Name: טכניקות דגימת דם ללא מסוף בגינאה חזירים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-10-11T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 58 s
Description: למד ארבע שיטות דגימת דם ללא מסוף בגינאה חזירים במצבי עירות והרדמה. הטכניקות כוללות דגימה מווריד הלטרל ספנוס והטארסל, עם הנחיות לנפחי דם בטוחים וציוד נדרש.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

אנו מכירים בסיוע המיומן של אנני ב &#39;Kristensen, אליזבת V. אנדרסן, לינדה ב&#39; Bringtoft ומטפלים בבעלי החיים במחלקה לרפואה ניסויית, קמפוס פרדריקסברג, הפקולטה לבריאות ומדעי רפואה, אוניברסיטת קופנהגן, דנמרק. יעקב Lønholdt הוא הודה לקבלת הסיוע הטכני מצוין שלו בצילומי הנהלים. מחקר זה נתמך בחלקו על ידי מרכז LIFEPHARM לin vivo פרמקולוגיה ואוניברסיטת קופנהגן.

הנהלים מוצגים בוצעו על פי פרוטוקולים שאושרו על ידי הדני לניסויים בבע&quot;ח הפקוח תחת משרד המזון, החקלאות והדיג. .1 דגימת דם מsaphenous לרוחב או Tarsal הווריד <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבצע הליך זה ללא הרדמה ואת עזרתו של חוקר אחד, אחד טיפול שפן הניסיונות, ואחד איסוף הדגימה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגלח את אזור הקרסול של הרגל האחורית עם מכונת גילוח חשמלי עד שהוורידים גלויים. ודא האזור הוא גדול מספיק כדי להימנע מפרווה מפריעה לאתר לנקב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את הרגל האחורית באמבט מים פושר ולשפשף בעדינות את הרגל, מה שהופך את הוורידים מורחבים יותר וברורים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נגב את הרגל במגבת נקייה ולחטא את האתר לנקב עם גזה או מקלון צמר גפן הטבול באלכוהול 70%. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לרסן את פן הניסיונות ולהאריך את הרגל האחורית כלפי מטה תוך הפעלת לחץ עדין באופן מיידי מעל מפרק הברך to לספק קיפאון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנקב את הווריד באמצעות מחט 21 G או אזמל. לאסוף למשל דם., על ידי שימוש בצינור איסוף או נימים. בעדינות לתפעל את הרגל כדי לסייע לזרימת הדם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשחרר קיפאון, פעם אחת המדגם הושג. החל פיסת צמר גזה או צמר גפן עם לחץ עדין לאתר לנקב עד דימום הפסק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להחזיר את החיה לכלוב והצג שלה ל5-10 דקות כדי להבטיח עצירת דימום. </li></ol> 2 דגימת דם מוריד האוזן <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבצע הליך זה ללא הרדמה לבד או עדיף עם עזרתו של חברי אחד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחטא את פני השטח הגבי של האוזן באמצעות גזה או מקלון צמר גפן טבול באלכוהול 70%. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להפעיל לחץ קל לבסיס של האוזן כדי לספק קיפאון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנקב את הווריד באמצעות מחט 21 G או אזמל, ולאסוף דם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשחרר קיפאון, פעם אחת המדגם הושג, החל פיסת גזה או צמר גפן עם geלחץ ntle לאתר לנקב עד דימום פסק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להחזיר את החיה לכלוב והצג שלה ל5-10 דקות כדי להבטיח עצירת דימום. </li></ol> .3 דגימת דם מוריד הצוואר <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבצע הליך זה באמצעות העזרה של חוקר אחד נוסף; אחד טיפול שפן ניסיונות ואחד איסוף הדגימה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטשטש פן הניסיונות עם חומר הרדמה מתאימה לכל תקופת של הליך זה. תערובת של tiletamine (0.93 מ&quot;ג / קילוגרם), zolazepam (0.93 מ&quot;ג / קילוגרם), xylazine (1.49 מ&quot;ג / קילוגרם) וbutorphanol (0.06 מ&quot;ג / קילוגרם) יכולה לשמש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את פן הניסיונות מורדמים על הגב שלה בעדינות לחזור בי הרגליים הקדמיות caudally. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגלח ולחטא (למשל., עם 70% אלכוהול) חלק הגחון של הצוואר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מעיל המזרק עם או הפרין או EDTA לפני דגימה על מנת להקטין את הסיכון של קרישה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> למשש את עצם הבריח ולהכניס 25 G (או 23 G) מחט רכובה על ap מזרק 1 מ&quot;לבסמיכות 1 סנטימטר לרוחב קו האמצע ברמה של מפרק כתף. שמור את המזרק בזווית כלפי מעלה והמדיאלי קלה בעת החלת לחץ שלילי קל. למנוע נזק למבני היסוד כמו וריד הצוואר נמצא די שטחי. הטה את הצוואר של חזיר הים מעט לאחור כדי לספק קיפאון מוגבר של הווריד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שחרר את הרגליים הקדמיות כאשר דגימת הדם שהושגה, ולהקל על קיפאון לפני המחט חזר בו. השתמש בפיסת גזה או צמר גפן יבש להפעיל לחץ עדין לאתר לנקב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להחזיר את בעלי החיים לכלוב התאוששות ולפקח על מנת להבטיח עצירת דימום והתאוששות מן ההרדמה. </li></ol>

<ol><li>DeOgburn, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+increased+dietary+cholesterol+with+carbohydrate+restriction+on+hepatic+lipid+metabolism+in+Guinea+pigs%5BTitle%5D)+AND+%22Comp.Med%22%5BJournal%5D)">Effects of increased dietary cholesterol with carbohydrate restriction on hepatic lipid metabolism in Guinea pigs.</a> Comp.Med. 62 (2), 109-115 (2012).</li>
<li>Fernandez, M., Volek, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guinea+pigs+a+suitable+animal+model+to+study+lipoprotein+metabolism%2C+atherosclerosis+and+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Nutr+Metab+%28Lond%29%22%5BJournal%5D)">Guinea pigs a suitable animal model to study lipoprotein metabolism, atherosclerosis and inflammation.</a> Nutr Metab (Lond). 3 (17), (2006).</li>
<li>Frikke-Schmidt, H., Tveden-Nyborg, P., Birck, M. M., Lykkesfeldt, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+dietary+fat+and+cholesterol+exacerbates+chronic+vitamin+C+deficiency+in+guinea+pigs%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Nutr%22%5BJournal%5D)">High dietary fat and cholesterol exacerbates chronic vitamin C deficiency in guinea pigs.</a> Br J Nutr. 105 (1), 54-61 (2011).</li>
<li>Hem, A., Smith, A. J., Solberg, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Saphenous+vein+puncture+for+blood+sampling+of+the+mouse%2C+rat%2C+hamster%2C+gerbil%2C+guinea+pig%2C+ferret+and+mink%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">Saphenous vein puncture for blood sampling of the mouse, rat, hamster, gerbil, guinea pig, ferret and mink.</a> Lab Anim. 32 (4), 364-368 (1998).</li>
<li>Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+sample+collection+in+small+laboratory+animals%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmacol+Pharmacother%22%5BJournal%5D)">Blood sample collection in small laboratory animals.</a> J Pharmacol Pharmacother. 1 (2), 87-93 (2010).</li>
<li>Guillen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FELASA+guidelines+and+recommendations%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Assoc+Lab+Anim+Sci%22%5BJournal%5D)">FELASA guidelines and recommendations.</a> J Am Assoc Lab Anim Sci. 51 (3), 311-321 (2012).</li>
<li>Ye, P., Cheah, I. K., Halliwell, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+fat+diets+and+pathology+in+the+guinea+pig+Atherosclerosis+or+liver+damage%5BTitle%5D)+AND+%22Biochim+Biophys+Acta%22%5BJournal%5D)">High fat diets and pathology in the guinea pig Atherosclerosis or liver damage.</a> Biochim Biophys Acta. 1832 (2), 355-364 (2013).</li>
<li>Tveden-Nyborg, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maternal+vitamin+C+deficiency+during+pregnancy+persistently+impairs+hippocampal+neurogenesis+in+offspring+of+guinea+pigs%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Maternal vitamin C deficiency during pregnancy persistently impairs hippocampal neurogenesis in offspring of guinea pigs.</a> PLoS One. 7 (10), 12-18391 (2012).</li>
<li>Schjoldager, J. G., Tveden-Nyborg, P., Lykkesfeldt, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prolonged+maternal+vitamin+C+deficiency+overrides+preferential+fetal+ascorbate+transport+but+does+not+influence+perinatal+survival+in+guinea+pigs%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Nutr%22%5BJournal%5D)">Prolonged maternal vitamin C deficiency overrides preferential fetal ascorbate transport but does not influence perinatal survival in guinea pigs.</a> Br J Nutr. 110 (9), 1573-1579 (2013).</li>
<li>Greulich, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Secretory+products+of+guinea+pig+epicardial+fat+induce+insulin+resistance+and+impair+primary+adult+rat+cardiomyocyte+function%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Secretory products of guinea pig epicardial fat induce insulin resistance and impair primary adult rat cardiomyocyte function.</a> J Cell Mol Med. 15 (11), 2399-2410 (2011).</li>
<li>Swifka, J., Weiss, J., Addicks, K., Eckel, J., Rosen, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epicardial+fat+from+guinea+pig+a+model+to+study+the+paracrine+network+of+interactions+between+epicardial+fat+and+myocardium%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc+Drugs+Ther%22%5BJournal%5D)">Epicardial fat from guinea pig a model to study the paracrine network of interactions between epicardial fat and myocardium.</a> Cardiovasc Drugs Ther. 22 (2), 107-114 (2008).</li>
<li>Pilny, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+hematology+of+rodent+species%5BTitle%5D)+AND+%22Vet.Clin+North+Am+Exot+Anim+Pract%22%5BJournal%5D)">Clinical hematology of rodent species.</a> Vet.Clin North Am Exot Anim Pract. 11 (3), 523-vii (2008).</li>
<li>Franco, N. H., Olsson, I. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scientists+and+the+3Rs%3A+attitudes+to+animal+use+in+biomedical+research+and+the+effect+of+mandatory+training+in+laboratory+animal+science%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">Scientists and the 3Rs: attitudes to animal use in biomedical research and the effect of mandatory training in laboratory animal science.</a> Lab Anim. 48 (1), 50-60 (2014).</li>
<li>Van, L. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((eAssessing+the+application+of+the+3Rs+a+survey+among+animal+welfare+officers+in+The+Netherlands%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">eAssessing the application of the 3Rs a survey among animal welfare officers in The Netherlands.</a> Lab Anim. 47 (3), 210-219 (2013).</li>
<li>Sloan, R. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+doses+of+ketamine-xylazine+anesthesia+reduce+cardiac+ischemia-reperfusion+injury+in+guinea+pigs%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Assoc+Lab+Anim+Sci%22%5BJournal%5D)">High doses of ketamine-xylazine anesthesia reduce cardiac ischemia-reperfusion injury in guinea pigs.</a> J Am Assoc Lab Anim Sci. 50 (3), 349-354 (2011).</li>
<li>Jacobson, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+anaesthetic+regimen+for+surgical+procedures+in+guinea+pigs%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">A novel anaesthetic regimen for surgical procedures in guinea pigs.</a> Lab Anim. 35 (3), 271-276 (2001).</li>
<li>Saha, J. K., Xia, J., Grondin, J. M., Engle, S. K., Jakubowski, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+hyperglycemia+induced+by+ketamine+xylazine+anesthesia+in+rats+mechanisms+and+implications+for+preclinical+models%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Biol+Med%28Maywood%29%22%5BJournal%5D)">Acute hyperglycemia induced by ketamine xylazine anesthesia in rats mechanisms and implications for preclinical models.</a> Exp Biol Med(Maywood). 230 (10), 777-784 (2005).</li>
</ol>

יש לי המחברים אין לחשוף. כל ההליכים אושרו על ידי הניסויים בבעלי חי החוק של דנמרק, אשר הנו בהתאם למועצת אירופה אמנת ETS 123.

בהשוואה לעכברים וחולדות, חזירי ים חוששים ידי הטבע ויש לגשת בשלווה ולטפל בו כראוי על מנת להפחית את הלחץ. מנקודת מבט של רווחת בעלי חיים, הפועלות בזהירות הוא באופן טבעי בראש סדר עדיפויות; עם זאת, זה יהיה גם להפחית את הסיכון לתופעות הקשורים חרדה בלמשל הנתונים שנאסף., רמות דם מוגברות של סטרואידים וגלוקוז 12. כמו כן, טיפול יומי יהיה להרגיל את החיות לנהלים רגילים ויכול לשמש כדי להפחית את הלחץ עוד יותר. מומחיות מעשית בטכניקת דגימת דם מסוימת צריכה להיות שנרכש על ידי ההת...

שפן הניסיונות הוא מודל חיה ניסיוני יקר ומאומתים בשל מספר קווי דמיון ביולוגי לבני אדם כגון דרישה לאספקה ​​תזונתית של ויטמין C, ליפופרוטאין פלזמה הדומה חילוף חומרים של אנזימים ופרופילי ליפופרוטאין, כמו גם קווי דמיון משותפים עם placentation ואנושי פיתוח טרום לידתי 1-3,7,8. זה הופך את חזיר ים מודל אטרקטיבי ומתאים ללימוד השפעות של מחלות הקשורות דיאטה כגון מחלת שאינה אלכוהוליים כבד שומני, מחלות לב וכלי דם והשפעות המשוערות של מחסור בויטמין C, אלא גם את ההשפעה של לדוגמא., התערבות תזונתית אימהית על הפיתוח צאצאים. דגימת דם חוזרת נדרשה לעתים קרובות בשני הטווח הארוך וקצר במחקרי vivo. בשל הבדלים אנטומיים מינים ספציפיים אפנון של טכניקת הדגימה הוא הכרחי על מנת להשיג דגימות דם בחזירי ים בהשוואה למודלים של מכרסמים אחרים <sup&gt; 4,5. זה כולל שינוי בקורס של ורידים ועורקים, וגם לא צריכים שרקנים זנב, יש לי כך דרישות ואפשרויות שונות לשניהם דגימה וטיפול. דגימה מsaphenous או וריד קרסול, גורם אי נוחות מינימאלית ולחץ בבעלי החיים ואינו דורש הרדמה 3,9. טכניקה זו מאפשרת לי חזרו דגימות של כמויות קטנות של דם (100-400 μl), למשל., כדי לקבוע סמנים ביוכימיים בפלזמה. אם גודל מדגם קטן עוד יותר הוא מספיק (50-100 μl), יכולה די בקלות ניתן להשיג זאת על ידי ניקוב וריד האוזן. טכניקה זו יכולה גם להתבצע בבעלי חיים מודעים ושימושית לדוגמא בעת מדידת רמת סוכר בדם 10,11. דגימה מוריד הצוואר מאפשרת לאוסף של כמויות גדולות יותר של דם (1-2 מ&quot;ל) אבל דורשת הרדמה. כאן, אנו מציגים ארבע טכניקות דגימת דם שונות לאו חזירי ים מודעים או מורדם. Procedures כל הנהלים שאינם המסוף ובלבד שכרכי המדגם ומספר הדגימות לא יעלו על הנחיות לאיסוף דם בחיות מעבדה 6. זה באינטרסים של מדע טוב, כמו גם לרווחת בעלי החיים שלחץ צריך להיות כל הזמן למינימום. כתוצאה מכך, מאומן היטב בלבד ואישי מוסמך צריך לבצע את ההליכים בבעלי החיים.

<table><tbody><tr><td>מכונת גילוח חשמלית</td><td>Wella (קונטורה), דנמרק</td><td>273207</td><td>ניתן להשתמש במוצר חלופי. מזרקים מרובי ספקים</td></tr><tr><td>&nbsp;</td><td>B.Braun-Omnifix-F, גרמניה</td><td>9161406V</td><td>ניתן להשתמש במוצר חלופי. מספר ספקים</td></tr><tr><td>מחטים</td><td>BD Microlance, ספרד</td><td>301156</td><td>ניתן להשתמש במוצר חלופי. ספקים מרובים</td></tr><tr><td>צינור איסוף Microvette&nbsp;</td><td>Sarstedt, D-51588N&uuml; mbrecht, גרמניה</td><td>201,288,100</td><td>ניתן להשתמש במוצר חלופי. מספר ספקים</td></tr><tr><td>מנתח Accu-Check</td><td>Roche A/S Diagnostics, דנמרק</td><td></td><td>ניתן להשתמש במוצר חלופי. ניתן להשתמש במספר ספקים</td></tr><tr><td>Heparin 5000 IE/ml</td><td>LEO Pharma, דנמרק</td><td></td><td>ניתן להשתמש במוצר חלופי. מספר ספקים</td></tr><tr><td>הרדמה</td><td>Zoletil 50, Chemvet, דנמרק</td><td></td><td>ניתן להשתמש במוצר חלופי. ספקים מרובים</td></tr><tr><td>הרדמה</td><td>נרקוקסיל וטרינר 20 מ"ג / מ"ל, Intervet, דנמרק</td><td></td><td>ניתן להשתמש במוצר חלופי. ספקים מרובים</td></tr><tr><td>הרדמה</td><td>טורבוגסיק וטרינר 10 מ"ג / מ"ל, Scanvet, דנמרק</td><td></td><td>ניתן להשתמש במוצר חלופי. מספר ספקים</td></tr><tr>משחת <td></td><td></td><td>עיניים ניטרלית</td><td>ניתן להשתמש במוצר חלופי. ספקים מרובים</td></tr><tr><td>גזה או צמר גפן&nbsp;</td><td></td><td></td><td>ניתן להשתמש במוצר חלופי. מספר ספקים</td></tr><tr><td>חומר חיטוי (70% אלכוהול)</td><td></td><td></td><td>ניתן להשתמש במוצר חלופי. ספקים מרובים</td></tr></tbody></table>

טכניקות דגימת דם ללא מסוף בגינאה חזירים

Non-Terminal Blood Sampling Techniques in Guinea Pigs

גינאה חזירים יש כמה קווי דמיון ביולוגיים לבני אדם והן תוקפים מודלים של בעלי חיים ניסיוניים 1-3. עם זאת, השימוש בחזירי ים מהווה כיום אזור צר יחסי של נתוני מחקר ותיאורים על מתודולוגיה מסוימת היא בהתאמה נדירה. התכונות האנטומי של שרקנים שונות מעט ממודלים של מכרסמים אחרים, ומכאן אפנון של טכניקות דגימה כדי להתאים להבדלי מינים ספציפיים, למשל., בהשוואה לעכברים וחולדות, נחוצים כדי להשיג דגימות באיכות מספקות וגבוהות. כשני לטווח הארוך וקצר במחקרי vivo לעתים קרובות דורש חוזר ונשנה דם דגימת הבחירה של טכניקה יש לשקול היטב על מנת להפחית את הלחץ ואי נוחות בבעלי החיים, אלא גם כדי להבטיח את הישרדות, כמו גם עמידה בדרישות של גודל מדגם ונגישות. ניתן להשיג דגימות דם ורידים במספר האתרים בשרקנים למשל., saphenous וצווארורידים, כל טכניקה המכילה את שני יתרונות וחסרונות 4,5. כאן, אנו מציגים ארבע טכניקות דגימת דם שונות לאו חזירי ים מודעים או מורדם. הנהלים כל הנהלים שאינם המסוף ובלבד שכרכי המדגם ומספר הדגימות לא יעלו על הנחיות לאיסוף דם בחיות מעבדה 6. כל השיטות שתוארו נבדקו ביסודיות והגישו בקשה לחזרו בדגימת דם vivo במחקרים בתוך מתקן המחקר שלנו.

ארבע גישות שונות בטכניקות דגימת דם שאינו מסוף vivo באו חזירי ים מודעים או מורדם הוצגו. איור 1 מדגים את מהלך saphenous לרוחב ווריד קרסול בפן הניסיונות והאתרים לנקב אפשריים. ורידי אוזן גלויים על פני השטח הגבי של אוזן חזיר ים הם באיור 2 ורידים אלה יכולים לשמש לדגימת דם כאשר נדרש רק נפח קטן מאוד. עמדתו של פן הניסיונות לדגימת דם הצוואר היא מופע באיור 3. במהלך וריד הצוואר בא לידי ביטוי בחיצים עם החץ מצביע העליון באתר ל...

למרות שמודל ידוע, שפן הניסיונות כיום מייצגים נישה במדעי בעלי חיים ניסיוניים ונתונים מוגבלים נגיש בביצוע של רוב ההליכים. כאן אנו מציגים ארבע גישות שונות למי שאינו מסוף בטכניקות דגימת דם vivo באו חזירי ים מודעים או מורדם.

Guinea pigs possess several biological similarities to humans and are validated experimental animal models1-3. However, the use of guinea pigs currently ...

המטרה הכוללת של סרטון זה היא להמחיש את המתודולוגיה של ארבע טכניקות שונות לדגימת דם בשרקנים. ההליכים המוצגים אינם סופניים אלא אם נפחי הדגימה או מספר הדגימות חורגים מההנחיות לאיסוף דם. בחיות מעבדה, כאן אנו רואים את הגורם לווריד הצדדי והווריד הטרסל.הווריד האוס עובר בגב ולרוחב מעל מפרק הטרסל. יש לקחת מקסימום שלוש דגימות מכל רגל אחורית, ולאסוף כ-100 עד 400 מיקרוליטר דם לכל דגימה. הציוד הדרוש כולל מכונת גילוח חשמלית, אמבט מים חמים, מגבת נקייה, מעט צמר גפן, חומר חיטוי כגון 70% אלכוהול, מחטים סטריליות, 21 ערוץ או צינורות איסוף קטנים יותר.ואם המטרה היא למדוד את רמת הגלוקוז בדם ודגימת AccuCheck, ניתן לבצע דגימת דם מהצפאוס או מווריד הטרסל בשרקנים ללא הרדמה. שרקן הניסיונות מרוסן על ידי עוזר מיומן ויש להשתמש בטכניקת ספיגה. השיער המכסה את אזור הטרסל מגולח במכונת גילוח חשמלית והרגל האחורית נשטפת ומחוממת באמבט מים פושר.בנוסף לניקוי הרגל, זה גורם לוורידים להתרחב ולהיות גלויים יותר. הרגל האחורית מורחבת והקיפאון מושג על ידי הפעלת לחץ עדין כלפי מטה ממש מעל הברך, מה שמאפשר לווריד להיראות מיד לפני הדגימה. האזור המגולח ניגב בחומר חיטוי.הווריד מנוקב בעזרת מחט או רומח, וניתן לאסוף דם לצינור נימי או מיקרוטי. כאשר נאסף דם, הקיפאון מוקל ומופעל לחץ עדין עם חתיכת צמר גפן כדי להקל על המוסטזיס, ניתן לראות כאן את העורקים והוורידים השטחיים על פני השטח הגבי של אוזן השרק. ניתן להשתמש בכלים אלה לדגימת דם כאשר נדרש נפח קטן מאוד.דוגמה אחת יכולה להיות למדידות גלוקוז בדם. שרקן הניסיונות מרוסן בעדינות תוך השארת האוזן נגישה. אתר הניקוב חייב להיות מוכן באופן ספיגה לפני הדגימה, אך אין צורך בגילוח.ניתן להפעיל לחץ קל בבסיס האוזן כדי להפוך את הוורידים לגלויים יותר. הווריד מנוקב באמצעות מחט או רומח ודם נאסף בצינור נימי או מנותח מיד לרמות הגלוקוז בדם באמצעות מערכת הדגימה AccuCheck. לאחר איסוף דם, יש להפעיל לחץ עדין על מקום הניקוב כדי להקל על המוסטזיס.תמונה זו ממחישה את מיקומו של שרקן הניסיונות לדגימת דם צווארית ואת הגורם לווריד הצוואר. ההליך מבוצע אך ורק על בעל חיים מורדם. הציוד הדרוש כולל תרופות להרדמה וצמר גפן חשמלי, חומר חיטוי כגון סטטוסקופ אלכוהול 70%, משחת עיניים ניטרלית, מזרקים של מיליליטר, מחטים סטריליות, בדרך כלל 23 או 25.ניתן להשתמש בערוץ הפרין ו-EDTA לשטיפת מזרקים לפני הדגימה על מנת למנוע קרישה. קיימים מגוון פרוטוקולי הרדמה עבור שרקנים. במקרה זה, בעלי חיים מורדמים על ידי הרדמה מאוזנת עם תערובת של אריחי סוליט סינוס ובוטיף מוזרקים תת עורית בצוואר.ניתן לדלל תערובת זו במי מלח כדי להפוך את המינון למדויק יותר. לאחר ההזרקה יש להחזיר את השרקן לכלוב ולהשאיר אותו בשקט. אפקט הסביבה נראה בדרך כלל לאחר כ-10 דקות ונמשך 30 עד 40 דקות לפני הדגימה.עומק ההרדמה מוערך על ידי בדיקת רפלקסים וניתנת משחת עיניים ניטרלית להגנה על העיניים. ניגשים לווריד הצוואר כשהשרקן מונח על גבו, והרגליים הקדמיות נסוגות אחת לרבעון. האזור מגולח ומוכן באופן אספטי, עצם הבריח מוחשת, ומחט ערוץ 23 המותקנת על מזרק מיליליטר אחד מוחדרת כסנטימטר אחד לרוחב קו האמצע, רק גולגולת גבית לעצם הבריח.יש לשמור על המזרק בזווית קלה כלפי מעלה ומדיאלית. ברגע שהעור חודר, מופעל לחץ שלילי קל על המזרק מכיוון שהצוואר ממוקם באופן שטחי למדי ועומק החדרה של כשלושה עד ארבעה מילימטרים מספיק. לאחר איסוף הדגימה, שחרר את המתח של הרגליים הקדמיות והפעל לחץ עדין על צד הפנצ'ר.לאחר מכן ניתן להחזיר את החיה לכלוב התאוששות, אך יש לעקוב אחריה כדי להבטיח המוסטזיס והתאוששות מהרדמה. כאשר השרקן מתאושש לחלוטין מההרדמה, הוא עשוי לחזור לדיר שלו. המאפיינים האנטומיים של שרקן הניסיונות שונים במקצת מאלה של מודלים אחרים של מכרסמים, ויש צורך במודולציה של טכניקות דגימה כדי להתאים להבדלים ספציפיים בין המינים ולהשיג דגימות באיכות מספקת בזמן הקצר ביותר האפשרי.גם לטווח הארוך וגם לטווח הקצר. in vivo, מחקרים דורשים לעתים קרובות דגימת דם חוזרת. יש לשקול היטב את בחירת הטכניקה על מנת להפחית מתח ואי נוחות ולהבטיח הישרדות, כמו גם עמידה בדרישות גודל המדגם ונגישות.כל השיטות המתוארות נבדקו ביסודיות ויושמו בהצלחה לדגימת דם חוזרת ונשנית. במחקרים במתקן המחקר שלנו, השרקן מייצג נישה במדעי בעלי החיים הניסיוניים, אך יש נתונים מוגבלים על ביצוע הליכים בסיסיים. במאמר וידאו זה, הצגנו ארבע גישות שונות לדגימת דם לא סופנית in vivo בבעלי חיים בהכרה או מורדמים, בתנאי שנפחי הדגימה ומספר הדגימות אינם חורגים מההנחיות לאיסוף דם בחיות מעבדה.הליכים אלה מומלצים לשימוש בשרקנים כאשר נדרשת דגימת דם חוזרת. בפרוטוקול הלימוד שלך.

non-terminal-blood-sampling-techniques-in-guinea-pigs

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

שואב דם יש צורך במספר רב של מחקרים, למשל ללמוד את פרופיל פרמקוקינטיקה של תרכובת. כאן, אנו מדגימים כיצד להקיז דם מן החולדות באמצעות שתי טכניקות: להקיז דם מהעורק saphenous או לנקב לב.

ציור דם מן החולדות דרך וריד Saphenous ועל ידי נקר לב

דגימות דם שימושיות להערכת סמנים ביולוגיים של מצבים פיזיולוגיים או מחלה in vivo. כאן אנו מתארים את המתודולוגיה לדגימת דם מווריד הזנב הצדדי בחולדה. שיטה זו מספקת דגימות מהירות עם מינימום כאב ופולשניות.

דגימת דם מוריד הזנב לרוחב של העכברוש

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לאסוף דגימות דם מן הווריד בריחי של חולדה.

בריחי וריד לנקב כאמצעי חלופי של איסוף דגימת דם בחולדות

הפיתוח של אינטרפרון-גמא ELISpot וזמינותו של שפן PBMCs מאפשרת אפיון T-cell תגובות במודל זה מאוד רלוונטי ללימוד מחלות זיהומיות. לנו יש להחיל וזמינותו כדי למדוד את תא T תגובות המשויכות intradermal משלוח של חיסונים DNA.

אופטימיזציה אינטרפרון-גמא ELISpot Assay מידה תגובות תא T במודל שפן לאחר החיסון

מאמר זה מדגים גישה extradural להשמיד את שק השפן גינאה endolymphatic ולפגוע צינור endolymphatic עם בוחר דק כדי לגרום הידרופס ניסיוני endolymphatic.

גישה כירורגית מתוקן כדי לגרום הידרופס הידרו בשפן גינאה

קצב סינון גלומרולרי (GFR) הוא הסמן האידיאלי להערכת תפקוד הכליות. עם זאת, שיטת המדידה הסטנדרטית באמצעות הזרקת אינולין עם ניתוח דם ושתן סדרתי אינה מעשית. מאמר זה מתאר שיטה מעשית למדידת GFR באופן טרנסדרמלי בחזירונים.

מדידה טרנסדרמלית של קצב סינון גלומרולרי בחזירונים מאווררים מכנית

כאן, אנו מציגים פרוטוקול המציע חלופות איסוף דם מהירות, קלות ואמינות עבור מודל החולדות. אנו מתארים שלוש שיטות שונות לדגימת דם בהתאם להקשר: ניקוב וריד הזנב בהרדמה או בעל חיים בהכרה, וניקור ורידים בפין הגבי בהרדמה.

וריד זנב שונה וניקוב ורידים פין לדגימת דם במודל החולדה

סרט הווידאו הזה מתעד שיטות לאיסוף דגימות מים חוף הים ועיבוד אותם במורד הזרם עבור יישומים שונים, כולל ריכוז ביומסה, טיהור חומצות גרעין, שפע תאים, מזין ומנתח גז עקבות.

מי ים דגימה אוסף

פרוטוקול זה מדגים כיצד מתח רגיש צבעים לאפשר הקלטה אופטית של הפעילות החשמלית של רשתות עצביות שלמים כגון plexuses של מערכת חזירי הים העצבים enteric, עם רזולוציה מתכווננת אשר נע בין חד תאים למעגל רב ganglionic.

הקלטה אופטית של הפעילות החשמלית גינאה חזיר רשתות enteric באמצעות מתח רגיש צבעים

יונית הנוכחי של BK ערוצי נרשם באמצעות מהדק טכניקות תיקון. ערוצי BK באים לידי...

הצמד תיקון וטכניקות זלוף עבור לימוד תעלות יונים מתבטא Xenopus ביציות

למד ארבע שיטות דגימת דם ללא מסוף בגינאה חזירים במצבי עירות והרדמה. הטכניקות כוללות דגימה מווריד הלטרל ספנוס והטארסל, עם הנחיות לנפחי דם בטוחים וציוד נדרש.

טכניקות דגימת דם ללא מסוף בגינאה חזירים

גלה סרטונים נוספים