RNA Isolation from Mouse Pancreas: A Ribonuclease-rich Tissue

Ana Clara P. Azevedo-Pouly; Ola A. Elgamal; Thomas D. Schmittgen

doi:10.3791/51779

בידוד RNA מן העכבר לבלב: רקמות ribonuclease עשיר

JoVE Journal
Biology

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Biology

RNA Isolation from Mouse Pancreas: A Ribonuclease-rich Tissue

בידוד RNA מן העכבר לבלב: רקמות ribonuclease עשיר

Full Text

28,456 Views

08:47 min

August 2, 2014

DOI: 10.3791/51779-v

Ana Clara P. Azevedo-Pouly¹, Ola A. Elgamal¹, Thomas D. Schmittgen¹

¹Pharmaceutics & Pharmaceutical Chemistry,The Ohio State University

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

אנו מדווחים על הליך לבידוד RNA עם שלמות גבוהה מלבלב העכבר העשיר בריבונוקלאז.

המטרה הכוללת של הליך זה היא לבודד RNA בעל שלמות גבוהה מהלבלב של עכבר רכס ריבונוקלאז. זה מושג על ידי הסרה מהירה של הלבלב מפגר של עכבר שהורדם. לאחר מכן, הלבלב שקע במגיב ליזה, והרקמה הומוגנית.

לאחר הצנטריפוגה, ה-RNA מבודד מהסופרנטנט באמצעות פרוטוקולים סטנדרטיים ותמיסת מעכב RNA מתווספת לתמיסת ה-RNA הסופית. השלב האחרון הוא לנקות בזהירות את להבי ההומוגנייזר על ידי הסרת כל גושי הרקמה שנתפסו בלהבים, ולאחר מכן ביצוע סדרה של שטיפות אתנול ומים. בסופו של דבר, הליך זה מאפשר בידוד של RNA עבור לבלב עכבר עם מספר שלמות RNA גדול משבע שישמש לניתוח ביטוי גנים שגרתי.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos