Name: הזרקת intracardiac מונחה ההדמיה אולטראסאונד לפתח מודל עכבר של שד גרורות סרטן מוח ואחריו האורכי MRI (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-03-06T13:45:00.000+00:00
Duration: 8 min 36 s
Description: למדו ליצור מודל עכבר של שד גרורות סרטן מוח באמצעות הזרקת intracardiac מונחה אולטראסאונד. שיטה זו מאפשרת מעקב אורכי ב-MRI ברזולוציה גבוהה לחקר התקדמות הגידולים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

אנו אסירי תודה לבני זוג. דיאן פלמיירי ופטרישיה Steeg של NCI שספק לנו תאי MDA-MB231Br. אנו מודים לד&quot;ר ראלף מייסון, מר ג&#39;ייסון Reneau וגב &#39;רמונה לופס לתמיכה טכנית וקולגיאלית. עבודה זו נתמכה בחלקה על ידי IDEA DOD פרסים W81XWH-08-1-0,583 וW81XWH-12-1-0,317. ניסויי MRI בוצעו במרכז ההדמיה מתקדם למחקר, מתקן NIH BTRP # P41-RR02584, והזרקת intracardiac אולטרסאונד מונחה בוצעה עם VisualSonics Vevo 770 תחת 1S10RR02564801.

נהלי כל החיה אושרו על ידי הוועדה המוסדית טיפול בבעלי חיים ושימוש במרכז Southwestern הרפואי של אוניברסיטת טקסס. 1. הכנת תאי MDA-MB231/Br-GFP <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אחזר ותרבות תאי MDA-MB231/Br-GFP (הניתנים באדיבות על ידי בני הזוג. פלמיירי וSteeg, NCI) במדיום DMEM המכיל 10% FBS, גלוטמין 1% ו -1% פניצילין / סטרפטומיצין. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שים לב למצבם של התאים והצבע של מדיום, ולהחליף בינוני כל 2-3 ימים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Trypsinize ולאסוף את התאים כאשר מגיע למפגש 80% כפי שמתואר בצעדים 1.3.1-1.3.5: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את המדיום הישן לחלוטין ולהוסיף 5 מיליליטר PBS (1x) כדי לשטוף את התאים בעדינות. הסר את PBS מהצלחת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הוסף 1.5 מיליליטר טריפסין בצלחת; להטות את הצלחת בעדינות כדי להבטיח את כל התאים מכוסים על ידי טריפסין. שים את הצלחת בחזרה לתא החממה ולשמור אותו ב37 מעלות צלזיוס במשך דקות 1. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קח את המנה מתוך חממה ולבחוןהתאים תחת מיקרוסקופ אופטי כדי להבטיח את התאים להתנתק המנה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הוסף 3 מיליליטר בינוני כדי לעצור את ההשפעה של טריפסין. לאסוף את תערובת התאים בצינור צנטריפוגות. צנטריפוגה את התערובת על 2,000 סל&quot;ד למשך 5 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את המדיום בזהירות וresuspend תאי 5 בינוני סרום ללא מיליליטר עד הומוגנית. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רוזן המספר מתאים של תאי resuspend אותם במדיום DMEM החופשי בסרום עם ריכוז סופי של 1.75 x 10 5 תאים ב100 μl נפח. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קח 50 תערובת תא μl ולהוסיף 50 μl Trypan הכחול. לאחר הערבוב, לקחת 10 תערובת μl ובזהירות להוסיף לשקופית ספירת תאים. השתמש בדוגמאות רבות כדי להבטיח הערכת מספר התא מדויקת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> היצמד בשקופית ספירת תאים, קצה אחד בכל פעם ודלפק התא מתחיל לספור באופן אוטומטי. קח את הממוצע של כל תוצאות הספירה והחישוב הכולל מספר התא. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צנטריפוגה התאים שוב וresuspend אותםהנפח המתאים של מדיום סרום ללא לגרום לריכוז הסופי של 1.75 x 10 5 cells/100 μl נפח. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תאים מניחים על קרח לפני זריקת intracardiac. </li></ol> 2. הזרקת intracardiac מונחה ההדמיה אולטראסאונד <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש בעכברי עירום נשיים (BALB / ג נו / נו) בין 6-8 שבועות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התחבר מערכת ההדמיה. לאתחל את 704 (MHz 40) מתמר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התחל מחקר חדש ולמלא את הפרטים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרדימי (3% O isoflurane/100% 2 בחדר אינדוקציה) ולשמור על בעלי החיים עם isoflurane (2%) ב100% O 2 (DM 1 3 / min) במהלך ההליך כולו באמצעות חרטומו. הרדמה הוא אישר כאשר לא רפלקס נסיגה הוא ציין עם קמצוץ הבוהן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדר את הטמפרטורה של טבלת ההדמיה 37 ° C. תדביק את העכבר הרדים לשולחן ההדמיה המחומם במצב שכיבה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שמור ג&#39;ל אולטרסאונד על 37 מעלות צלזיוס לפני imהזדקנות. להחיל את הג&#39;ל לחזו של העכבר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הר מתמר בבעל. מנמיכים את המתמר עד שיגיע לעומק ההדמיה הרצוי. להזיז את הבמה עד לחדר השמאלי מזוהה עם אב העורקים עולים כאתר (איור 1 א). נעל את הבמה כאשר תצוגה ברורה של חדר השמאלי היא מדמיין. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צייר של תערובת תא 100 μl לתוך מזרק 1 מיליליטר עם מחט G 22. מקום ולתקן את המזרק על מזרק הר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הזז את המזרק קדימה לכיוון החזה בעכבר ולעבור אותו בזהירות מצד לצד עד שקצה המחט הוא בתחום ההדמיה של נוף (לפני הכניסה לעכבר). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התאם את גובה המחט וזווית כדי לכוון את החדר השמאלי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחדור את מחט המזרק לתוך חלל intercoastal מייד דרך שכבות עור ושרירים לתוך החדר השמאלי תחת הדרכתו של ההדמיה אולטרה סאונד. אינדיקציה להחדרה מוצלחת של המחט לתוך ventri השמאלCLE הוא ריפלוקס של דם טרי בעורקים (צבע ורוד בניגוד לדם ורידים אדום כהה) לתוך המזרק </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הזרק את תערובת התא לאט (איור 1). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בסיום, למשוך את המחט, להרים את המתמר, לנקות את הג&#39;ל אולטרסאונד עם גזה לחה ולהסיר קלטת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן את כלוב נקי עם כרית שחומם מראש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את החיה על הכרית ולבחון את החיה עד להחלמה מלאה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפקח על התנהגותם של בעלי החיים בכל שעות 24 במשך יומיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תנאים כלליים וסימני נוירולוגים של סיבוכים בעכברי ניסוי מנוטרים באופן שיגרתי. </li></ol> 3. ניטור ה-MRI של התפתחות גידול תוך גולגולתי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להשתמש במגנט טסלה 9.4 לעקוב אחר התפתחות תוך גולגולתי של גרורות במוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ליזום MRI שבועיים לאחר השתלת גידול ולחזור פעם בשבוע לתקופה של עד שלושה שבועות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדים את החיות עם 3% isoflurane ולשמור אותם תחת גןההרדמה RAL (isoflurane 1.5%). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפקח ולשמור על טמפרטורת הגוף של בעלי החיים ומתמידים נשימה לאורך כל הניסוי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> multislice ברזולוציה גבוהה (14 פרוסות עם 1 מ&quot;מ עובי, אין פער) T 1 - ו-T 2 משוקללי תמונות העטרה, המכסות את האזור מהאונה הקדמית לפוסה האחורית, נרכשים עם הפרמטרים הבאים: תמונות 1 משוקללת-T: ספין הפרוסה מרובה הד (SEM), TR / TE אלפיות = 400 msec/20, מטריקס: 256 x 256, FOV מ&quot;מ 20 x 20, ברזולוציה מטוס: 78 x 78 מיקרומטר 2. תמונות משוקללות-2 T: מהירות ספין הד הפרוסה מרובה רצפים (FSEMS), TR / TE אלפיות = 2500 msec/48, 8 רכבות הד, מטריקס: 256 x 256, FOV 20 x 20 מ&quot;מ, ברזולוציה מטוס: 78 x 78 מיקרומטר 28,9. נגעים סרטניים מופיעים בהירים יותר מרקמות מוח נורמליות על T תמונות משוקללת 2. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> גודל גידול נקבע על T תמונות 2-משוקללות ידי התוויית enhan ידניcing חלק מהמסה על כל תמונה על ידי שימוש בתוכניות MATLAB שנכתבו על ידינו 8. בהתחשב ביותר של הגידול בקטרים ​​קטנים יותר מהעובי פרוס (1 מ&quot;מ), גודל הגידול מוצג כבאזור מטוס ולא את עוצמת הקול. </li></ol> 4. H &amp; E מכתים אישור גרורות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להקריב את העכברים מייד לאחר MR האחרון לסרוק, לנתח את המוח של נושאי גידול ולהטביע אותו במדיום OCT ו קפוא ב-80 ° C. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סעיף סדרה של 10 מוח העטרה מיקרומטר בעובי דגימות עם cryostat. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבצע צביעת H &amp; E על החלקים במוח. </li></ol>

<ol><li>Schouten, L. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incidence+of+brain+metastases+in+a+cohort+of+patients+with+carcinoma+of+the+breast%2C+colon%2C+kidney%2C+and+lung+and+melanoma%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer%22%5BJournal%5D)">Incidence of brain metastases in a cohort of patients with carcinoma of the breast, colon, kidney, and lung and melanoma.</a> Cancer. 94, 2698-2705 (2002).</li>
<li>Lin, N. U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CNS+metastases+in+breast+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Oncol%22%5BJournal%5D)">CNS metastases in breast cancer.</a> J. Clin. Oncol. 22, 3608-3617 (2004).</li>
<li>Eichler, A. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+biology+of+brain+metastases-translation+to+new+therapies%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev.+Clin.+Oncol%22%5BJournal%5D)">The biology of brain metastases-translation to new therapies.</a> Nat. Rev. Clin. Oncol. , (2011).</li>
<li>Lockman, P. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heterogeneous+blood-tumor+barrier+permeability+determines+drug+efficacy+in+experimental+brain+metastases+of+breast+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Heterogeneous blood-tumor barrier permeability determines drug efficacy in experimental brain metastases of breast cancer.</a> Clin. Cancer Res. 16, 5664-5678 (2010).</li>
<li>Yoneda, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+bone-seeking+clone+exhibits+different+biological+properties+from+the+MDA-MB-231+parental+human+breast+cancer+cells+and+a+brain-seeking+clone+in+vivo+and+in%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">A bone-seeking clone exhibits different biological properties from the MDA-MB-231 parental human breast cancer cells and a brain-seeking clone in vivo and in.</a> 16, 1486-1495 (2001).</li>
<li>Palmieri, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Her-2+overexpression+increases+the+metastatic+outgrowth+of+breast+cancer+cells+in+the+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Her-2 overexpression increases the metastatic outgrowth of breast cancer cells in the brain.</a> Cancer Res. 67, 4190-4198 (2007).</li>
<li>Percy, D. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+characterization+of+changing+blood-tumor+barrier+permeability+in+a+mouse+model+of+breast+cancer+metastasis%3A+a+complementary+magnetic+resonance+imaging+approach%5BTitle%5D)+AND+%22Invest.+Radiol%22%5BJournal%5D)">In vivo characterization of changing blood-tumor barrier permeability in a mouse model of breast cancer metastasis: a complementary magnetic resonance imaging approach.</a> Invest. Radiol. 46, 718-725 (2011).</li>
<li>Zhou, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Longitudinal+MRI+evaluation+of+intracranial+development+and+vascular+characteristics+of+breast+cancer+brain+metastases+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Longitudinal MRI evaluation of intracranial development and vascular characteristics of breast cancer brain metastases in a mouse model.</a> PLoS One. 8, (2013).</li>
<li>Zhou, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+near-infrared+optical+imaging+of+2-deoxyglucose+uptake+by+intracranial+glioma+of+athymic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Dynamic near-infrared optical imaging of 2-deoxyglucose uptake by intracranial glioma of athymic mice.</a> PLoS One. 4, (2009).</li>
<li>Zhang, R. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+permeability+of+the+blood-brain+barrier+in+experimental+brain+metastases+produced+by+human+neoplasms+implanted+into+nude+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Pathol%22%5BJournal%5D)">Differential permeability of the blood-brain barrier in experimental brain metastases produced by human neoplasms implanted into nude mice.</a> Am. J. Pathol. 141, 1115-1124 (1992).</li>
<li>Mason, R. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumor+oximetry%3A+comparison+of+19F+MR+EPI+and+electrodes%5BTitle%5D)+AND+%22Adv.+Exp.+Med.+Biol%22%5BJournal%5D)">Tumor oximetry: comparison of 19F MR EPI and electrodes.</a> Adv. Exp. Med. Biol. 530, 19-27 (2003).</li>
<li>Gril, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pazopanib+reveals+a+role+for+tumor+cell+B-Raf+in+the+prevention+of+HER2%2B+breast+cancer+brain+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Pazopanib reveals a role for tumor cell B-Raf in the prevention of HER2+ breast cancer brain metastasis.</a> Clin. Cancer Res. 17, 142-153 (2010).</li>
</ol>

אין ניגודי האינטרסים הכריזו.

במחקר הנוכחי, יש לנו הראו כי הזרקה של חדר השמאל מונחה הדמיה אולטרסאונד מבטיחה את הדיוק, כך שכל בעלי חיים בגרורות במוח מחקר פיתח את זה ולא מוות של בעלי חיים נצפו. היופי של הזרקת דימוי מודרך הוא שהדרך של חדירת מחט לעור ולבסוף לתוך החדר השמאלי יכולה להיות במעקב ומותאם תחת תמונה, שהוא שונה מההליך הידני הדורש ציוני דרך אנטומיים קפדניות לעקוב. הבנות הנוכחיות של התפתחות של גרורות במוח תוך גולגולת מבוססות במידה רבה על מח...

גרורות במוח היא הגידול הממאיר תוך גולגולתי השכיחה ביותר במבוגרים. התחזית היא ענייה מאוד, עם חציון הישרדות של 4-6 חודשים אפילו עם טיפול אגרסיבי. סרטן השד הוא אחת משלושת סוגי הסרטן העיקריים גדולים עם תחלואה גבוהה של גרורות במוח 1-3. קווי סרטן שד המוח טרופי כמה הם מסוגלים לפתח גרורות במוח לאחר intracardiac או הזרקת intracarotid 4. הזרקה ישירה של תאים סרטניים לתוך החדר השמאלי יכולה לעקוף את מיטת נימי ריאה ובכך להגדיל את השכיחות של יצירת גרורות במוח תוך מזעור גרורות קרביים. קו מד&quot;א-MB231Br הוא אחד קווי סרטן השד האנושיים הנפוצים ביותר לפתח גרורות במוח במודלים של מכרסמים 5,6. כמו רבים מחקרים אחרים 4,7, אנחנו צריכים לבצע הליך ידני של הזרקת intracardiac במחקרים הקודמים שלנו. עם זאת, רק 50% שיעור מוצלח הושג עם המדריךהזרקה ושבריר של עכברים מתו מהפרוצדורות פולשניות החוזרות ונשנות במידה וניסויים לפני נכשלו. כאן, אנו מציגים את השימוש בהליך מונחה הדמיה כדי לאבטח את ההזרקה של תאי סרטן שד המבקש מוח לתוך החדר השמאלי של עכברי athymic. MRI ברזולוציה גבוהה אורך מוחל לעקוב אחר התפתחות תוך גולגולתי של גרורות במוח.

<table><tbody><tr><td>DMEM</td><td>HyClone</td><td>SH30022.01</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>טריפסין</td><td>מדיה-טק</td><td>25-051-C1</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>מונה תאים אוטומטי</td><td>BioRad</td><td>TC10</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>איזופלורן</td><td>בקסטר אינטרנשיונל בע"מ</td><td>1001936060</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>מערכת הדמיה ברזולוציה גבוהה VisualSonics Vevo 770&nbsp;</td><td>ויז'ואל סוניקס בע"מ</td><td></td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>מגנט קדח אופקי 9.4 T עם מערכת Varian INOVA Unity&nbsp;</td><td>אג'ילנט</td><td></td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>מתחם O.C.T</td><td>סאקורה פינטק ארה"ב</td><td>4583</td><td>&nbsp;</td></tr></tbody></table>

הזרקת intracardiac מונחה ההדמיה אולטראסאונד לפתח מודל עכבר של שד גרורות סרטן מוח ואחריו האורכי mri

Ultrasound Imaging-guided Intracardiac Injection to Develop a Mouse Model of Breast Cancer Brain Metastases Followed by Longitudinal MRI

גרורות במוח סרטן השד, המתרחשות ב30% מחולות בסרטן השד בשלב IV, קשורה בתמותה גבוהה. חציון ההישרדות היא רק 6 חודשים. זה קריטי כדי להיות מודלים של בעלי חיים מתאימים לחקות את ההתפשטות המודינמית של התאים גרורתי בתרחיש הקליני. כאן, אנו מציגים את השימוש בהדמית אולטרסאונד החיה קטנה כדי להדריך את ההזרקה מדויקת של תאי סרטן שד טרופי מוח לתוך החדר השמאלי של עכברים בעירום athymic. MRI אורך משמש להערכת חניכה וצמיחה של גרורות במוח תוך גולגולתי. הזרקת intracardiac מונחה אולטרסאונד מבטיחה לא רק בהזרקה מדויקת וזאת בשיעור מוצלח גבוהה יותר, אלא גם ירדה באופן משמעותי שיעור תמותה, בהשוואה להליך במדריך הקודם שלנו. בבדיקת MRI ברזולוציה גבוהה vivo מאפשרת ההדמיה של נגעי multifocal hyperintense, קטן כמו 310 מיקרומטר קוטר ב-T-משוקלל 2 תמונות ב3 שבועות לאחר הזרקה. FolloMRI w למעלה חושף את צמיחת גידול תוך גולגולתי ומספר גדל של גרורות שלהפיץ בכל המוח כולו.

עם הרזולוציה מרחבית הגבוהה של ה-MRI (78 מיקרומטר ברזולוציה מטוס), ניתן לזהות נגעי hyperintense קטנים כמו 310 מיקרומטר קוטר (איור 2). מאז גרורות במחקר זה הן קטנות מאוד והתפתחות של נמק ובצקת הוא מינימאלי, נגע hyperintense על T תמונות משוקללת 2 באמת ייצג את מסת הגידול. מחקרי MRI אורך לאפשר בהערכה לא פולשנית vivo של גידול. כפי שניתן לראות באיור 3, MRI ברז...

מודל שד סרטן מוח גרורות עכבר הוא הקים עם הזרקת intracardiac אולטרסאונד מונחה הדמיה של תאי MDA-MB231/Br-GFP. התפתחות של גרורות תוך גולגולתי multifocal כבר במעקב אורכים באמצעות רזולוציה גבוהה 9.4 T-MRI.

הזרקת intracardiac מונחה ההדמיה אולטראסאונד לפתח מודל עכבר של שד גרורות סרטן מוח ואחריו האורכי MRI

Breast cancer brain metastasis, occurring in 30% of breast cancer patients at stage IV, is associated with high mortality. The median survival is only 6 ...

המטרה הכללית של הליך זה היא להשתמש בהדמיית אולטרסאונד כדי להקים מודל עכברי של גרורות של סרטן השד במוח, שניתן יהיה לנטר לאחר מכן באמצעות MRI. הדבר משיג על ידי איסוף תאי סרטן שד בעלי טרופיזם למוח והזרקתם לחדר השמאלי. בעזרת הכוונה של אולטרסאונד, ניתן לנטר את התפתחות הגידול התוך-גולגולתית.באמצעות MRI, ואישור של גרורות על ידי צביעת H&amp;E. בסופו של דבר, הזרקה מדויקת בהנחיית דימות יכולה להגביר משמעותית את הצלחת הניטור, ההיווצרות וההתפתחות של גרורות לסרטן השד במוח. MRI אורךים מאפשר ניטור לא פולשני של ההיווצרות וההתפתחות של סרטן השד.כל הפרוצדורות בבעלי חיים אושרו על ידי הוועדה המוסדית לטיפול בבעלי חיים ושימושם (IACUC) של University of Texas Southwestern Medical Center. עבור פרוטוקול זה, הכינו תאי M-D-A-M-B 2 31 B-R-G-F-P שגודלו במצע DMEM המכיל 10% FBS, 1% glutamine ו-1% penicillin streptomycin. עקבו תמיד אחר מצב התאים והחליפו את המצע מדי יומיים עד שלושה ימים. כאשר הושגה 80% confluence, בצעו trypsinization ואספו את התאים.ראשית, הסר לחלוטין את המצע הישן באמצעות פיפטת ואקום. לאחר מכן, הוסף 5 mL של PBS כדי לשטוף את התאים בעדינות עד שכל התאים מכוסים ב-PBS. לאחר מכן, הסר את תמיסת השטיפה.בשלב הבא, הוסיפו 1.5 milliliters של trypsin לצלוחית. הטו את הצלוחית בעדינות כדי להבטיח שכל התאים מכוסים ב-trypsin

ultrasound-imaging-guided-intracardiac-injection-to-develop-mouse

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

הדמיה של פליטת אור ועין מתנהלת פעילות היפוקסיה, גורם 1α מוחל לפקח היפוקסיה תוך גולגולתי התפתחות גידולים של סרטן השד מודל גרורות במוח העכבר.

בתחום ההדמיה vivo של פליטת אור Dynamics היפוקסיה גידול של גרורות סרטן השד המוח במודל של עכברים

בפתוגנזה של גרורות בעצמות, אנגיוגנזה היא תהליך חיוני ולכן מהווה יעד עבור הדמיה וטיפול. כאן, אנו מציגים מודל עכברים של אתר ספציפי גרורות סרטן השד עצם לתאר אסטרטגיות אנגיוגנזה הלא פולשני...

רב מודלי הדמיה של אנגיוגנזה מודל עכברים עירום של גרורות סרטן השד עצם באמצעות דימות תהודה מגנטית, טומוגרפיה ממוחשבת נפחית ו אולטראסאונד

הזרקת intramyocardial מלעורית מונחה אקו מייצגת שיטה יעילה, אמינה, וניתן למקד עבור המשלוח של סוכני העברת גנים או תאים לתוך הלב העכברי. בעקבות הצעדים המפורטים בפרוטוקול זה, המפעיל יכול להיות מוכשר במהירות בטכניקה תכליתית, פולשנית זו.

הזרקת Transthoracic Intramyocardial אולטרסאונד מונחה בעכברים

הסרטן הוא מחלה מורכבת שמושפעת מהרקמות המקיפות את הגידול, כמו גם המתווכים פרו מקומיים ואנטי דלקתיים. לכן, דגמי הזרקת orthotropic, ולא מודלים תת עורי עשויים להיות שימושיים ללמוד התקדמות הסרטן באופן שהפתולוגיה אנושית מחקה טוב יותר.

הזרקת orthotopic של תאי סרטן השד לחלב שומן Pad של עכברים לחקר התפתחות גידול.

גרורה במוח הפך צורך רפואי דחוף כמו השכיחות שלה גדלה תוך אופציות טיפוליות נותרו פליאטיבי. יצירת מודלים של בעלי חיים הניסיונות של גרורות במוח באמצעות זריקת intracarotid העורקת של תאי סרטן מקל מחקרים מכניסטית של ביולוגית המחלה והערכת משטרי התערבות רומן.

Cell הזרקת הסרטן Intracarotid לייצר מודלי עכבר של המוח גרור

כאן, אנו מציגים פרוטוקול להשתיל תאים סרטניים בשד אל תוך כרית שומן החלב פשוטה, פחות פולשנית, אחיזה נוחה בדרך, והוא מודל סרטן השד זה העכבר orthotopic עם סביבה נאותה כרית שומן החלב יכול לשמש כדי לחקור היבטים שונים של סרטן.

הזרקת Orthotopic של תאים סרטניים בשד אל תוך כרית שומן החלב עכברים

עבודה זו מוגדרות מראש פרוטוקול מתקדם כדי להעריך במדויק את טעינת הגידול על ידי זיהוי של חלבון פלורסנט ירוק אותות biלומינסנציה, כמו גם שילוב של טכניקת גילוי מולקולרי כמותי.

לומדת משולשת סרטן השד שלילי באמצעות אורתובנושא שד סרטן השד מודל

מידול גרורות מוח תוך גולגולתי מסובך על ידי חוסר יכולת לפקח על גודל הגידול ותגובה לטיפול בשיטות מדויקות ובזמן. המתודולוגיה שהוצגה זוגות הזרקת גידול תוך גולגולתי עם ניתוח הדמיית תהודה מגנטית, אשר בשילוב, מטפח זריקות מדויקות ועקביות, ניטור משופר של בעלי חיים, ומדידות מדויקות של נפח הגידול.

מידול גרורות מוח באמצעות הזרקה תוך גולגולתית והדמיית תהודה מגנטית

אנו מתארים מודל עכבר xenograft של גרורות במוח של סרטן השד שנוצרו באמצעות הזרקת ורידים בזנב של קו תאי סרטן שד דלקתי מוגבר אנדוגניים HER2.

מידול גרורות במוח באמצעות הזרקת ורידים בזנב של תאי סרטן שד דלקתיים

גרורות במוח הן גורם לתחלואה קשה ולתמותה בחולי סרטן. רוב המודלים של עכברי גרורות במוח מסובכים על ידי גרורות מערכתיות מבלבלות ניתוח של תמותה ותוצאות התערבות טיפולית. מוצג כאן פרוטוקול להזרקת קרוטיד פנימית של תאים סרטניים המייצר גידולים תוך גולגולתיים עקביים עם גידולים סיסטמיים מינימליים.

מידול גרורות במוח על ידי הזרקת עורק הצוואר הפנימי של תאים סרטניים

למדו ליצור מודל עכבר של שד גרורות סרטן מוח באמצעות הזרקת intracardiac מונחה אולטראסאונד. שיטה זו מאפשרת מעקב אורכי ב-MRI ברזולוציה גבוהה לחקר התקדמות הגידולים.

הזרקת intracardiac מונחה ההדמיה אולטראסאונד לפתח מודל עכבר של שד גרורות סרטן מוח ואחריו האורכי MRI

גלה סרטונים נוספים