מופיעים סימני התייבשות, יש להפחית בהדרגה את ההרדמה למצב כבוי לאחר התאוששות בעל החיים, להעבירו לכלוב ולהנחיל amoxicillin דרך הפה בערבוב עם מי השתייה למשך שבעה ימים. ניתן לקבוע את עוצמת עומס הלחץ הנוצר כתוצאה מהיצרות של ה-ascending aorta על ידי התבוננות במדרג הלחצים באתר ההיצרות האורטלית באמצעות אקו-לב דו-ממדי.הפאנל השמאלי של האיור מציג הד דופלר של חולדה עם היצרות באבי העורקים בעלת מפל לחצים של 63 mm of mercury. הפאנל הימני מייצג חולדת ביקורת (sham) ללא מפל לחצים משמעותי לאורך האורטה. הפאנל העליון מציג אקו-קרדיוגרפיה במצב M mode של החדר השמאלי בחולדות, שמונה שבועות לאחר הניתוח, והפאנל התחתון מייצג ביקורת (sham); עובי המחיצה הבין-חדרית ועובי הדופן האחורית של החדר השמאלי עלו באופן משמעותי, בעוד שהקוטר הפנימי של החדר השמאלי פחת באופן משמעותי בחולדות שעברו היצרות אורטלית.בהשוואה לקבוצות ביקורת שעברו ניתוח דמה, נצפתה היפרטרופיה לבבית משמעותית בחולדות שעברו constrictio of ascending aorta שמונה שבועות לאחר הניתוח. שלום, אני רג'. כאן נסביר את הפרוצדורה לביצוע constriction of ascending aorta בחולדה.היתרון העיקרי של מודל זה הוא הפיתוח ההדרגתי של היפרטרופיה של שריר הלב ואי-ספיקת לב. בדומה למצב קליני של יתר לחץ דם כרוני, במקרה זה יש לנקוט זהירות ביישום של Titanic clip לצורך היצרות של ה-iota. הדבר החשוב ביותר הוא שיישום ה-Titanic clip יהיה מספיק כדי להוביל להיצרות קריטית של ה-iota עבור left 20 plus stress, אך לא חמור מספיק כדי לגרום לאי-ספיקה אלקטרונית חריפה ובצקת ריאות; כמו כן, יש לנקוט זהירות כדי למנוע כל פגיעה בריאות בעת ביצוע החתך בין הצלעות.יש להפעיל את המנשמים למשך שלוש עד ארבע שניות תוך כדי לחיצה נגדית על הצלעות כדי לנפח מחדש את הריאות. תודה שצפיתם בסרטון זה ובהצלחה בניסוייכם.

ascending-aortic-constriction-rats-for-creation-pressure-overload

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

היצרות העורקים רוחבי (TAC) על העכבר הוא מודל ניסיוני נפוץ ללמוד המנגנונים היפרטרופיה לב ואי ספיקת לב הפיתוח. כאן אנו מתארים נהלים להתכווץ אבי העורקים כדי ליצור תואר לשחזור של היפרטרופיה לב בעכברים.

אבי העורקים צמצום רוחבי של עכברים

מתואר מודל חולדה של התכווצות אבי העורקים הבטני הגורם להיפרטרופיה של הלב ועיצוב מחדש. שיטה יעילה, ניתנת לשחזור וזעיר פולשנית משמשת כדי לספק פלטפורמה פשוטה אך שימושית למחקר בהיפרטרופיה ותפקוד לקוי של שריר הלב.

מודל של שיפוץ לב באמצעות התכווצות של אבי העורקים בבטן בחולדות

התכווצות העורקים רוחבי פולשנית (MTAC) חוסך את עיקרי התכווצות העורקים רוחבי רגיל (TAC) תוך ביטול השימוש מאוורר עם אינטובציה לקנה הנשימה. זה מוכיח להיות שיטה רצויה מאוד ללימודי תפוקה גבוהה על עומס של חדר שמאלי, בעיקר חקר תרגום.

פולשנית רוחבי אבי העורקים התכווצות עכברים

המטרה של פרוטוקול זה היא לתאר צעד אחר צעד הטכניקה של פולשנית רוחבי אבי העורקים הכיווץ (טק) בעכברים. על ידי חיסול של צנרור ואוורור אשר הכרחיות עבור הליך רגיל בשימוש נפוץ, טק פולשנית ומפשט את תהליך פעיל ומפחית את הלחץ על החיה.

הטכניקה של פולשנית התרחבות אבי העורקים רוחבי בעכברים עבור אינדוקציה של גדילת

כאן, אנו מציגים פרוטוקול של אבי העורקים רוחבי הכיווץ (טק) באמצעות ניקור לרוחב. טכניקה זו היא הליך ניתוחי החזה פולשנית, סגור במטרה לדמות עומס ואי ספיקת לב בעכברים ניצול ההגדרות הרגילות של מעבדה טק.

דגם סגור-החזה לזירוז רוחבי. התרחבות אבי העורקים בעכברים

אנו מציגים שיטה כירורגית לזירוז היפרטרופיה נכון חדרית וכישלון בחולדות.

עורק ריאתי פסים דגם של עומס המושרה היפרטרופיה נכון חדרית וכישלון

אנו מתארים את היצירה של מודל חולדה של עומס יתר על הלחץ המושרה שיפוץ מתון ותפקוד סיסטולי מוקדם שבו אותות התמרה מסלולים מעורב בייזום של תהליך שיפוץ מופעלים. מודל בעל חיים זה יסייע בזיהוי מטרות מולקולריות להחלת אסטרטגיות טיפול מוקדמות נגד שיפוצים עבור אי ספיקת לב.

מודל חולדה של עומס יתר של לחץ המושרה שיפוץ מתון תפקוד סיסטולית לעומת אי ספיקת לב סיסטולית.

פרוטוקול זה מציג שיטה משופרת להשגת היפרטרופיה שריר הלב חולפת עם תפר נספג, המדמה ירידה היפרטרופיה חדרית שמאל לאחר הסרת עומס לחץ. זה יכול להיות בעל ערך עבור המחקרים על תנאי היפרטרופי שריר הלב.

הפעלת התכווצות אבי העורקים רוחבית עם תפר נספג להשגת היפרטרופיה שריר הלב ארעית

הפרוטוקול הנוכחי מתאר טכניקה שונה ופשוטה עם הליך היצרות אבי העורקים הרוחבי (TAC) זעיר פולשני באמצעות retractor מתוצרת עצמית. הליך זה יכול להתבצע ללא מכונת הנשמה או מיקרוסקופ ומציג עומס לחץ, המוביל בסופו של דבר היפרטרופיה לבבית או אי ספיקת לב.

טכניקה שונה להתכווצות רוחבית של אבי העורקים בעכברים

הפרוטוקול הנוכחי מתאר טכניקה חדשה של פסים באבי העורקים בעכברים כדי לגרום לעומס יתר על הלחץ היפרטרופיה לבבית. עבור להקות, טבעת גומי עם קוטר פנימי קבוע משמש. טכניקה חדשה זו מבטיחה פחות שונות ויותר נתונים הניתנים לשחזור עבור ניסויים עתידיים.

פסי אבי העורקים O-Ring לעומת כיווץ אבי העורקים הרוחבי המסורתי למידול היפרטרופיה לבבית הנגרמת על ידי עומס יתר בלחץ

פרוטוקול זה מתאר הליך כירורגי זעיר פולשני לפסי אבי העורקים העולה בחזירים.

מודל זעיר פולשני של היצרות אבי העורקים בחזירים

למדו שיטה ליצירת היפרטרופיה של החדר השמאלי בעכברושי Wistar באמצעות היצרות עורק הזרוע העולה. מודל זה מאפשר חקר מנגנוני שינויי הלב ואסטרטגיות טיפוליות אפשריות.

עולה אבי העורקים תעוקה בחולדות ליצירת עומס יתר לחץ לב היפרטרופיה הדגם

גלה סרטונים נוספים