טיפול המבוסס על תאים לאי ספיקת לב בחולדה: חדר זוגי פתיחת בית החזה לאוטם שריר הלב וepicardial השרשה של תאים וBiomatrix

מטרת הליך זה היא לבצע כריתת בית חזה כפולה בחולדות על מנת לבצע קשירה כלילית ויישום אפיקרדיאלי. זה מושג על ידי ביצוע תחילה של כריתת בית החזה בחלל הבין-צלעי הרביעי. לאחר מכן, העורק הכלילי היורד הקדמי השמאלי או LAD נקשר.

לאחר מכן מבוצעת כריתת בית חזה שנייה שבועיים לאחר מכן בחלל הבין-צלעי החמישי. לבסוף, התאים והמטריצה מוחלים על פני הלב הפועם האוטם. בסופו של דבר, אקו לב מבוצע כדי להעריך את תפקוד הלב והיסטולוגיה מתבצעת על ידי מדידות גודל אוטם.

היתרון העיקרי של טכניקה זו על פני שיטות קיימות כמו סטרנוטומיה הוא שמדובר בגישה זעיר פולשנית המדגימה שההליך יהיה ולופז שלחה משתפי פעולה מהמעבדה שלנו. כל בעלי החיים טופלו בהתאם להמלצות ה-F-E-L-A-S-A והחוק השוויצרי להגנה על בעלי חיים. לאחר הוצאת חולדה ובידוד וניקוי עצמות הירך על פי פרוטוקול הטקסט, השתמש במספריים כדי לחתוך את שני קצות העצמות.

לאחר מכן כדי לשטוף את מח העצם, הזריק PBS סטרילי לליבת העצם, ואסוף את המח לצינור של 15 מיליליטר. צנטריפוגה את מח העצם שנאסף למשך שבע דקות ב -300 פעמים G.הסר את הספינאט עם שלושה מיליליטר של מאגר ליזה של כדוריות דם אדומות. השעו את הגלולה, דגרו את המתלה למשך דקה אחת בטמפרטורת החדר לפני שתסובבו שוב למשך שבע דקות ב-300 פעמים G לאחר החייאה.

השעיית הגלולה במדיום תרבית סטרילי. הוסף מדיום תרבית תאים נוסף בבקבוק תרבית של 150 מיליליטר וזרע את התאים ביום השני לדגירה. שנה את המדיום כדי להסיר תאים שאינם נצמדים והמשך להחליף את המדיום כל יומיים למשך שבועיים-שלושה עד להשגת צפיפות התאים הרצויה.

כדי לבצע את כריתת בית החזה הראשונה, התחל בשקילת החולדה והגדר את פרמטרי ההנשמה בהתאם. יציאת האוורור מוגדרת אוטומטית. לאחר מכן גלחו את החלק השמאלי של בית החזה, הדליקו כרית חימום והגדירו אותו ל -37 מעלות צלזיוס.

לאחר הרדמת החולדה על פי פרוטוקול הטקסט, בצע צביטה בבוהן או בזנב לפני הנחת החולדה על כרית החימום במצב שכיבה באמצעות קטטר IV בגודל 14, החדרת החיה, ולאחר מכן חבר את צנתר האינטובציה למאוורר מכרסמים. מתוכנת ל-2.5 ליטר לדקה של חמצן, 2.5% כמות פלואור, נפח גאות של שני מיליליטר ותדירות נשימה של 90 נשימות לדקה. לאחר הכנת מזרק עם בופרנורפין 0.1 מיליגרם לק"ג תת עורית, יש להזריק שליש מהתמיסה, ולאחר מכן להשתמש בתמיסת בטדין 1% לחיטוי האזור.

לאחר מכן, חתכו את העור בניצב לעצם החזה של החלל הבין-צלעי הרביעי והפרידו את שלוש השכבות של שריר בית החזה. ואז פתח את החלל הבין-צלעי הרביעי בין צלעות ארבע וחמש. השתמש במחזיר קטן כדי לפזר את הצלעות ולחשוף את הלב.

לאחר מכן פתח בזהירות את קרום הלב ואתר את העורק הכלילי היורד הקדמי השמאלי או LAD, והשתמש בתפר 7.0 כדי לקשור אותו ארבעה מילימטרים מתחת לאטריום. לאחר מכן שלוט בשינוי הצבע של האזור האיסכמי עם שלושה תפרי אפס הממוקמים בערך ורחוק מעצם החזה. הכינו שני תפרים שישמשו לסגירת החלל הבין-צלעי.

הדק את התפר הדיסטלי. מהדק את צינור הפליטה של מכונת ההנשמה למשך שתי שניות על מנת לנפח את החזה ולהימנע מפנאומוטורקס. ואז הדק את התפר השני.

מקם את שכבות השרירים בחזרה למקומן. לאחר מכן השתמש בחמישה תפרים אפס כדי לסגור את העור עם תמיסת 1% בטדין. יש לחטא את התפר ולהזריק את תמיסת הבופרנורפין שנותרה.

כבה את מערכת ההרדמה והסר את צנתר האינטובציה. שמור את החולדה בכלוב מתחת למנורה חמה למשך שעה עד שעתיים לפני החזרתה ליחידת IVC. שבועיים לאחר כריתת בית החזה הראשונה, הריפוי הושלם וצלקת בקושי נראית לעין.

בעקבות ההליך שתואר קודם לכן בסרטון זה להכנת החולדה לניתוח, חתכו את העור בניצב לעצם החזה בחלל הבין-צלעי החמישי. הפרד את שלוש שכבות השריר ופתח את החלל הבין-צלעי החמישי בין צלעות חמש ושש. השתמש במחזיר קטן כדי לפזר את הצלעות ולחשוף את הלב.

אם יש הדבקה מסוימת, השתמש במלקחיים עדינים כדי להקל עליה בזהירות. לאחר מכן, אתר את אזור האוטם המופיע כאזור חיוור מתחת לקשירה. במידת הצורך, הכנס חתיכה של 10 סנטימטר של שבעה תפרים אפסים בקודקוד ומשוך אותה בעדינות כדי לדמיין טוב יותר את החדר השמאלי.

לאחר מכן למרוח תאים ומטריצה על פני השטח של האזור האיסכמי של הלב. לאחר הגלולה, ארבע פעמים 10 לששת התאים כמתואר בפרוטוקול הטקסט, הפקידו את הפלטה על הלב לפני השימוש בחומר איטום פיברין כדי לכסות אותו. שכבת הדבק מקבעת את התאים לפני השטח של הלב.

לאחר הסרת פיסת התפר ממצב הקודקוד, השריר חוזר למקומו תופר ומחטא את החיה. כפי שהודגם קודם לכן בסרטון כפי שמוצג כאן. לאחר התערבות כירורגית, בעלי חיים ירדו במשקל והתאוששו במהירות לפני שעלו במשקל ללא תלות בטיפול שבוצע כפי שמודגם בגרף קפלן זה, שיעור ההישרדות גבוה לאחר כריתת בית החזה הראשונה, בעלי חיים שטופלו בפיברין ו/או בתאים הראו שיעורי הישרדות נמוכים יותר מקבוצות אחרות כפי שניתן לראות בגרף זה.

עם זאת, שיעורי ההישרדות הכוללים נותרו גבוהים לאחר שנייה. כריתת בית החזה ותפקוד הלב הטיפולי הוערכו על ידי אקו לב. תמונות מייצגות אלה של מצב M עבור בעלי חיים בריאים ואוטמים ממחישות כי התכווצות דופן LV מבוטלת שבועיים לאחר קשירת LAD נרשם קיצור חלקי שבועיים לאחר LAD על סך של 104 בעלי חיים.

התפלגות השכיחות מציגה שיטות הניתנות לשחזור סביר עם מקדם שונות של 17%איור זה מתאר ייצוג גרפי של תפקוד הלב על ידי מקטע הפליטה הנמדד שבועיים ושישה שבועות לאחר LAD תפקוד הלב ממשיך לרדת במהלך פרק זמן זה. שיפוץ לב מתרחש גם בתקופה זו ומיוצג כאן על ידי עלייה בנפחי ה-LV שנרשמו הן באחות והן בדיאסטולה. לבסוף, צביעת זהב על חלקי הלב חשפה כי רקמה פיברוטית ובסופו של דבר צלקת טרנסמורלית התפתחה לאחר שישה שבועות לאחר קשירת LAD לאחר שליטה, ניתן לבצע טכניקה זו תוך 30 עד 40 דקות אם היא מבוצעת כראוי.

לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד לבצע כריתת חזה כפולה זעיר פולשנית.