Human Pluripotent Stem Cell Based Developmental Toxicity Assays for Chemical Safety Screening and Systems Biology Data Generation

Vaibhav Shinde; Stefanie Klima; Perumal Srinivasan Sureshkumar; Kesavan Meganathan; Smita Jagtap; Eugen Rempel; J&#246;rg Rahnenf&#252;hrer; Jan Georg Hengstler; Tanja Waldmann; J&#252;rgen Hescheler; Marcel Leist; Agapios Sachinidis

doi:10.3791/52333

תאי גזע אנושיים pluripotent בהתבסס התפתחותית רעילות מבחני לביולוגיה הקרנה ומערכות בטיחות כימית נת...

JoVE Journal
Developmental Biology

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Developmental Biology

Human Pluripotent Stem Cell Based Developmental Toxicity Assays for Chemical Safety Screening and Systems Biology Data Generation

תאי גזע אנושיים pluripotent בהתבסס התפתחותית רעילות מבחני לביולוגיה הקרנה ומערכות בטיחות כימית נתונים דור

Full Text

13,232 Views

17:28 min

June 17, 2015

DOI: 10.3791/52333-v

Vaibhav Shinde*¹, Stefanie Klima*², Perumal Srinivasan Sureshkumar¹, Kesavan Meganathan¹, Smita Jagtap¹, Eugen Rempel³, Jörg Rahnenführer³, Jan Georg Hengstler⁴, Tanja Waldmann², Jürgen Hescheler¹, Marcel Leist*², Agapios Sachinidis*¹

¹Center of Physiology and Pathophysiology, Institute of Neurophysiology,University of Cologne, ²Department of Biology,University of Konstanz, ³Department of Statistics,Technical University of Dortmund, ⁴Leibniz Research Centre for Working Environment and Human Factors,Technical University of Dortmund

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

הפרוטוקולים מתארים שתי מערכות במבחנת רעילות התפתחותית מבחן (UKK וUKN1) המבוססים על תאי גזע עובריים אנושיים ומחקרי transcriptome. מערכות הבדיקה לחזות סיכון לרעילות התפתחותית אדם, ועשויות לתרום לצמצום ניסויים בבעלי חיים, עלויות והזמן הנדרשים לבדיקת בטיחות כימית.

המטרה הכוללת של הליך זה היא לתאר שתי מערכות בדיקת רעילות התפתחותיות במבחנה המבוססות על תאי גזע עובריים אנושיים ומחקרי טרנסקריפטום. זה מושג על ידי תרבית ראשונה של תאי גזע עובריים אנושיים על פיברובלסטים עובריים של עכברים. השלב השני הוא לאפשר לתאי הגזע העובריים האנושיים ליצור גופי אמברי שבהם הם יכולים ליצור תאים מכל שלוש שכבות הנבט או להבדיל אותם לאבות נוירואקטודרמליים.

לאחר מכן, גופי העובר או האבות הנוירו-אקטודרמליים מטופלים בתרכובות מעניינות בריכוזים שונים במהלך ההתמיינות. השלבים האחרונים הם להעריך את כדאיות התאים ולבודד את ה-RNA. בסופו של דבר נעשה שימוש בניתוח מיקרו-מערך טרנסקריפטום כדי להראות את השינויים בביטוי ה-RNA של תאים שטופלו בתרכובת מעניינת בהשוואה לתאי ביקורת לא מטופלים בהתבסס על תאי גזע ניאוניים אנושיים ואזורי מאקרו של DNA, הקמנו מתודולוגיה במבחנה המאפשרת ניטור השפעות רעילות התפתחותיות רלוונטיות לבני אדם.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos