טכניקות דגימת דם ללא מסוף בגינאה חזירים

המטרה הכוללת של סרטון זה היא להמחיש את המתודולוגיה של ארבע טכניקות שונות לדגימת דם בשרקנים. ההליכים המוצגים אינם סופניים אלא אם נפחי הדגימה או מספר הדגימות חורגים מההנחיות לאיסוף דם. בחיות מעבדה, כאן אנו רואים את הגורם לווריד הצדדי והווריד הטרסל.

הווריד האוס עובר בגב ולרוחב מעל מפרק הטרסל. יש לקחת מקסימום שלוש דגימות מכל רגל אחורית, ולאסוף כ-100 עד 400 מיקרוליטר דם לכל דגימה. הציוד הדרוש כולל מכונת גילוח חשמלית, אמבט מים חמים, מגבת נקייה, מעט צמר גפן, חומר חיטוי כגון 70% אלכוהול, מחטים סטריליות, 21 ערוץ או צינורות איסוף קטנים יותר.

ואם המטרה היא למדוד את רמת הגלוקוז בדם ודגימת AccuCheck, ניתן לבצע דגימת דם מהצפאוס או מווריד הטרסל בשרקנים ללא הרדמה. שרקן הניסיונות מרוסן על ידי עוזר מיומן ויש להשתמש בטכניקת ספיגה. השיער המכסה את אזור הטרסל מגולח במכונת גילוח חשמלית והרגל האחורית נשטפת ומחוממת באמבט מים פושר.

בנוסף לניקוי הרגל, זה גורם לוורידים להתרחב ולהיות גלויים יותר. הרגל האחורית מורחבת והקיפאון מושג על ידי הפעלת לחץ עדין כלפי מטה ממש מעל הברך, מה שמאפשר לווריד להיראות מיד לפני הדגימה. האזור המגולח ניגב בחומר חיטוי.

הווריד מנוקב בעזרת מחט או רומח, וניתן לאסוף דם לצינור נימי או מיקרוטי. כאשר נאסף דם, הקיפאון מוקל ומופעל לחץ עדין עם חתיכת צמר גפן כדי להקל על המוסטזיס, ניתן לראות כאן את העורקים והוורידים השטחיים על פני השטח הגבי של אוזן השרק. ניתן להשתמש בכלים אלה לדגימת דם כאשר נדרש נפח קטן מאוד.

דוגמה אחת יכולה להיות למדידות גלוקוז בדם. שרקן הניסיונות מרוסן בעדינות תוך השארת האוזן נגישה. אתר הניקוב חייב להיות מוכן באופן ספיגה לפני הדגימה, אך אין צורך בגילוח.

ניתן להפעיל לחץ קל בבסיס האוזן כדי להפוך את הוורידים לגלויים יותר. הווריד מנוקב באמצעות מחט או רומח ודם נאסף בצינור נימי או מנותח מיד לרמות הגלוקוז בדם באמצעות מערכת הדגימה AccuCheck. לאחר איסוף דם, יש להפעיל לחץ עדין על מקום הניקוב כדי להקל על המוסטזיס.

תמונה זו ממחישה את מיקומו של שרקן הניסיונות לדגימת דם צווארית ואת הגורם לווריד הצוואר. ההליך מבוצע אך ורק על בעל חיים מורדם. הציוד הדרוש כולל תרופות להרדמה וצמר גפן חשמלי, חומר חיטוי כגון סטטוסקופ אלכוהול 70%, משחת עיניים ניטרלית, מזרקים של מיליליטר, מחטים סטריליות, בדרך כלל 23 או 25.

ניתן להשתמש בערוץ הפרין ו-EDTA לשטיפת מזרקים לפני הדגימה על מנת למנוע קרישה. קיימים מגוון פרוטוקולי הרדמה עבור שרקנים. במקרה זה, בעלי חיים מורדמים על ידי הרדמה מאוזנת עם תערובת של אריחי סוליט סינוס ובוטיף מוזרקים תת עורית בצוואר.

ניתן לדלל תערובת זו במי מלח כדי להפוך את המינון למדויק יותר. לאחר ההזרקה יש להחזיר את השרקן לכלוב ולהשאיר אותו בשקט. אפקט הסביבה נראה בדרך כלל לאחר כ-10 דקות ונמשך 30 עד 40 דקות לפני הדגימה.

עומק ההרדמה מוערך על ידי בדיקת רפלקסים וניתנת משחת עיניים ניטרלית להגנה על העיניים. ניגשים לווריד הצוואר כשהשרקן מונח על גבו, והרגליים הקדמיות נסוגות אחת לרבעון. האזור מגולח ומוכן באופן אספטי, עצם הבריח מוחשת, ומחט ערוץ 23 המותקנת על מזרק מיליליטר אחד מוחדרת כסנטימטר אחד לרוחב קו האמצע, רק גולגולת גבית לעצם הבריח.

יש לשמור על המזרק בזווית קלה כלפי מעלה ומדיאלית. ברגע שהעור חודר, מופעל לחץ שלילי קל על המזרק מכיוון שהצוואר ממוקם באופן שטחי למדי ועומק החדרה של כשלושה עד ארבעה מילימטרים מספיק. לאחר איסוף הדגימה, שחרר את המתח של הרגליים הקדמיות והפעל לחץ עדין על צד הפנצ'ר.

לאחר מכן ניתן להחזיר את החיה לכלוב התאוששות, אך יש לעקוב אחריה כדי להבטיח המוסטזיס והתאוששות מהרדמה. כאשר השרקן מתאושש לחלוטין מההרדמה, הוא עשוי לחזור לדיר שלו. המאפיינים האנטומיים של שרקן הניסיונות שונים במקצת מאלה של מודלים אחרים של מכרסמים, ויש צורך במודולציה של טכניקות דגימה כדי להתאים להבדלים ספציפיים בין המינים ולהשיג דגימות באיכות מספקת בזמן הקצר ביותר האפשרי.

גם לטווח הארוך וגם לטווח הקצר. in vivo, מחקרים דורשים לעתים קרובות דגימת דם חוזרת. יש לשקול היטב את בחירת הטכניקה על מנת להפחית מתח ואי נוחות ולהבטיח הישרדות, כמו גם עמידה בדרישות גודל המדגם ונגישות.

כל השיטות המתוארות נבדקו ביסודיות ויושמו בהצלחה לדגימת דם חוזרת ונשנית. במחקרים במתקן המחקר שלנו, השרקן מייצג נישה במדעי בעלי החיים הניסיוניים, אך יש נתונים מוגבלים על ביצוע הליכים בסיסיים. במאמר וידאו זה, הצגנו ארבע גישות שונות לדגימת דם לא סופנית in vivo בבעלי חיים בהכרה או מורדמים, בתנאי שנפחי הדגימה ומספר הדגימות אינם חורגים מההנחיות לאיסוף דם בחיות מעבדה.

הליכים אלה מומלצים לשימוש בשרקנים כאשר נדרשת דגימת דם חוזרת. בפרוטוקול הלימוד שלך.