מעקב מיקרוביאלית זיהום בסביבות קמעונאיות באמצעות פלורסנט אבקה - קמעונאות מעדני סביבת דוגמא

המטרה הכוללת של הליך זה היא להדגים את מנגנון הזיהום הצולב הפוטנציאלי של הפתוגן הנישא במזון, ליסטריה מונוציטוגנס. במעדנייה קמעונאית. זה מושג על ידי עיצוב מטבח מעדנייה מדומה כדי לדמות את הסביבה הקמעונאית.

בשלב השני, בשר המעדנייה מחוסן בתרכובת פלואורסצנטית, ולאחר מכן מתבקשים המתנדבים לפרוס, לארוז ולאחסן את הבשר המצופה במקרר. בשלב האחרון, הזיהום הצולב הפוטנציאלי יהיה במעקב על ידי התבוננות בתרכובת הפלואורסצנטית באור שחור. בסופו של דבר, ניתן להשתמש בספקטרומטריה כדי לכמת את התרכובת הפלואורסצנטית הממחישה כיצד מתרחש זיהום צולב בסביבת המעדנייה הקמעונאית.

היתרון העיקרי של טכניקה זו על פני שיטות המשתמשות במיקרואורגניזמים הוא שבעזרת טכניקה זו ניתן לכמת את התרכובת הפלואורסצנטית במהירות על ידי פוטומטריה ספקטרלית. למרות ששיטה זו יכולה לספק תובנה לגבי קמעונאות, ניתן ליישם את בטיחות המזון גם במערכות אחרות כגון חוות קטנות, מפעלי עיבוד מזון ופעולות אחרות של שירותי מזון. התחל בהנחת כפפות נקיות ואתנול 70% על השיש לשימוש במהלך ההליך.

לאחר מכן השתמש בסכין נקייה ובקרש חיתוך כדי לפרוס את בשר המעדנייה לשלוש דגימות בעובי של כ-100 מילימטר. לאחר מכן השתמש בספוג נקי לח מעט כדי לצפות דגימה אחת באופן שווה באבקת פלורסנט טרייה שהוכנה. לאחר מכן, עטפו את כל הדגימות בניילון נצמד והשתמשו בסרט כדי לתייג את הדגימה המצופה באבקה פלואורסצנטית כ-a ואת שתי הדגימות הנותרות כ-b ו-c.

לאחר מכן הניחו את הדגימות בארבע מעלות צלזיוס והרכיבו נורות פלורסנט קומפקטיות שחורות עם נורות 13 וואט סביב אזור הפורס. חותכים חמישה על חמישה סנטימטרים של רדיד אלומיניום כדי לשמש כתבנית לספוגית וממלאים צינורות של 1315 מיליליטר בשישה מיליליטר של אתנול 95% גם בשלב זה. לאחר מכן הרכיב שלוש מצלמות וידאו במיקומים אסטרטגיים כדי לצפות בכל אזורי המעדנייה המדומה בו זמנית.

כדי לעקוב אחר זיהום בשר המעדנייה באבקת פלורסנט, הפעל את המצלמות כדי לצלם את המשתתפים בווידאו במהלך ההליך וצלם תמונה מקדימה של המעדנייה המדומה תחת אור פלואורסצנטי שחור. לאחר מכן בקש מכל משתתף לבצע את הפעולות הבאות. ראשית, הסר את דגימת הבשר המסומנת A מהמקרר.

לאחר מכן, פרקו את הבשר, שמרו את הניילון והניחו את הדגימה על מגש העגלה של הפורס. אבטח את הדגימה עם אחיזת הבשר, ולאחר מכן הפעל את הפורס והתאם את כפתור אינדקס הפורס לשניים. לאחר מכן, פורסים ומחלקים חמש חתיכות בשר על נייר המעדנייה, ולאחר מכן מכבים את החשמל ומשחררים את אחיזת הבשר.

מניחים את פרוסות הבשר בשקית ניילון המסומנת A, ולאחר מכן עוטפים מחדש את דגימת הבשר ומחזירים אותה למקרר לאחר חיתוך דגימות B ו-C כפי שהודגם זה עתה לאחר צילום של המטבח המדומה. כדי לכמת את זיהום אבקת הפלורסנט, הנח את תבנית נייר האלומיניום הסטרילית על כל אזור המצוין בתמונה. לאחר מכן ספוג כל אזור עם צמר גפן סטרילי של סידן אלגינט, ספוג באתנול 95% והניח צמר גפן אחד בכל אחד מהצינורות של 95% אתנול.

מערבל כל צינור ביסודיות, ולאחר מכן מעביר את תכולתו לקובטות זכוכית בודדות. קרא את הספיגה של כל דגימת ספוגית ב-370 ננומטר, ולאחר מכן השתמש בנוסחה כדי לחשב את כמות האבקה הפלואורסצנטית שנלקחה מכל אזור. לבסוף, צפו בסרטון כדי לכמת את מספר הפעמים שנגעו במשטחים השונים של המדומה דה.

בניסוי מייצג זה, מתנדבים צולמו בווידאו כדי לנתח את התדירות הממוצעת של מגע ידיים על משטחים שונים של פורס הבשר במהלך הכנת פרוסות המעדנייה. עבור צופים שונים ניתחו את הסרטון ותדירות מגעי הידיים הייתה ממוצעת. הנתונים מצביעים על כך שכצפוי, במעדניית אחיזת הבשר, עטיפת הבשר, בשר המעדנייה ונייר המעדנייה היו השיעורים הגבוהים ביותר של מגע ידיים עם ממוצע של שמונה עד 14 מגעים למשתתף.

לאחר מכן נלקחו משטחים, כגון המקרר, שולחן האחיזה, אחיזת הבשר, להב הפורס ורכיבים שונים של מגש הכרכרה, וכמות האבקה הפלואורסצנטית על הרכיבים השונים של הפורס והמטבח המדומה. כפי שהודגם כצפוי. התוצאות הצביעו על כך שרמות הזיהום הגבוהות ביותר נמצאו על המקרר, האחיזה, אחיזת הבשר והצלחות האחוריות.

בעת ניסיון הליך זה, חשוב לזכור להפעיל את מצלמות הווידאו בו-זמנית כדי להבטיח שהתמונות מסונכרנות. שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום בטיחות המזון, כגון כיצד מתרחש זיהום צולב, וניתן לפתח שיטות אימון יעילות על סמך התוצאות שלנו.