Endothelial Cell Tube Formation Assay for the <em>In Vitro</em> Study of Angiogenesis

Katie L. DeCicco-Skinner; Gervaise H. Henry; Christophe Cataisson; Tracy Tabib; J. Curtis Gwilliam; Nicholas J. Watson; Erica M. Bullwinkle; Lauren Falkenburg; Rebecca C. O'Neill; Adam Morin; Jonathan S. Wiest

doi:10.3791/51312

Assay היווצרות צינור תא האנדותל ל במבחנה חקר אנגיוגנזה

JoVE Journal
Biology

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Biology

Endothelial Cell Tube Formation Assay for the In Vitro Study of Angiogenesis

Assay היווצרות צינור תא האנדותל ל במבחנה חקר אנגיוגנזה

Full Text

61,956 Views

08:12 min

September 1, 2014

DOI: 10.3791/51312-v

Katie L. DeCicco-Skinner¹, Gervaise H. Henry¹, Christophe Cataisson², Tracy Tabib¹, J. Curtis Gwilliam¹, Nicholas J. Watson¹, Erica M. Bullwinkle¹, Lauren Falkenburg¹, Rebecca C. O'Neill¹, Adam Morin¹, Jonathan S. Wiest²

¹Department of Biology,American University, ²Laboratory of Cancer Biology and Genetics,National Cancer Institute, NIH

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Assay היווצרות הצינור הוא שיטה מהירה, לכימות למדידת אנגיוגנזה במבחנה. תאי האנדותל הם בשילוב עם אמצעי תקשורת מותנה ומצופים על תמצית קרום במרתף. היווצרות צינור מתרחשת בתוך שעות וצינוריות שהוקמו זה עתה לכמת בקלות.

המטרה הכוללת של הליך זה היא לקבוע גנים או מסלולים המעורבים באנגיוגנזה באמצעות שימוש בשיטה מהירה וכמותית במבחנה. זה מושג על ידי תאי אנדותל ראשוניים או אימורטליים מורעבים בסרום הראשון יום לפני הבדיקה. השלב השני הוא דגירה של תאי אנדותל עם סידן למשך 30 דקות, ולאחר מכן שטיפת התאים עם PBS.

לאחר מכן, תאי האנדותל הם מסנן פנימי להסרת גושים ונספרים. השלב האחרון הוא לשלב תאי אנדותל עם מדיה מותנית המכילה גורמים אנגיוגניים אפשריים ולהוציא אותם על תמצית קרום בסיס מוצקה. בסופו של דבר, מיקרוסקופ אור או פלואורסצנטי משמש להדמיית רשתות צינורות, אותן ניתן לכמת באמצעות תוכנות מחשב מיוחדות.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos