Name: הזרקת Transthoracic Intramyocardial אולטרסאונד מונחה בעכברים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-08-05T15:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 22 s
Description: למד הזרקה אולטרסאונדית תוך-שרירית בחזה בעכברים לטיפול גני בלב. שיטה זו מאפשרת מיקוד מדויק של תרופות או תאים לשריר הלב בצורה מינימלית פולשנית ובטוחה.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

TWP מומן על ידי מלגת בריאן מקגוורן לאיגוד הלב האירי. WTP מומן על ידי R01 HL095712 ופרס החוקר המבוסס של AHA.

כל השלבים המתוארים בוצעו תחת פרוטוקולים שאושרו על ידי ועדת הטיפול ושימוש בבעלי חיים המוסדיים של בית החולים לילדים בבוסטון. .1 הכנה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבצע הערכה אנטומית ותפקודית של הלב בסיסית על ידי בדיקת אקו לפני תחילת פרוטוקול ההזרקה, כעמדה רגשי קבועים האופטימלית להזרקת intramyocardial לא עשויה להניב תצוגות סטנדרטי אופטימליות להתוויית האנטומיה והערכה של תפקוד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התקנת ההזרקה מוצגת איורים 1A-1C. מניחים מזרק ריק עם מחט נדן, כלפי מעלה פוע אוריינטציה, במהדק המזרק (ראו איור 1 ג) ולאבטח את החללית מתמר אולטרסאונד במהדק סריקת הראש (ראה איור 1). שחרר את משותף נעילת מהדק כדור סריקת הראש (איור 1) ולתפעל את כיוון המתמר כך שיהיה מיושר מקביל לציר של המחט. תקן scan-עמדת ראש על ידי הידוק משותף נעילת מהדק כדור סריקת הראש. הערה: לקבלת זריקה בעכברים בוגרים, מחט G 30 עם אורך 1 סנטימטר ב/ 2.5 היא אופטימלית. מזרק 1 מ&quot;ל יכול לשמש לנפחים גדולים יותר, ואילו מזרק gastight יכול לשמש לשליטה מדויקת יותר של כמויות קטנות יותר (5-10 μl). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל ג&#39;ל אולטרסאונד בנדיבות על קצה המתמר עם מרית כדי לכסות את הראש לאורך כולו. לשלוף בזהירות את המחט ולהשתמש במחט הר בקרות כדי לקדם את המחט ישירות תחת המתמר ובתוך ג&#39;ל אולטרסאונד להדמיה. לבצע התאמות קטין באמצעות מחט הר שליטה, כך שהמחט דמיינה בבירור לאורכו על תמונת אולטרסאונד. אם המתמר היה מיושר במקביל כראוי למחט בשלב 1.4, אז המחט צריכה להישאר בתוך מטוס ההדמיה כפי שהוא מתקדם ונסוג עם ידית שליטת הזרקה (איור 1 ג). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בשלבים הבאים, לא להפריע את הצורךיישור אופקי le / מתמר על ידי הזזת או בציר האופקי. במקום זאת, להתמקד באזורים ספציפיים של הלב להזרקה על ידי שינוי המצב האנכי (ציר y) של מחט הר ועל ידי הזזת פלטפורמת בעלי החיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הזז את המתמר superiorly מהפלטפורמה של בעלי החיים באמצעות השליטה בגובה סריקה (איור 1), כדי לאפשר המיקום הבא של העכבר הרדים על גבי הפלטפורמה של בעלי החיים. זה לא ישבש את יישור ציר x של המתמר לציר של המחט הארוכה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את המזרק ששימש ליישור ממהדק המזרק וזורקים בזהירות. טען את המחט החדשה ומזרק עם injectate לגמר יעד הנפח, ומאפשר לשטח מת בקצה המזרק. להיות זהיר כדי להסיר בועות אוויר. הנח את המזרק לתוך מהדק המזרק ללא התאמת יישור ציר x שלה. באופן מלא לחזור בי המזרק באמצעות שליטת ההזרקה. הערה: למטרות הכשרה ראשוניות, השימוש בכחול של אווןצבע (1%), כתם Trypan הכחול (0.4%) או השעיה של microspheres ניאון כמו injectate יכול לסייע למפעיל במאשר מיומנות והצלחה של הזרקה ממוקדת. </li></ol> .2 הזרקה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל משולב חם יותר של פלטפורמת החימום ולהגדיר אותו ל37 C °. מניחים את פלטפורמת בעלי החיים 180 ° מכיוון ההדמיה הרגיל, עם מהדק צינור הרדמה והראש של החיה הקרובה ביותר למפעיל. הדבר זה מאפשר ללב (בצד השמאל של החזה) להיות ipsilateral למהדק המזרק והמחט. הערה: התאמות סיבוב נוספות בכיוון השעון קטין לפלטפורמת בעלי החיים עשויות להיות נחוצות כדי לכוון את הלב בצורה נכונה למטוס ליד עצם ציר קצר ההדמיה שישמש להזרקה (איור 2 א). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן עכברים לבדיקת אקו כפי שדווח בעבר 9. להרדים את העכבר בתא אינדוקציה עם 2% isoflurane. הסרת שיער חזה עם שיער קרם להסרתd להחיל הסיכה ג&#39;ל לשתי העיניים כדי למנוע התייבשות של לובן העין. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרם את המתמר באמצעות השליטה בגובה ראש הסריקה (איור 1). הנח את פרקדן העכבר הרדים על גבי פלטפורמת החיה המחוממת עם החוטם בתוך חרטום אספקת 1-3 isoflurane% (2A-2B איורים). הכנס בעדינות בדיקה רקטלית והדבק את ארבע כפות הרגליים לאלקטרודות א.ק.ג., יישום ג&#39;ל אלקטרודה למגע חשמלי. הערה: רמה מתאימה של הרדמה יש להבטיח ליחס האנושי של בעלי החיים. לא צריך להיות שום שינוי בקצב לב ולא תגובה למיקום של המחט דרך קיר החזה. יש להשתמש בבקרות ההומיאוסטטית המשולבת של פלטפורמת בעלי החיים טמפרטורה כדי לשמור על טמפרטורה נורמלית (37 ± 0.5 ° C), כהיפותרמיה תגרום ברדיקרדיה יחסית, הרחבה של חדר, ואי נוחות אפשרית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברגע שהעכבר הוא מאובטח על הפלטפורמה של בעלי החיים, להפחית את המתמר על depilaחזה טד באמצעות השליטה בגובה ראש הסריקה (איור 1). התקנת אולטרסאונד האופטימלית להזרקה היא ללב להיות דמיין בכיוון הציר הקצר ליד העצם, כמו לכל טכניקת אקו סטנדרטית. סובב את פלטפורמת בעלי החיים 20-30 ° בכיוון השעון כדי לקבל את חלון אקוסטי האופטימלי להזרקה במטוס ההדמיה ציר הקצר (איורים 2A-2B). הערה: לחלופין, הזרקה יכולה להתבצע מנטיית ציר ארוכה ליד עצם על ידי סיבוב נגד כיוון השעון של פלטפורמת בעלי החיים (איור 2 ג). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש בפקדי התאמת פלטפורמה של בעלי החיים כדי להתאים את שדה הראייה ולמקד כל אתר הזרקה רצויה בשריר הלב של החדר השמאלי. לכוון את המצלמה חזרה-ושוב מהקודקוד לבסיס של לב כדי למקד את מיקום ההזרקה הרצויה בשריר הלב של החדר השמאלי (A3-C3 איורים). הערה: התצוגה ליד עצם midpapillary קצר הציר (איור 3 א) מציעה reproduciblציוני דרך דואר המאפשרים הדמיה מעקב של אתר ההזרקה. הערה: לחלופין, תצוגת הציר הארוכה ליד העצם יכולה לשמש יעד אתר הזרקה מוגדר מראש (איור 3D). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל עם המזרק במהדק המזרק חזר באופן מלא, להתקדם לאט לאט את המזרק לכיוון החזה של בעל החיים על ידי הפיכת כיוון השעון שליטת הזרקה (איור 4 א). כדי לאפשר הדמיה אולטרסאונד ברורה של שני הלב וקצה המחט כפי שהוא מתקרב החזה, להשתמש בשפע של ג&#39;ל אולטרסאונד על הצד השמאלי של החזה ולייעל את חלון אקוסטי על ידי הגדרת שדה ראיה רחב על פקדי אקו. הגדר את הנקודה / אזור מוקדי באתר היעד להזרקה. התאמות קלות למחט הר פקדים יכולים למטב את התמונה של המחט לאורכו. הערה: יש לו מכונות אולטרסאונד חלק תוכנת מדריך מחט פונקציה להאריך דיגיטלי קו לאורך הציר של המחט הארוכה דרך לשריר לב היעד(איור 4). כגון כלי תוכנה יכולים להיות מועילים אבל לא הכרחי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עם בעלי החיים מסוממים כראוי (1-3% isoflurane מעורבבים עם 0.5-0.8 ליטר / דקה 100 חמצן%), לקדם את המחט דרך קיר החזה של העכבר ולתוך שריר הלב, התבוננות בזהירות את המיקום של קצה המחט המשופע בכל פעמים. לעצור קידום כאשר קצה המחט הוא בתוך שריר לב היעד (איור 4C). הקצה משופעים כולה צריך להיות מאובטח בתוך שריר הלב, כדי למנוע דליפת injectate אל תוך חלל קרום הלב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כאשר הקצה הוא במיקום הרצוי, לספק injectate על ידי לחיצה על בוכנת המזרק. לספק injectate לאט, מעל 5-30 שניות (בהתאם לכמות שנמסר). עד 50 μl של injectate יכול להיות מועבר מבלי להתפשר על תפקוד חדר. הופעת echobright חולפת לאזור שריר הלב שהוחדר יכולה להיות ביטוי לאחר זריקה מוצלחת. תקופה קצרה (שניות) של bradycard היחסיIA יצוין מדי פעם עם זריקה לתוך שריר הלב ובמהירות פותר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברגע שinjectate כבר מנוהל, מייד למשוך את המחט על ידי סיבוב נגד כיוון השעון של כפתור בקרת הזרקה. העכבר צריך להיות כל הזמן תחת הרדמה במשך כמה דקות של התבוננות אקו כדי לאשר תפקוד חדר השתמר ואין סיבוכי postprocedural. אם צוין, אזורים מרובים של שריר לב יכולים להיות מוזרקים באופן סדרתי על ידי מיקום מחדש של הזווית של מחט גישה של על ידי התאמה של הפלטפורמה לבעלי החיים. לאחר הזרקת intramyocardial, העכבר ממוקם בכלוב בכוחות עצמו ואיפשר להתאושש מהרדמה תחת השגחה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אל תשאיר חיה ללא השגחה עד שהוא חזר להכרה מספיק כדי לשמור על כיבה sternal. אל תחזרו בעלי חיים שעברו הזרקת intramyocardial לחברתם של בעלי חיים אחרים, עד שהתאושש באופן מלא. הכלוב צריך להיות ממוקם על משטח thermoregulated עם מחדשמתן ady של דיאטת מים ועכבר. אי נוחות Postprocedural לא צפויה וכישלון לחדש כראוי התנהגות נורמלית זמן קצר לאחר ההתערבות מציע סיבוך פוטנציאלי (ראה דיון). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להשליך בזהירות את המחט מייד לאחר השלמת הזרקת intramyocardial כדי למזער את הסיכון לפציעה חדה למפעיל או עוברי האורח. שימוש חוזר במחט עלולה לגרום להקהיה של הקצה שהופך אותו מאתגר יותר כדי לחדור את שריר הלב וכתוצאה מכך בסיכון גבוה יותר של סיבוכים. </li></ol>

<ol><li>Kochanek, K. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deaths%3A+final+data+for+2009%5BTitle%5D)+AND+%22Natl+Vital+Stat+Rep%22%5BJournal%5D)">Deaths: final data for 2009.</a> Natl Vital Stat Rep. 60 (3), 1-117 Forthcoming.</li>
<li>Strauer, B. E., Steinhoff, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((10+years+of+intracoronary+and+intramyocardial+bone+marrow+stem+cell+therapy+of+the+heart%3A+from+the+methodological+origin+to+clinical+practice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Cardiol%22%5BJournal%5D)">10 years of intracoronary and intramyocardial bone marrow stem cell therapy of the heart: from the methodological origin to clinical practice.</a> J Am Coll Cardiol. 58, 1095-1104 (2011).</li>
<li>Cheng, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intramyocardial+autologous+cell+engraftment+in+patients+with+ischaemic+heart+failure%3A+a+meta-analysis+of+randomised+controlled+trials%5BTitle%5D)+AND+%22Heart+Lung+Circ%22%5BJournal%5D)">Intramyocardial autologous cell engraftment in patients with ischaemic heart failure: a meta-analysis of randomised controlled trials.</a> Heart Lung Circ. 22 (11), 887-894 (2013).</li>
<li>Fischer-Rasokat, U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+pilot+trial+to+assess+potential+effects+of+selective+intracoronary+bone+marrow-derived+progenitor+cell+infusion+in+patients+with+nonischemic+dilated+cardiomyopathy%3A+final+1-year+results+of+the+transplantation+of+progenitor+cells+and+functional+regeneration+enhancement+pilot+trial+in+patients+with+nonischemic+dilated+cardiomyopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Heart+Fail%22%5BJournal%5D)">A pilot trial to assess potential effects of selective intracoronary bone marrow-derived progenitor cell infusion in patients with nonischemic dilated cardiomyopathy: final 1-year results of the transplantation of progenitor cells and functional regeneration enhancement pilot trial in patients with nonischemic dilated cardiomyopathy.</a> Circ Heart Fail. 2, 417-423 (2009).</li>
<li>Seth, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Percutaneous+intracoronary+cellular+cardiomyoplasty+for+nonischemic+cardiomyopathy%3A+clinical+and+histopathological+results%3A+the+first-in-man+ABCD+%28autologous+bone+marrow+cells+in+dilated+cardiomyopathy%29+trial%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Percutaneous intracoronary cellular cardiomyoplasty for nonischemic cardiomyopathy: clinical and histopathological results: the first-in-man ABCD (autologous bone marrow cells in dilated cardiomyopathy) trial.</a> J Am Coll Cardiol. 48, 2350-2351 (2006).</li>
<li>Ladage, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Percutaneous+methods+of+vector+delivery+in+preclinical+models%5BTitle%5D)+AND+%22Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Percutaneous methods of vector delivery in preclinical models.</a> Gene Ther. 19, 637-641 (2012).</li>
<li>Zangi, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modified+mRNA+directs+the+fate+of+heart+progenitor+cells+and+induces+vascular+regeneration+after+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Modified mRNA directs the fate of heart progenitor cells and induces vascular regeneration after myocardial infarction.</a> Nat Biotechnol. 31, 898-907 (2013).</li>
<li>Laakmann, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Minimally+invasive+closed-chest+ultrasound-guided+substance+delivery+into+the+pericardial+space+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Naunyn+Schmiedebergs+Arch+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Minimally invasive closed-chest ultrasound-guided substance delivery into the pericardial space in mice.</a> Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol. 386 (3), 227-238 (2013).</li>
<li>Respress, J. L., Wehrens, X. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transthoracic+echocardiography+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Transthoracic echocardiography in mice.</a> J Vis Exp. (39), e1738(2010).</li>
<li>Wang, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+cis-regulating+elements+and+trans-activating+factors+of+the+rat+cardiac+troponin+T+gene%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Characterization of cis-regulating elements and trans-activating factors of the rat cardiac troponin T gene.</a> J Biol Chem. 269, 30595-30603 (1994).</li>
<li>Shimshek, D. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Codon-improved+Cre+recombinase+%28iCre%29+expression+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Genesis%22%5BJournal%5D)">Codon-improved Cre recombinase (iCre) expression in the mouse.</a> Genesis. 32, 19-26 (2002).</li>
<li>Lichtenauer, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intravenous+and+intramyocardial+injection+of+apoptotic+white+blood+cell+suspensions+prevents+ventricular+remodelling+by+increasing+elastin+expression+in+cardiac+scar+tissue+after+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Basic+Res+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Intravenous and intramyocardial injection of apoptotic white blood cell suspensions prevents ventricular remodelling by increasing elastin expression in cardiac scar tissue after myocardial infarction.</a> Basic Res Cardiol. 106 (4), 645-655 (2011).</li>
<li>Herrmann, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Postinfarct+intramyocardial+injection+of+mesenchymal+stem+cells+pretreated+with+TGF-alpha+improves+acute+myocardial+function%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Regul+Integr+Comp+Physiol%22%5BJournal%5D)">Postinfarct intramyocardial injection of mesenchymal stem cells pretreated with TGF-alpha improves acute myocardial function.</a> Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 299 (1), 371-378 (2010).</li>
<li>Zhou, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+injection+of+autologous+mesenchymal+stromal+cells+improves+myocardial+function%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Biophys+Res+Commun%22%5BJournal%5D)">Direct injection of autologous mesenchymal stromal cells improves myocardial function.</a> Biochem Biophys Res Commun. 390 (3), 902-907 (2009).</li>
<li>Campbell, N. G., Suzuki, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+delivery+routes+for+stem+cell+therapy+to+the+heart%3A+current+and+future+approaches%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cardiovasc+Transl+Res%22%5BJournal%5D)">Cell delivery routes for stem cell therapy to the heart: current and future approaches.</a> J Cardiovasc Transl Res. 5 (5), 713-726 (2012).</li>
<li>Hou, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radiolabeled+cell+distribution+after+intramyocardial%2C+intracoronary%2C+and+interstitial+retrograde+coronary+venous+delivery%3A+implications+for+current+clinical+trials%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Radiolabeled cell distribution after intramyocardial, intracoronary, and interstitial retrograde coronary venous delivery: implications for current clinical trials.</a> Circulation. 112, Suppl 9. 150-156 (2005).</li>
<li>Dib, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recommendations+for+successful+training+on+methods+of+delivery+of+biologics+for+cardiac+regeneration%3A+a+report+of+the+International+Society+for+Cardiovascular+Translational+Research%29%5BTitle%5D)+AND+%22JACC+Cardiovasc+Interv%22%5BJournal%5D)">Recommendations for successful training on methods of delivery of biologics for cardiac regeneration: a report of the International Society for Cardiovascular Translational Research).</a> JACC Cardiovasc Interv. 3 (3), 265-275 (2010).</li>
<li>Dib, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+therapy+for+cardiovascular+disease%3A+a+comparison+of+methods+of+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cardiovasc+Transl+Res%22%5BJournal%5D)">Cell therapy for cardiovascular disease: a comparison of methods of delivery.</a> J Cardiovasc Transl Res. 4 (2), 177-181 (2011).</li>
</ol>

למחברים אין מה לחשוף.

ביולוגיים יכול להיות מועבר לשריר הלב על ידי הזרקה ישירה intramyocardial, הזרקת intrapericardial, או ממשל עקיף באמצעות זרם הדם. ניסויי טיפול אחרונים תא מבוסס במודלי אוטם שריר לב שתיארו גישת פתיחת בית החזה פתוחה למסירת injectate 12-14. גורם חשוב בהצלחה של התערבות טיפולית בשריר הלב תלוי בבחירה של מסלול משלוח. המנה המקומית הגבוהה ביותר של ביולוגי מושגת על ידי 15,16 משלוח intramyocardial. הזרקת Intramyocardial תחת הדמיה ישירה היא השיטה הפשוטה ביותר ומאפשרת לממשל מ...

מחלות לב היא סיבת מוות המובילה לגברים ולנשים בארצות הברית, והיוו 600,000 מקרי מוות בשנה 1. מודלים עכבריים למחלת לב וכלי דם הם חשובים ביותר לחקר מנגנוני pathophysiological ולחקר טיפולים פוטנציאליים. משלוח בשריר הלב של וקטורי ריפוי גנטיים, תאי גזע, RNAs שונה, וחקירת היתרי סוכנים טיפוליים אחרת של הפוטנציאל הטיפולי שלהם למחלות לב 2-7. נכון לעכשיו, יש אפשרויות מוגבלות למסירה בשריר הלב של סוכנים טיפוליים בעכברי מודל 6. הזרקת Intramyocardial תחת הדמיה ישירה היא נפוצה, אבל דורשת sternotomy או פתיחת בית החזה, והוא מוגבל לאזור החשוף של הלב. בעוד נוח כאשר היא מבוצעת בזמן אחר מניפולציה ניסויית כגון קשירת LAD, את הצורך בפרוצדורה פולשנית למסירת intramyocardial מגביל עיצובים ניסיוניים פוטנציאל ומציגהשפעות dditional מההליך (למשל, סיסטיק בשל פתיחת בית החזה). משלוח קרום הלב מלעורית של וקטורים ויראליים דווח, אבל באתר וההפצה של סוכן טיפולי אינו הומוגנית וקשה לשליטה 8. תוצאות הזרקה כלילית מלעורית בהפצה הומוגני יותר של חומר מוזרק, אבל מסירה כלילית יעילה ושחזור מאתגרות במודלים עכבריים. כאן, אנו מתארים טכניקה סגורה חזה intramyocardial הזרקה המאפשרת מיקוד פולשנית, מפעיל המבוקר של סוכנים טיפוליים בהנחיית אולטרסאונד. הטכניקה קלה ללימוד, חוסכת את הצורך בפתיחה בית החזה או sternotomy והסיבוכים הניסיוניים הדיילת שלהם, ומספקת גמישות רבה יותר בעיתוי ובאתרים של הזרקת intramyocardial. לפיכך, הזרקת intramyocardial בסיוע אקו מייצגת שיטה טכנית פשוטה ויעילה מאוד של מניפולציהשריר לב במודלים ניסיוניים עכבריים.

<table><tbody><tr><td>מערכת הדמיית אולטרסאונד Vevo 2100&nbsp;</td><td>Visualsonics</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Vevo Integrated Rail System III</td><td>Visualsonics</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Microscan MS400 מתמר</td><td>Visualsonics</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Microscan MS550D מתמר</td><td>Visualsonics</td><td></td><td></td></tr><tr><td>PrecisionGlide מחטים</td><td>BD</td><td>305128</td><td>30 G x 1 אינץ' / 2.5 ס"מ</td></tr><tr><td>1 סמ"ק מזרק קצה החלקה</td><td>Exel International&nbsp;</td><td>26048</td><td>או שווה ערך</td></tr><tr><td>Gastight 50 &#956; l מזרקי זכוכית</td><td>המילטון</td><td>1705</td><td></td></tr><tr><td>כתם כחול טריפן (0.4%)</td><td>Gibco&nbsp;</td><td>15250</td><td>או שווה ערך</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Baxter</td><td>AHN3640</td><td>או שווה ערך</td></tr><tr><td>Aquasonic 100</td><td>Parker Laboratories</td> <td>(01-08)</td> <td>או שווה ערך</td></tr><tr><td>למיקרוספירות פוליסטירן (פלואורסצנט אדום)</td> <td>Life Technologies</td><td>F-8842</td><td>או שווה ערך</td></tr></tbody></table>

הזרקת transthoracic intramyocardial אולטרסאונד מונחה בעכברים

Ultrasound-guided Transthoracic Intramyocardial Injection in Mice

מודלים עכבריים למחלת לב וכלי דם הם חשובים לחקר מנגנוני pathophysiological ולחקור טיפולי התחדשות פוטנציאליים. ניסויים הכוללים הזרקה בשריר הלב מבוצעים כיום על ידי גישה כירורגית ישירה באמצעות פתיחת בית החזה. בעוד נוח כאשר היא מבוצעת בזמן אחר מניפולציה ניסויית כגון קשירת עורקים כלילית, את הצורך בפרוצדורה פולשנית למסירת intramyocardial מגביל עיצובים ניסיוניים פוטנציאל. עם אי פעם שיפור הרזולוציה אולטרסאונד ושיטות הדמיה לא פולשנית מתקדמות, עכשיו זה אפשרי לביצוע, הזרקת intramyocardial מלעורית מונחה אולטרסאונד באופן שיגרתי. טיפול זה יעיל ומהימן מספק סוכנים לאזור מיקוד של שריר לב. יתרונות של שיטה זו כוללים הימנעות מתחלואה ניתוחית, מתקן למקד אזורים של שריר לב באופן סלקטיבי בהנחיית אולטרסאונד, ואת ההזדמנות כדי לספק injectate לmyocardiuמ &#39;במרווחי זמן מרובים, שנקבע מראש זמן. בעזרת טכניקה התאמנה, סיבוכים מהזרקת intramyocardial הם נדירים, ועכברים לחזור במהירות לפעילות רגילה בהתאוששות מהרדמה. בעקבות הצעדים המפורטים בפרוטוקול זה, המפעיל עם ניסיון אקו בסיסי יכול להיות מוכשר במהירות בטכניקה תכליתית, פולשנית זו.

הזרקת Intramyocardial עכברית עם צבע הכחול או Microspheres פלורסנט הזרקה של הצבע הכחול של אוון היא שימושית למטרות אימונים. זמן קצר לאחר הזרקה, להרדים את העכבר ולהסיר את הלב לדמיין את מיקומו של הצבע הכחול המוזרק. איור 5 מראה דוגמא של זריקה מוצלחת, עם צבע כחול חדירת שריר הלב ברמת שריר אמצע פפילרי (איור 5A, האזור סגור בקו מקווקו). צבע הכחול אוונס יהיה לשטוף החוצה של הרקמה בתוך כמה שעות....

הזרקת intramyocardial מלעורית מונחה אקו מייצגת שיטה יעילה, אמינה, וניתן למקד עבור המשלוח של סוכני העברת גנים או תאים לתוך הלב העכברי. בעקבות הצעדים המפורטים בפרוטוקול זה, המפעיל יכול להיות מוכשר במהירות בטכניקה תכליתית, פולשנית זו.

הזרקת Transthoracic Intramyocardial אולטרסאונד מונחה בעכברים

Murine models of cardiovascular disease are important for investigating pathophysiological mechanisms and exploring potential regenerative therapies. ...

המטרה הכללית של פרוצדורה זו היא להחדיר Eloqua של זריקה באופן בטוח ומדויק לאזור רצוי של מיקרדיום בשיקוף תחת הנחיית אולטרסאונד. הדבר מושג תחילה על ידי מניפולציה של כיוון המתמר כך שיהיה מקביל לציר מחט ההחדרה. לאחר מכן, העכבר, הנמצא במצב שכיבה ומרדמה, ממוקם כראוי על פלטפורמת בעלי החיים כדי להקל על ההזרקה המכוונת.לאחר מכן, נקבע החלון האコースטי האופטימלי להגשה מדויקת של inject eight באמצעות התאמות קלות של פלטפורמת בעל החיים והצגת שדה ראייה רחב. לבסוף, תחת הדרכת אולטרסאונד, קצה המחט מועבר בזהירות אל דופן בית החזה ואל השריר הלבבי (myocardium) והזרקה של inject eight מבוצעת באופן בטוח ויעיל.מיקרוסקופיה בחתך רחב של השריר הלבבי המשקף משמשת כדי להראות מסירה מוצלחת של סמן רקמה ליעד השריר הלבבי הרצוי. הדגמה ויזואלית של שיטה זו היא קריטית. מאחר ומערכת המסילה המשולבת, פלטפורמת החיה, בקרת מזרק ההזרקה ותפסן המתמר חייבים להיות מיושרים מרחבית באופן נכון לצורך מסירה מדויקת של החומר המוזרק.שיטה זו יכולה לסייע במתן תשובות לשאלות מפתח בתחום הביולוגיה הרגנרטיבית, כגון אלה הבוחנות אסטרטגיות טיפוליות להשבה של תפקוד השריר הלבבי. בלבבות ששובבו, ובמיוחד עבור מי שאינם מנוסים בשיטה זו, אנו שמים דגש מרבי על הדיוק בפגיעה במטרה. הקפדה יתרה על פרטי יישור המחט ומיקום האולטרסאונד האופטימלי תבטיח את הצלחת הפעולה.ראשית, עלה

ultrasound-guided-transthoracic-intramyocardial-injection-in-mice

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

מניפולציות גנטיות רבות ו / או זריקות intramyocardial של גנים, חלבונים, תאים, ו / או biomaterials באים על גבי מימד הזמן במחקרים של פגיעה איסכמיה / reperfusion חריפה שיפוץ כרונית בעכברים. וידאו זה ממחיש את הליכי microsurgical עבור איסכמיה / reperfusion, קשירת עורק כלילי קבע, ומחקרים הזרקת intramyocardial.

קשירת עורקים כלילית לבין הזרקת Intramyocardial ב מודל Murine של אוטם

משלוח תא intramyocardial במודלים עכבריים של מחלות לב וכלי דם, כגון יתר לחץ דם או אוטם שריר הלב, הוא בשימוש נרחב כדי לבדוק את הפוטנציאל הטיפולי סוגי תאים שונים במחקרי התחדשות של. לכן, תיאור מפורט ויזואליזציה ברורה של הליך כירורגים זה יעזרו להגדיר את הגבולות ואת היתרונות של ניתוחים טיפוליים תא לב וכלי דם במכרסמים קטנים.

משלוח הנייד intramyocardial: תוכן בלבבות Murine

מודל שד סרטן מוח גרורות עכבר הוא הקים עם הזרקת intracardiac אולטרסאונד מונחה הדמיה של תאי MDA-MB231/Br-GFP. התפתחות של גרורות תוך גולגולתי multifocal כבר במעקב אורכים באמצעות רזולוציה גבוהה 9.4 T-MRI.

הזרקת intracardiac מונחה ההדמיה אולטראסאונד לפתח מודל עכבר של שד גרורות סרטן מוח ואחריו האורכי MRI

מאתר מחקרים במודלים של דלקת המעי הגס הראו כי אחוז קטן (1-5%) של גזע mesenchymal (MSC) מוזרק לווריד או intraperitoneally הביתה כדי מודלק colon1,2. מחקר זה מראה כי זריקות intracardiac מונחה אולטרה סאונד של MSCs לגרום בלוקליזציה מוגברת אל המעי.

הזרקת Intracardiac מונחה אולטרה סאונד של גזע Mesenchymal האנושי כדי להגדיל את יונת אל המעי לשימוש במודלים מאתר של מחלות מעי דלקתיות ניסיוני

אסטרטגיות טיפוליות הרומן של רפואה רגנרטיבית הלב דורשים מקיף ומפורט הלימודים במודלים של בעלי חיים פרה גדולה לפני שהם יכולים להיחשב לשימוש בבני אדם. כאן, נדגים שיטה הזרקת intramyocardial מונחה אקוקרדיוגרפיה ניגודיות מלעורית בארנבים, וזה יקר עבור בדיקת יעילותם של טיפולים חדשניים כאלה השערות.

הזרקת Intramyocardial מונחה אקוקרדיוגרפיה ניגודיות מלעורית ואספקה תא בדגם פרה גדולה

כאן אנו מציגים פרוטוקול עבור מניפולציה ג'ין ספציפיות הלב בעכברים. תחת הרדמה, הלבבות העכבר היו מוחצן בחלל הבין-צלעי הרביעי. לאחר מכן, adenoviruses גנים ספציפיים קידוד הוזרקו מזרק לתוך שריר הלב, ואחריו מדידה ביטוי חלבון באמצעות הדמיה ויוו ומערביות כתם ניתוח.

שיטה פשוטה ויעילה In Vivo מניפולציה ג'ין ספציפיות הלב באמצעות הזרקת Intramyocardial בעכברים

העברת תאים מונחית אולטרסאונד סביב האתר של אוטם שריר הלב בעכברים היא דרך בטוחה, יעילה ונוחה להשתלת תאים.

השתלת קרדיומיוציטים פלוריפוטנטיים פלוריפוטנטיים המושרים על ידי אולטרסאונד בעכברים עם אוטם שריר הלב

הפרוטוקול הנוכחי מתאר הליך רדיולוגיה התערבותי שנקבע להזרקה תוך-תימית בעכברים כדי למנוע את הסיכון לניתוח פתוח ולשפר את הדיוק של זריקות מלעוריות עיוורות.

טכניקה זעיר פולשנית, מדויקת ויעילה להזרקה תוך-תימית בעכברים

מאמר זה מפרט פרוטוקול ממוטב עבור הזרקות תוך-קרדיוקרדיאליות מונחות אקו לב במודלים של חולדות של אוטם שריר הלב באמצעות מחט 29 G x 88 מ"מ. טכניקה זו מבטיחה אספקה חזקה, מדויקת וניתנת לשחזור של חומרים טיפוליים ישירות לאזור האוטם.

הזרקה מונחית אקו לב להעברת תאי גזע ממוקדת ואמינה לתוך שריר הלב במודל חולדה של אוטם שריר הלב

אקו Transthoracic מציעה שיטה לא פולשנית להערכת תפקוד הלב בעכברים. שילוב של אולטראסאונד דופלר שיטות הדמיה ניתן להשתמש כדי להשיג מדידות ממדי של הלב ואת זרימת הדם intracardiac, אשר יחדיו מספקים הערכה של הסיסטולי והדיאסטולי לב וביצועים.

אקו Transthoracic ב עכברים

למד הזרקה אולטרסאונדית תוך-שרירית בחזה בעכברים לטיפול גני בלב. שיטה זו מאפשרת מיקוד מדויק של תרופות או תאים לשריר הלב בצורה מינימלית פולשנית ובטוחה.

הזרקת Transthoracic Intramyocardial אולטרסאונד מונחה בעכברים

גלה סרטונים נוספים