Name: טיפול של הכותנה העכברוש במחקרים להערכה טרום-הקלינית של וירוסי Oncolytic (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-11-24T15:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 13 s
Description: למדו שיטת טיפול בטוחה בעכברושי כותנה לצמצום מתח בלכידה, תוך שימוש בצינור העשרה וסל פלדה. שיטה זו משפרת רווחת בעלי חיים ואמינות מחקרים טרום-הקליניים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

בריאן קאדינגטון מחזיקה במלגה מהקרן הקנדית לסרטן השד. עבודה זו מומנה על ידי מענקים תפעוליים מהאגודה לחקר הסרטן ומכון המחקר של האגודה הקנדית לסרטן (לשעבר הברית הקנדית לחקר סרטן השד). אנו מודים לאן טולפסון (בית הספר לרפואה של אוניברסיטת סנט לואיס) על תאי LCRT ולד"ר קתלין דילייני ומריון קוריק על הסיוע הטכני בדיור והרגעה של חולדות כותנה.

<ol><li>Cervantes-Garcia, D., Ortiz-Lopez, R., Mayek-Perez, N., Rojas-Martinez, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oncolytic+virotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Oncolytic virotherapy.</a> Ann Hepatol. 7 (1), 34-45 (2008).</li>
<li>Vaha-Koskela, M. J., Heikkila, J. E., Hinkkanen, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oncolytic+viruses+in+cancer+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Lett%22%5BJournal%5D)">Oncolytic viruses in cancer therapy.</a> Cancer Lett. 254 (2), 178-216 (2007).</li>
<li>Abril, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Both+viral+and+host+factors+contribute+to+neurovirulence+of+bovine+herpesviruses+1+and+5+in+interferon+receptor-deficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Virol%22%5BJournal%5D)">Both viral and host factors contribute to neurovirulence of bovine herpesviruses 1 and 5 in interferon receptor-deficient mice.</a> J Virol. 78 (7), 3644-3653 (2004).</li>
<li>Nakamichi, K., Matsumoto, Y., Otsuka, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Defective+infection+of+bovine+herpesvirus+1+in+non-permissive+murine+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vet+Med+Sci%22%5BJournal%5D)">Defective infection of bovine herpesvirus 1 in non-permissive murine cells.</a> J Vet Med Sci. 63 (10), 1139-1142 (2001).</li>
<li>Boukhvalova, M. S., Blanco, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+cotton+rat+sigmodon+hispidus+model+of+respiratory+syncytial+virus+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Top+Microbiol+Immunol%22%5BJournal%5D)">The cotton rat sigmodon hispidus model of respiratory syncytial virus infection.</a> Curr Top Microbiol Immunol. 372, 347-358 (2013).</li>
<li>Papp, Z., Babiuk, L. A., Baca-Estrada, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+immunity+in+the+respiratory+tract+and+protection+from+bovine+herpesvirus+type+1+infection+by+different+routes+of+immunization+with+recombinant+adenovirus%5BTitle%5D)+AND+%22Viral+Immunol%22%5BJournal%5D)">Induction of immunity in the respiratory tract and protection from bovine herpesvirus type 1 infection by different routes of immunization with recombinant adenovirus.</a> Viral Immunol. 11 (2), 79-91 (1998).</li>
<li>Hughes, T. C. R., Lilley, C. E., Ponce, R., Kaufman, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Critical+analysis+of+an+oncolytic+herpesvirus+encoding+granulocyte-macrophage+colony+stimulating+factor+for+the+treatment+of+malignant+melanoma%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Oncolytic+Virotherapy%22%5BJournal%5D)">Critical analysis of an oncolytic herpesvirus encoding granulocyte-macrophage colony stimulating factor for the treatment of malignant melanoma.</a> Journal of Oncolytic Virotherapy. 3, 11-20 (2014).</li>
<li>Jones, C., Chowdhury, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+the+biology+of+bovine+herpesvirus+type+1+%28BHV-1%29%2C+its+role+as+a+cofactor+in+the+bovine+respiratory+disease+complex+and+development+of+improved+vaccines%5BTitle%5D)+AND+%22Anim+Health+Res+Rev%22%5BJournal%5D)">A review of the biology of bovine herpesvirus type 1 (BHV-1), its role as a cofactor in the bovine respiratory disease complex and development of improved vaccines.</a> Anim Health Res Rev. 8 (2), 187-205 (2007).</li>
<li>Jones, C., Chowdhury, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bovine+herpesvirus+type+1+%28BHV-1%29+is+an+important+cofactor+in+the+bovine+respiratory+disease+complex%5BTitle%5D)+AND+%22Vet+Clin+North+Am+Food+Anim+Pract%22%5BJournal%5D)">Bovine herpesvirus type 1 (BHV-1) is an important cofactor in the bovine respiratory disease complex.</a> Vet Clin North Am Food Anim Pract. 26 (2), 303-321 (2010).</li>
<li>Hushur, O., Takashima, Y., Matsumoto, Y., Otsuka, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Restriction+of+bovine+herpesvirus+1+%28BHV-1%29+growth+in+non-permissive+cells+beyond+the+expression+of+immediate+early+genes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vet+Med+Sci%22%5BJournal%5D)">Restriction of bovine herpesvirus 1 (BHV-1) growth in non-permissive cells beyond the expression of immediate early genes.</a> J Vet Med Sci. 66 (4), 453-455 (2004).</li>
<li>Cuddington, B. P., Dyer, A. L., Workenhe, S. T., Mossman, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oncolytic+bovine+herpesvirus+type+1+infects+and+kills+breast+tumor+cells+and+breast+cancer-initiating+cells+irrespective+of+tumor+subtype%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Oncolytic bovine herpesvirus type 1 infects and kills breast tumor cells and breast cancer-initiating cells irrespective of tumor subtype.</a> Cancer Gene Ther. 20 (5), 282-289 (2013).</li>
<li>Cuddington, B. P., Mossman, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Permissiveness+of+Human+Cancer+Cells+to+Oncolytic+Bovine+Herpesvirus+1+Is+Mediated+in+Part+by+KRAS+Activity%5BTitle%5D)+AND+%22J+Virol%22%5BJournal%5D)">Permissiveness of Human Cancer Cells to Oncolytic Bovine Herpesvirus 1 Is Mediated in Part by KRAS Activity.</a> J Virol. 88 (12), 6885-6895 (2014).</li>
<li>Small, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+phase+I+trial+of+intravenous+CG7870%2C+a+replication-selective%2C+prostate-specific+antigen-targeted+oncolytic+adenovirus%2C+for+the+treatment+of+hormone-refractory%2C+metastatic+prostate+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">A phase I trial of intravenous CG7870, a replication-selective, prostate-specific antigen-targeted oncolytic adenovirus, for the treatment of hormone-refractory, metastatic prostate cancer.</a> Mol Ther. 14 (1), 107-117 (2006).</li>
<li>Freytag, S. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phase+I+study+of+replication-competent+adenovirus-mediated+double+suicide+gene+therapy+for+the+treatment+of+locally+recurrent+prostate+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Phase I study of replication-competent adenovirus-mediated double suicide gene therapy for the treatment of locally recurrent prostate cancer.</a> Cancer Res. 62 (17), 4968-4976 (2002).</li>
<li>Benjamin, R., Helman, L., Meyers, P., Reaman, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+phase+I%2FII+dose+escalation+and+activity+study+of+intravenous+injections+of+OCaP1+for+subjects+with+refractory+osteosarcoma+metastatic+to+lung%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">A phase I/II dose escalation and activity study of intravenous injections of OCaP1 for subjects with refractory osteosarcoma metastatic to lung.</a> Hum Gene Ther. 12 (12), 1591-1593 (2001).</li>
<li>Prince, G. A. The Cotton Rat in Biomedical Research. Animal Welfare Information Center Newsletter. 5 (2), Available from:
 
 <a target="_blank" href="http://www.nal.usda.gov/awic/newsletters/v5n2/5n2princ.htm">http://www.nal.usda.gov/awic/newsletters/v5n2/5n2princ.htm</a> 3-5 (1994).</li>
<li>Tsai, J. C., Garlinghouse, G., McDonnell, P. J., Trousdale, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+experimental+animal+model+of+adenovirus-induced+ocular+disease.+The+cotton+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">An experimental animal model of adenovirus-induced ocular disease. The cotton rat.</a> Arch Ophthalmol. 110 (8), 1167-1170 (1992).</li>
<li>Ginsberg, H. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+mouse+model+for+investigating+the+molecular+pathogenesis+of+adenovirus+pneumonia%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">A mouse model for investigating the molecular pathogenesis of adenovirus pneumonia.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 88 (5), 1651-1655 (1991).</li>
<li>Russell, S. J., Peng, K. W., Bell, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oncolytic+virotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Oncolytic virotherapy.</a> Nat Biotechnol. 30 (7), 658-670 (2012).</li>
<li>Mossman, K. L., Saffran, H. A., Smiley, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Herpes+simplex+virus+ICP0+mutants+are+hypersensitive+to+interferon%5BTitle%5D)+AND+%22J+Virol%22%5BJournal%5D)">Herpes simplex virus ICP0 mutants are hypersensitive to interferon.</a> J Virol. 74 (4), 2052-2056 (2000).</li>
<li>Mossman, K. L., Smiley, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Herpes+simplex+virus+ICP0+and+ICP34.5+counteract+distinct+interferon-induced+barriers+to+virus+replication%5BTitle%5D)+AND+%22J+Virol%22%5BJournal%5D)">Herpes simplex virus ICP0 and ICP34.5 counteract distinct interferon-induced barriers to virus replication.</a> J Virol. 76 (4), 1995-1998 (2002).</li>
<li>Hummel, J. L., Safroneeva, E., Mossman, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+ICP0-Null+HSV-1+and+interferon+signaling+defects+in+the+effective+treatment+of+breast+adenocarcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">The role of ICP0-Null HSV-1 and interferon signaling defects in the effective treatment of breast adenocarcinoma.</a> Mol Ther. 12 (6), 1101-1110 (2005).</li>
<li>Papp, Z., Middleton, D. M., Mittal, S. K., Babiuk, L. A., Baca-Estrada, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mucosal+immunization+with+recombinant+adenoviruses%3A+induction+of+immunity+and+protection+of+cotton+rats+against+respiratory+bovine+herpesvirus+type+1+infection%5BTitle%5D)+AND+%22J+Gen+Virol%22%5BJournal%5D)">Mucosal immunization with recombinant adenoviruses: induction of immunity and protection of cotton rats against respiratory bovine herpesvirus type 1 infection.</a> J Gen Virol. 78 (11), 2933-2943 (1997).</li>
<li>Papp, Z., Babiuk, L. A., Baca-Estrada, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+pre-existing+adenovirus-specific+immunity+on+immune+responses+induced+by+recombinant+adenovirus+expressing+glycoprotein+D+of+bovine+herpesvirus+type+1%5BTitle%5D)+AND+%22Vaccine%22%5BJournal%5D)">The effect of pre-existing adenovirus-specific immunity on immune responses induced by recombinant adenovirus expressing glycoprotein D of bovine herpesvirus type 1.</a> Vaccine. 17 (7-8), 933-943 (1999).</li>
<li>Mittal, S. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+systemic+and+mucosal+immune+responses+in+cotton+rats+immunized+with+human+adenovirus+type+5+recombinants+expressing+the+full+and+truncated+forms+of+bovine+herpesvirus+type+1+glycoprotein+gD%5BTitle%5D)+AND+%22Virology%22%5BJournal%5D)">Induction of systemic and mucosal immune responses in cotton rats immunized with human adenovirus type 5 recombinants expressing the full and truncated forms of bovine herpesvirus type 1 glycoprotein gD.</a> Virology. 222 (2), 299-309 (1996).</li>
<li>Steel, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Syngeneic+Cotton+Rat+Cancer+Model+for+Replicating+Adenoviral+Vectors%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Therapy%22%5BJournal%5D)">Syngeneic Cotton Rat Cancer Model for Replicating Adenoviral Vectors.</a> Molecular Therapy. 13 (1), 123(2006).</li>
<li>Toth, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cotton+rat+tumor+model+for+the+evaluation+of+oncolytic+adenoviruses%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Cotton rat tumor model for the evaluation of oncolytic adenoviruses.</a> Hum Gene Ther. 16 (1), 139-146 (2005).</li>
<li>Toth, K., Spencer, J. F., Wold, W. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunocompetent%2C+semi-permissive+cotton+rat+tumor+model+for+the+evaluation+of+oncolytic+adenoviruses%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Immunocompetent, semi-permissive cotton rat tumor model for the evaluation of oncolytic adenoviruses.</a> Methods Mol Med. 130, 157-168 (2007).</li>
<li>Steel, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunocompetent+syngeneic+cotton+rat+tumor+models+for+the+assessment+of+replication-competent+oncolytic+adenovirus%5BTitle%5D)+AND+%22Virology%22%5BJournal%5D)">Immunocompetent syngeneic cotton rat tumor models for the assessment of replication-competent oncolytic adenovirus.</a> Virology. 369 (1), 131-142 (2007).</li>
<li>Workenhe, S. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunogenic+HSV-mediated+oncolysis+shapes+the+antitumor+immune+response+and+contributes+to+therapeutic+efficacy%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">Immunogenic HSV-mediated oncolysis shapes the antitumor immune response and contributes to therapeutic efficacy.</a> Mol Ther. 22 (1), 123-131 (2014).</li>
<li>Sobol, P. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adaptive+antiviral+immunity+is+a+determinant+of+the+therapeutic+success+of+oncolytic+virotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">Adaptive antiviral immunity is a determinant of the therapeutic success of oncolytic virotherapy.</a> Mol Ther. 19 (2), 335-344 (2011).</li>
<li>Prince, G. A. The Cotton Rat in Biomedical Research. Animal Welfare Information Center Newsletter. 5 (2), 
 
 <a target="_blank" href="http://www.nal.usda.gov/awic/newsletters/v5n2/5n2princ.htm">http://www.nal.usda.gov/awic/newsletters/v5n2/5n2princ.htm</a> (1994).</li>
</ol>

המחברים מודים שאין ניגודי אינטרסים פיננסיים הקשורים למחקר זה.

חולדות כותנה נרגשות מאוד ויש להן תגובת טיסה חזקה. לכן, יש לנקוט בזהירות מיוחדת כדי למזער כל לחץ מיותר על החיה. מערך הכלוב המתואר יאפשר לכידה בטוחה וקלה של בעלי החיים, כאשר מיקום צינור ההעשרה הוא בעל חשיבות עליונה. בעת הקמת כלובים, יש לוודא שצינורות ההעשרה עומדים בדרישות הגודל והצורה, וממוקמים בכיוון הנכון בכלוב. כמו כן, חשוב לוודא שכל הטכנאים שעשויים לסייע בתחזוקת בעלי חיים יידעו על הדרישות הספציפיות לדיור. נקיטת אמצעי זהירות אלה תפחית את התסיסה של בעל החיים לפני ביצוע ההליכים. כמו כן, רצוי לבצע הליכים בבוקר, לפני כל טיפ...

וירוסי Oncolytic (OV) לשכפל באופן סלקטיבי בתאי גידול על ידי ניצול הבדלים ביוכימיים בין תאים נורמלים וסרטניים 1,2. ישנם שני סוגים של OVS: אלה שאינם דורשים מוטציה להשיג oncolysis סלקטיבית, המכונים וירוסי wild-type כמתרחשים באופן טבעי ואלה אשר חייבים להיות מהונדסים כדי להשיג oncolysis סלקטיבית. האוסף של מוטציות בתוך סוג גידול נתון קובע את אופי יתרון הצמיחה סלקטיבית על פני תאים נורמלים לOV 2. הבטיחות והתועלת של OVS באמצעות הודגמה בניסויים קליניים 3-7. למרות התקדמות בתחום virotherapy oncolytic קיימים פערים בין תוצאות פרה-קליניות וקליניות, המצביע על כך יש צורך במודלים טובים יותר להעריך את היעילות אנטי-הסרטנית של OVS. סוג הווירוס ההרפס שור 1 (BHV-1) הוא חבר של משפחת הרפס, ותת-משפחת Alphaherpesviridae. BHV-1 initiates השור מורכב מחלה בדרכי הנשימה בבקר, מפגין במגוון רחב של תסמינים דומים 8,9 קר רע. BHV-1 נקשר קולטנים התקשרות וכניסה בשימוש על ידי HSV-1, כגון סולפט וnectin-1 10 heparan. עם זאת, הוא נקשר CD155 במקום של nectin-2 10. יש BHV-1 טווח מארח צר מאוד כך שהוא אינו יכול להיכנס ביעילות ובליזום שכפול בתאים עכבריים רגילים והפכו את 3,4,10. זה הופך את השימוש במודלים עכבריים קונבנציונליים בעייתי. קיבולת oncolytic של BHV-1 כבר הוכיחה במבחנה 11,12. BHV-1 הוכח ליזום שכפול ובלהרוג תאים סרטניים אנושיים ממגוון רחב של מקורות היסטולוגית, כוללים תאי סרטן השד וסרטן שד ייזום תאים 11,12. עם זאת, היכולת אנטי-הסרטנית של BHV-1 חייבת להיות מוערכת in vivo בהקשר של מארח עם מערכת חיסון תקין. האדם Adenovirus (Ad), שליש 57 זנים אל מזוהים, בדרך כלל גורם למחלה בדרכי הנשימה בבני אדם. וקטורי Ad Oncolytic נבדקו ליעילות אנטי-הסרטנית שלהם עם כמה קידום לניסויים קליניים 13-15. למרות נתונים פרה-קליניים מבטיחים, תוצאות קליניות נפלו קצרות של ציפיות. מודלים xenograft גידול אנושי משמשים בדרך כלל כדי לחקור את היעילות אנטי-הסרטנית של וקטורי מודעות, למרות שהם מפגינים נחלשו מערכת חיסונית לווירוס 16,17. יתר על כן, מודלים עכבריים syngeneic הם אוֹסְרָנִי לזיהום מודעות, מה שהופכים את ההערכה של תגובות חיסוני מארח תוך שימוש במודלים אלה מעשיים 17,18. המערכת החיסונית המארח זוהתה כמנגנון המשפיע ביותר על ידי שOVS להוציא מוות של תאים סרטניים 19. תגובות אנטי-סרטניות בין tolerized ואנטיגן גידולים הקשורים אינו tolerized דגמים (TAA) שונים ויכולות להשפיע על ההצלחה של טיפול OV מאוד. OV KM100 HSV-1 (ICP0 n212VP16 בשנת 1814 20) 20,21 עורר נסיגה של גידול ב -80% מעכברי נושאי גידול במודל סרטן שד אנטיגן Polyoma התיכון T העכברי 22. עם זאת, בדגמים / neu HER-2, היעילות אנטי-הסרטנית של KM100 נעה בין 20% רגרסיה מלאה בעכברי syngeneic וקיפאון בגידול מהונדס, HER2-tolerized עכברים. יחד נתונים אלה מדגישים את החשיבות של הערכה מלאה OVS באמצעות מודלים של בעלי חיים בצורה הטובה ביותר לשחזר את נוף החיסון האנושי כדי להבין מה תכונות שתקבענה את ההצלחה טיפולית. החולדה הכותנה (hispidus Sigmodon), ילידי צפון אמריקה והדרום, היא נפוצה ביותר כמודל של זיהום בנגיף syncytial נשימה (כפי שנסקר ב5). חולדות כותנה משמשות גם במחקר חיסון נגד BHV-1 כפי שהם לשחזר את הפתולוגיה הקשורים למחלות בדרכי הנשימה שור מורכבות 6,23. יתר על כן, זיהום BHV-1 של חולדות כותנההוא חיסוני, גרימה רירית מתמשכים ותגובות חיסוניים מערכתיות 6,23-25. שורות תאים כבר נגזרו fibrosarcoma וosteosarcomas של בלוטת החלב (LCRT) והעצם (CCRT וVCRT), בהתאמה 26 ספונטניים. חולדות כותנה היו בשימוש כדי להעריך את יעילות in vivo של וקטורי Ad oncolytic כפי שהם רגישים לזיהום מודעות ולהפגין פתולוגיה דומה לבני האדם 27-29. השימוש במודלי מדוכאי חיסון להערכה טרום הקלינית של OVS הם לא רק פחות מעיד על תגובה הקלינית לטיפול, אבל הם אינם לוקחים בחשבון את תפקידה של מערכת החיסון בvirotherapy oncolytic 30,31. לכן, syngeneic והמודלים של עכברים כותנה-tolerized גידול של סרטן השד וסרטן עצמות הם מודלים רלוונטיים שבו להעריך את היעילות פרה-הקלינית של OVS, כגון BHV-1 ומודעות שלא ניתן ללמוד באמצעות מודלים עכבריים קונבנציונליים.

<table><tbody><tr><td>דולבקו s שונה Eagle' s בינוני&nbsp;</td><td>Gibco</td><td>11965-092</td><td>רשאי להשתמש בכל מותג&nbsp;</td></tr><tr><td>1X מי מלח חוצץ פוספט&nbsp;</td><td></td><td></td><td>יכול להכין במעבדה, לסנן לעיקור</td></tr><tr><td>200 מ"מ L-גלוטמין</td><td>Gibco</td><td>25030164</td><td>יכול להשתמש בכל מותג</td></tr><tr><td>100x אנטיביוטיקה-אנטי-מיקוטיקה&nbsp;</td><td>Gibco</td><td>15240-062</td><td>עשוי להשתמש בכל מותג</td></tr><tr><td>סרום בקר עוברי</td><td>Quality Biological Inc.</td><td>110-001-101HI</td><td>רשאי להשתמש בכל מותג</td></tr><tr><td>T-150cm2 בקבוק תרבית רקמות</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-826-80</td><td>עשוי להשתמש בכל מותג</td></tr><tr><td>1X TypLE Express</td><td>Life Technologies</td><td>12604-013</td><td></td></tr><tr><td>צלחת תרבית תאים 12 בארות, תחתית שטוחה</td><td>Fisher Scientific</td><td>08-772-29</td><td>רשאי להשתמש בכל מותג, חייב להיות מטופל בתרבית רקמות</td></tr><tr><td>alamarBlue</td><td>Life טכנולוגיות</td><td>DAL1025</td><td>עשוי להשתמש במגיב חלופי לקביעת כדאיות התא</td></tr><tr><td>8640 Teklad 22/5 דיאטת מכרסמים</td><td>Harlan&nbsp;</td><td>8640</td><td></td></tr><tr><td>1/8 אינץ' מצעי מכרסמים של קלחי תירס</td><td>Harlan</td><td>7092</td><td></td></tr><tr><td>Nestlets</td><td></td> <td>Ancare-עשוי</td> <td>מסיבי כותנה בתוליים בעיסת, צינורות חרוטיים נטולי אבק וניתנים לחיטוי</td></tr><tr><td>50 מ"ל</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>14-432-22</td><td>עשוי להשתמש בכל מותג, חייב להיות סטרילי</td></tr><tr><td>Isoflurane USP, 99.9%, הרדמה בשאיפה</td><td>Pharmaceutical Partners of Canada Inc.</td><td>M60302</td><td></td></tr><tr><td>70% אתנול</td><td></td><td></td><td>יכול להכין במעבדה</td></tr><tr><td>10% ניטרלי חוצץ פורמלין</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>HT501128</td><td>עשוי להשתמש בכל מותג</td></tr><tr><td>NAPCO NapFlow 1200 Class II A/B3 בטיחות ביולוגית ארון בטיחות מיקרוביולוגית (מכסה מנוע תרבית תאים)</td> דגם <td>NAPCO</td><td>בשימוש אינו זמין כרגע</td><td>עשוי להשתמש בכל מותג</td></tr><tr><td>Thermo Fisher Scientific Precision חימום אמבט מים</td><td> המודל המדעי</td><td>בשימוש אינו זמין כעת&nbsp;</td><td>רשאי להשתמש בכל מותג</td></tr><tr><td colspan="4">[header]</td></tr><tr><td>Reichert Bright-line Hemacytometer</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Z359629</td><td>עשוי להשתמש בכל מותג</td></tr><tr><td>Typhoon Trio BioAnalyzer&nbsp;</td>מודל <td>מדעי החיים של GE Healthcare</td><td>בשימוש אינו זמין כעת&nbsp;</td><td>עשוי להשתמש בכל קורא לוחות פלואורסצנטי</td></tr><tr><td>Tecan Safire2 קורא מיקרו-פלטות רב זיהוי</td> דגם <td>Tecan</td><td>בשימוש אינו זמין כעת&nbsp;</td><td>עשוי להשתמש בכל קורא לוחות פלואורסצנטי</td></tr><tr><td>צנטריפוגה שולחנית Allegra 6R</td><td>בקמן קולטר</td><td>366816</td><td>עשוי להשתמש בכל</td></tr><tr><td>מותג מכונת הרדמה שולחנית</td><td>דגם VetEquip</td><td>בשימוש אינו זמין כרגע&nbsp;</td><td>רשאי להשתמש בכל מותג, חייב להיות נייד</td></tr><tr><td>Wahl Peanut Mini Clippers</td><td>Wahl</td><td></td><td>עשוי להשתמש בכל מותג של קוצץ קטן</td></tr><tr><td>מזרקי אינסולין 29 גרם x 1/2 אינץ', 0.3 מ"ל</td><td>BD</td><td>329464</td><td>יכול להשתמש בכל מותג. מזרקי אינסולין מומלצים מכיוון שהם מקלים על הזריקות דרך החולדה. עור קשוח.&nbsp;</td></tr><tr><td>צמר גפן</td><td>MedPro</td><td>018-425</td><td>עשוי להשתמש בכל מותג</td></tr><tr><td>מספריים חיתוך מחודדים</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>8940</td><td>עשוי להשתמש בכל מותג</td></tr><tr><td>ניתוח רקמות מלקחיים</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>13-812-41</td><td>עשוי להשתמש בכל מותג</td></tr></tbody></table>

טיפול של הכותנה העכברוש במחקרים להערכה טרום-הקלינית של וירוסי oncolytic

Handling of the Cotton Rat in Studies for the Pre-clinical Evaluation of Oncolytic Viruses

נגיפים אונקוליטיים הם טיפול אנטי-סרטני חדשני עם יכולת למקד לתאי גידול, תוך השארת תאים בריאים שלמים. כדי שאסטרטגיה זו תצליח, מחקרים אחרונים הראו כי מעורבות של מערכת החיסון המארחת היא חיונית. לכן, יש להעריך את הווירותרפיה האונקוליטית בהקשר של מודל בעל יכולת חיסונית. יתר על כן, מחקר של טיפולים אנטי-גידוליים במודלים של בעלי חיים נסבלים עשוי לסכם טוב יותר את התוצאות שנראו בניסויים קליניים. חולדות כותנה, המשמשות בדרך כלל לחקר וירוסים נשימתיים, הן מודל אטרקטיבי לחקר וירותרפיה אונקוליטית שכן מודלים סינגניים של קרצינומה של שד ואוסטאוסרקומה. עם זאת, חסר מידע שפורסם על נוהל הטיפול הנכון במכרסמים נרגשים אלה. גישת הטיפול והלכידה המתוארת ממזערת את הלחץ של בעלי החיים כדי להקל על הניסויים. טכניקה זו תלויה ביכולתו של החוקר לשמור על קור רוח במהלך הטיפול ולבצע נהלים בזמן. לבסוף, אנו מתארים כיצד להכין תאי גידול חלב של חולדת כותנה להיווצרות גידול תת עורי עקבי, וכיצד לבצע זריקות תוך-גידוליות ותוך צפקיות. ניתן ליישם שיטות אלו במגוון רחב של מחקרים המקדמים את התפתחות חולדת הכותנה כמודל פרה-קליני רלוונטי לחקר טיפול אנטי-גידולי.

בשל האופי מאוד הרגיש של חולדות כותנה, היכרות עם הנהלים וניצול מותאמים כדי להפחית את הלחץ של בעלי החיים יקל בשימוש בם כמודל חיה פרה-קליני. שימוש בטכניקות טיפול הולמים גם למזער את הסיכון לחוקר. בעת שימוש בחולדות כותנה זה הכרחי כדי להישאר רגוע. החולדות הן להתרגש מאוד ותנסינה לברוח הכלוב שלהם. שימוש בצינור העשרה וnestlets יהיה למזער ניסיונות בריחה. איור 2 מראה התקנת כלוב אופטימלית כדי לסייע בלכידתו ש...

חולדות כותנה נרגשות מאוד ויש להן תגובה חזקה של ברח או הילחם. מתוארת שיטת טיפול אופטימלית להפחתת הלחץ של בעלי החיים שתהפוך את חולדות הכותנה לנגישות יותר כמודל פרה-קליני.

טיפול של הכותנה העכברוש במחקרים להערכה טרום-הקלינית של וירוסי Oncolytic

Oncolytic viruses are a novel anticancer therapy with the ability to target tumor cells, while leaving healthy cells intact.  For this strategy to be ...

המטרה הכוללת של הליך זה היא להדגים את הטיפול והלכידה הבטוחים של חולדות כותנה בשיטה ספציפית שמטרתה להפחית את הלחץ שחווה בעל החיים. זה מושג על ידי הנחת צינור העשרה כנגד קצה כלוב עכברושים וסלסלת פלדה ניתנת לאבטחה מעל. בשלב השני, הציוד האישי המגן המתאים מועלה ומותר לפרחח הכותנה לזחול לתוך צינור ההעשרה.לאחר מכן הצינור מוחזק כנגד דופן הכלוב והחיה הלכודה מועברת במהירות למיכל פלסטיק עם חורי אוויר להובלה לתא ההרדמה. בשלב האחרון, חרוט אף מיוחד המותאם במיוחד לחוטם הכותנה מונח על החיה כדי להקל על הרגעה מלאה. בסופו של דבר, ניתן להשתמש בהליך לכידה זה כדי לטפל בבטחה בפרחי כותנה באופן שמפחית את הלחץ שלהם ומגביר את בטיחותם.כאשר משתמשים במכרסמים נרגשים מאוד אלה במחקרים פרה-קליניים, בדרך כלל אנשים חדשים בשיטה זו יתקשו בגלל הפערים בספרות לגבי הטיפול, הדיור וההתנהגות של חולדת הכותנה. הדגמה חזותית של שיטה זו היא קריטית כדי להחמיא לדיווחים הכתובים כדי להכין את החוקרים לאתגרים ההתנהגותיים בעבודה עם חולדות כותנה. מי שידגים את ההליך יהיו בריאן קאטינגטון, סטודנטית לתואר שני, ומייגן אר, פוסט-דוקטורנטית מהמעבדה שלי כדי להפחית את הלחימה, שיכנו את חולדות הכותנה בנפרד בכלובי מתלה פוליקרבונט המכילים מצע קלחי תירס בגודל שמונה אינץ', קטע של צינורות PVC שאורכו לא יותר משמונה סנטימטרים, וקנים להעשרה כדי לאפשר לכידה בטוחה וקלה של בעלי החיים.הנח את צינור ההעשרה כנגד קצה הכלוב ולאחר מכן הנח סל מעופש הניתן לאבטחה מעל החלק העליון של הכלוב המכיל מזון למכרסמים ובקבוק מים. כעת אספו מיכל פלסטיק גדול ושקוף עם חורים לאוויר ומכסה ותא אינדוקציה להרדמה, גדול מספיק כדי להתאים למיכל וחרוט אף המותאם לצינור יציאת הגז. שימו לב שלפרחח הכותנה יש חוטם מוארך הדורש צורה שונה כדי לספק את גז ההרדמה כפי שמתואר בתמונה זו של חרוט אף, שתוכנן להתאים כראוי לחולדת כותנה העובדת בזוגות.על החוקרים ללבוש כפפות עור עבות להגנה במהלך כל חלקי ההליך. כאשר שני החוקרים מוכנים, הניחו את הכלוב של החיה על משטח ישר והסירו את המכסה החיצוני. לאחר מכן, כאשר החיה נמצאת בתוך צינור ההעשרה, הרם קלות את מגש ההזנה מפלדה ותמרן לאט את הצינור עד שהוא מקביל לדפנות הכלוב ונגד הגב.לאחר מכן, הרם לאט ובכוונה את קצה מכסה הפלדה הרחוק ביותר מצינור ההעשרה, תוך שמירה על הקצה השני במגע עם הכלוב. בקש מהחוקר השני ליצור חלל גדול מספיק עבור מיכל הפלסטיק. לאחר מכן, בתנועה אחת חלקה ומהירה, דחפו את הפלסטיק והמיכל על גבי צינור ההעשרה.שמור על מגע של המיכל עם צד הכלוב הלוכד את החיה בצינור. כאשר מטפלים בחולדות הכותנה, חשוב להיות סבלניים ולהשתמש ביד יציבה מכיוון שלבעלי החיים יש תגובת טיסה או לחימה חזקה, והיא תנסה להימנע מלכידה על ידי ריצה וקפיצה מהכלוב. אם בעל חיים אכן בורח, הימנע מטיפול בזנב.מכיוון שיכול להתרחש פירוק, הסר את מגש ההזנה מפלדה ותן את מכסה מיכל הפלסטיק לחוקר האחר. לאחר מכן החלק את מכסה הפלסטיק בין צד הכלוב למיכל. להיות מודעים לנספחים של החיה הלכודה בתהליך וסגירה, אך לא לאטום את המיכל, לוודא שהמיכל נשאר סגור.העבר את החיה לתא האינדוקציה. לאחר מכן בקש מחוקר אחד להניח במהירות את החיה בתא ולהסיר את מכסה המיכל בתנועת נוזל אחת בעוד השני נפתח ומחליף מיד את מכסה תא האינדוקציה. לבסוף, לאחר מתן ההרדמה, החזירו את החולדה לכלוב שלה עם ניטור עד שהחיה תחזור לניידות מלאה וחזרה לעצם החזה.הזרקת תאי גידול ברי קיימא חשובה להיווצרות גידול תקין. בתמונה זו מוצגת שכבה חד-שכבתית בריאה של תאי LCRT שניתן להכין להזרקה לתוך פרחי כותנה. לעומת זאת, לתאי LCRT אלה יש כדאיות נמוכה ואין להשתמש בהם להזרקות.הגידולים הנוצרים מתאי LCRT גדלים במהירות, וכתוצאה מכך, מרכזים נמקיים נוצרים לעתים קרובות ככאלה, יש לעקוב בקפידה אחר היווצרות הגידול כדי למנוע כיב. אם מתרחש כיב, יש להקריב את החיה כדי למנוע זיהום ומוות אפשרי מאלח דם. שמירה על שלמות רקמת הגידול לאחר הכריתה תביא לדגימה המהווה ייצוג מדויק יותר של הגידול in vivo.לדוגמה, כאן, מוצגת טכניקת כריתה שבאמצעותה מפרידים את הגידול בזהירות מהרקמה הסובבת באמצעות אזמל ופינצטה כפי שמוצג בתמונה הסופית הזו. המבנה הצפוף וכלי הדם של הגידול נשמר על ידי טכניקת כריתה זו, החשובה לניתוח טיפולים המשפיעים על כלי הדם של הגידול. כמו במקרה של וירוסים אונקוליטיים רבים בזמן ניסיון הליך זה, חשוב לזכור להישאר רגועים ולבצע כל צעד לאט ובכוונה כדי להימנע מתסיסה של חולדות הכותנה.לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד ללכוד ולטפל בבטחה בחולדות כותנה.

handling-cotton-rat-studies-for-pre-clinical-evaluation-oncolytic

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

התערבות RNA (RNAi) הוא בעל יתרונות רבים על פני בנוקאאוט הגן נעשה שימוש נרחב ככלי במחקרים גנים תפקודיים. המצאת ה-DNA וקטור מבוססי RNAi הטכנולוגיה הפכה לטווח ארוך הגן מושרה מציאה אפשרי, גם הגדילה את הכדאיות של השתקת...

וקטור מבוסס DNA התערבות RNA ללמוד לתפקד גנים סרטן

הסרטון מדגים העברה לוקואזורית של וירוסים אונקוליטיים באמצעות הזרקת עורקי כבד כגישה טיפולית לקרצינומה הפטוצלולרית. נגיפים אלה משתכפלים באופן סלקטיבי בתאי הגידול, גורמים לליזה של תאים ומשחררים אנטיגנים הקשורים לתאי גידול. תהליך זה גורם למוות תאי אימונוגני, וגורם לתגובה אנטי-סרטנית.

התמקדות בגידולי כבד עם וירוסים אונקוליטיים דרך עורק הכבד

סרטון זה מדגים את הליך הזרקת נגיפי HIV כימריים לקליפת המוח של חולדה, שם ה-RNA של הנגיף משתלב בגנום המארח, משתכפל ומתפשט כדי לבסס זיהום HIV פעיל במודל הניסוי.

הקמת זיהום HIV פעיל במודל חולדה

סרטון זה מדגים את התהליך של הזרקת וקטור ויראלי לתוך חומר החולדה השחור כדי למדל מחלת פרקינסון. הוא מתאר את השלבים להכנת החולדה, הזרקת המיקרו של הווקטור הנגיפי לתוך החומר השחור, ואת הליך ההתאוששות.

הזרקה וקטורית ויראלית לתוך חומר החולדה ניגרה למידול מחלות נוירודגנרטיביות

פרוטוקול זה מתאר כיצד להשתיק באופן זמני ומרחוק פעילות עצבית באזורי מוח נפרדים בזמן שחולדות עוסקות במשימות למידה וזיכרון. הגישה משלבת פרמקוגנטיקה (Designer-Receptors-Exclusively-Activated-by-Designer-Drugs) עם פרדיגמה התנהגותית (התניה חושית) שנועדה להבחין בין מרכיבים שונים של למידה.

שיטה להשתקה מרחוק עצבית פעילות במכרסמים בשלבים בדידים של למידה

וירותרפיה אונקוליטית נמצאת בפיתוח כתרופות חדשניות לטיפול בקרצינומה של הכבד (HCC).  כאן אנו מתארים שיטה לטיפול מקומי ב-HCC באמצעות מתן עורקי כבד של נגיף אונקוליטי.

Transarterial מינהל oncolytic וירוסים לטיפול Locoregional של Orthotopic HCC אצל חולדות

שיטות משלוח הגן רחב היקף מערכת העצבים המרכזית בחולדה מכוסים. בדוגמה זו, המטרה היא לחקות מחלה המשפיעה על חוט השדרה כולו. התמרה חושית רחבה יכול לשמש כדי לספק חלבון טיפולית מערכת העצבים מהמינהל, היקפי חד פעמי.

שיטות וטיפים על עירוי לוריד של Adeno-הקשורים וירוס חולדות והערכה של מערכת העצבים המרכזית התמרה חושית

כאן נתאר פרוטוקול להעסקת תפוקה גבוהה ההקרנה RNAi לחשוף את מטרות המארח יכול להיות מניפולציות כדי לשפר את הטיפול וירוס oncolytic, במיוחד rhabodvirus וטיפול וירוס vaccinia, אבל ניתן בקלות להתאים oncolytic אחרים וירוס פלטפורמות או לגילוי גנים המארח לווסת את שכפול וירוס בדרך כלל.

ברמת הגנום RNAi ההקרנה כדי לזהות גורמים מארח לווסת את הטיפול Oncolytic וירוס

פרוטוקול זה מתאר עבודה מפורט עבור הדור של ex-vivo אפיון של וירוסים oncolytic ביטוי של immunomodulators, באמצעות וירוסי חצבת קידוד bispecific תא T engagers כדוגמה. יישום והתאמה וקטור פלטפורמות אחרות, transgenes נאיץ את ההתפתחות של הרומן immunovirotherapeutics לתרגום קליניים.

Paramyxoviruses עבור Immunomodulation, ממוקדות הגידול: הערכה לשעבר Vivo ועיצוב

פיתחנו פרוטוקול עבור הדור והערכה של הומניזציה ונגיף הכשל החיסוני האנושי חעוגה מודל העכבר מבוסס על השתלת תא גזע, הנגיף החיסוני intravaginal האדם חשיפה, ו-droplet דיגיטלי PCR RNA כימות.

הומניזציה חעוגה עכברים עבור חשיפה Intravaginal HIV וטיפול בזיהום HIV

כאן, אנו מציגים פרוטוקול כדי להקים מודל עכברוש חדש של זיהום HIV פעיל באמצעות HIV כימרי (EcoHIV), שהוא קריטי לשיפור ההבנה שלנו של מאגרים נגיפיים HIV-1 במוח ומציע מערכת לחקור הפרעות נוירוקוגניטיביות הקשורות ל- HIV ותחלואה נלווית (כלומר, שימוש בסמים).

מודל עכברוש של זיהום מוחי EcoHIV

למדו שיטת טיפול בטוחה בעכברושי כותנה לצמצום מתח בלכידה, תוך שימוש בצינור העשרה וסל פלדה. שיטה זו משפרת רווחת בעלי חיים ואמינות מחקרים טרום-הקליניים.

טיפול של הכותנה העכברוש במחקרים להערכה טרום-הקלינית של וירוסי Oncolytic

גלה סרטונים נוספים