Name: השתלת קרנית עכברית: דגם לחקר הצורה נפוצה ביותר של Solid השתלות איברים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-11-17T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 3 s
Description: חקור השתלת קרנית עכברית לחקר דחיית שתלים חמורה. מודל זה מאפשר הערכת שלמות השתל ובדיקת אסטרטגיות טיפוליות שונות לשיפור תוצאות השתלות איברים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

המחברים רוצים להודות לאנשים הרבים שעבדו על הטכניקה הזו ושכללו אותה, והיו אחראים ליצירתם של כתבי יד רבים הן במעבדה זו והן באחרות. עבודה זו נתמכה על ידי מענק המכונים הלאומיים לבריאות EY12707 (PMS) ומענק בלתי מוגבל ממחקר למניעת עיוורון למחלקה לרפואת עיניים.

הערה: מטופלים כל בעלי החיים המשמשים בהליך זה בהתאם לאגודה לחקר חזון הצהרת עיניים לשימוש בבעלי החיים ברפואת עיניים ומחקר חזון, כמו גם את ההנחיות שנקבעו על ידי הוועדה לפיקוח על בעלי החיים באוניברסיטת סנט לואיס. הערה: כל המכשירים ופתרונות כירורגיים הם מעוקרים לפני ניתוח, כדי לצמצם את זיהום חיידקים של העין. יש לציין, כי בעוד שבעלי החיים עושים לחוות קצת כאב מהליך זה, אנחנו לא מעסיקים משככי כאבים. הסיבה לכך היא כי כל משככי הכאבים אנטי דלקתיים ומאז תגובות השתלה הקרנית כרוכות דלקת, השימוש בתרופות אנטי-דלקתיות יפגע ביכולת שלנו כדי לקבוע אילו גורמים מעורבים בכישלון שתל קרני. 1. הרדמה <ol style="margin-left: 40px;;text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח עכברי תורם למקבל בהרדמה כללית על ידי זריקות IP של קטמין (86.98 מ&quot;ג / קילוגרם) ו xylazine (13.04 מ&quot;ג / קילוגרם). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שמור את עכבר הנמען בהרדמה לאורך כל ההליך אשר בדרך כלל לוקח 30 דקות לשעה. כתוצאה מכך, כל הזמן לפקח על העכבר עבור כל סימנים של חזרה להכרה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל המשחה puralube לעין עד שלא תעבור ניתוח אחרי בעל החיים הוא מורדם כדי למנוע יובש. </li></ol> 2. הארכת קרנית <ol style="margin-left: 40px;;text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קבלתן של קרנית התורם. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברגע שבעלי החיים הוא בהרדמה מלאה, להשיג mydriasis ההולם מצד ממשל של כמה טיפות עיניים של tropicamide 1% ו -2.5% hydrochloride phenylephrine. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקם את הראש של החיה התורמת בצורה אופקית על לוח מונח על תמיכת מטלטלין חסון. תקן את הראש עם רצועה של סרט על פני הצוואר, כדי להבטיח כי העין היא במצב אופקי לאורך כל הפעולה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שימוש במקדחה בקוטר 2 מ&quot;מ, שקצה שלו היה צבוע עם מתיל הכחול, החוצהמרפד את האתר שתל קרנית המרכזית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בסכין חד, לחדור הקרנית ולהזריק healon ללשכה הקדמית להעמיק אותו כדי להפחית את הסיכוי לניזק לאנדותל התורם והעדשה בסיסית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בלו שתל התורם במספריים Vannas ומקום לצלחת המכילה תמיסת מלח מאוזנת &quot;הנקס ועד שימוש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אחרי שתל התורם כבר הוסר, להרדים את העכבר התורם באמצעות CO 2 שאיפה. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנת מיטת השוחד. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור על אותם השלבים כפי שמתואר ב2.1.1 דרך 2.1.2 לנמען. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שימוש במקדחה בקוטר 1.5 מ&quot;מ, מתאר את אתר שתל נמען. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בסכין חד, לחדור הקרנית ולהזריק healon ללשכה הקדמית להעמיק אותו כדי להפחית את הסיכוי לניזק לעדשה הבסיסית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את הכפתור קרני המרכזי שהותווה מהנמען באמצעות מספריים Vannas וזורקים. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תפירתשתל <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את קרנית התורם מעל שתל המיטה בקרנית של הנמען. הקפד שhealon נאות הוא תחת קרנית התורם להגנה על תאי האנדותל תורם מנזק על ידי מגע ישיר עם עדשה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות microforceps היטה Super Fine, למקם את הנגיסה הראשונה של 11-0 תפר ניילון לצד התורם, דרך התורם עם עומק 90% מעובי מלא לצד של הנמען, ואז לקשור את. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברגע שהקרנית מעוגנת במקום, לבצע תפרי midcardinal קטע כזה שיש לו את הקרנית 8 עד 10 תפרים כולל וקרנית התורם היא בשורה בצורה מאובטחת עם ומחוברת למיטת השתל הקרנית הנמען. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העמקת הלשכה הקדמית <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להעמיק את הלשכה הקדמית על ידי הזרקת HBSS או בועת אוויר ללשכה הקדמית ובעדינות לבדוק את התקינות של השתל קרני לדליפה עם ספוג. הערה: אם לא ניתן רפורמה הלשכה הקדמית אז יש הסתברות גבוהה של גataract אשר יהפוך את ההערכות עתידיות של הקרנית המושתלת קשות מאוד וגם להוביל לבעיות בתפקוד תורם קרנית האנדותל וכישלון ובכך שתל. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הערכה סופית <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שים לב לעין לקבוע כי התלמיד הוא עגול ועומק הלשכה הקדמית הוא נורמלי. הערה: אם התלמיד אינו עגול זה עולה כי בתפירת איריס נפגעה וכך השתל נחשב לכישלון טכני. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל משחה אנטיביוטית לעין. אופציונאלי: סגור את המכסה עין עם תפר 7-0 משי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שים לב עכברים עד שהם התעוררו לגמרי ולאחר מכן בנפרד לשכן אותם למינימום של שני ימים שלאחר ניתוח. </li></ol></li></ol> הסרת 3. תפר <ol style="margin-left: 40px;;text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> במקרים בם תפר מכסה משמש, להרדים עכברים כפי שתואר לעיל ולהסיר את תפר המכסה ב 48 שעות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרדימי עכברים ביום 7 לאחר הניתוח. הסר את sutures אבטחת השתל קרני. ברגע שהתפרים יוסרו ובעלי החיים התעוררו באופן מלא, להחזיר אותו לכלוב שלה. </li></ol> 4. הערכה קלינית <ol style="margin-left: 40px;;text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדוק את העין לאינדיקציות של סיבוכים פרוצדורליים הכוללים, קטרקט (ערפול של העדשות), hyphema (דם בלשכה הקדמית), לשכה קדמית שאינה של העומק הנכון, או אטימות משמעותיות של הקרנית. שקול אלה המדגימים סיבוכים אלה כ&quot; התפשר &quot;ולהרדים אותם משאיפת CO 2. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבצע את כל הבדיקות על עכברי unanesthetized. החזק את העכבר ביד אחת ובכך מרסן את העכבר, כך ששני יכול proptose עין כדי לאפשר תצפית טובה יותר של העין. ברגע שהתצפיות הושלמו, להחזיר את בעל החיים לכלוב שלה. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> האם צופה שאינו מכיר את קבוצות הטיפול העריך את השווי מושתל קרניות 2 עד 3 פעמים בשבוע לסימנים של שתל קרניפרקי דחייה או כישלון שתל קרני. להשתמש במיקרוסקופ הניתוחי או biomicroscope מנורת סדק אופקי לתצפיות אלה. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להעריך כל קרנית לאטימות באמצעות סולם של 0 עד 5. קנה המידה מוגדרת באופן הבא: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הקצאת ציון של 0 עד אלה קרניות שאין להם סימנים של אטימות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הקצאת ציון של 1 לאלה קרניות שמראות אטימות שטחיות מינימליות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הקצאת ציון של 2 עד קרניות המציגות אטימות קלות ועמוקות יותר, אבל התלמיד ואיריס שהבסיס עדיין ניתן להבחין. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הקצאת ציון של 3 עד קרנית המציגות אטימות סטרומה בי לא ניתן לראות את איריס בפירוט למעט השוליים התלמיד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הקצאת ציון של 4 לקרנית, המציגות אטימות סטרומה צפופות ואם ניתן לראות אין מבנים שבבסיס. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הקצאת ציון של 5 עד קרנית המציגות אטימות מלאים ובצקת סטרומה אינטנסיבית, עם תלמיד ואיריס טשטש לחלוטין. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"><html> גם להעריך כל קרנית למידת חדירה של כלי דם (ניאו-וסקולריזציה) משתמש בסולם דירוג של 1 עד 8. לשם כך, להציג את הקרנית כמורכבת של 4 רביעים שווים ולקבוע את הסכום של כלי דם בכל אחד מרביעים עם ציון שטווח הרצון בין 0 (ללא כלי) 2 לכלי דם נרחבים של הרבע הזה. הוסף את הציונים הבודדים מכל רבע כדי לחשב את הציון הסופי ניאו-וסקולריזציה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לסווג קרניות בחריפות כזאת בדחו אם יש להם ציון של 3 לשתי תצפיות רצופות במשך זמן מצביע עד 5 שבועות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לסווג עכברים שהקרניות היו ברורים בשעה 5 שבועות, אבל לפתח עננות בזמנים&gt; 45 ימי הודעה קליטתם, עם ציון של 3 לשתי נקודות זמן ברציפות, כבעל דחיית שתל קרני לטווח מאוחר עבר. השתמש בעקומות הישרדות קפלן-מאייר לנתח הישרדות שתל. </li></ol></li></ol> 5. מניפולציה של הדגם בשמאל: 40px; &quot;&gt; <li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנה של תאים בודדים מהטחול. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי להכין תאים בודדים, להרדים את עכבר התורם ראשון. לאחר מכן, להסיר את הטחול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את הטחול במסננת תא ולשבש אותה עם בוכנת מזרק ממזרק 3 מיליליטר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שטוף תאים וגלולים ב 10 מיליליטר של תמיסת מלח מאוזנת הנקס. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר 10 μl של השעיה תא ולהוסיף עד 10 μl של trypan 0.4% כחולים ולערבב. תוסיף את זה לhemocytometer ולספור את התאים ברשת המרכזית. מספר התאים בצינור הוא ספירת התאים 10 4 x 2 (גורם לדילול בtrypan הכחול) X X 10 (נפח בצינור). </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הזרקה ללשכה הקדמית. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרדימי עכברים כפי שתואר לעיל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבצע זריקות באמצעות מיקרוסקופ לנתח. לכל הזרקה intracameral, להשתמש 6 10 תאי טחול ב0.005 מיליליטר נפח ומצויד במחט 33 G מזרק microliter 0.25 מיליליטר. הערה: מניפולציות אחרותשל המודל יכול להתבצע על ידי טיפול בבעלי חיים עם חומרים כימיים הפועלים כשני יריבים או אגוניסטים כדי לקבוע את התפקיד שגורם מסוים עשוי לשחק לאחר ניתוח שתל קרני orthotopic. </li></ol></li></ol>

<ol><li>Farooq, A. V., Shukla, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Herpes+simplex+epithelial+and+stromal+keratitis%3A+an+epidemiologic+update%5BTitle%5D)+AND+%22Surv.+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Herpes simplex epithelial and stromal keratitis: an epidemiologic update.</a> Surv. Ophthalmol. , 448-462 (2012).</li>
<li>Gipson, I. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-related+changes+and+diseases+of+the+ocular+surface+and%5BTitle%5D)+AND+%22Invest.+Opthlamol.+Vis.+Sci%22%5BJournal%5D)">Age-related changes and diseases of the ocular surface and.</a> Invest. Opthlamol. Vis. Sci. 54, 48-53 (2013).</li>
<li>Edwards, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Indications+for+corneal+transplantation+in+New+Zealand%3A+1991-1999%5BTitle%5D)+AND+%22Cornea%22%5BJournal%5D)">Indications for corneal transplantation in New Zealand: 1991-1999.</a> Cornea. 21, 152-155 (2002).</li>
<li>Thompson, R. W., Price, M. O., Bowers, P. J., Price, F. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+survival+after+penetrating+keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Long-term survival after penetrating keratoplasty.</a> Ophthalmol. 110, 1396-1402 (2003).</li>
<li>Williams, K. A., Roder, D., Esterman, A., Muehlberg, S. M., Coster, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Factors+predictive+of+corneal+graft+survival.+Report+form+the+Australian+Corneal+Graft+Registry%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Factors predictive of corneal graft survival. Report form the Australian Corneal Graft Registry.</a> Ophthalmology. 99, 403-414 (1992).</li>
<li>Larkin, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Corneal+allograft+rejection%5BTitle%5D)+AND+%22Br.+J.+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Corneal allograft rejection.</a> Br. J. Ophthalmol. 78, 649-652 (1994).</li>
<li>Boisjoly, H. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Risk+factors+of+corneal+graft+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Risk factors of corneal graft failure.</a> Ophthalmol. 100, 1728-1735 (1993).</li>
<li>Sugar, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recipient+Risk+Factors+for+Graft+Failure+in+the+Cornea+Donor+Study%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Recipient Risk Factors for Graft Failure in the Cornea Donor Study.</a> Ophthalmol. 116, 1023-1028 (2009).</li>
<li>Namba, K., Kitaichi, N., Nishida, T., Taylor, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+regulatory+T+cells+by+the+immunomodulating+cytokines+alpha-melanocyte-stimulating+hormone+and+transforming+growth+factor-beta2%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Leukoc.+Biol%22%5BJournal%5D)">Induction of regulatory T cells by the immunomodulating cytokines alpha-melanocyte-stimulating hormone and transforming growth factor-beta2.</a> J. Leukoc. Biol. 72, 946-952 (2002).</li>
<li>Taylor, A. W., Yee, D. G., Streilein, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Suppression+of+nitric+oxide+generated+by+inflammatory+macrophages+by+calcitonin+gene-related+peptide+in+aqueous+humor%5BTitle%5D)+AND+%22Invest.+Ophthalmol.+Vis.+Sci%22%5BJournal%5D)">Suppression of nitric oxide generated by inflammatory macrophages by calcitonin gene-related peptide in aqueous humor.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 39, 1372-1378 (1998).</li>
<li>Wilbanks, G. A., Mammolenti, M., Streilein, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studies+on+the+induction+of+anterior+chamber-associated+immune+deviation+%28ACAID%29.+III.+Induction+of+ACAID+depends+upon+intraocular+transforming+growth+factor-beta%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Studies on the induction of anterior chamber-associated immune deviation (ACAID). III. Induction of ACAID depends upon intraocular transforming growth factor-beta.</a> Eur. J. Immunol. 22, 165-173 (1992).</li>
<li>Volpert, O. V., et al. Inducer-stimulated Fas targets activated endothelium for destruction by anti-angiogenic thrombospondin-1 and pigment epithelium-derived factor. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aVolpert%2C+OV+%22Nat.+Med%22">Nat. Med</a>. , 8-349 (2002).</li>
<li>Apte, R. S., Sinha, D., Mayhew, E., Wistow, G. J., Niederkorn, J. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cutting+edge%3A+role+of+macrophage+migration+inhibitory+factor+in+inhibiting+NK+cell+activity+and+preserving+immune+privilege%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Cutting edge: role of macrophage migration inhibitory factor in inhibiting NK cell activity and preserving immune privilege.</a> J. Immunol. 160, 5693-5696 (1998).</li>
<li>Kennedy, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+production+of+interleukin-1+receptor+antagonist+peptides+in+normal+human+cornea%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Invest%22%5BJournal%5D)">Novel production of interleukin-1 receptor antagonist peptides in normal human cornea.</a> J. Clin. Invest. 95, 82-88 (1995).</li>
<li>Shimmura-Tomita, M., Wang, M., Taniguchi, H., Akiba, H., Yagita, H., Hori, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Galectin-9-mediated+protection+from+allo-specific+T+cells+as+a+mechanism+of+immune+privilege+of+corneal+allografts%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Galectin-9-mediated protection from allo-specific T cells as a mechanism of immune privilege of corneal allografts.</a> PLoS One. 8, (2013).</li>
<li>Goldberg, M. F., Ferguson, T. A., Pepose, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detection+of+cellular+adhesion+molecules+in+inflamed+human+corneas%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Detection of cellular adhesion molecules in inflamed human corneas.</a> Ophthalmol. 101, 161-168 (1994).</li>
<li>Stuart, P. M., Griffith, T. S., Usui, N., Pepose, J. S., Yu, X., Ferguson, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD95+ligand+%28FasL%29-induced+apoptosis+is+necessary+for+corneal+allograft+survival%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">CD95 ligand (FasL)-induced apoptosis is necessary for corneal allograft survival.</a> J Clin Invest. 99, 396-402 (1997).</li>
<li>Yamagami, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+Fas-Fas+ligand+interactions+in+the+immunorejection+of+allogeneic+mouse+corneal+transplants%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Role of Fas-Fas ligand interactions in the immunorejection of allogeneic mouse corneal transplants.</a> Transplantation. 64, 1107-1111 (1997).</li>
<li>Stuart, P. M., Pan, F., Plambeck, S., Ferguson, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fas%2FFas+ligand+interactions+regulate+neovascularization+in+the+cornea%5BTitle%5D)+AND+%22Invest.+Ophthalmmol.+Vis.+Sci%22%5BJournal%5D)">Fas/Fas ligand interactions regulate neovascularization in the cornea.</a> Invest. Ophthalmmol. Vis. Sci. 44, 93-98 (2003).</li>
<li>Stuart, P. M., Yin, X. T., Pan, F., Haskova, Z., Plambeck, S., Ferguson, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibitors+of+matrix+metalloproteinases+activity+prolong+corneal+allograft+acceptance+by+increasing+FasL+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Invest.+Ophthalmol.+Vis.+Sci%22%5BJournal%5D)">Inhibitors of matrix metalloproteinases activity prolong corneal allograft acceptance by increasing FasL expression.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 45, 1169-1173 (2004).</li>
<li>Joo, C. -K., Pepose, J. S., Stuart, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((T-cell+mediated+responses+in+a+murine+model+of+orthotopic+corneal+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Invest.Ophthalmol.+Vis.+Sci%22%5BJournal%5D)">T-cell mediated responses in a murine model of orthotopic corneal transplantation.</a> Invest.Ophthalmol. Vis. Sci. 36, 1530-1540 (1995).</li>
<li>Sonoda, Y., Sano, Y., Ksander, B., Streilein, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+cell-mediated+immune+responses+elicited+by+orthotopic+corneal+allografts+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Invest.+Ophthalmol.+Vis.+Sci%22%5BJournal%5D)">Characterization of cell-mediated immune responses elicited by orthotopic corneal allografts in mice.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 36, 427-434 (1995).</li>
<li>Sano, Y., Osawa, H., Sotozono, C., Kinoshita, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytokine+expression+during+orthotopiccorneal+allograft+rejection+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Invest.+Ophthalmol.+Vis.+Sci%22%5BJournal%5D)">Cytokine expression during orthotopiccorneal allograft rejection in mice.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 39, 1953-1957 (1998).</li>
<li>Haskova, Z., Usui, N., Ferguson, T. A., Pepose, J. S., Stuart, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD4%2B+T+cells+are+critical+in+corneal+but+not+skin+allograft+rejection%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">CD4+ T cells are critical in corneal but not skin allograft rejection.</a> Transplantation. 69, 483-488 (2000).</li>
<li>Tan, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunological+disruption+of+antiangiogenic+signals+by+recruited+allospecific+T+cells+leads+to+corneal+allograft+rejection%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Immunological disruption of antiangiogenic signals by recruited allospecific T cells leads to corneal allograft rejection.</a> J. Immunol. 188, 5962-5969 (2012).</li>
<li>Dana, M. R., Yamada, J., Streilein, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Topical+interleukin-1+receptor+antagonist+promotes+corneal+transplant+survival%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Topical interleukin-1 receptor antagonist promotes corneal transplant survival.</a> Transplantation. 63, 1501-1507 (1997).</li>
<li>Cunnusamy, K., Chen, P. W., Niederkorn, J. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IL-17A-dependent+CD4%2BCD25%2B+regulatory+T+cells+promote+immune+privilege+of+corneal+allografts%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Immunol%22%5BJournal%5D)">IL-17A-dependent CD4+CD25+ regulatory T cells promote immune privilege of corneal allografts.</a> J. Immunol. 186, 6737-6745 (2011).</li>
<li>Fu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Arginine+depletion+as+a+mechanism+for+the+immune+privilege+of+corneal+allografts%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Arginine depletion as a mechanism for the immune privilege of corneal allografts.</a> Eur. J. Immunol. 41, 2997-3005 (2011).</li>
<li>Medina, C. A., Rowe, A. M., Yun, H., Knickelbein, J. E., Lathrop, K. L., Hendricks, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Azithromycin+treatment+increases+survival+of+high-risk+corneal+allotransplants.Cornea%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Azithromycin treatment increases survival of high-risk corneal allotransplants.Cornea.</a> , 32-658 (2013).</li>
<li>Cho, Y. K., Zhang, X., Uehara, H., Young, J. R., Archer, B., Ambati, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+Endothelial+Growth+Factor+Receptor+1+morpholino+increases+graft+survival+in+a+murine+penetrating+keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22Invest.+Ophthalmol.+Vis.+Sci%22%5BJournal%5D)">Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 1 morpholino increases graft survival in a murine penetrating keratoplasty.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 53, 8458-8471 (2012).</li>
<li>Kim, H. K., Choi, J. A., Uehara, H., Zhang, X., Ambati, B. K., Cho, Y. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Presurgical+corticosteroid+treatment+improves+corneal+transplant+survival+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cornea%22%5BJournal%5D)">Presurgical corticosteroid treatment improves corneal transplant survival in mice.</a> Cornea. 32, 1591-1598 (2013).</li>
<li>Yamazoe, K., Yamazoe, K., Shimazaki-Den, S., Shimazaki, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prognostic+factors+for+corneal+graft+recovery+after+severe+corneal+graft+rejection+following+penetrating+keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Prognostic factors for corneal graft recovery after severe corneal graft rejection following penetrating keratoplasty.</a> BMC Ophthalmol. 13, 5(2013).</li>
<li>Panda, A., Vanathi, M., Kumar, A., Dash, Y., Priya, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Corneal+graft+rejection%5BTitle%5D)+AND+%22Surv.+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Corneal graft rejection.</a> Surv. Ophthalmol. 52, 375-396 (2007).</li>
<li>Patel, S. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Graft+survival+and+endothelial+outcomes+in+the+new+era+of+endothelial+keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Graft survival and endothelial outcomes in the new era of endothelial keratoplasty.</a> Exp. Eye Res. 95, 40-47 (2012).</li>
<li>Anshu, A., Price, M. O., Tan, D. T., Price, F. W. Jr <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+keratoplasty%3A+a+revolution+in+evolution%5BTitle%5D)+AND+%22Surv.+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Endothelial keratoplasty: a revolution in evolution.</a> Surv. Ophthalmol. 57, 236-252 (2013).</li>
</ol>

למחברים אין אינטרסים כלכליים מתחרים.

המודל העכברי של השתלת קרנית המתוארת כאן מאפשר לחוקר ללמוד דחיית שתל קרנית אדם במודל שהוא ניבוי של מה גורמים הקשורים הטובים ביותר עם ​​שתי הדחייה 15,17,18,20, 26-30 וקבלת 21-25 של קרנית allografts. בשונה השתלת קרנית אנושית, שבו מטופלים מקבלים גם טיפול בסטרואידים מקומי או מערכתי לדחייה או לטפל או למנוע 31, מודל זה משמש בדרך כלל כדי לקבוע מי גורמים שרלוונטיים לדחייה של שתל, בהעדר טיפול כזה. בנוסף למודל לדחיית שתל חמור של קרנית, אשר מתרחש בדרך כלל בתוך...

השתלת קרנית היא אחד מהסוגים המוצלחים והנפוצים ביותר של השתלה שבוצעו בבני אדם. הסיבות לכך שניתוח זה מבוצע הן תוצאה של פציעה, מחלה זיהומית 1, או צורות אחרות של מחלה בקרנית שאינה מדבקת 2. דמויות מעין הבנק האגודה של אמריקה עולות כי מעל 46,000 בוצעו בשנת 2011 (ראה באתר אינטרנט בכתובת: restoresight.org/eye_banks/eye_banks.html). אינדיקציה להצלחתו היא ששיעורי כישלון שנה אחת עבור שתלי קרנית אלוגנאית נעים 10-15% ולאחר 5 שנים של ההצלחה היא בעודף של 70% 3-8. מחקרים רבים הראו, ההצלחה של allografts קרנית קשורה באופן ישיר לעובדה כי העין היא אתר מועדף אימונולוגית. גורמים אחראים למצב הקרניות כאתר זכות חיסוני כוללים חוסר של שני כלי הדם והלימפה בקרנית, היעדר יחסי של תאי הצגת אנטיגן, גורמים המיוצר על ידי הקרנית שsuppresזה funtions מפעיל חיסוני 9-15, ביטוי נמוך של MHC אנטיגנים 16, ואת הביטוי של מקאל 17-20. עם זאת, למרות גורמים אלה, גורם שתלים אלה להצלחה, הם עוברים דחייה 3-7. כתוצאה מכך, הבנת מנגנונים אלה שמתווכים דחייה זו, כמו גם בדיקת טיפולים שונים למניעת דחייה היא בעל חשיבות קריטית. לצורך כך, אנו מתארים כאן מודל עכברי של השתלת קרנית שכבר בשימוש במשך 20 שנים כדי ללמוד השתלת קרנית בסביבה ניסויית מבוקרת. מאז תגובות השתלה כרוכות בגורמים רבים ושונים הפועלים בקונצרט שאולטימטיבי לקבוע אם הרקמה המושתלת נכשלת או מצליחה, שלא ניתן להבין את החשיבות של גורמים אלה בכל דגם במבחנה. כתוצאה מכך, מחקרים שנערך בבעלי חיים שלמים נדרשים כדי לקבוע מה גורמים חשובים להצלחה או או failuמחדש של רקמה מושתלת. בעוד מינים אחרים של בעלי חיים שימשו במחקר השתלה קרנית, יש במודל העכברי מספר יתרונות בהשוואה לשימוש במינים אחרים. הראשון הוא קיומה של זנים רבים של עכברים המבטאים את גנים מושתלים מסוימים או היו ממוקד-גן לחוסר ביטוי של גורמים חיסוניים ספציפיים שתפקידה בהשתלה ניתן ללמוד טוב יותר. בנוסף, יש חומרים כימיים רבים (שני גורמים רקומביננטי ונוגדנים המנטרלים את הגורמים) שהם ספציפיים לעכברים ושאינם קיימים למינים רבים אחרים של בעלי חיים. בגלל קיומם של גורמים אלה, מודל זה כבר נעשה שימוש נרחב כדי לזהות גורמים רלוונטיים מעורבים בתגובה החריפה של קרנית שתל 15, 17,18,20 -29. יתר על כן, רבים מן הגורמים המעורבים בהשתלת קרנית ידוע גם להיות פונקציונלי בהשתלה של רקמות אחרות.

<table><tbody><tr><td>Zeiss מיקרוסקופ כירורגי</td><td>Zeiss</td><td>Rebuilt</td><td></td></tr><tr><td>1 מ"ל מזרק</td><td>BD</td><td>305122</td><td></td></tr><tr><td>3 מ"ל מזרק</td><td>BD</td><td>309657</td><td></td></tr><tr><td>10 מ"ל מזרק</td><td>BD</td><td>309602</td><td></td></tr><tr><td>מספריים ואנוס</td><td>Stortz</td><td>E-3387</td><td></td></tr><tr><td>11-0 תפרים</td><td>אלקון</td><td>717939M</td><td></td></tr><tr><td>טרפין 2.0 מ"מ</td><td>Katena</td><td>K 2-7520</td><td></td></tr><tr><td>טרפין 1.5 מ"מ</td><td>Katena</td><td>K 2-7510</td><td></td></tr><tr><td>Tricaine Hydrochloride 0.5%</td> <td>Alcon</td><td>NDC 0065-0741-12</td><td></td></tr><tr><td>Healon</td><td>Abbott</td><td>Healon OVD</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים</td><td>FST</td><td>11251-20</td><td></td></tr><tr><td>7-0 תפרים</td><td>אלקון</td><td>8065</td><td></td></tr><tr><td>2.5% פנילפרין הידרוכלוריד</td><td>אלקון</td><td>NDC 61314-342-02</td><td></td></tr><tr><td>1% טרופיקמיד</td><td>באוש & Lomb</td><td>NDC-24208-585-59</td><td></td></tr><tr><td>מזרק המילטון</td><td>המילטון</td><td>7654-01</td><td></td></tr><tr><td>33 מחט מד</td><td>המילטון</td><td>90033</td><td></td></tr><tr><td>מסננת תאים (100 &mu; m ניילון)</td><td>BD Falcon</td><td>352360</td><td></td></tr><tr><td>המוציטומטר</td><td>בריאות קרדינלית</td><td>B3175</td><td></td></tr><tr><td>טריפן כחול</td><td>סיגמא</td><td>T8154</td><td></td></tr></tbody></table>

השתלת קרנית עכברית: דגם לחקר הצורה נפוצה ביותר של solid השתלות איברים

Murine Corneal Transplantation: A Model to Study the Most Common Form of Solid Organ Transplantation

השתלת קרנית היא הצורה הנפוצה ביותר של השתלת איברים בארצות הברית עם בין 45,000 ל-55,000 הליכים המבוצעים מדי שנה. בעוד שקיימים מספר מודלים של בעלי חיים להליך זה ועכברים הם המין הנפוץ ביותר. הסיבות לשימוש בעכברים הן העלות היחסית של השימוש במין זה, קיומם של זנים מוגדרים גנטית רבים המאפשרים חקר תגובות חיסוניות, וקיומו של מערך נרחב של ריאגנטים שניתן להשתמש בהם כדי להגדיר עוד יותר תגובות במין זה. מודל זה שימש להגדרת גורמים בקרנית האחראים למצב הפריבילגיה החיסונית היחסית של רקמה זו המאפשרת להשתלות קרנית לשרוד דחייה חריפה בהיעדר טיפול מדכא חיסוני. הוא שימש גם להגדרת הגורמים החשובים ביותר בדחיית השתלות אלוגרפים כאלה. כתוצאה מכך, הרבה ממה שאנו יודעים על מנגנונים של קבלה ודחייה של השתלת קרנית נובע ממחקרים המשתמשים במודל עכברי של השתלת קרנית. בנוסף לתיאור מודל לדחיית השתלת קרנית חריפה, אנו מציגים לראשונה גם מודל של דחיית אלוגרפט קרנית מאוחרת.

המודל העכברי של השתלת קרנית היה בשימוש כבר למעלה מ -20 שנים לאפיין בהצלחה מנגנונים של שני דחיית קרנית שתל 19-23 וקבלת קרנית שתל 13, 15,16,18, 24-27. מודל זה שימש להקמת חשיבות ביטוי מקאל בקבלת שתל קרנית, שבבעלי חיים שאין לי מקאל לא היו מסוגל לקבל allografts קרני 15. כמו כן, נעשה שימוש על מנת להוכיח כי הטיפול בכלי דם צמיחת אנדותל גורם קולטן 1 morpholino מגביר את הישרדות שתל הקרנית 28 באופן משמעותי. בדו"ח האחרון מאוד מודל זה שימש כדי לבדוק ...

עכברים שימשו כמודל לחקר צורות רבות של השתלה, כולל השתלת קרנית. אנו מתארים בדוח זה מודל עכברי להשתלת קרנית חריפה ומאוחרת כאחד.

השתלת קרנית עכברית: דגם לחקר הצורה נפוצה ביותר של Solid השתלות איברים

Corneal transplantation is the most common form of organ transplantation in the United States with between 45,000 and 55,000 procedures performed each ...

המטרה הכוללת של ההליך הבא היא להציג מודל לדחיית השתלת קרנית חריפה. זה מושג על ידי הסרת הקרנית התורמת. השלבים הבאים של ההליך הם הכנת מיטת השתל של הנמען ותפירת קרנית התורם למקומה.לאחר מכן נבדקת תקינות השתל, ואם אין נזילות, העפעף נתפר סגור. לאחר שבוע מעריכים את האטימות של שתל הקרנית כדי למדוד את דחיית האלוגרפט. בסופו של דבר, ניתן להשתמש במודל, יכול לבחון מגוון אסטרטגיות טיפוליות כדי להגדיר את הגורמים החשובים ביותר הקשורים לדחיית השתלת איברים מוצקים.השתלת קרנית היא הנפוצה ביותר בארצות הברית. ישנם מספר מודלים של בעלי חיים זמינים להליך זה, אך עכברים הם הנפוצים ביותר. מודל זה שימש להגדרת גורמים, הכרוכים הן בדחייה והן בקבלה של השתלת הקרנית.לאחר הרדמת העכברים התורמים והמקבלים ואישור מצבם המורדם על ידי צביטה בבוהן, יש למרוח משחת סיכה טהורה על העיניים שאינן עוברות ניתוח. לאחר מכן אבטח את הראש עם העין התורמת אופקית לתמיכה יציבה וניתנת להזזה באמצעות רצועת סרט על הצוואר. כעת באמצעות שיניים בקוטר שני מילימטר שקצהו נצבע בכחול מתיל, מתארים את אתר השתלת הקרנית המרכזי.לאחר מכן עם להב סכין עיניים של 15 מעלות חודר לקרנית כדי לסייע במניעת נזק לעדשה הבסיסית. הזרקו את התמיסה הויסקו-אלסטית לחדר הקדמי כך שהתא יהיה עמוק יותר. כעת כרתו את שתל התורם במספריים של ונציה והעבירו את השתל לצלחת של HBSS על קרח עד לשי

murine-corneal-transplantation-model-to-study-most-common-form-solid

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

מודל השתלת לב בצוואר הרחם העכברי הוא גם מתאים חיסוני, כמו גם מחקרי פציעת reperfusion איסכמיה. שינינו את התהליך תוך שימוש בטכניקת שרוול שאינו תפר וביצעו יותר מ 1,000 השתלות מוצלחות עם גישה זו.  במסמך זה, אנו מספקים פרטים נוספים בטכניקה זו כדי להשלים את הווידאו.

עכברי צוואר הרחם לב השתלת דגם שימוש בטכניקת חפתים השתנה

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לחקר האימונולוגיה של דחייה. המודל הכירורגי הציג דוחות על זמן ניתוח קצר וטכניקה תמציתית. בהתאם לשילוב הזן של התורם-מקבל, הכליה המושתלת עלולה לפתח דחייה תאית חריפה או נזק כרוני לאלוגרפט, המוגדר על ידי פיברוזיס אינטרסטיציאלי וניוון צינור.

השתלת כליה עכבר: מודלים של דחיית השתל

כדי לחקור השתלה משולבת של איברים מוצקים וכלי דם, אנו מתארים מודל חדש של השתלת דופן חזה הטרוטופית, בלוטת התימוס ולב בעכברים באמצעות טכניקת שרוול צוואר הרחם ללא תפרים.

Microsurgical דגם חדשני לHeterotopic, כמקשה אחת בחזה קיר, קורנית, ולב השתלה בעכברים

מודל הרומן הזה להשתלה הגפיים האחוריות orthotopic בתוך העכבר, החלת טכניקה השרוול הלא תפר עבור השקה סופר-כלי הדם, מספק כלי רב עוצמה עבור מחקר אימונולוגי מכניסטית in vivo הקשורים אלוגרפט מרוכבים vascularized (VCA).

Orthotopic הינד לימב השתלה בבית העכבר

השתלת עור בעובי מלאת Murine היא מודל ומבוסס ללמוד דחייה בסביבת alloimmune. כאן, אנו מספקים הדרכה של כל שלב המעורב בביצוע BALB / ג - השתלת עור&gt; C57BL / 6 בעובי מלא.

השתלת עור בעובי מלא Murine

כאן, פרוטוקול צעד אחר צעד להכנה וטיפוח של כפתורי הקרנית מפוצל חזירי מוצג. כמו זה אורגאנו-מעובד בדרך כלל מודל תרבות האיברים מראה שיעורי מוות של תאים בתוך 15 ימים, המקבילה לקרנית התורם האנושי, הוא מייצג את המודל הראשון המאפשר טיפוח לטווח ארוך של קרניות לא אנושיות מבלי להוסיף דקטרן רעיל.

מודל של הקרנית של הקרניות הפותל באמצעות לחצני הקרנית מפוצלת

המאמר הנוכחי מתאר טכניקה שונה להשתלת לב הטרוטופית וסקולרית עם טכניקה אספטית מעודכנת, שיכוך כאבים והרדמה.

פרוטוקול השתלת לב הטרוטופי מורין מותאם לסטנדרטים עכשוויים של טכניקה אספטית, הרדמה ושיכוך כאבים

פרוטוקול זה מציג גישה טרנס-סקלרלית מונחית ראייה טרנס-אישונים להעברה בטוחה ומדויקת של שתלים תאיים תת-רשתית, עם שיעור נמוך של סיבוכים כירורגיים, במושתלי עכבר עם או בלי ניוון רשתית.

השתלה טרנס-סקלרלית מונחית אישונים של שתלים תת-רשתית במודל עכבר ניוון רשתית

מחקר זה בונה שני מודלים סטנדרטיים של השתלת זרים בעכברים כדי לשחזר באופן ספציפי דחייה תאית חריפה ודחייה חריפה בתיווך נוגדנים. מודלים אלו משמשים פלטפורמה אמינה לחקר מנגנוני דחיית מערכת החיסון על ידי זנוגרפט, להערכת אסטרטגיות מדכאות חיסון ולקידום מחקר טרום-קליני של השתלות זנו.

מודל עכברו סטנדרטי עם זרימת עבודה של שלושה אנשים לחקר דחייה תאית חריפה ותיווך נוגדנים בזנוטרנספלטציה

פרוטוקול זה מציג טכניקת אנסטומוזה פשוטה מקצה לצד להשתלת לב צוואר הרחם בעכברים, ומספק מודל חזק וניתן לשחזור ללימוד אימונולוגיה של השתלות.

השתלת לב עכבר הטרוטופית צווארית באמצעות טכניקת אנסטומוזה מקצה לצד לחקר אימונולוגיה של השתלות

חקור השתלת קרנית עכברית לחקר דחיית שתלים חמורה. מודל זה מאפשר הערכת שלמות השתל ובדיקת אסטרטגיות טיפוליות שונות לשיפור תוצאות השתלות איברים.

השתלת קרנית עכברית: דגם לחקר הצורה נפוצה ביותר של Solid השתלות איברים

גלה סרטונים נוספים