Name: שיטות איסוף חלב לעכברים וריבס Muntjac צביים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-07-19T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 34 s
Description: למד שיטת איסוף חלב מעכברים וצבאי Reeves' Muntjac באמצעות אוקסיטוצין והרדמה. טכניקה זו מאפשרת מחקר בתחומי החיסון הפסיבי וזיהוי פתוגנים בדרך יעילה וזולה.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

ניסויים אלה מומנו על ידי #RAI093634A המענקים של ה-NIH. אנו מביעים הכרת תודה עצומה לג'ני פאוורס, DVM, PhD, על עזרתה בחליבת מונטג'אק.

1. עכבר חליבת פרוטוקול השיטות שתוארו בפרוטוקול זה אושרו על ידי IACUC. 1. הפרדה של הסכר מצאצאים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בחר את הסכר לחליבה. בחר סכר עם המלטה של ​​4 או יותר גורים שהוא 8-12 ימים שלאחר המלטה כדי לספק חלב מקסימאלי אוסף-למרות שהאוסף הוא אפשרי בכל נקודה שלאחר המלטה עד זמן 21 ימים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפרד את הסכר מההמלטה שלה לפחות 2 שעות לפני החליבה. הערה: יש רצון אחד לחלוב סכר יותר מפעם אחת בתקופת זמן נתונה, זה מקובל על בית הסכרים המופרדים באותו הכלוב עם אוכל הולם ואספקת מים. </li></ol> 2. מנהל של אוקסיטוצין, הרדמה ועיני חומר סיכה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנהל 2 IU / קילוגרם של אוקסיטוצין intraperitoneally (IP). אוקסיטוצין הוא הורמון שפועל על בלוטות החלב של נקבות מניקות כדי לעורר את שחרורו של חלב. ניתן לרכוש אוקסיטוצין frאום וטרינר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנהל תערובת הרדמה המכילה 80-100 מ&quot;ג / קילוגרם קטמין בשילוב עם 5-10 מ&quot;ג / IP xylazine קילוגרם. לדוגמא, תערובת הרדמה מיליליטר מניית 10 יכולה להיות מוכנה מראש לעכברים במשקל של כ 30 גרמו ותכלול 0.1 מיליליטר xylazine, 8.9 מיליליטר H 2 O, ו1.0 מיליליטר קטמין. 0.25 הרדמה כוללת מיליליטר תהיה להרדים את העכבר בגודל זה לכ 20-30 דקות, אשר אמור לספק מספיק זמן לאיסוף חלב. הערות: כדי לקבוע כי בעל החיים כבר הרדימו בהצלחה, מניחים בעדינות אותה על בטנה על משטח מוצק; היא לא צריכה להיות להזיז את רגליה או מנסה לקום על רגליה אם היא בהרדמה מלאה. במקרה של עכבר לא להיות מורדם באופן מלא עם המינון המקורי, החוקר רשאי לנהל אחר ¼ או ½ מהמינון המקורי של תערובת ההרדמה בהתאם לגודל של העכבר ו / או ברמה של הרגעה שהעכבר כבר השיג . עם זאת, זה אני יכולncrease הסיכוי של תגובה שלילית להרדמה, וגם עלול לגרום לעכבר להיות מורדם ו / או מורדם לתקופה ארוכה יותר של זמן עמוקים יותר. הערה: אם חליבת סכר יותר מאחד, יש צורך לזעזע אוקסיטוצין וזריקות הרדמה בשל זמן מחצית החיים הקצר של אוקסיטוצין ופעמים הרגעה לקטמין ו xylazine. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> למרוח כמות קטנה של חומר סיכה העין לפינה של כל עין והתפשט כדי למנוע את עיניו של העכבר מהתייבשות בזמן שתחת הרדמה. </li></ol> 3. אוסף חלב אוסף חלב מתבצע בקלות עם שני חוקרים: חוקר אחד להחזיק את העכבר הרדים תוך הבעת חלב (המכונה R1), וחוקר אחד כדי לאסוף את חלב (R2) באופן ידני. שיטה זו יכולה להתבצע גם עם אדם אחד, אם העכבר הוא מאובטח על משטח שטוח כדי למנוע נזק. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> R2 צריך להיות מצויד בכריות הכנת אלכוהול סטרילי, פיפס P-200etman, קצה פיפטה נקי לכל עכבר, ומכל להחזיק חלב, כגון צינור Eppendorf 1.5 מיליליטר או cryovial 1.2 מיליליטר (ראה טבלה של חומרים). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כמו אוקסיטוצין מתחיל להיכנס לתוקף, האכזבה חלב תהיה גלויה באזור החלב של העכבר (ראה איור 1 א). R1: לגולל כרית הכנת אלכוהול סטרילי ולנגב בעדינות את אזור החלב של העכבר כדי לנקות את האזור לפני החליבה. ידני לשאוב חלב מהפטמה באמצעות האגודל והאצבע לעסות בעדינות ולסחוט את רקמת השד בתנועה כלפי מעלה עד שחרוז גלוי של חלב מתחיל להיווצר בבסיס הפטמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחץ על בוכנת pipetman P-200 לתחנה הראשונה שלה לשחרר אוויר מקצה פיפטה ולהתכונן לאוסף חלב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקם את קצה פיפטה בחלק העליון של טיפת חלב, ומשוך בעדינות את החלב לתוך קצה פיפטה ידי שחרור לאט את לחץ על הבוכנה. יש להיזהר שלא לשים את הקצה קרוב מדי לפטמה או העור (ראהאיור 1). אין זה הכרחי כדי לשחרר לחלוטין את הבוכנה כמו זה יהיה למשוך את חלב כל הדרך לחלק העליון של קצה פיפטה ויקשה לגרש את חלב לעתים קרובות צמיג לתוך המכל מחזיק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגרש את חלב לתוך המכל על ידי שימוש באגודל כדי ללחוץ על בוכנת עבר התחנה הראשונה (ראה תרשים 1C). כדי להקל על גירושם של נפחים קטנים, לחץ על קצה פיפטה נגד הצד של הצינור, כך שנוזל לא הולך לאיבוד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תמשיך להביע באופן ידני חלב מפטמה, נע בכל כיוון השעון או נגד כיוון השעון כדי לא לדלג על כל פטמות. זה גם מקובל ושימושי לחזור וללשאוב חלב ללא הרף מאותו העטין זה צריך לייצר יותר חלב מאשר אחר. </li></ol> 4. היפוך הרדמה בסכר <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברוב המקרים, זה נפוץ לסכר להתחיל להתחיל להתעורר במהלך תהליך החליבה. אם זה לא המקרה, הנח את הסכר בCAGדואר בעקיפין מתחת למקור חום, כגון שמיכה במחזור מחוממת, עד שהיא מתחילה להתעורר. הערה: כסכר מתחיל להתעורר, לשמור על התבוננות קרובה של פעילותה עד שהיא תוכל ללכת על הכלוב שלה בכוחות עצמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברגע שהסכר הוא נע על הכלוב בלי מאבק, הנח אותה בחזרה לכלוב המקורי שלה עם גוריה. השפעות שליליות לא כבר ציינו ביחס ליכולתם של הגורים כדי להאכיל לאחר איסוף חלב. </li></ol> 2. Muntjac חליבת פרוטוקול השיטות שתוארו בפרוטוקול זה אושרו על ידי IACUC. 1. הפרדה של פלוני מצאצאים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בחר את האיילה לחליבה. צבי muntjac ריבס &#39;בדרך כלל ללדת אחד חום בהיר 2. לחלוב את האיילה ביום שלאחר לידה כדי לאפשר את ההזדמנות להתחנף כדי לקבל גישה לחומרים מזינים חיוניים בקולוסטרום 8. הערה: חום בהיר בדרך כלל מסתיר ולא מופיע שוב במהלך procedure; הפרדה של זוג אם הצאצאים אינה הכרחית. </li></ol> 2. מנהל של אוקסיטוצין, הרדמה ועיני חומר סיכה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנהל 10 IU / קילוגרם של אוקסיטוצין לשריר (IM). אוקסיטוצין הוא הורמון שפועל על בלוטות החלב של נקבות מניקות כדי לעורר את האכזבה של חלב. אוקסיטוצין ניתן לרכוש מוטרינר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנהל את ההרדמה BAM 11 IM מכיל 0.45 מ&quot;ג / קילוגרם butorphanol, azaperone מ&quot;ג / קילוגרם 0.25, medetomadine 0.07 מ&quot;ג / קילוגרם. מנה אחת של תערובת ההרדמה BAM תהיה להרדים muntjac לכ 20-30 דקות, המספקת מספיק זמן לאיסוף חלב מלא. אפשרות נוספת להרדמה היא midazolam ב1-2 מ&quot;ג / קילוגרם, אשר להרדים muntjac כ 10-15 דקות. אמנם זה מספק מספיק זמן לאיסוף חלב, הרדמה זה עובר מטבוליזם במהירות רבה יותר מאשר BAM ובעלי החיים עשויים לנסות לברוח בתום תקופת הזמן הקצר יותר. הערה: תגובה מינימאלית לכאב, רפלקסים קטין עם הנגיעה האוזניים, ואחריו את היכולת של R1 להחזיק MJ ללא מאבק מצביעים על כך שבעלי החיים כבר הרדימו בהצלחה. הערה: במקרה של muntjac לא להיות מורדם באופן מלא עם המינון המקורי, החוקר רשאי לנהל אחר ¼ או ½ מהמינון המקורי של תערובת ההרדמה בהתאם לגודלו של בעל החיים ו / או ברמה של הרגעה שכבר היה הושג. עם זאת, זה יכול להגדיל את הסיכוי לתגובה שלילית להרדמה, וגם עלול לגרום לmuntjac להיות עמוק יותר בהרדמה ו / או מורדם לתקופה ארוכה יותר של זמן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> למרוח כמות קטנה של חומר סיכה לפינה של כל עין והתפשטות כדי למנוע את עיניו של muntjac מהתייבשות בזמן שתחת הרדמה. </li></ol> 3. אוסף חלב אוסף חלב מתבצע בקלות עם שני חוקרים; חוקר אחד להחזיק muntjac הרדים בהברכיים תוך הבעת חלב (המכונה R1), וחוקר שני כדי לשמור על ראשו של muntjac בתנוחה נוחה ובטוחה ולאסוף את חלב (R2) באופן ידני. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בהתאם להרדמה המשמשת, חליבה צריכה להתבצע גם 1) בעטים שלהם על מנת לספק מקום בטוח עבורם הם צריכים להתעורר במהלך ההליך (או מושרה midazolam) 2) בחדר המתנה ללא מצעים כדי לשמור על ניקיון (BAM- מושרה). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> R1 ו R2 צריך להיות מצויד בגזה ספוגת אתנול וכמה מיליליטר 15 צינורות פוליפרופילן חרוטי להחזיק את חלב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כמו אוקסיטוצין מתחיל להיכנס לתוקף, האכזבה חלב תהיה גלויה באזור החלב של muntjac. R1: לטהר את הידיים בכפפות ואצבעות, כמו גם את כל העטין וכל פטמה בודדת של בעלי החיים עם הגזה ספוגת אתנול. R2: החזק את ראשו של muntjac בעמדה בטוחה ונוחה כדי לאפשר להקל על נשימה ולעזור למנוע regurgitation כרס הפנימי. החזק את CL צינור האיסוף<html> OSE לפטמה שחלב מבלי לגעת בו על מנת למנוע זיהום פוטנציאלי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשאוב חלב מפטמה אחת על ידי שימוש באגודל ובאצבע כדי לסחוט בעדינות את רקמת השד בתנועה כלפי מעלה עד שהפטמה היא צבה עם חלב, ובעדינות לגלגל את חלב מהפטמה ולתוך הצינור שR2 מחזיק (ראה איור 2 ). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הערה: חלב יוצא בזרם, ולכן חשוב לR2 כדי לקבל את צינור האיסוף מוקם כך שלא מעט חלב יהיה מבוזבז. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העטין של muntjac מחולק לרבעים. R1: המשך להביע את חלב מכל רבע עד שהחלב כבר לא זורם בקלות. אם חלב לא יכול לבוא לידי ביטוי מפטמה אחת, להביע מכל הפטמות האחרות לפני ההחזרה לראשונה. זה גם מקובל ושימושי לחזור וללשאוב חלב ללא הרף מאותו העטין זה צריך לייצר יותר חלב מאשר אחר. </li></ol> 4. היפוך הרדמה בDoe t &quot;&gt; זה נפוץ איילה מושרה midazolam להתחיל להתעורר במהלך תהליך החליבה. ברוב המקרים, האיילה תנסה לברוח לפני שכל חלב כבר הביע. איפוק קטן משמש במאמץ להגביר את חלב תשואה, אך הבטיחות והנוחות של שני החוקרים והאיילה הן חשובים לא פחות. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנהל atipamezole ב2.5 מ&quot;ג / מ&quot;ג medetomadine תת עורי להיפוך מהיר של BAM הרדימה איילה. שים לב: עם שני הסוגים של הרדמה, יש צורך לשמור על התבוננות קרובה של האיילה עד שהיא מסוגלת ללכת בכוחות עצמה בלי למעוד או ליפול, והוא מסוגל לאכול ולשתות ללא חשש של שאיפה או חנק. השפעות שליליות לא כבר ציינו ביחס ליכולתו של העופר להניק לאחר איסוף חלב. </li></ol>

<ol><li>Dueling, S. Muntiacus reevesi. Animal Diversity Web. , Available from: 
 
 <a target="_blank" href="http://animaldiversity.ummz.umich.edu/accounts/Muntiacus_reevesi">http://animaldiversity.ummz.umich.edu/accounts/Muntiacus_reevesi</a> (2004).</li>
<li>Pei, K., Taber, R., O'Gara, B., Wang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Breeding+cycle+of+the+Formosan+Reeves+muntjac+%28Muntiacus+reevesi+micrurus%29+in+northern+Taiwan%2C+Republic+of+China%5BTitle%5D)+AND+%22Mammalia%22%5BJournal%5D)">Breeding cycle of the Formosan Reeves muntjac (Muntiacus reevesi micrurus) in northern Taiwan, Republic of China.</a> Mammalia. 59 (2), 223-228 (1995).</li>
<li>Browning, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transmission+of+prions+from+mule+deer+and+elk+with+chronic+wasting+disease+to+transgenic+mice+expressing+cervid+PrP%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Virol%22%5BJournal%5D)">Transmission of prions from mule deer and elk with chronic wasting disease to transgenic mice expressing cervid PrP.</a> J. Virol. 78 (23), 13345-13350 (2004).</li>
<li>Van de perre, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transfer+of+antibody+via+mother%27s+milk%5BTitle%5D)+AND+%22Vaccine%22%5BJournal%5D)">Transfer of antibody via mother's milk.</a> Vaccine. 21 (24), 3374-3376 (2003).</li>
<li>Maden, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetically+modified+mice+produce+human+milk+protein%5BTitle%5D)+AND+%22BioNews%22%5BJournal%5D)">Genetically modified mice produce human milk protein.</a> BioNews. , (2009).</li>
<li>Rodgers, C. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Practical+aspects+of+milk+collection+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Lab.+Anim%22%5BJournal%5D)">Practical aspects of milk collection in the rat.</a> Lab. Anim. 29 (4), 450-455 (1995).</li>
<li>Depeters, E. J., Hovey, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+for+collecting+milk+from+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Mammary+Gland+Biol.+Neoplasia%22%5BJournal%5D)">Methods for collecting milk from mice.</a> J. Mammary Gland Biol. Neoplasia. 14 (4), 397-400 (2009).</li>
<li>Knight, C. H., Maltz, E., Docherty, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Milk+yield+and+composition+in+mice%3A+effects+of+litter+size+and+lactation%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Milk yield and composition in mice: effects of litter size and lactation.</a> 84 (1), 127-133 (1986).</li>
<li>Hedrich, H. J., Bullock, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+laboratory+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">The laboratory mouse.</a> , 735-736 (2004).</li>
<li>Nishimori, K., Young, L. J., Guo, Q., Wang, Z., Insel, T. R., Matzuk, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oxytocin+is+required+for+nursing+but+is+not+essential+for+parturition+or+reproductive+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+USA%22%5BJournal%5D)">Oxytocin is required for nursing but is not essential for parturition or reproductive behavior.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 93 (21), 11699-11704 (1996).</li>
<li>Miller, B. F., Osborn, D. A., Lance, W. R., Howze, M. M., Warren, R. J., Miller, K. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Butorphanol-azaperone-medetomidine+for+immobilization+of+captive+white-tailed+deer%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Butorphanol-azaperone-medetomidine for immobilization of captive white-tailed deer.</a> 45 (2), 457-467 (2009).</li>
</ol>

למחברים אין מה לחשוף.

עכבר ישנם מספר גורמים לקחת בחשבון בעת ​​איסוף חלב מעכבר, כולל 1) כמות הזמן להפריש עבור אוסף, 2) במינון של אוקסיטוצין מנוהל, 3) כמה גורי הסכר הוא כיום סיעוד ו4) הסכום זמן שחלף מאז המלטה בזמן איסוף המידע. שימוש במחקרים קודמים כקווים מנחים, יצאנו כדי לייעל את התנאים לתנובת החלב. מחקר קודם שנעשה באופן ישיר יש קורלציה תנובת החלב עם ג...

מודלים של בעלי החיים לספק תובנות לגבי הפתולוגיה מחלה שלא ניתן להשיג על ידי ניתוח במבחנה. כדי לספק את התוצאות יעילות ביותר, זה חשוב להשתמש במודל של בעלי חיים הקשור באופן הדוק למחלה והמינים של עניין. לדוגמא, muntjac &#39;ריבס (reevesi Muntiacus), צבאים קטנים אסיה 1,2, ועכברים מהונדסים המבטאים את חלבון cervid הפריון (CerTgPrP) 3 הם מודלים של בעלי חיים שימושיים למיני cervid. שני המינים הם polyestrous, המאפשרים גידול בכל ימות שנה, ולכן מקור עקבי לרקמות הקשורים להריון ונוזלים ללמוד מנגנונים ספציפיים בביולוגיה cervid. יש מחקרים על חלב מגוון רחב של יישומים, כי הם יותר פשוט (וזולים) השיגו במודלים של בעלי חיים מאשר בבני אדם. חוקרים יכולים לחקור חלב וקולוסטרום כמקור פוטנציאלי של 1 העברת מחלות מידבקת), 2) נוגדנים שהועברו מאם לצאצאים בdevelopment חסינות פסיבית 4 ו -3) לקטופרין, חלבון המצוי בחלב אם אנושי המעורב בחסינות פסיבית שחוקרים כעת מנסים לייצר באופן מסחרי 5. איסוף כמות משמעותית של חלב מבעלי חיים קטנים יכול להוכיח להיות משימה קשה. רוג&#39;רס הציע גישה לאיסוף חלב מחולדות 6, אשר לאחר מכן נעשה שימוש בעכברים. DePeters וHovey הציעו שתי שיטות לאיסוף חלב, אחד באמצעות ואקום שנוצר באופן ידני המיוצר על ידי הנורה פיפטה גומי המחובר לפיפטה פסטר, ושנייה המחייב את הבנייה של יחידת חליבה, אשר מחוברת אז למקור ואקום (כגון כרז) למסוק חלב עכבר 7. כאן אנו מציעים שיטה פשוטה, עלות נמוכה לאיסוף חלב משני עכברים והצבאים muntjac ריבס &#39;, אשר דורש ציוד מעבדה רק זמין וכישורים טכניים בסיסיים. השיטה שלנו מניבה כמויות מספיקות של חלב לשונהיישומים.

<table><tbody><tr><td colspan="4">חומרים&#8212; </td></tr><tr><td>קטמין עכבר (KetaVed 100 מ"ג/מ"ל) (מינון: 80-100 מ"ג/ק"ג)</td><td>MWI/Vedco</td><td>011075</td><td></td></tr><tr><td>קסילזין (100 מ"ג/מ"ל) (מינון: 5-10 מ"ג/ק"ג)</td><td>MWI/Vedco</td><td>NADA 139236</td><td></td></tr> חומר <tr><td>סיכה לעיניים</td><td>MWI/Apexa</td><td>701013</td><td></td></tr><tr><td>אוקסיטוצין (2 יחב"ל/ק"ג)Vet</td> <td>One</td><td>501013</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">חומרים&#8212; Muntjac</td></tr><tr><td>Midazolam (1-2 מ"ג/ק"ג)</td><td>Amerisource Bergen Drug Corp</td><td>924326</td><td>אופציונלי: חוקר יכול להשתמש במידזולם בפני עצמו או בשילוב BAM כחומר הרדמה</td></tr><tr><td>בוטואורפנול טרטרט (טורבוגסי) (0.45 מ"ג/ק"ג)</td><td>פורט דודג' בריאות בעלי חיים</td><td>NADA 135-780</td><td></td></tr><tr><td>אזאפרון טרטרט (0.25 מ"ג/ק"ג)</td><td>ZooPharm</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Medetomadine HCl (0.07 מ"ג/ק"ג)</td><td>ZooPharm</td><td></td><td></td></tr><tr><td>אנטיפמזול הידרוכלוריד (אנטיסדאן) (מינון: 0.25 מ"ג/ק"ג)</td><td>Orion Corporation</td><td>NADA 141-033</td><td></td></tr><tr><td>אוקסיטוצין (10 יחב"ל/ק"ג)Vet</td> <td>One</td><td>501013</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">ציוד&#8212; עכבר</td></tr><tr><td>P-200 פיפטמן</td><td>גילסון</td><td>F123601</td><td></td></tr><tr><td>200 &mu; l קצות פיפטה</td><td>Light Labs</td><td>B-2004-SH</td><td></td></tr><tr><td>מזרקים 1 מ"ל</td><td>MWI</td><td>005427</td><td></td></tr><tr><td>מחטי 27 גרם</td><td>MWI</td><td>002031</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">ציוד&#8212; Muntjac</td></tr><tr><td>15 מ"ל צינורות חרוטיים</td><td>VWR</td><td>21008-918</td><td></td></tr><tr><td>22 גרם מחטים</td><td>MWI</td><td>873</td><td></td></tr><tr><td>3 מ"ל מזרקי נעילת לואר</td><td>MWI</td><td>001377</td><td></td></tr></tbody></table>

שיטות איסוף חלב לעכברים וריבס &#39;muntjac צביים

Milk Collection Methods for Mice and Reeves' Muntjac Deer

מודלים של בעלי חיים משמשים בדרך כלל במעבדות מחקר כדי להשיג את מה שבדרך כלל נחשב לא מעשי במארח הטבעי של פתוגן. איסוף חלב מבעלי חיים מאפשר למדענים את ההזדמנות לחקור היבטים רבים של רבייה, כולל העברה אנכית, חסינות פסיבית, ביולוגיה של בלוטות החלב והנקה. השגת כמויות נאותות של חלב למחקרים אלה היא משימה מאתגרת, במיוחד ממודלים של בעלי חיים קטנים. כאן אנו מדגימים שיטה זולה וקלה לאיסוף חלב בעכברים ובאייל מונטג'אק של ריבס שאינה דורשת ציוד מיוחד או הכשרה נרחבת. שיטה מסוימת זו דורשת שני חוקרים: אחד לשאוב את החלב ולייצב את החיה, ואחד לאסוף את החלב במיכל מתאים ממודל מונטג'אק או עכבר. דגם העכבר דורש גם שימוש בפיפטמן P-200 ובקצות פיפטה מתאימים. אמנם שיטה זו זולה וקלה יחסית לביצוע, אך יש לייעץ לחוקרים כי הרדמת החיה נדרשת לאיסוף חלב אופטימלי.

עכבר מהניסויים שלנו, יש לנו קבענו כי ניתן לגבות כ 100-400 μl חלב מעכבר מעבדה אחד, תלוי במספר משתנה. משתנה אלו כוללים 1) כמות הזמן להפריש עבור אוסף, 2) במינון של אוקסיטוצין מנוהל, 3) כמה גורי הסכר הוא כיום סיעוד ו4) הסכום של הודעה המלטת זמן. המחקרים שלנו הראו כי את התשואה הגבוהה ביותר מתקבלת כאשר הסכרים מופרדים מצאצאיהם לפחות 2 שעות, ולפחות 45 דקות לשעה היא להפריש לכל עכבר לחליבה. כרכי חלב מרביים ...

איסוף חלב ממודלים של בעלי חיים מקל על כיווני מחקר שונים: הבנת חסינות פסיבית, זיהוי פתוגנים האחראים להעברה אנכית, ובאמצעות שימוש בעכברים טרנסגניים, אפילו ייצור מסחרי של חלבונים המצויים בחלב אם. כאן אנו מדגימים שיטה פשוטה לאיסוף חלב בעכברים ובאייל המונטג'אק של ריבס.

שיטות איסוף חלב לעכברים וריבס &#39;Muntjac צביים

Animal models are commonly used throughout research laboratories to accomplish what would normally be considered impractical in a pathogen&#8217;s native ...

המטרה הכוללת של הליך זה היא להדגים כיצד לאסוף חלב מעכבר או מאייל רב-ענפים (reeve's muntjac deer) לשימוש במגוון ניסויים מדעיים. דבר זה מושג תחילה על ידי מתן אוקסיטוצין לבעל החיים כדי לעורר את שחרור החלב, ולאחר מכן בעל החיים מורדם. בשלב הבא, חוקר אחד סוחט את החלב ידנית בעוד חוקר שני אוסף אותו.השלב הסופי הוא הבטחת בטיחות בעל החיים בעת התאוששותה מההרדמה. בסופו של דבר, ניתן לאסוף כ-5 עד 30 מיליליטר של חלב Mutt Jack בכל סשן, או עד 450 µL של חלב עכבר בכל סשן. היתרון המרכזי של טכניקה זו על פני שיטות קיימות, כגון אלו הדורשות ציוד מיוחד, הוא שטכניקה זו זולה יחסית וקלה ללמידה.שיטה זו יכולה לסייע במענה למספר שאלות מדעיות, כגון האם פתוגן יכול לעבור מאם לצאצאיה באמצעות החלב. אנשים שאינם מכירים את השיטה עשויים להתייאש בתחילה, כיוון שסחיבת החלב בצורה נכונה דורשת תרגול. תסייע לי בפרוצדורה זו סטפני פול-אווי (Stephanie full away), טכנאית מהמעבדה שלנו, כדי לעורר את הפרשת החלב בעכברה מניקה.הניחו שתי יחידות בינלאומיות לקילוגרם של oxytocin באופן תוך-peritoneal מיד לפני איסוף החלב, הרדימו את העכבר ומרחו כמות קטנה של חומר סיכוך לעיניים בכל עין כדי למנוע מהעיניו של העכבר להתייבש בזמן ההמתנה להשפעת חומר ההרדמה. הכינו מספר פדים סטריליים עם אלכוהול, פיפטמן P 200, טיפים סטריליים לפיפטה, ומכל לאיסוף החלב, כגון פ

milk-collection-methods-for-mice-and-reeves-muntjac-deer

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

פרוטוקול זה מדגים שיטות להפקת הזרע מן האשכים של זכרים ואז כשזרעו נקבות עכברים. הליך זה שימושי כאשר זמן מדויק יש צורך במחקרים התפתחותיים כמו גם עבודה מהונדס.

קצירת הזרע והזרעה מלאכותית של עכברים

שיטה זו מתארת ​​כיצד לנתח ולהעריך התפתחות תפקוד בלוטת החלב ומן העכברים. בלוטות החלב נכרת מוערכים לתואר הפיתוח באמצעות הר שלם תוך פליטה החלב מוערך באמצעות אוקסיטוצין מבוססי assay myoepithelial התכווצות התא.

הערכת התפתחות בלוטת החלב פונקציה ועל מודלים עכבר

אולטרסאונד Transabdominal מתואר כאמצעי יעיל, פולשני להערכת מצב הרבייה צבי muntjac של ריבס. שיטות אלה ניתן להשתמש כדי להשיג אבחון הריון מוקדם כדי להעריך את הכדאיות העוברית. יישומים עתידיים של טכניקה זו כוללים הערכה של גיל ההיריון ואת ההשפעות של מחלה אימהית על התפתחות העובר.

אולטרסאונד Transabdominal לאבחון הריון באייל Muntjac של ריבס

חלב הוא מקור תזונה עיקרי ליילוד. ניתוח מרכיבי החלב עשוי לספק תובנה לגבי גורמים אימהיים המשפיעים על בריאות הצאצאים. פרוטוקול זה מתאר שיטה ידנית לאיסוף דגימות חלב מהחולדה המניקה, אשר לאחר מכן יכולה לשמש לניתוח נוסף במורד הזרם.

אוסף חלב בעכברוש שימוש נימי צינורות והערכה של שומן חלב תוכן על ידי Creamatocrit

פנוטיפי הבדלים בין האוכלוסיות cervid עשויה להיות קשורה ברמת האוכלוסייה גנטיקה או תזונה; אניני טעם אשר קשה בטבע. פרוטוקול זה מתאר איך עיצבנו מחקר מבוקר בו חוסל וריאציה תזונתי. מצאנו כי וריאציה פנוטיפי של זכר לבן זנב היה יותר מוגבל על ידי תזונה יותר מהגנטיקה.

פרוטוקול להערכת ההשפעות היחסי של גנטיקה וסביבה על הצבי וצמיחה הגוף עבור Cervid חיים ארוכים

מחקר זה דוחות דיגום הדם של וריד הזנב בעכברים באמצעות מערכת צינור שאיבת ואקום עם זכוכית מגדלת מוכספת. השיטה שלנו קל לתרגל, ניתן להשתמש עבור לקיחת דמים חוזרים בעכברים.

איסוף ששונה דם מן הוורידים הזנב של עכברים שאינם מרדימים עם מערכת איסוף הדם ואקום, זכוכית מגדלת מוכספת

מאמר זה מתאר ומדגים את ניהול החיסונים התוך-אנלתיים ואת איסוף החלב מארנבים מניקים (Oryctolagus cuniculus) כאמצעי להערכת חסינות הרירית במודל מתאים מבחינה תרגומית של חיסון אימהי.

חיסון תוך-כלי ואוסף חלב במחקרים על חיסון אימהי בארנבים הלבנים של ניו זילנד (Oryctolagus cuniculus)

כאן, אנו מתארים מתן תרופות מונחות מיקרופיפטה (MDA) כשיטה חלופית לאכילה אוראלית המתמרצת את חיית המחקר לבלוע טיפולים בקלות עם מינימום מתח ואי נוחות.

שימוש במתן תרופות מונחות מיקרופיפטה כשיטה חלופית לגבאג' אוראלי במודלים של מכרסמים

מאמר זה מתאר כיצד להרכיב מכשיר שניתן להשתמש בו לאיסוף חלב מעכברי מעבדה. מכשיר זה זול, נייד ומאפשר איסוף של 0.1-0.5 מ"ל חלב על ידי אדם מיומן אחד. פרוטוקול חליבה מפורט כלול גם כן.

טכניקה יעילה לאדם יחיד לדגימת חלב מעכברי מעבדה

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לטכניקת איסוף דם אופטימלית בנבדקים עכברים באמצעות ניקור ורידים בפנים באמצעות lancet. אנו משתמשים בטכניקה זו לצד הערכה ציטומטרית של זרימה ציטומטרית כדי לאפיין פנוטיפים תאיים של זנים טרנסגניים, קונגניים ומדווחים. הוא מתאים גם לניתוח ציטוקינים בסרום ולמחקרי סוכרת.

ניקור ורידים בפנים לאיסוף דם עכברים

למד שיטת איסוף חלב מעכברים וצבאי Reeves' Muntjac באמצעות אוקסיטוצין והרדמה. טכניקה זו מאפשרת מחקר בתחומי החיסון הפסיבי וזיהוי פתוגנים בדרך יעילה וזולה.

שיטות איסוף חלב לעכברים וריבס 'Muntjac צביים

גלה סרטונים נוספים