RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
he_IL
Menu
Menu
Menu
Menu
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
דג הזברה(דניו ריו)הוא מערכת מודל חוליות רבת עוצמה לחקר התפתחות, מידול מחלות והקרנה לטיפולים חדשניים. בשל גודלם הקטן, ניתן לשכן במעבדה מספר גדול של דגי זברה בעלות נמוכה. למרות שדגי זברה קלים יחסית לתחזוקה, יש לתת שיקול מיוחד הן לתזונה והן לאיכות המים כדי לייעל את בריאות הדגים ואת הצלחת הרבייה.
וידאו זה יספק סקירה של גידול דגי זברה ותחזוקה במעבדה. לאחר סקירה קצרה של בית הגידול הטבעי של דגי הזברה, יידונו טכניקות החיוניות לשחזור סביבה זו במעבדה, כולל אלמנטים מרכזיים של מערכות מתקן דגים להזרמת מים והכנת שרימפס במי מלח כחלק מדיאטת דגי הזברה. בנוסף, המצגת תכלול מידע על אופן המעקב אחר זני דגי זברה ספציפיים בסביבת מעבדה, תוך התייחסות ספציפית לאיסוף דגימות סנפירי זנב להפקת DNA וגנוטיפינג. לבסוף, שינויים ניסיוניים בסביבת דגי הזברה יידונו כאמצעי לקידום הבנתנו את הדגים הללו, ובתמורה את עצמנו.
גידול נכון חיוני להצלחת הניסויים המבוצעים בדגי זברה. איכות מים אופטימלית מקדמת את בריאות הדגים ואת יכולת הרבייה הניסיונית. בנוסף, ייצור ביצי דגי זברה תלוי מאוד בתזונה נכונה. סרטון זה מתאר כיצד דגים שוכנים ומאכילים במעבדה, טיפים לטיפול וניהול מלאי, והצצה לאופן שבו סביבת דגי הזברה מתומרנת בניסויים ביולוגיים.
בואו נתחיל על ידי עובר על היסודות של בית הגידול של דגים.
דגי זברה פראיים מקורם במים טריים של ההימלאיה. באקלים זה, הדגים מבלים את רוב ימיהם בעשיית גופים איטיים של מים מתוקים.
איך גן העדן הזה נוצר מחדש במעבדה? בואו נתחיל עם החלק החשוב ביותר: המים. למרות שמים מתוקים עשויים להיראות קלים להשגה, מי ברז רעילים לדגי זברה בגלל כלור ומזהמים פוטנציאליים. לכן, יש להעביר מי אקווריום דרך מערכת טיהור, כגון יחידת אוסמוזה הפוכה. מלחים ומאגרי pH מתווספים בחזרה למים המטוהרים כדי לייעל את המליחות ואת ה- pH.
כדי למקסם את היעילות הניסיונית, דגים רבים נשמרים בכמות מוגבלת של מים. הפסולת מצטברת במהירות עם כל הדגים האלה שוחים מסביב, מה שהופך את שינוי המים לחיוני. צורך זה יוצר ביקוש גבוה למים, ולכן מתקני דגים משתמשים במערכת recirculation כדי למזער את השימוש במים. מים מלוכלכים מסוננים ומעוקרים על ידי טיפול UV לפני שהם זורמים בחזרה למערכת.
דגי זברה נשמרים במיכלים מיוחדים, הזמינים בגדלים מרובים. הטנקים מכוסים כדי להפחית את האידוי ולמנוע בריחה של דגים. כדי לאפשר למיכל להשתלב במערכת, למכסה יש חורים שדרכם זורמים מים נקיים כל הזמן. מפלס המים נשאר יציב הודות ליציאת הצפה בחלק האחורי של המיכל, המכוסה בבלבל עם חורים קטנים המאפשרים למים מלוכלכים, אך לא דגים, לזרום החוצה.
למרות חילופי המים, אצות ופסולת מוצקה עדיין יכולים להצטבר במיכלים, ולכן הם צריכים להיות מנוקים באופן קבוע.
גם בקרה סביבתית במתקני דגים חשובה ביותר. הטמפרטורה נשמרת ליד 28 °C (55 °F), או 80 °F. כדי לשמור על השעון הביולוגי של בעלי החיים, האורות נשלטים על מחזור עם 14 שעות של אור ו -10 שעות של חושך.
עכשיו שעברנו על תנאי הדיור של דגי הזברה, בואו נדבר על התזונה שלהם.
בסביבתם הטבעית, דגי זברה צורכים במידה רבה זואופלנקטון וחרקים. דיאטה זו נוצרת מחדש במעבדה על ידי שילוב של מזון יבש ואורגניזמים קטנים. דגים זחליים וצעירים משגשגים על מיקרואורגניזמים חיים כמו פרמזיה, בעוד דגים בוגרים מוזנים לעתים קרובות אבקות זמינות מסחרית וסרטנים קטנים המכונה שרימפס מי מלח.
יצורים אלה נוחים במיוחד להכנת מעבדה, כי הביצים שלהם ניתן לאחסן כמו ציסטות רדומות בטמפרטורת החדר. כדי להכין את השרימפס לאכילה, הקליפות החיצוניות הקשות שלהם מוסרות על ידי טיפול עם אקונומיקה. לאחר מכן, ביצים ערופות נשטפות ביסודיות. הביצים מועברות לאחר מכן למגדל מאוורר כדי לאפשר צמיחה במי מלח במשך יום אחד. לבסוף, השרימפס בקעה נאספים ונשטפים במסננת רשת ולאחר מכן לשים לתוך בקבוקים להאכלה. דגים ניזונים בדרך כלל 2 - 3 פעמים ביום, לסירוגין הזנה חיה ויבשה, וזרימת המים כבויה בתקופה זו, כך שהמזון לא צף לפני שהוא נאכל.
עכשיו שאתה יודע איך לשכן ולהאכיל דגים, הגיע הזמן ללמוד איך לעבוד עם ולעקוב אחר מלאי הדגים שלך.
מתקני הדגים במעבדה מאכלסים סוגים רבים ושונים של דגי זברה, מזני סוג בר, לדגים שהגנום שלהם שונה עם מוטציות נקודתיות מפריעות וטרנסגנים מוחדרים. כדי לעקוב אחר כל הדגים האלה, בעלי חיים עם רקע גנטי דומה נשמרים יחד במיכלים מסומנים. תוויות טנקים צריכות להכיל מידע מזהה יסודי, כולל גנוטיפ הדגים ותאריך הלידה.
פריון דגי הזברה מתחיל לרדת לאחר השנה הראשונה לחיים, ולכן יש לחדש את המלאי מדי שנה. דגי זברה אינם שורדים היטב זנים מולדים לחלוטין, ולכן יש לשמור על המגוון הגנטי על ידי איסוף צאצאים מצלבים של דגים שאינם קשורים זה מזה, או "מפרצונים".
כאשר outcrossing קווים מהונדסים או מוטנטיים, צאצאים הנושאים את השינוי הגנטי הרצוי חייבים להיות מזוהים על ידי ביטוי פלואורופור או genotyping. לגנוטיפ, ראשית להרגיז את הדגים בטריקאין. לאחר מכן, לחתוך חתיכה קטנה של סנפיר הזנב כמקור של DNA.
לבסוף, לבודד DNA מדגימת הזנב ולהשתמש בו לניתוח PCR כדי לזהות רצפים ספציפיים. בזמן ההמתנה לתוצאות, שמור כל דג במיכל הקטן שלו עם מזהה.
כעת, לאחר שעברנו על תנאי גידול דגים סטנדרטיים, בואו נבחן כמה דרכים שבהן הסטנדרטים האלה מופעלים כדי לחקור תהליכים ביולוגיים.
טמפרטורת מי המערכת יכולה להשפיע עמוקות על בריאות דגי הזברה. כדי ליצור מודל של סוכרת, חוקרים אלה מטפלים בדגים עם רעלן הלבלב, סטרפטוזוצין, ומאחסנים אותם במיכלים עם טמפרטורת מים מופחתת. הדגים הסוכרתיים מראים פנוטיפים צפויים, כגון נזק לכליות ולעיניים, כמו גם התחדשות מופחתת של סנפירי הזנב, וניתן להשתמש בהם כדי לבחון את הביולוגיה של הסוכרת.
ניתן גם לשנות מערכות טנקים למטרות ניסיוניות ספציפיות. מחקרים על התנהגות השחייה בדגים יכולים לשמש כקריאה לחרדה, תוקפנות או התנהגויות חברתיות. כאן, מעקב וידאו משמש כדי לנתח את ההבדל בהתנהגות השחייה בין דגים לא מטופלים ואלה שטופלו בתרופה נוירואקטיבית. מחקרים כאלה עוזרים לקדם את ההבנה שלנו במדעי המוח ויכולים להיות כלי לגילוי סמים.
תנאי אור משתנים יכולים להשפיע גם על דגי זברה. טיפול אור אינטנסיבי יכול אפילו לשמש כדי לפטור את התאים חישת האור של הרשתית. לדגים אלה יש את היכולת לתקן רקמת רשתית פגומה על ידי התפשטות תאים, וזה עניין משמעותי למדענים חוקרים ניוון רשתית אצל אנשים.
הרגע צפית בסרטון של ג'וב על תחזוקת דגי זברה וצמחות. עברנו על היסודות של איך דגים שוכנים, מאכילים ומנוהלים במעבדה. תודה שצפיתם!
גידול נכון חיוני להצלחת הניסויים המבוצעים בדג הזברה. איכות מים אופטימלית מקדמת את בריאות הדגים ואת יכולת השחזור הניסיונית. בנוסף, ייצור ביצי דג הזברה תלוי מאוד בתזונה נכונה. סרטון זה מתאר כיצד דגים מאוחסנים ומוזנים במעבדה, טיפים לטיפול וניהול מלאי, והצצה לאופן שבו סביבת דג הזברה מתמרנת בניסויים ביולוגיים.
נתחיל במעבר על היסודות של בית הגידול של הדגים.
דג זברה בר מקורו במי ההימלאיה הטריים. באקלים זה, הדגים מבלים את רוב ימיהם בהתחממות בגופי מים מתוקים הנעים לאט.
איך משחזרים את גן העדן הזה במעבדה? נתחיל עם החלק החשוב ביותר: המים. למרות שמים מתוקים עשויים להיראות קלים להשגה, מי ברז רעילים לדגי הזברה בגלל כלור ומזהמים פוטנציאליים. לכן, יש להעביר מי אקווריום דרך מערכת טיהור, כגון יחידת אוסמוזה הפוכה. לאחר מכן מוסיפים מלחים ומאגרי pH בחזרה למים המטוהרים כדי לייעל את המליחות וה-pH.
כדי למקסם את יעילות הניסוי, דגים רבים מוחזקים בכמות מוגבלת של מים. הפסולת מצטברת במהירות עם כל הדגים ששוחים מסביב, מה שהופך את החלפת המים לחיונית. צורך זה יוצר ביקוש גבוה למים, ולכן מתקני דגים משתמשים במערכת מחזור כדי למזער את השימוש במים. מים מלוכלכים מסוננים ומעוקרים על ידי טיפול UV לפני שהם זורמים חזרה למערכת.
דגי הזברה מוחזקים במיכלים מיוחדים, הזמינים במספר גדלים. המיכלים מכוסים כדי להפחית את האידוי ולמנוע בריחת דגים. כדי לאפשר למיכל להשתלב במערכת, במכסה יש חורים שדרכם זורמים כל הזמן מים נקיים. מפלס המים נשאר יציב הודות ליציאת הצפה בחלק האחורי של המיכל, המכוסה במבלבל עם חורים קטנים המאפשרים למים מלוכלכים, אך לא לדגים, לזרום החוצה.
למרות חילופי המים, אצות ופסולת מוצקה עדיין יכולות להצטבר במיכלים, ולכן יש לנקות אותן באופן קבוע.
גם בקרה סביבתית במתקני דגים חשובה ביותר. הטמפרטורה נשמרת קרוב ל-28? C, או 80 ?F. כדי לתחזק את בעלי החיים? השעון הביולוגי, האורות נשלטים במחזור עם 14 שעות אור ו-10 שעות חושך.
עכשיו לאחר שעברנו על תנאי הדיור של דגי הזברה, בואו נדבר על התזונה שלהם.
בבית הגידול הטבעי שלהם, דגי הזברה צורכים בעיקר זואופלנקטון וחרקים. דיאטה זו נוצרת מחדש במעבדה על ידי שילוב של מזון יבש ואורגניזמים קטנים. זחלים ודגים צעירים משגשגים על מיקרואורגניזמים חיים כמו פרמציה, בעוד שדגים בוגרים ניזונים לעתים קרובות מאבקות זמינות מסחרית וסרטנים קטנים הידועים בשם שרימפס מלח.
יצורים אלה מתאימים במיוחד להכנה במעבדה, מכיוון שניתן לאחסן את הביצים שלהם כציסטות רדומות בטמפרטורת החדר. להכנת השרימפס לאכילה, קליפתם החיצונית הקשה מוסרת על ידי טיפול באקונומיקה. לאחר מכן, ביצים ללא כיסוי נשטפות היטב. לאחר מכן הביצים מועברות למגדל מאוורר כדי לאפשר צמיחה במי מלח למשך יום אחד. לבסוף, השרימפס שבקעו נאספים ונשטפים במסננת רשת ואז מכניסים אותם לבקבוקים להאכלה. דגים מוזנים בדרך כלל 2-3 פעמים ביום, לסירוגין מזון חי ויבש, וזרימת המים מושבתת במהלך תקופה זו כדי שהמזון לא יצוף לפני האכילה.
עכשיו כשאתה יודע איך לשכן ולהאכיל דגים, הגיע הזמן ללמוד איך לעבוד עם מלאי הדגים שלך ולעקוב אחריו.
מתקני דגי מעבדה מאכלסים סוגים רבים ושונים של דגי זברה, מזנים מסוג בר, ועד לדגים שהגנום שלהם שונה עם מוטציות נקודתיות משבשות והוכנסו טרנסגנים. כדי לעקוב אחר כל הדגים האלה, חיות עם רקע גנטי דומה מוחזקות יחד במיכלים מסומנים. תוויות המיכל צריכות להכיל מידע מזהה יסודי, כולל גנוטיפ הדג ותאריך הלידה.
פוריות דג הזברה מתחילה לרדת לאחר שנת החיים הראשונה, ולכן יש לחדש את המלאי מדי שנה. דגי הזברה אינם שורדים היטב כמו זנים מולדים לחלוטין, ולכן יש לשמור על המגוון הגנטי על ידי איסוף צאצאים מהכלאות של דגים שאינם קרובי משפחה, או "הכלאות".
בעת חציית קווים טרנסגניים או מוטנטיים, יש לזהות צאצאים הנושאים את השינוי הגנטי הרצוי על ידי ביטוי פלואורופור או גנוטיפ. כדי לגנוטיפ, תחילה יש להרדים את הדג בטריקאין. לאחר מכן, חתכו חתיכה קטנה מסנפיר הזנב כמקור ל-DNA.
לבסוף, בודד DNA מדגימת הזנב והשתמש בו לניתוח PCR לזיהוי רצפים ספציפיים. בזמן ההמתנה לתוצאות, שמור כל דג במיכל קטן משלו המסומן במזהה.
כעת, לאחר שעברנו על תנאי גידול הדגים הסטנדרטיים, בואו נסתכל על כמה דרכים שבהן הסטנדרטים האלה מנוצלים כדי לחקור תהליכים ביולוגיים.
הטמפרטורה של מי המערכת יכולה להשפיע עמוקות על בריאות דג הזברה. כדי ליצור מודל של סוכרת, החוקרים האלה מטפלים בדגים עם רעלן הלבלב, סטרפטוזוצין, ומאחסנים אותם במיכלים עם טמפרטורת מים מופחתת. הדגים הסוכרתיים מראים פנוטיפים צפויים, כגון נזק לכליות ולעיניים, כמו גם התחדשות מופחתת של סנפירי הזנב, וניתן להשתמש בהם כדי לבחון את הביולוגיה של הסוכרת.
ניתן לשנות מערכות טנקים גם למטרות ניסוי ספציפיות. מחקרים על התנהגות שחייה בדגים יכולים לשמש כקריאה לחרדה, תוקפנות או התנהגויות חברתיות. כאן, מעקב וידאו משמש לניתוח ההבדל בהתנהגות השחייה בין דגים לא מטופלים לאלה שטופלו בתרופה נוירואקטיבית. מחקרים כאלה מסייעים לקדם את ההבנה שלנו במדעי המוח ויכולים להיות כלי לגילוי תרופות.
תנאי אור משתנים יכולים להשפיע גם על דג הזברה. ניתן להשתמש בטיפול באור אינטנסיבי אפילו כדי לשחרר את תאי חישת האור של הרשתית. לדגים אלה יש את היכולת לתקן רקמת רשתית פגומה על ידי התפשטות תאים, מה שמעניין משמעותית מדענים החוקרים ניוון רשתית בבני אדם.
זה עתה צפיתם בסרטון של JoVE על תחזוקה וגידול דגי זברה. עברנו על היסודות של האופן שבו דגים מאוחסנים, מוזנים ומנוהלים במעבדה. תודה שצפית!
Related Videos
09:12
Biology II: Mouse, Zebrafish, and Chick
96.6K צפיות
07:26
Biology II: Mouse, Zebrafish, and Chick
64.3K צפיות
08:31
Biology II: Mouse, Zebrafish, and Chick
81.8K צפיות
08:29
Biology II: Mouse, Zebrafish, and Chick
47.1K צפיות
06:42
Biology II: Mouse, Zebrafish, and Chick
14.5K צפיות
07:58
Biology II: Mouse, Zebrafish, and Chick
25.4K צפיות
09:04
Biology II: Mouse, Zebrafish, and Chick
59.1K צפיות
07:24
Biology II: Mouse, Zebrafish, and Chick
88.4K צפיות
08:07
Biology II: Mouse, Zebrafish, and Chick
103.3K צפיות
08:27
Biology II: Mouse, Zebrafish, and Chick
90.7K צפיות
06:57
Biology II: Mouse, Zebrafish, and Chick
25.6K צפיות
07:48
Biology II: Mouse, Zebrafish, and Chick
59.0K צפיות
07:40
Biology II: Mouse, Zebrafish, and Chick
42.6K צפיות
06:48
Biology II: Mouse, Zebrafish, and Chick
19.1K צפיות
08:12
Biology II: Mouse, Zebrafish, and Chick
55.7K צפיות