Name: העכברי אנדוסקופיה ל בVivo ריפוי Multimodal הדמיה של היווצרות הסרטן וההערכה של מעיים פצע ודלקת (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-08-26T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 42 s
Description: למד אנדוסקופיה בעכברים להערכת דלקת מעיים, ריפוי פצעים וזיהוי גידולים באמצעות אנדוסקופיית פלואורסצנציה. שיטה זו מאפשרת מעקב סדרתי ואבחון בזמן אמת של שינויים ברירית המעי.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

אנו מודים לסוניה Dufentester ואלקה וובר לקבלת סיוע טכני מומחה. אנו מודים Faekah גוהר להגהה את כתב היד וסטפן ברוקנר לתמיכת מידע רפואי. עבודה זו נתמכה על ידי מענק בינתחומי מ- קרונות-Fresenius-Stiftung השאר (2012_A94). ד Bettenworth נתמכה על ידי מענק מחקר מהפקולטה לרפואה, Westfälische Wilhelms-Universität מינסטר. מ &#39;ברוקנר נתמכה על ידי עמדה סיבובית &quot;Gerok&quot; של (DFG SFB1009B8). אנו מודים ליקה בלום להמחשה של הקריקטורה העכבר.

כל הניסויים בבעלי החיים אושרו על ידי Landesamt für נאטור, Umwelt und Verbraucherschutz (LANUV) על פי חוק הגנה על בעלי חיים הגרמנים. .1 חומרים והתקנה ניסיונית <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> טיפול בבעלי חיים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש נשי או עכברי זכרים של כל זן במשקל 20 25 גרם ולשכן אותם על פי חקיקת טיפול בבעלי החיים מקומית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להאכיל את העכברים עם אוכל מיוחד למכרסמים ולהחיל צ&#39;או ללא אספסת לפחות שלושה ימים לפני הקרינה בדיקות כדי למזער הקרינה אוטומטית endoluminal. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לספק כרצונך מי שתיית autoclaved. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אינדוקציה של קוליטיס-Induced DSS החריף <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן 3% (w / v) נתרן גופרתי dextran (DSS, משקל מולקולרי: 36,000-50,000 Da) פתרון על ידי המסת 3 גרם של DSS ב100 מ&quot;ל autoclaved מים. להציע את הפתרון הזה כמי שתייה בלעדיים כלרצונך עכברים ולחשב 5 מ&quot;ל של DSS-פתרון לכל עכבר / יום. המשך Feedעכברי רול עם מים autoclaved ללא כרצונך DSS 9. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אינדוקציה של סרטן מעי גס <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפזר azoxymethane mutagenic (AOM) (זהירות! עלול לגרום לסרטן ולנזק גנטי!) בתמיסת מלח איזוטוני סטרילי כדי לקבל ריכוז סופי של 1 מ&quot;ג / מ&quot;ל. החל מנה בודדת של AOM 10 מ&quot;ג לכל קילוגרם משקל גוף תוך peritoneally באמצעות מזרק 1 מ&quot;ל (30 G) 10. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עכברי אתגר (לא כולל עכברי שליטה) עם מחזורים חוזרים ונשנים של 3% (w / v) DSS מיום 0 עד 7, יום 14 עד 21, יום 28-35 ויום 42-49 לגרום cancerogenesis מעי גס דלקתי מונע. להאכיל את העכברים במי autoclaved רק בין אתגרים אלה (ראו איור 4 א ללוח זמנים מפורטים). להאכיל את עכברי שליטה במי autoclaved לאורך כל הניסוי. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנת אנדוסקופיה הקרינה (FE) <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שימוש והעמסת-Isothiocyanat (FITC) - (משקל מולקולרי 70,000 Da; FITC: גלוקוז = 1: 250) dextran לdetection של אדנומה במעי הגס על ידי שיפור חזותי של תבנית כלי דם דיספלזיה קשורה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנהל dextran FITC- מצומדות 60 מ&quot;ג המדולל ב100 μl PBS הווריד 5 דקות לפני הבדיקה אנדוסקופית הקרינה. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרדמה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לספק אספקת isoflurane רציפה עבור הרדמה (1.5 LO 2 / דקה; isoflurane 1.5-2 כרך% [2-כלורו-2 (difluoromethoxy) -1,1,1-trifluoro-אתאן]). השתמש בציוד הרדמה וטרינרים מיוחד עם facemask לשלוט בחוזקה הרדמה. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנה של חוקן <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להחדיר 2 מ&quot;ל של נוזל חוקן (תוכן: hydrogenphosphate Disodium 1.5% (w / v) ונתרן dihydrogenphosphate 11% (w / v)) לתוך המעי הגס אם טעינת צואה משמעותית חשודה שעלולות לטשטש את הראייה. </li></ol></li></ol> .2 ציוד טכני <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש בתחנת עבודה אנדוסקופית וטרינרים שפותחה ואושרה לשימוש באנדוסקופיה בעלי החיים הקטן. חבר את ווrkstation ליחידת מצלמה, מקור אור קסנון, משאבת אוויר ולצג מחשב קונבנציונלי לאנדוסקופיה אור הלבנה. לאחר מכן לחבר את המצלמה וטלסקופ מיניאטורי הנוקשה (קוטר 1.9 מ&quot;מ חיצוני, אורך סנטימטר 10; איור 5). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש בנדן אנדוסקופ עם הערוץ חוזר (איור 5D) ליישום של מלקחיים ביופסיה או צינור הזרקה. השתמש בנדן בלי לעבוד ערוץ לקולונוסקופיה אבחון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קבע את תצורת ההגדרות של מקור האור לאנדוסקופיה הקרינה לרגש קליעים נותבים בשימוש (לדוגמא, 490 ננומטר לdextran FITC- מצומדות). בנוסף, לשלב מסנן bandpass ראוי בין הטלסקופ והמצלמה (לדוגמא, 525 ננומטר לdextran FITC- מצומדות). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס מלקחיים גמישים ביופסיה (3 charr., 28 סנטימטר) דרך ערוץ העבודה של אנדוסקופ לקבל ביופסיות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להציג את צינור הזרקה גמישה (0.96 מ&quot;מ) דרך ערוץ העבודה לאקטואלית, intramucosal או endoluminaldministration של סוכני אבחון או טיפול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להשתמש בטבלת בדיקה מחוממת עם טמפרטורה של 42 מעלות צלזיוס. זה מונע עכברים הופכים היפותרמיה בזמן הבדיקה. </li></ol> .3 הרדמה של בעלי חיים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את העכבר בקופסא קטנה אך leakproof ולנהל isoflurane (100% (v / v), 5% כרך, 3 L / min). חכה עד שהעכבר מאבד את הכרתו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העבר את העכבר על שולחן הבדיקה לאנדוסקופיה. המשך שאיפת isoflurane באמצעות מסיכת פנים עם נ מינון 100% / v, 1.5% כרך, 1.5 ליטר / דקה. תמיד להחיל משחה העין כדי למנוע יובש בעיניים בזמן שתחת הרדמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להעריך את היעילות של הרדמה על ידי בדיקת רפלקסים. בדוק את &#39;להסתובב רפלקס&#39;: אם מורדם מספיק, עכבר שוכב על הגב שלה לא צריך להסתובב. בדקו את &quot;הבהונות רפלקס &#39;: כאשר ההרדמה היא נאותה, רך צובטת בין אצבעות רגליו של בעל החיים לא צריך להוביל לנסיגה של רגל (שלב שלסובלנות כירורגית). </li></ol> .4 קולונוסקופיה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח עכבר הרדים נוטה / על הגב שלה על שולחן הבדיקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנהל 2 מ&quot;ל של חוקן באמצעות צינורית מכופתרת לתוך המעי הגס אם טעינת צואה משמעותית חשודה שעלול לטשטש את הראייה. חכה לעכברים לעשות את הצורך לאחר מתן החוקן. הכנס את אנדוסקופ מאוד בזהירות כדי להימנע מניקוב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פתח את שני השסתומים של הנדן עם אחד מהם להיות מחובר למשאבת האוויר. לאטום את השסתום האחר עם אצבעך לוותר אוויר. לנפח מעי גס עם אוויר, לאט ובזהירות, במיוחד במקרה של ביופסיה או הזרקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לקדם אנדוסקופ רק עד כפף מעי הגס הזכות להימנע מניקוב (4-5 סנטימטר מטבעת). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קולונוסקופיה לאבחון <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבחון את הרירית לשינויים דלקתיים או ממאיר תוך משיכת בחזרה אנדוסקופ. משוך לאחור באיטיות על מנת להעריך את כל היקפו של המעי. להעריך pa intraluminalthologies באמצעות מערכות ניקוד הוקמו מתאימות כנדרש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי להצדיק את עמדת אנדוסקופית זהה לרכישת תמונה בפריטים החזותיים חוזרים ונשנים של אזורי פצע, לב המרחק בין פי הטבעת העכברית והנגע ברירית. יתר על כן, להשתמש בקצה של המלקחיים הביופסיה כspacer כדי להשיג מרחק זהה בין אזור הפצע במהלך רכישת תמונת אנדוסקופ ו. גודל הפצע קשור לגודל של נדן אנדוסקופ, הכולל 3 מ&quot;מ. הערה: אנדוסקופ מקום בעמדה זהה בהשוואה אופטית עם תיעוד תמונה של בדיקות קודמות. נגעי מדד באותה הזווית ומרחק בכל מעקב בדיקה אנדוסקופית. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הליך ביופסיה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קח ביופסיות בעזרת שני חוקרים. להציג את המלקחיים הביופסיה בזהירות דרך הערוץ עובד עד קצה המלקחיים גלוי על הצג לחוקר השני. פתיחה וסגירה של מלקחיים בזהירות כדיניקוב חלל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הזז מלקחיים לאתר של פתולוגיה. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הליך הזרקה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבצע הליך הזרקה בעזרת שני חוקרים. צינור טרום מילוי הזרקה גמישה (0.96 מ&quot;מ) עם הסוכן לחלוטין להינתן. לדחוף צינור דרך הערוץ עובד עד הצינורית (30 G) היא נראה על הצג לחוקר השני. הכן את המזרק העדין ובעדינות לנהל את הסכום המבוקש סוכן אבחון או טיפול של. כרכי הזרקה צריכים להיות 50 מרביים μl. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס את המחט לתוך submocosa בזווית של 15-30 מעלות. פנים שפוע בכיוון של הרירית. רירית תערוכות הרמת סימן אופייני לאחר זריקה מוצלחת. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אנדוסקופיה הקרינה (FE) <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנהל dextran FITC- מצומדות 60 מ&quot;ג המדולל ב100 μl PBS לווריד לפני בדיקת הקרינה אנדוסקופית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדוק את נקודת הזמן האופטימלית בין ההזרקה שלנותב ניאון שכותרתו והליך ההדמיה שתלויה בפרמקולוגיה נותב. קביעת תצורה של הגדרות של מערכת סינון bandpass בהתאם לאורך גל עירור ופליטה של ​​נותב בשימוש. לבצע אנדוסקופיה הקרינה לקליעים נותבים נפח דם שאינם ספציפיים (לדוגמא, FITC) מייד לאחר הזרקה תוך ורידית של צבע הניאון כדי להעריך את הדפוס של כלי הדם של פני השטח הרירי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשקול הדמיה כמה שעות לאחר יישום נותב במקרה של קליעים נותבים ממוקדים או &quot;בדיקות חכמות &#39;כדי לספק יעד טוב יותר לרקע יחס. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבצע תיעוד וידאו פוטו ושל התוצאות. </li></ol></li></ol> .5 Post-קולונוסקופיה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפרד את העכבר בכלוב ריק ולהניח אותה על מגבת נייר כדי להגן על העכבר מaspirating ההמלטה. לחמם את העכבר עם מנורת Redlight כדי למנוע היפותרמיה. שים לב לעכבר ולא להשאיר ללא השגחה עד שהוא חזר מספיקתודעה לשמור כיבתה sternal. ברגע שמודע לחלוטין, במקום את העכבר חזרה לכלוב שלו בהתאמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בסופו של ניסוי, עכבר מקום בקופסא קטנה אך leakproof ולנהל CO 2 (100% (v / v), 100% כרך, 3 L / min). חכה עד שהעכבר מאבד את הכרתו מלאה ועוצר נשימה. עכבר שדר על ידי שבר צוואר. בצע laparotomy הבטן וexplant המעי הגס. פתח את המעי הגס אורכים או לשטוף אותו להערכה היסטולוגית או מולקולרית נוספת. </li></ol>

<ol><li>Bettenworth, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Translational+18F-FDG+PET%2FCT+imaging+to+monitor+lesion+activity+in+intestinal+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+nuclear+medicine+%3A+official+publication%2C+Society+of+Nuclear+Medicine%22%5BJournal%5D)">Translational 18F-FDG PET/CT imaging to monitor lesion activity in intestinal inflammation.</a> Journal of nuclear medicine : official publication, Society of Nuclear Medicine. 54, 748-755 (2013).</li>
<li>Lewis, J. S., Achilefu, S., Garbow, J. R., Laforest, R., Welch, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Small+animal+imaging.+current+technology+and+perspectives+for+oncological+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22European+journal+of+cancer%22%5BJournal%5D)">Small animal imaging. current technology and perspectives for oncological imaging.</a> European journal of cancer. 38, 2173-2188 (2002).</li>
<li>Huang, E. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Colonoscopy+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Surgical+endoscopy%22%5BJournal%5D)">Colonoscopy in mice.</a> Surgical endoscopy. 16, 22-24 (2002).</li>
<li>Becker, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+imaging+of+colitis+and+colon+cancer+development+in+mice+using+high+resolution+chromoendoscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Gut%22%5BJournal%5D)">In vivo imaging of colitis and colon cancer development in mice using high resolution chromoendoscopy.</a> Gut. 54, 950-954 (2005).</li>
<li>Becker, C., Fantini, M. C., Neurath, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+resolution+colonoscopy+in+live+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+protocols%22%5BJournal%5D)">High resolution colonoscopy in live mice.</a> Nature protocols. 1, 2900-2904 (2006).</li>
<li>Neurath, M. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+tumor+development+and+wound+healing+using+endoscopic+techniques+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Assessment of tumor development and wound healing using endoscopic techniques in mice.</a> Gastroenterology. 139, 1837-1843 (2010).</li>
<li>Pickert, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((STAT3+links+IL-22+signaling+in+intestinal+epithelial+cells+to+mucosal+wound+healing%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+experimental+medicine%22%5BJournal%5D)">STAT3 links IL-22 signaling in intestinal epithelial cells to mucosal wound healing.</a> The Journal of experimental medicine. 206, 1465-1472 (2009).</li>
<li>Shapira, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Utilization+of+murine+laparoscopy+for+continuous+in-vivo+assessment+of+the+liver+in+multiple+disease+models%5BTitle%5D)+AND+%22Plos+one%22%5BJournal%5D)">Utilization of murine laparoscopy for continuous in-vivo assessment of the liver in multiple disease models.</a> Plos one. 4, e4776(2009).</li>
<li>Wirtz, S., Neufert, C., Weigmann, B., Neurath, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemically+induced+mouse+models+of+intestinal+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+protocols%22%5BJournal%5D)">Chemically induced mouse models of intestinal inflammation.</a> Nature protocols. 2, 541-546 (2007).</li>
<li>Neufert, C., Becker, C., Neurath, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+inducible+mouse+model+of+colon+carcinogenesis+for+the+analysis+of+sporadic+and+inflammation-driven+tumor+progression%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+protocols%22%5BJournal%5D)">An inducible mouse model of colon carcinogenesis for the analysis of sporadic and inflammation-driven tumor progression.</a> Nature protocols. 2, 1998-2004 (2007).</li>
<li>Dieleman, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+experimental+colitis+induced+by+dextran+sulphate+sodium+%28DSS%29+is+characterized+by+Th1+and+Th2+cytokines%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+and+experimental+immunology%22%5BJournal%5D)">Chronic experimental colitis induced by dextran sulphate sodium (DSS) is characterized by Th1 and Th2 cytokines.</a> Clinical and experimental immunology. 114, 385-391 (1998).</li>
<li>Gao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Colitis-accelerated+colorectal+cancer+and+metabolic+dysregulation+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Carcinogenesis%22%5BJournal%5D)">Colitis-accelerated colorectal cancer and metabolic dysregulation in a mouse model.</a> Carcinogenesis. 34, 1861-1869 (2013).</li>
<li>Foersch, S., Neufert, C., Neurath, M. F., Waldner, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endomicroscopic+Imaging+of+COX-2+Activity+in+Murine+Sporadic+and+Colitis-Associated+Colorectal+Cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Diagnostic+and+therapeutic+endoscopy%22%5BJournal%5D)">Endomicroscopic Imaging of COX-2 Activity in Murine Sporadic and Colitis-Associated Colorectal Cancer.</a> Diagnostic and therapeutic endoscopy. 2013, 250641(2013).</li>
<li>Bremer, C., Ntziachristos, V., Weissleder, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optical-based+molecular+imaging%3A+contrast+agents+and+potential+medical+applications%5BTitle%5D)+AND+%22European+radiology%22%5BJournal%5D)">Optical-based molecular imaging: contrast agents and potential medical applications.</a> European radiology. 13, 231-243 (2003).</li>
<li>Keller, R., Winde, G., Terpe, H. J., Foerster, E. C., Domschke, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescence+endoscopy+using+a+fluorescein-labeled+monoclonal+antibody+against+carcinoembryonic+antigen+in+patients+with+colorectal+carcinoma+and+adenoma%5BTitle%5D)+AND+%22Endoscopy%22%5BJournal%5D)">Fluorescence endoscopy using a fluorescein-labeled monoclonal antibody against carcinoembryonic antigen in patients with colorectal carcinoma and adenoma.</a> Endoscopy. 34, 801-807 (2002).</li>
<li>Jones, M. K., Tomikawa, M., Mohajer, B., Tarnawski, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gastrointestinal+mucosal+regeneration%3A+role+of+growth+factors%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+bioscience+%3A+a+journal+and+virtual+library%22%5BJournal%5D)">Gastrointestinal mucosal regeneration: role of growth factors.</a> Frontiers in bioscience : a journal and virtual library. 4, 303-309 (1999).</li>
<li>Mertz, H. R., Walsh, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peptic+ulcer+pathophysiology%5BTitle%5D)+AND+%22The+Medical+clinics+of+North+America%22%5BJournal%5D)">Peptic ulcer pathophysiology.</a> The Medical clinics of North America. 75, 799-814 (1991).</li>
<li>Pantelis, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+sealing+with+a+fixed+combination+of+collagen+matrix-bound+coagulation+factors+on+the+healing+of+colonic+anastomoses+in+experimental+high-risk+mice+models%5BTitle%5D)+AND+%22Langenbeck%27s+archives+of+surgery+%2F+Deutsche+Gesellschaft+fur+Chirurgie%22%5BJournal%5D)">The effect of sealing with a fixed combination of collagen matrix-bound coagulation factors on the healing of colonic anastomoses in experimental high-risk mice models.</a> Langenbeck's archives of surgery / Deutsche Gesellschaft fur Chirurgie. 395, 1039-1048 (2010).</li>
<li>Burk, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+factor+from+a+transformed+cell+line+that+affects+cell+migration%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">A factor from a transformed cell line that affects cell migration.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 70, 369-372 (1973).</li>
<li>Msaki, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+RelA+%28p65%29+threonine+505+phosphorylation+in+the+regulation+of+cell+growth%2C+survival%2C+and+migration%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+biology+of+the+cell%22%5BJournal%5D)">The role of RelA (p65) threonine 505 phosphorylation in the regulation of cell growth, survival, and migration.</a> Molecular biology of the cell. 22, 3032-3040 (2011).</li>
<li>Zigmond, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Utilization+of+murine+colonoscopy+for+orthotopic+implantation+of+colorectal+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+one%22%5BJournal%5D)">Utilization of murine colonoscopy for orthotopic implantation of colorectal cancer.</a> PloS one. 6, e28858(2011).</li>
<li>Foersch, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+imaging+of+VEGF+in+gastrointestinal+cancer+in+vivo+using+confocal+laser+endomicroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Gut%22%5BJournal%5D)">Molecular imaging of VEGF in gastrointestinal cancer in vivo using confocal laser endomicroscopy.</a> Gut. 59, 1046-1055 (2010).</li>
<li>Mitsunaga, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescence+endoscopic+detection+of+murine+colitis-associated+colon+cancer+by+topically+applied+enzymatically+rapid-activatable+probe%5BTitle%5D)+AND+%22Gut%22%5BJournal%5D)">Fluorescence endoscopic detection of murine colitis-associated colon cancer by topically applied enzymatically rapid-activatable probe.</a> Gut. 62, 1179-1186 (2013).</li>
</ol>

יש לי המחברים אין לחשוף.

ריפוי פצעי אפיתל הוא תהליך מתמשך. קילוף פיסיולוגי מתמשך של תאי שטח בתוך הרירית של הקיבה והמעיים מתרחש דורש התחדשות תכופה של תאי האפיתל 16. כתוצאה מכך, יש ריפוי פצע לקוי השפעה עצומה על מספר מחלות, כולל כיבים במערכת העיכול ודליפה 17 בהשקה 18. הערכת רקע מולקולרי, כמו גם לתרופות פוטנציאליות כדי לעורר ריפוי האפיתל יכולה להתבצע רק באופן חלקי במערכות תרבית תאים במבחנה 19,20. לפיכך, יש צורך בהגדרות ניסיוניות מתוחכמות יותר כגון קולונוסקו...

מודלים של בעלי החיים העשירו מאוד את ההבנה של פתולוגיות במעיים רבות שלנו. עכבר המעבדה (musculus Mus) התפתח כמודל חיה ראש במחקר ביו בשל המידע הגנטי והגנומי בשפע שלה, והוא זמין בקלות בזנים מהונדסים ונוק אאוט. בנוסף לשיפור היווצרות מחלה הבנה, מודלים של בעלי החיים גם חשוב משמשים לבדיקת תרופות פוטנציאליות, כמו גם התערבויות אבחון או טיפול פרה קליניות. עם זאת, למרות מגוון רחב של דגמי עכבר מחקה מחלות של בני אדם, הרבה אפשרויות אבחון והתערבות המשמשות באופן שיגרתי בטיפול בחולה אינן זמינות לעכברים. בהתאם לכך, אסטרטגיות מעקב כדי לפקח על מהלך המחלה עכברית או את ההשפעה של התערבויות טיפוליות לעתים קרובות מוגבלות לתצפיות עקיפות או נתיחה שלאחר מות הניתוח. בעוד שנהלים לא פולשנית קיימים לעכברי ניטור חיוניות כמו מדדי פעילות מחלה, quantification של ירידה במשקל או רווח, דם, שתן וצואת מנתח, אלה הם רק אינדיקטורים עקיפים ומוטה על ידי שונות בין פרט. בנוסף, לאחר המוות מנתח למנוע תצפיות אורך בנקודות זמן חוזר על עצמו. טכניקות הדמיה מתוחכמות כדי לעקוב אחר פעילות מחלה רק לאחרונה בעכברים הוכנסו 1,2. למרות שטכניקות הדמיה אלה מאפשרים לניתוחים חוזרים ונשנים, הם רק לספק מבט תיאורים ולעתים קרובות לא מדויק על הבטן, אינו מאפשרים הדמיה של רירית ישירה או לאפשר התערבויות אבחון או טיפול כגון רכישת ביופסיה או יישום מקומי וintramucosal של מועמדי סמים. לאחרונה, מערכות אנדוסקופיות ברזולוציה גבוהה לשימוש בעכברים חיים פותחו 3,4. בפעם הראשונה בטכניקות אנדוסקופיות אלה מאפשרות הדמיה ישירה של פתולוגיות מחלה במעי הגס endoluminal כגון ריפוי פצעים או דלקת מעיים obj מתןמצב בזמן אמת ective, המאפשר מחקרים ארוכי טווח בבעלי החיים זהים בנקודות זמן חוזר על עצמו. מלבד המאפשר ביופסיות חוזרות ונשנות בעכבר בודד, יכולים לשמש גם מערכות אנדוסקופיות להשפיע טיפולי גידול שונה או דלקת מקומית כך שהוא מאפשר יישום ישיר של חומר לאזור של עניין. יתר על כן, כפי שחומרים טיפוליים ושליטה יכולים להיות מועברים ישירות לאזור של עניין, זה יכול להתבצע באותו העכבר, לא כולל השתנות בין פרט. מערכות אלה כעת להיות מועסקים להערכה של דלקת במעי הגס, ריפוי פצעים, ביופסיות כבד לפרוסקופי ואינדוקצית orthotopic של גידולים בכבדים 8 והתפתחות גידולים באמצעות מערכות ניקוד שונות כגון המדד אנדוסקופית העכברי של חומרת קוליטיס (MEICS) 5-7. MEICS מורכב מחמישה פרמטרים להערכת דלקת: עיבוי של דופן המעי הגס, שינויים של הדפוס של כלי הדם, נוכחות של הפיברין, גרעיניות של mucosמשטח אל, ועקביות שרפרף. בפרוטוקול זה אנו מתארים את השימוש באנדוסקופיה הנוקשה במודלים עכבריים של ריפוי פצע במעיים, דלקת וסרטן מעי גס. ראשית, אנחנו מדגימים את ההערכה אנדוסקופית של ריפוי פצעים ודלקת במעי הגס, כמו גם הערכת אורך של פעילות קוליטיס והמחקר של cancerogenesis במעי הגס העכברי. מעבר לשימוש תיאורים של אנדוסקופיה העכברית, אנו מספקים הוראות מפורטות על השימוש במכשור אנדוסקופי לקבלת ביופסיות, והיישום המקומי וintramucosal של רכיבים שונים של עניין (למשל, לתרופות או תאים סרטניים). לבסוף, אנחנו מדגימים את השימוש באנדוסקופיה הקרינה העכברית, שמשתמשת בטכניקות הדמיה מולקולריות מתוחכמות, בהגדרה של גידולי מעי גס.

<table><tbody><tr><td colspan="4">ריאגנטים</td></tr><tr><td>דיאטה נטולת אספסת</td><td>Harlan Laboritories, מדיסון, ארה"ב</td><td>2014</td><td></td></tr><tr><td>אזוקסימתאן (AOM)</td><td>סיגמא-אולדריץ', דייזנהופן , גרמניה</td><td>A5486</td><td></td></tr><tr><td>משחת עיניים Bepanthen</td><td>באייר, לברקוזן, גרמניה</td><td>80469764</td><td></td></tr><tr><td>Dextran sulphate נתרן (DSS)</td><td>TdB Consulatancy, אופסלה, שוודיה</td><td>DB001</td><td></td></tr><tr><td>Eosin</td><td>Sigma-Aldrich, Deisenhofen, גרמניה</td><td>E 4382</td><td></td></tr><tr><td>Ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA)</td><td>Sigma-Aldrich, Deisenhofen, גרמניה</td><td>E 9884</td><td></td></tr><tr><td>Falcon Tube 50 ml</td><td>BD Biosciences, Erembodegem, בלגיה</td><td>352070</td><td></td></tr><tr><td>Florene 100 V/V</td><td>Abbott, וויאסבאדן, גרמניה</td><td>B506</td><td></td></tr><tr><td>Haematoxylin</td><td>Sigma-Aldrich, Deisenhofen, גרמניה</td><td>HHS32-1L</td><td></td></tr><tr><td>איזופנטן (2-מתילבוטן)</td><td>Sigma-Aldrich, Deisenhofen, גרמניה</td><td>M32631-1L</td><td></td></tr><tr><td>מתילן כחול</td><td>Merck, דרמשטדט, גרמניה</td><td>1159430025</td><td></td></tr><tr><td>תרכובת O.C.T. Tissue Tek&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>Sakura, Zoeterwonde, הולנד</td><td>4583</td><td></td></tr><tr><td>Omnican F - canula</td><td>Braun, Melsungen, Germany</td><td>9161502</td><td></td></tr><tr><td>תמיסת מלח חוצצת פוספט, PBS</td><td>Lonza, Verviers, בלגיה</td><td>4629</td><td></td></tr><tr><td>נתרן כלורי 0.9%</td> <td>בראון, Melsungen, גרמניה</td><td>5/12211095/0411</td><td></td></tr><tr><td>Standard diet</td><td>Altromin, Lage, גרמניה</td><td>1320</td><td></td></tr><tr><td>Tissue-Tek Cryomold</td><td>Sakura, ליידן, הולנד</td><td>4566</td><td></td></tr><tr><td>Vitro &ndash; קלוד&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>ר. לנגנברינק, טנינגן, גרמניה</td><td>04-0002&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">ציוד</td></tr><tr><td>AIDA Control</td><td>Karl Storz - Endoskope, Tuttlingen, Germany</td><td>20 096020</td><td></td></tr><tr><td>מסנן פס פס</td><td>סמרוק, רוצ'סטר, ארה"ב</td><td>HC 716/40</td><td></td></tr><tr><td>מסנן פס פס</td><td>סמרוק, רוצ'סטר, ארה"ב</td><td>HC 809/81</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים ביופסיה, 3 Fr., 28 ס"מ</td><td>Karl Storz - Endoskope, Tuttlingen, גרמניה</td><td>61071ZJ</td><td></td></tr><tr><td>Dell Monitor</td><td>Dell, פרנקפורט, גרמניה</td><td>נדן בדיקה U2412Mb</td><td></td></tr><tr><td>, 9 Fr.Karl</td> <td>Storz - Endoskope, Tuttlingen, גרמניה</td><td>61029D</td><td></td></tr><tr><td>מעטפת בדיקה, 9 Fr.Karl</td> <td>Storz - Endoskope, Tuttlingen, גרמניה</td><td>61029C</td><td></td></tr><tr><td>כבל אור סיבים אופטיים, 3.5 מ"מ</td><td>Karl Storz - Endoskope, Tuttlingen, גרמניה</td><td>69495NL</td><td></td></tr><tr><td>Fluorescein Blue מערכת סינון</td><td>Karl Storz - Endoskope, Tuttlingen, גרמניה</td><td>20100032</td><td></td></tr><tr><td>מסנן מחסום פלואורסצאין</td><td>Karl Storz - Endoskope, Tuttlingen, גרמניה</td><td>20100033</td><td></td></tr><tr><td>מתג רגל</td><td>Karl Storz - Endoskope, Tuttlingen, Germany</td><td>20010430</td><td></td></tr><tr><td>טלסקופ HOPKINS, 1.9 מ"מ, אורך 10 ס"מ</td><td>Karl Storz - Endoskope, Tuttlingen, Germany</td><td>1830231</td><td></td></tr><tr><td>SCB D-light P&nbsp;</td><td>Karl Storz - Endoskope , טוטלינגן, גרמניה</td><td>20 133720</td><td></td></tr><tr><td>SCB tricam SL II</td><td>Karl Storz - Endoskope, טוטלינגן, גרמניה</td><td>20 2230 20</td><td></td></tr><tr><td>סט צינורות VETPUMP II</td><td>Karl Storz - Endoskope, Tuttlingen, Germany</td><td>69811</td><td></td></tr><tr><td>Tricam PDD PAL</td><td>Karl Storz - Endoskope, Tuttlingen, Germany</td><td>20221037</td><td></td></tr><tr><td>UniVet Porta</td><td>Groppler Medizintechnik, Deggendorf, Germany</td><td>BKGM 0451</td><td></td></tr><tr><td>Vetpump 2</td><td>Karl Storz - Endoskope (טוטלינגן, גרמניה</td><td>) 69321620</td><td></td></tr></tbody></table>

העכברי אנדוסקופיה ל בvivo ריפוי multimodal הדמיה של היווצרות הסרטן וההערכה של מעיים פצע ודלקת

Murine Endoscopy for In Vivo Multimodal Imaging of Carcinogenesis and Assessment of Intestinal Wound Healing and Inflammation

מודלים עכבר נמצאים בשימוש נרחב ללמוד פתוגנזה של מחלות בבני אדם ולהעריך את תהליכי אבחון, כמו גם התערבויות טיפוליות preclinically. עם זאת, הערכה תקפה של שינויים פתולוגיים לעתים קרובות מחייבת ניתוח היסטולוגית, וכאשר היא מבוצעת vivo לשעבר, מחייבת מוות של בעלי החיים. לכן בהגדרות ניסיוניות קונבנציונליות, בדיקות מעקב תוך פרט הן לעתים נדירות אפשריות. לפיכך, פיתוח של אנדוסקופיה העכברית בעכברים חיים מאפשר לחוקרים בפעם הראשונה לשניהם באופן ישיר לדמיין את רירית הקיבה ומעיים וגם לחזור על התהליך כדי לפקח על שינויים. יישומים רבים לin vivo אנדוסקופיה העכברית קיימים, כולל חקר דלקת מעיים או ריפוי פצעים, קבלת ביופסיות ריריות שוב ושוב, ולנהל באופן מקומי סוכני אבחון או טיפול באמצעות צנתרים הזרקה זעירים. מו הדמיה לאבחון לאחרונה, הדמיה מולקולרית האריכהdalities מאפשר זיהוי ספציפי של מולקולות מטרה מובחנות באמצעות photoprobes הספציפי. לסיכום, אנדוסקופיה העכברית התפתחה כטכנולוגיה חדשנית חדשנית לאבחון ניסיוני בתחום ההדמיה vivo ועלולה להשפיע באופן משמעותי על מחקר פרה קליני בתחומים שונים.

בניטור vivo של ריפוי פצע במעיים במהלך אנדוסקופיה שגרתית, פצעים ברירית היו מושרה באופן מכאני על ידי מלקחיים זעירים ביופסיה בקוטר של 3 צרפתי (שווה 1 מ"מ; איור 1 א). בהמשך לכך, ריפוי פצעים היה במעקב על ידי בדיקות אנדוסקופיות יומיות ולכמת על ידי מדידה של השטח שיורית פצע באמצעות תוכנה לעריכת תמונות, למשל, ImageJ (איור 1). סגירת הפצעים בודדת לאורך הזמן מתבטאת במנה של אזור פצע בפועל / אזור פצע ראשוני. לדוגמא, ביום ...

טכניקות הדמיה חיה קטנות מאפשרות בדיקות אבחון סדרתי והתערבויות טיפוליות in vivo. לאחרונה, היקף היישומים התרחב באופן משמעותי וכיום כולל הערכה של התפתחות גידולים במעי הגס, ריפוי פצעים וניטור של דלקת. פרוטוקול זה מדגים יישומים פוטנציאליים המגוונים אלה של אנדוסקופיה העכברית.

העכברי אנדוסקופיה ל בVivo ריפוי Multimodal הדמיה של היווצרות הסרטן וההערכה של מעיים פצע ודלקת

Mouse models are widely used to study pathogenesis of human diseases and to evaluate diagnostic procedures as well as therapeutic interventions ...

בסרטון זה יוצגו ביישום הראשון מגוון יישומים מאנדוסקופיה של נוירונים. כיצד להשתמש באנדוסקופ כדי לדרג את חומרת המחלה במודל עכבר של קוליטיס יוצג ביישום השני. השימוש באנדוסקופיה לניטור ריפוי פצעים ברירית in vivo יודגם ביישום האחרון.השימוש באנדוסקופיה פלואורסצנטית לאיתור גידולי מעיים והטכניקה להזרקה תוך רירית יוצגו בסופו של דבר ריפוי פצעי מעיים, דלקת וסרטן. ניתן להעריך אגנזה על סמך ממצאי הניתוח האנדוסקופי. היתרון העיקרי של טכניקה זו על פני שיטות קיימות כמו ניתוח היסטולוגי של קוליטיס ניסיונית, הוא שבעזרת טכניקה זו ניתן לבצע בדיקות מעקב אישיות ולהעריך שוב ושוב שינויים ברירית.לכן, שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום דלקת המעיים הניסיונית, כגון מהי ההתבססות הזמנית של קוליטיס. ההשלכות של טכניקה זו משתרעות על הטיפול בסרטן המעי הגס בגלל האפשרות לאפיין תפקודית נגעים ניאופלסטיים. למרות ששיטה זו יכולה לספק תובנה לגבי התפתחות סרטן המעי הגס, ניתן ליישם אותה גם על מערכות אחרות כגון מחלות מעי דלקתיות או קוליטיס זיהומית.בדרך כלל, אנשים חדשים בשיטה זו יתקשו בגלל האתגר של טיפול באנדוסקופ בקנה מידה קטן פלואורסצנטי. אנדוסקופיה מרחיבה את הפוטנציאל של אנדוסקופיה באור רחב להדמיה מולקולרית על ידי מיקוד ספציפי של מבנים תאיים על ידי עקבות מתויגים פלואורסצנטיים במהלך בדיקות אנדוסקופיות. כדי לגרום לסרטן המעי הגס בחיות הניסוי, השתמש תחילה במזרק מיליליטר אחד המצויד במחט בגודל 30 כדי להזריק 10 מיליגרם לקילוגרם מוטגני טרי מוכן כאוקסי מתאן לכל עכבר.אתגר את קבוצת עכברי הניסוי עם מחזורים חוזרים ונשנים של 3% משקל לנפח, נתרן דקסטרן סולפט או DSS מיום האפס עד 7, 21 עד 28, ו-42 עד 49 כדי לגרום לסרטן המעי הגס המונע על ידי דלקת. אגנזה מספקת לעכברים מי חיטוי בין האתגרים ביום הקולונוסקופיה. לאחר אישור הרגעה על ידי צביטת הבוהן, השתמש בצינורית מכופתרת כדי להחדיר שני מיליליטר של חוקן נוזלי למעי הגס של חיית ניסוי.אם יש חשד להעמסת צואה משמעותית, אז בזמן ההמתנה לעשיית צרכי העכבר, חבר תחנת עבודה אנדוסקופית וטרינרית של בעלי חיים קטנים ליחידת המצלמה לאנדוסקופיה באור לבן. הגדר את ההגדרות של מקור האור כדי לעורר את העקבות שיש להזריק, ולאחר מכן שלב מסנן מעבר פס מתאים בין הטלסקופ למצלמה. כעת, הניחו את העכבר על שולחן הבדיקה והכניסו את האנדוסקופ בזהירות רבה.כדי למנוע ניקוב, פתח את שני שסתומי הנדן. יש לחבר שסתום אחד למשאבת האוויר. יש לאטום את השני באצבע מורה כדי לשלוט באוויר.לאחר מכן נפחו לאט ובזהירות את המעי הגס, וקדמו את האנדוסקופ רק עד לכופף המעי הגס הימני כדי למנוע ניקוב כ -4.5 סנטימטרים מפי הטבעת. כעת, משוך לאט לאחור את האנדוסקופ ובדוק את הרירית לאיתור שינויים דלקתיים או ממאירים, ולהעריך את כל היקף המעי. לאחר מכן כדי לאחזר דגימת ביופסיה, הכניסו מלקחיים ביופסיה בזהירות דרך תעלת העבודה עד שקצה המלקחיים נראה על הצג.פתח וסגור את המלקחיים בזהירות כדי למנוע ניקוב והעביר אותם לאתר הפתולוגיה. ליישום רירית אינטרה של חומרים פרמקולוגיים, מלא מראש צינור הזרקה גמיש לחלוטין בחומר המעניין, ולאחר מכן דחף את הצינור דרך תעלת העבודה עד שהצינורית נראית על הצג. לאחר מכן חבר מזרק עדין והכנס את המחט לתוך הרירית בזווית של 15 עד 30 מעלות מול השיפוע לכיוון הרירית, יש לתת בעדינות עד 50 מיקרוליטר של החומר הטיפולי.לאחר הזרקה מוצלחת, הרירית תציג הרמה אופיינית לביצוע אנדוסקופיה פלואורסצנטית, מתן החומר המעניין תוך ורידי לפני הבדיקה. בדוק את נקודת הזמן האופטימלית בין הזרקת העוקב המסומן בפלורסנט שלך, לבין הליך ההדמיה, התלוי בפרמקולוגיה של המעקב. לאחר מכן כדי להציג את החומר המוזרק על ידי אנדוסקופיה פלואורסצנטית, הגדר את ההגדרות של מערכת מסנן מעבר הפס בהתאם לאורכי גל העירור והפליטה של העוקב המוזרק.לבסוף, דמיין את הרקמה לאחר מריחת העוקב כדי לרכוש קריאת יחס יעד לרקע לאחר השראת קוליטיס. עכברים. ירידה במשקל החל מהיום השלישי עם ירידה מקסימלית של 19% במשקל הגוף המתרחשת ביום השביעי בהתאם לירידה במשקל הגוף. המדד האנדוסקופי של ציון חומרת הקוליטיס עולה ביום השביעי לאחר תחילת DSS המצביע על נזק דלקתי מסיבי של רירית המעי הגס, אשר משתפר ביום ה-13.כמו כן, ביום השביעי, לאחר תחילת ה-DSS, הנזק ההיסטולוגי גבוה משמעותית בעכברים שטופלו ב-DSS בהשוואה לקבוצת הביקורת, כפי שמשתקף בהידלדלות אפיתל, כיבים ברירית וחדירת נויטרופילים מוגברת, שכולם משתפרים משמעותית ביום ה-13. בתמונות מייצגות אלה מאנדוסקופיה שגרתית, פצעים ברירית הושרו באופן מכני על ידי מלקחיים זעירים של ביופסיה עם פצע בקוטר מילימטר אחד. לאחר מכן נוטר הריפוי על ידי בדיקה אנדוסקופית יומית וכומת על ידי מדידת אזור הפצע הנותר באמצעות תוכנת עריכת תמונות.סגירת אזור הפצע הבודד לאורך זמן בוטאה אז על ידי המנה של שטח הפצע בפועל לפי אזור הפצע הראשוני. לדוגמא, יום שלישי לאחר יצירת הפצע, 41% משטח הפצע התאושש, בעוד שלאחר שבעה ימים הפצע נרפא לחלוטין. כרגיל, בסוף הניסוי, ניתן לכרות פצעים להערכה היסטולוגית, X vivo כמו בתמונות מייצגות אלה של מיטות פצעים מוכתמות בהמטין ו-ESN ביום האפס והחמישי, כ-80 יום לאחר השראת הגידול על ידי כאוקסי מתאן ושלושה מחזורים של גידולי מעי גס מרובים DSS, כמו גם ניתן להבחין בסימנים מקרוסקופיים של דלקת כרונית כגון רירית מגורענת.אנדוסקופיה פלואורסצנטית אנדוסקופית של מעי הנוירונים ללא יישום עוקב, גורמת לחוסר זיהוי של אות ספציפי כלשהו, ולא נצפות אינטראקציות עם רקמת המעי הגס או אוטופלואורסצנציה צואתית. לעומת זאת, מיד לאחר מריחה תוך ורידית של פיץ דקסטרן, ניתן לצפות בפלואורוכרום ברירית המעי הגס וניתן להשתמש בו להערכת כלי הדם המוגברים באזורים של דלקת כרונית או רירית ממאירה. בהתאם לכך, ניתן להשתמש בכימות עוצמת הקרינה כדי למדוד את הספיגה המוגברת משמעותית של הפלואורוכרום בתוך רקמה ממאירה בהשוואה לרירית המעי הגס שאינה מושפעת.לאחר שליטה, ניתן לבצע טכניקה זו תוך חמש עד 10 דקות אם היא מבוצעת כראוי. בזמן ניסיון הליך זה, חשוב לזכור לקדם את האנדוסקופ הנוקשה בזהירות דרך המעי הגס הימי. לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד להעריך ריפוי פצעי אפיתל, דלקת מעיים ואגנזה של סרטן בזמן ביצוע קולונוסקופיה ימית.

murine-endoscopy-for-vivo-multimodal-imaging-carcinogenesis

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

ileus לאחר הניתוח (POI) הוא סיבוך של ניתוח בטן מוביל לתחלואה ואשפוז ממושך. בגלל אסטרטגיות מניעות או טיפול חסרות מחקר התעצם הוא הכרחי. לכן הקמנו מודל עכבר סטנדרטי וריאלי כדי לחקור את הפתופיזיולוגיה של POI וללמוד אפשרויות טיפוליות פוטנציאליות.

הערכה תפקודית של תנועתיות מעיים ודלקת דופן מעי במכרסמים: ניתוח בדגם סטנדרטי של מניפולצית מעיים

במהלך השנים האחרונות, אנדוסקופים דור חדשים צמחו כעזרי מחקר אבחונים חשובים להערכת קוליטיס העכברי וגידולי מעי גס. אנו מציגים במסמך פרוטוקול מפורט לשיטת ניקוד חדשה שמשתמשת במזהים עשרוניים לתעד את החומרה אנדוסקופית של קוליטיס וגידולי מעי גס הערכה אנדוסקופית של דלקת וגידולי מעי גס בעכברים, כמו גם.

קולונוסקופיה גמישה בעכברים כדי להעריך את חומרת קוליטיס ומעי הגס גידולים באמצעות מערכת Validated אנדוסקופי ניקוד

על ידי שימוש בעכברים מדווחים טרנסגניים ותוויות פלואורסצנטיות הניתנות להזרקה, מיקרוסקופיה קונפוקלית של דיסק מסתובב תוך-חיוני לטווח ארוך מאפשרת הדמיה ישירה של התנהגות התאים המיאלואידיים לאדנומה של המעי הגס במודל סרטן המעי הגס Apc Min/+.

הדמיה של Dynamics התאים מיאלואידית בזמן אמת Apc מינימום / + מעיים גידולים על ידי דיסק מסתובב Confocal מיקרוסקופית

אנו מתארים שיטות לניטור אורך של יעילות הטיפולים לטיפול בפתולוגיות של המעי הגס בעכברים באמצעות אנדוסקופ קשיח. פרוטוקול זה יכול לשמש בקלות לאפיון התגובה הטיפולית של גידול בודד בעכברים חיים וגם לניטור הישנות פוטנציאלית של המחלה.

הערכה לא פולשנית של היעילות של ניו Therapeutics למעי פתולוגיות שימוש הדמיה אנדוסקופי סידורי של עכברים חיים

מתואר ההרכבה והשימוש במיקרואנדוסקופ רב-מודאלי שיכול לרשום במשותף נתוני תמונת רקמה שטחיים עם פרמטרים פיזיולוגיים של רקמות כולל ריכוז המוגלובין, ריכוז מלנין וריווי חמצן. טכניקה זו יכולה להיות שימושית להערכת מבנה רקמות וזילוף, וניתן לייעל אותה לצרכים האישיים של החוקר.

הדמיה מולטימודליות וספקטרוסקופיה סיבים צרור פלטפורמת Microendoscopy עבור לא פולשני,<em&gt; In vivo</em&gt; בדיקת רקמות

הגששים במטרה לייצג כלי חדשני עבור ניתוח המנגנונים המולקולריים, כגון חלבון ביטוי בסוגים שונים של המחלה (למשל, דלקת, זיהום, ו- tumorigenesis). במחקר זה, אנו מתארים הערכה כמותית טומוגרפי תלת מימדי של הסתננות מקרופאג מעיים במודל מאתר של קוליטיס באמצעות טומוגרפיה בתיווך פלורסצנטיות F4/80-ספציפיות.

בתיווך פלורסצנטיות טומוגרפיה זיהוי, כימות הקשורות מקרופאג דלקת מעיים מאתר

כאן, אנו מציגים פרוטוקול להקמת נקודות קצה חשובות וסמנים מתרבים של נזקי מעיים קטנים ופיצוי יתר באמצעות מודל של mucositis המושרה כימותרפיה. אנו להדגים את הזיהוי של תאים מתרבים באמצעות מחזור התא סמן מסוים באמצעות משקל המעי קטן, עומק קריפטה, ו בגובה ליה כנקודות קצה.

חשוב נקודות קצה וסמנים ההתרבות כדי להעריך פגיעה במעיים קטנים והסתגלות באמצעות מודל העכבר של Mucositis הנגרמת כימותרפיה

אנו מתארים שיטה כדי להמחיש gfp γδ iels התווית באמצעות הדמיה intravital של המעי הדק מורטין על ידי מיקרוסקופית הפוכה דיסק מיקרוסקופ קונפוקלית. טכניקה זו מאפשרת מעקב של תאים חיים בתוך רירית עד 4 h והוא יכול לשמש כדי לחקור מגוון של אינטראקציות מעיים החיסונית-אפיתל.

אינטרטל הדמיה של לימפוציטים תוך-אפיתל במעי קטן מוריין

תוך ניצול של מיקרוסקופ תוך-ויטאל, השיטה המוצגת כאן מאפשרת הדמיה בזמן אמת של שפיכת תאי אפיתל במעיים בבעלי חיים חיים. לכן, רירית מעיים מוכתמת topically (acriflavine ו rhodamineB-dextran) של עכברים מרדימים הוא תמונה עד רזולוציה של תא יחיד באמצעות מיקרוסקופית confocal.

גישה תוך-ויטאלית המבוססת על מיקרוסקופיה להערכת חמלה במעיים וביצועי שפיכת תאים אפיתל

כאן, אנו מספקים תיאור מפורט של ההליך כדי לגרום ביופסיות צביטה מונחה קולונוסקופית בעכברים ולעקוב אחר סגירת פצע בזמן אמת. בנוסף, מסופקות שיטות להכנת רקמות לניתוחים היסטולוגיים, אימונוהיסטוכימיים ומולקולריים של מיטת הפצע.

ביצוע ביופסיות צביטה קולונוסקופיות מונחות בעכברים והערכת שינויים ברקמות הבאים

כאן, אנו מציגים שיטה לקבלת תמונות של המעי על פצע המושרה בלייזר. על ידי חשיפת מעי העכבר ללייזר מולטיפוטון, אובדן של קריפט(ים) בודדים או מרובים מושרה באופן מקומי. על ידי הדמיה חוזרת ונשנית של האזור הפגוע במשך חודשים, נלכדת הדינמיקה בזמן אמת של התאוששות המעי.

אבלציה בלייזר ומיקרוסקופ תוך חיוני לחקר עיצוב מחדש של המעי

למד אנדוסקופיה בעכברים להערכת דלקת מעיים, ריפוי פצעים וזיהוי גידולים באמצעות אנדוסקופיית פלואורסצנציה. שיטה זו מאפשרת מעקב סדרתי ואבחון בזמן אמת של שינויים ברירית המעי.

העכברי אנדוסקופיה ל בVivo ריפוי Multimodal הדמיה של היווצרות הסרטן וההערכה של מעיים פצע ודלקת

גלה סרטונים נוספים