מעקב מיקרוביאלית זיהום בסביבות קמעונאיות באמצעות פלורסנט אבקה - קמעונאות מעדני סביבת דוגמא

המטרה הכוללת של הליך זה היא להדגים את מנגנון זיהום הצולב הפוטנציאלי של הפתוגן המועבר במזון, *Listeria monocytogenes*, בסביבת דלי קמעונאית. דבר זה מושג תחילה על ידי תכנון מטבח דלי מדמה כדי לסמלץ את הסביבה הקמעונאית.

בשלב השני, מזון מעובד (נקניקים) מוחדר בתרכיב פלואורסצנטי, ולאחר מכן מתבקשים מתנדבים לפרוס, לארוז ולאחסן את הבשר המצופה במקרר. בשלב הסופי, מעקב אחר זיהום צולב פוטנציאלי יתבצע באמצעות תצפית על התרכיב הפלואורסצנטי תחת אור שחור. לבסוף, ניתן להשתמש בספקטרומטריה כדי לכמת את התרכיב הפלואורסצנטי, ובכך להדגים כיצד מתרחש זיהום צולב בסביבת מכירת מזון מעובד.

היתרון העיקרי של טכניקה זו על פני שיטות המשתמשות במיקרואורגניזמים הוא שבאמצעות טכניקה זו, ניתן לכמת את התרכובת הפלואורסצנטית במהירות באמצעות פוטומטריה ספקטרלית. למרות ששיטה זו יכולה לספק תובנות לגבי קמעונאות, ניתן ליישם את בטיחות המזון גם במערכות אחרות כגון חוות קטנות, מפעלי עיבוד מזון ומפעלי שירותי מזון אחרים. התחילו בהנחת כפפות נקיות ו-70% ethanol על הדלפק לשימוש במהלך הפרוצדורה.

לאחר מכן, השתמש בסכין ובקרש חיתוך נקיים כדי לפרוס את נקניקי המזנקים לשלוש דגימות בעובי של כ-100 millimeter. לאחר מכן, השתמש בספוג נקי ולח מעט כדי לצפות באופן אחיד דגימה אחת באבקה פלורסצנטית שהוכנה טרי. לבסוף, עטוף את כל הדגימות בניילון נצמד והשתמש בסרט דביק כדי לסמן את הדגימה המצופה באבקה פלורסצנטית כ-a ואת שתי הדגימות הנותרות כ-b ו-c.

לאחר מכן, הניחו את הדגימות בטמפרטורה של 4 °C והתקינו נורות פלורסצנט קומפקטיות שחורות בעלות נורות של 13 watt מסביב לאזור הפרוסה. גזרו ריבוע של 5x5 סנטימטר של נייר אלומיניום שישמש כתבנית לסבבי דגימה, ובשלב זה מלאו גם מבחנות של 1315 milliliter ב-6 mL של 95% ethanol. לאחר מכן, התקינו שלוש מצלמות וידאו במיקומים אסטרטגיים כדי לצפות בכל אזורי הדלי המדומה בו-זמנית.

כדי לעקוב אחר זיהום נקניקי הבית של המשתתפים באמצעות אבקה פלואורסצנטית, הפעילו את המצלמות כדי להקליט את המשתתפים במהלך הפרוצדורה וצלמו תמונה של דלגט הבית המדומה תחת תאורה פלואורסצנטית שחורה. לאחר מכן, הנחו כל משתתף לבצע את השלבים הבאים. ראשית, הוציאו את דגימת הבשר המסומנת באות A מהמקרר.

בשלב הבא, הסירו את עטיפת הבשר, שמרו את נייר הנצמד, והניחו את הדגימה על מגש ההובלה של הפרוסה. הדקו את הדגימה בעזרת תפס הבשר, לאחר מכן הפעילו את הפרוסה וכוונו את כפתור מדד הפריסה למספר שתיים. כעת, פרסו והניחו חמש פרוסות בשר על נייר הנייר למזון, לאחר מכן כבו את המכשיר ושחררו את תפס הבשר.

הניחו את פרוסות הבשר בשקית פלסטיק המסומנת באות A, ולאחר מכן עטפו מחדש את דגימת הבשר והחזירו אותה למקרר, לאחר פריסת דגימות B ו-C כפי שהודגם זה עתה לאחר צילום המטבח המדומה. כדי לכמת את זיהום אבקת הפלואורסצנט, הניחו את תבנית נייר האלומיניום הסטרילית על כל אחד מהאזורים המצוינים בתמונה. לאחר מכן, דגמו כל אזור באמצעות מקלון סיבי כותנה של calcium alginate סטרילי, טבול ב-95%Ethanol, והניחו מקלון אחד בכל אחת מהמבחנות המכילות 95%Ethanol.

ערבבו כל מבחנה היטב במערבל Vortex, ולאחר מכן העבירו את התוכן לקוובטות זכוכית נפרדות. מדדו את הבליעה של כל דגימת swab ב-370 nanometers, ולאחר מכן השתמשו בנוסחה כדי לחשב את כמות האבקה הפלורסצנטית שנדגמה מכל אזור. לבסוף, צפו בסרטון כדי לכמת את מספר הפעמים שבהן נגעו במשטחים השונים של דגם השולחן.

בניסוי מייצג זה, מתנדבים צולמו בווידאו כדי לנתח את התדירות הממוצעת של מגע ידיים על משטחים שונים של מכשיר פריסת הבשר במהלך הכנת פרוסות הבשר. לאחר מכן, צופים שונים ניתחו את הווידאו ותדירות מגע הידיים חושבה לממוצע. הנתונים מעידים כי כמצופה, לאחיזת הבשר, לעטיפת הבשר, לבשר למאכל ולנייר הבשר היו שיעורי מגע הידיים הגבוהים ביותר, עם ממוצע של שמונה עד 14 מגעים למשתתף.

משטחים, כגון המקרר, שולחן האחיזה, תופס הבשר, להב הפרוסה ורכיבים שונים של מגש ההובלה, נדגמו באמצעות מטוש, וכמות האבקה הפלורסצנטית על הרכיבים השונים של הפרוסה ובמטבח המדמה נמדדה כמותית. כפי שהודגם זה עתה, התוצאות היו כמצופה. התוצאות הצביעו על כך שרמות הזיהום הגבוהות ביותר נמצאו במקרר, בתופס, בתופס הבשר ובלוחות האחוריים.

בעת ביצוע הליך זה, חשוב לזכור להפעיל את מצלמות הווידאו בו-זמנית כדי להבטיח שצילומי התמונות מסונכרנים. שיטה זו יכולה לסייע במתן מענה לשאלות מפתח בתחום בטיחות המזון, כגון כיצד מתרחשת זיהום צולב, וניתן לפתח שיטות הדרכה יעילות בהתבסס על תוצאותינו.