Name: דגם Murine של חסימת Ureteric חד-צדדית בלתי הפיכה והפיכה (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-12-20T15:00:00.000+00:00
Duration: 14 min 5 s
Description: חקור מודל עכברים לחסימת שופרת חד-צדדית הפיכה ובלתי הפיכה לחקר פיזיולוגיה כליתית. שיטה זו מאפשרת ניתוח היסטולוגי של פציעה והתאוששות רקמתית בכליות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

המחקר הנוכחי נתמך על ידי מענקים מ-Kidney Research UK (ST4/2011), קרן קנינגהם (CT11/14), קרן הצדקה של גברת AE Hogg לחקר הכליות וקרן תרומות הכליות של המרפאה המלכותית של אדינבורו.

הדרכה כללית: ניסויים בבעלי חיים בוצעו בהתאם להנחיות ותקנות שהוטלו על ידי בעלי חיים (הליכים מדעיים) Act 1986. פרוטוקול זה והפרוטוקול הנלווה וידאו עבור שני UUO סטנדרטי וR-UUO, שיכול להתבצע על רבים זני עכבר. בסרטון הנלווה, שני ההליכים מתבצעים על C57BL / 6 עכברי זכרים בגילי 8 שבועות. הנתונים שהוצגו בסעיף תוצאות הנציג התקבלו מFVB / n עכברי זכרים. הערה: פרוטוקול זה ונלווה פרטי וידאו כיצד לבצע UUO סטנדרטי וR-UUO ניצול השופכן השמאל, לעומת זאת יכול בקלות להיות מיושמת באותה הטכניקה כדי השופכן תקין. 1. הכנת בעלי החיים וlaparotomy <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבצע את כל ההליכים עם מכשירים סטריליים (autoclaved) ומתכלים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להזריק קטמין הידרוכלוריד (70mg / kg) וhydrochloride medetomidine (1 מ&quot;ג / קילוגרם) intraperitoneally להרדיםהעכבר. הערה: משך מטוס הרדמה וכתוצאה מכך הוא 4 שעות ולא נדרשת הרדמה משלימה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אשר את עומק ההרדמה על ידי אובדן הרפלקסים למשל, קמצוץ הבוהן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את כל השיער המקיף את אזור החתך ולהכין את עור הבטן לניתוח באמצעות יישום של פתרון chlorhexidine לדלל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את העכבר על כרית כירורגית מחוממת במצב שכיבה ולתקן את הגפיים לכרית באמצעות סרט דבק נמוך סימון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> במהלך ההליך, לפקח על העכבר לסימני כוויות תרמית כתוצאה מהכרית כירורגית המחוממת. אם אפשר להשתמש במקור חום לא חשמלי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנהל משכך כאבים על ידי הזרקה תת עורית של hydrochloride עצירות (0.06mg / קילוגרם) ולהחיל חומר סיכה העין כדי למנוע התייבשות של קרנית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפוך laparotomy קו האמצע וחתך של alba linea avascular באמצעות מספריים רקמה מפרידה כדי לקבל גישה לחלל הצפק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעטוף את העכבר והכנס COLIBRIמפשק לתוך החתך. </li></ol> חסימת 2. חד-צדדי Ureteric <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שימוש בניצני כותנה מעוקר לחשוף את השופכן שהותיר עקירת המעיים לכיוון הצד הימני של חלל הבטן ומכסה אותם עם וילונות לחים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעזרת מלקחיים זווית לבודד ולהרים את השופכן השמאל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי ליצור חסימת ureteric, לקשור השופכן שמאל פעמיים עם 6 / O תפר משי שחור קלוע בכל מקום בין שלפוחית ​​השתן ואגן כליה. בניסויים לטווח ארוכים, להשתמש בתפר נספג עבור כל ניתוחי הבטן. לחלופין, קליפ ligating יכול להיות מיושם על השופכן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי לבודד את שלפוחית ​​השתן משופכן, לחלק את השופכן בין שני התפרים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להחליף את המעיים בזהירות לתוך חלל הצפק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע את השלבים המפורטים בסעיף 4 - שחזור לאחר ניתוח וטיפול כדי לסגור את החתך ולהפוך את ההרדמה. </li></ol> 3. הכנה לReversiblחסימת הדואר חד צדדי Ureteric <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן עכבר לניתוח ולבודד את השופכן השמאל כמפורט בשלבים 1.1-2.2 לעיל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי ליצור חסימת ureteric שיכול להיות הפוכה, ולקשור השופכן שמאל פעמיים עם 6 / O תפר משי שחור קלוע קרוב לשלפוחית ​​השתן. השאר קצה אחד של התפר העליון עוד זה ישמש לעגן את צינורות פלסטיק הרכים מוקפי חומה במקום סביב השופכן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפוך חריץ אורכי באורך 5 מ&quot;מ של צינורות פלסטיק מוקפי חומה רך כזה שניתן פשק אותה פתוח כדי לאפשר לו להיות מיושם בדרכי השתן. כל צינורות פלסטיק סיליקון מוקפי חומה רכה, עם קוטר פנימי של 1 מ&quot;מ וקוטר חיצוני של 2 מ&quot;מ, ניתן להשתמש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את צינורות פלסטיק מוקפי חומה הרכה בעדינות סביב השופכן. ודא שהתפר הארוך עולה ממרכז החריץ בצינור לאחר שהוא נסגר סביב השופכן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים באורך של 6 / O תפר משי שחור קלוע סביב הצינור המוקף חומה הרכה המקיף את השופכן ולקשורפעם אחת. עכשיו מקום סוף התפר הארוך, מתעורר ממרכז החריץ בצינור, longitudinally פני צינורות כך שהוא נמצא בחלק העליון של התפר קשור בעבר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לקשור את התפר ממוקם סביב הצינור פעמיים כדי לעגן את צינורות וסופו של דבר התפר הארוך במקום סביב השופכן. הערה: כדי למנוע היווצרות הידבקות בשופכן וצינורות פלסטיק המוקף חומה הרכה, פתרון הפחתת הידבקות יכול להיות מיושם על האזור סביב הצינור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להחליף את המעיים בזהירות לתוך חלל הצפק. </li></ol> שחזור 4. לאחר ניתוח וטיפול <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סגור את הצפק עם שמיכת תפר באמצעות 5 / O תפר משי שחור קלוע ולהתקרב לעור באמצעות קליפים עור מתכתיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי למזער את הסיכון לזיהום לאחר ניתוח, חל כגון חיטוי כתמיסת יוד / אלכוהול לעור הבטן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חלקית הרדמה הפוכה עם hydrochloride atipamezole (2 מ&quot;ג / קילוגרם) תת עורי. </li&gt; <li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנהל נוזלים על ידי הזרקה תת עורית של 1 מיליליטר חימם מלוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפקח על העכבר עד שהוא חזר להכרתו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אפשר העכבר כדי להתאושש בקופסא מחוממת שמרה על 29 מעלות צלזיוס למשך 24 שעות. יכול להיות גם סיפק מזון טבול לעודד צריכת נוזלים ותזונה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השאר את העכבר כדי להתאושש כדי לגרום לרמה רצויה של חסימה, בדרך כלל 7 ימים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בניסויים התאוששות לטווח ארוך, לספק משככי כאבים מתמשכים. אם העכבר הוא להיות התאושש למשך זמן ארוך יותר מ -7 ימים, להסיר את סרטוני עור 7 ימים לאחר ניתוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברגע שהרמה הרצויה של חסימה כבר מושרה, או להפוך את UUO, כפי שיתואר להלן, או להרדים את העכבר על ידי נקע בצוואר הרחם ולאסוף את הכליות לניתוח histopathology. </li></ol> חסימת 5. הפיך חד צדדי Ureteric <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי לבצע R-UUO להכין עכבר, שעבר הכנה לR-UUO, לניתוח כפי שמתואר בשלבים 10.1-1.7. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם הווה, להסיר את סרטוני העור ולחלק או להסיר את התפרים בהצפק כדי לקבל גישה לחלל הבטן. הערה: אם השופכן כבר חסום לקטעי עור ניסוי ארוך טווח צריך להיות מודח 7 ימים לאחר יישום. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן את העכבר ולבודד את השופכן השמאלי כמתואר בשלבים 1.8-2.2. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעזרת מלקחיים זווית, לשחרר את צינורות פלסטיק הרכים מוקפי חומה מכל רקמת granulomatous שאולי נוצרה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותך את התפר מחזיק צינורות הפלסטיק סביב השופכן החסום עם אזמל ולהסיר את הצינור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאשר UUO המוצלח על ידי הערכה לנוכחות של הידרונפרוזיס בכליה השמאלית, הכליות אמורות להופיע חיוורות גם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מחלקים את השופכן בין התפרים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את האורך הנותר של השופכן, שצורף לכליות, על פיסה קטנה של גזה סטרילית. זה ישמש כדי לאסוף את משקעי השתן ותאים מתים שיהיה לנקז מהשופכןnd אגן כליה אחת התפר הוסר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מחלקים את השופכן לעיל, אך קרוב, התפר ולאפשר הכליות לניקוז על גבי הגזה. השאר את התפר התחתון, קרוב לשלפוחית ​​השתן, ללא פגע. זו היא להבטיח כי לא שתן ידלוף משלפוחית ​​השתן ולתוך חלל הצפק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברגע שהשופכן ואגן כליה כבר סחוט, להחיל תפר משי ארוך 6 / O שחור קלוע לסוף האורך הנותר של השופכן. זה ישמש כדי לסייע לשופכן להשקת שלפוחית ​​השתן שבוצעה מאוחר יותר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע את השלבים הבאים לanastomose האורך הנותר של השופכן לתוך שלפוחית ​​השתן: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל השופכן כך שהוא נמצא קדמי למקומו המקורי ושקרים על הכליות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים תפר Tacking יחיד 9 / O monofilament פוליאמיד 2 מ&quot;מ מהקצה של השופכן כך שהוא עולה לכיוון שלפוחית ​​השתן. תשמור על מנת להבטיח שהתפר נשאר במעיל שרירי ולא להיכנס ללום שופכן. Wil תפר Tackingl לשמש כדי לעגן את השופכן בשלפוחית ​​השתן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ליצירת ערוץ דרך שלפוחית ​​השתן, לעבור מחט 21G באלכסון דרך שלפוחית ​​השתן כך שעם יציאתו לכיוון הקדמי הקיר (הגחון) של שלפוחית ​​השתן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנוח מחט עיניים בשיפוע של מחט 21G. השתמש במחט 21G כדי להנחות את מחט העיניים דרך שלפוחית ​​השתן. מחט העיניים תשמש לקחת השופכן דרך שלפוחית ​​השתן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעבור תפר Tacking 9 / O, שהוחל על שופכן בשלב 5.11.2, דרך החתך הראשון בשלפוחית ​​השתן והחוצה דרך קיר שלפוחית ​​השתן הסמוך לנקודת הכניסה. ברגע שהשופכן עובר דרך שלפוחית ​​השתן זה יהיה קשור לעגן את השופכן לשלפוחית ​​השתן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את התפר הארוך 6 / O שחור קלוע המשי להחיל את הסוף של השופכן בשלב 5.10 דרך מחט העיניים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לסגת בזהירות את מחט העיניים מחוץ לשלפוחית ​​תוך הבטחה שהשופכן גם משך דרך שלפוחית ​​השתן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ברגע שהשופכן עולה מהשלפוחית ​​השתן דואר להוציא את מחט העיניים ולהחיל מהדק לתפר הארוך בסוף השופכן כדי למנוע נסיגה לאחור לתוך שלפוחית ​​השתן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעגן את השופכן בתוך מקום בשלפוחית ​​השתן, לקשור את תפר נקודת סימון monofilament 9 / O פוליאמיד, הוחל בשלב 5.11.5. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל תפרי יחיד נוספים 9 פוליאמיד / O עניבת monofilament כמתואר בשלבים 5.11.2 ו5.11.5 בשני מקומות סביב נקודת הכניסה לעגן את השופכן בשלפוחית ​​השתן בתקיפות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שימוש בחלק האחורי של מספריים נפתחו, לדחוף את קיר שלפוחית ​​השתן מעט לאחור כדי לחשוף יותר של השופכן המתהווה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מחלקים את השופכן מעל התפר הארוך ממוקם בקצה של השופכן. שופכן צריכה לחזור לגוף של שלפוחית ​​השתן. זה רגיל להתבונן שתן זורם מתוך הפתח בשלפוחית ​​השתן, המאשר את לומן הפתוח של השופכן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סגור את פצע היציאה בשלפוחית ​​השתן עם תפר monofilament פוליאמיד 9 / O. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בזהירות להחליף את המעיים לחלל הצפק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לספק טיפול שלאחר ניתוח, כמפורט בצעדים 4.1-4.8. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אפשר העכבר כדי להתאושש עד הכליה ביטול דחיסת, בדרך כלל 7 ימים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בנקודת סיום הניסוי, להרדים את העכבר על ידי נקע בצוואר הרחם ולאסוף את הכליות לניתוח histopathological. </li></ol>

<ol><li>Chevalier, R. L., Forbes, M. S., Thornhill, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ureteral+obstruction+as+a+model+of+renal+interstitial+fibrosis+and+obstructive+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+Int%22%5BJournal%5D)">Ureteral obstruction as a model of renal interstitial fibrosis and obstructive nephropathy.</a> Kidney Int. 75, 1145-1152 (2009).</li>
<li>Kipari, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nitric+oxide+is+an+important+mediator+of+renal+tubular+epithelial+cell+death+in+vitro+and+in+murine+experimental+hydronephrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Pathol%22%5BJournal%5D)">Nitric oxide is an important mediator of renal tubular epithelial cell death in vitro and in murine experimental hydronephrosis.</a> Am J Pathol. 169, 388-399 (2006).</li>
<li>Henderson, N. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Galectin-3+expression+and+secretion+links+macrophages+to+the+promotion+of+renal+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Pathol%22%5BJournal%5D)">Galectin-3 expression and secretion links macrophages to the promotion of renal fibrosis.</a> Am J Pathol. 172, 288-298 (2008).</li>
<li>Kitamoto, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+liposome+clodronate+on+renal+leukocyte+populations+and+renal+fibrosis+in+murine+obstructive+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmacol+Sci%22%5BJournal%5D)">Effects of liposome clodronate on renal leukocyte populations and renal fibrosis in murine obstructive nephropathy.</a> J Pharmacol Sci. 111, 285-292 (2009).</li>
<li>Tapmeier, T. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reimplantation+of+the+ureter+after+unilateral+ureteral+obstruction+provides+a+model+that+allows+functional+evaluation%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+Int%22%5BJournal%5D)">Reimplantation of the ureter after unilateral ureteral obstruction provides a model that allows functional evaluation.</a> Kidney Int. 73, 885-889 (2008).</li>
<li>Cochrane, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Renal+structural+and+functional+repair+in+a+mouse+model+of+reversal+of+ureteral+obstruction%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Soc+Nephrol%22%5BJournal%5D)">Renal structural and functional repair in a mouse model of reversal of ureteral obstruction.</a> J Am Soc Nephrol. 16, 3623-3630 (2005).</li>
<li>Puri, T. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+kidney+disease+induced+in+mice+by+reversible+unilateral+ureteral+obstruction+is+dependent+on+genetic+background%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Renal+Physiol%22%5BJournal%5D)">Chronic kidney disease induced in mice by reversible unilateral ureteral obstruction is dependent on genetic background.</a> Am J Physiol Renal Physiol. 298, F1024-F1032 (2010).</li>
<li>Heikkila, J., Holmberg, C., Kyllonen, L., Rintala, R., Taskinen, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+risk+of+end+stage+renal+disease+in+patients+with+posterior+urethral+valves%5BTitle%5D)+AND+%22J+Urol%22%5BJournal%5D)">Long-term risk of end stage renal disease in patients with posterior urethral valves.</a> J Urol. 186, 2392-2396 (2011).</li>
<li>Ravanan, R., Tomson, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Natural+history+of+postobstructive+nephropathy%3A+a+single-center+retrospective+study%5BTitle%5D)+AND+%22Nephron+Clin+Pract%22%5BJournal%5D)">Natural history of postobstructive nephropathy: a single-center retrospective study.</a> Nephron Clin Pract. 105, c165-c170 (2007).</li>
<li>Bascands, J. L., Schanstra, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Obstructive+nephropathy%3A+insights+from+genetically+engineered+animals%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+Int%22%5BJournal%5D)">Obstructive nephropathy: insights from genetically engineered animals.</a> Kidney Int. 68, 925-937 (2005).</li>
<li>Park, H. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Postobstructive+regeneration+of+kidney+is+derailed+when+surge+in+renal+stem+cells+during+course+of+unilateral+ureteral+obstruction+is+halted%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Renal+Physiol%22%5BJournal%5D)">Postobstructive regeneration of kidney is derailed when surge in renal stem cells during course of unilateral ureteral obstruction is halted.</a> Am J Physiol Renal Physiol. 298, F357-F364 (2010).</li>
<li>Manson, S. R., Niederhoff, R. A., Hruska, K. A., Austin, P. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endogenous+BMP-7+is+a+critical+molecular+determinant+of+the+reversibility+of+obstruction-induced+renal+injuries%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Renal+Physiol%22%5BJournal%5D)">Endogenous BMP-7 is a critical molecular determinant of the reversibility of obstruction-induced renal injuries.</a> Am J Physiol Renal Physiol. 301, F1293-F1302 (2011).</li>
<li>Manson, S. R., Niederhoff, R. A., Hruska, K. A., Austin, P. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+BMP-7-Smad1%2F5%2F8+pathway+promotes+kidney+repair+after+obstruction+induced+renal+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Urol%22%5BJournal%5D)">The BMP-7-Smad1/5/8 pathway promotes kidney repair after obstruction induced renal injury.</a> J Urol. 185, 2523-2530 (2011).</li>
<li>Chaves, L. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contrasting+effects+of+systemic+monocyte%2Fmacrophage+and+CD4%2B+T+cell+depletion+in+a+reversible+ureteral+obstruction+mouse+model+of+chronic+kidney+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Dev+Immunol%22%5BJournal%5D)">Contrasting effects of systemic monocyte/macrophage and CD4+ T cell depletion in a reversible ureteral obstruction mouse model of chronic kidney disease.</a> Clin Dev Immunol. 2013, 836-989 (2013).</li>
<li>Haque, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Longitudinal+changes+in+MRI+markers+in+a+reversible+unilateral+ureteral+obstruction+mouse+model%3A+preliminary+experience%5BTitle%5D)+AND+%22J+Magn+Reson+Imaging%22%5BJournal%5D)">Longitudinal changes in MRI markers in a reversible unilateral ureteral obstruction mouse model: preliminary experience.</a> J Magn Reson Imaging. 39, 835-841 (2014).</li>
<li>Bai, Z. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Arterially+transplanted+mesenchymal+stem+cells+in+a+mouse+reversible+unilateral+ureteral+obstruction+model%3A+in+vivo+bioluminescence+imaging+and+effects+on+renal+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Med+J%22%5BJournal%5D)">Arterially transplanted mesenchymal stem cells in a mouse reversible unilateral ureteral obstruction model: in vivo bioluminescence imaging and effects on renal fibrosis.</a> Chinese Med J. 126, 1890-1894 (2013).</li>
<li>Chaabane, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Renal+functional+decline+and+glomerulotubular+injury+are+arrested+but+not+restored+by+release+of+unilateral+ureteral+obstruction+%28UUO%29%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Renal+Physiol%22%5BJournal%5D)">Renal functional decline and glomerulotubular injury are arrested but not restored by release of unilateral ureteral obstruction (UUO).</a> Am J Physiol Renal Physiol. 304, F432-F439 (2013).</li>
<li>Thornhill, B. A., Burt, L. E., Chen, C., Forbes, M. S., Chevalier, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Variable+chronic+partial+ureteral+obstruction+in+the+neonatal+rat%3A+a+new+model+of+ureteropelvic+junction+obstruction%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+Int%22%5BJournal%5D)">Variable chronic partial ureteral obstruction in the neonatal rat: a new model of ureteropelvic junction obstruction.</a> Kidney Int. 67, 42-52 (2005).</li>
<li>Thornhill, B. A., Chevalier, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Variable+partial+unilateral+ureteral+obstruction+and+its+release+in+the+neonatal+and+adult+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Variable partial unilateral ureteral obstruction and its release in the neonatal and adult mouse.</a> Methods Mol Biol. 886, 381-392 (2012).</li>
</ol>

יש הסופרים לא מתחרים או סותר אינטרסים לחשוף.

חסימה של הכליה עלולה להשפיע על כליות טבעיות או מושתלות ולגרום לפגיעה בכליות ולצלקות. מודל R-UUO רלוונטי למחלות אנושיות מכיוון שחולים מציגים לעתים קרובות חסימה של דרכי הכליה משנית להיפרטרופיה של הערמונית, שסתומי השופכה האחוריים וכו' הדורשת הפחתת לחץ עם חולים שנותרים בדרך כלל עם פגיעה משמעותית בכליות שאין לה אפשרויות טיפול נוכחיות ועלולה בסופו של דבר להוביל למחלת כליות סופנית. 8,9 המודלים המפורטים כאן מאפשרים לחקור הן UUO בלתי הפיך והן R-UUO. UUO בלתי הפיך מאפשר לחקור דלקת ופגיעה ברקמות, כולל תפקידם של לויקוציטי...

המטרה הכוללת של המודל הניסיוני המתואר כאן היא לגרום לנפרופתיה חסימתית על ידי חסימת שופכן חד צדדית (UUO), שיכולה להיות בלתי הפיכה (UUO) או הפיכה (R-UUO). מוצג מודל פשוט ובלתי הפיך של UUO בו השופכן השמאלי נחסם לצמיתות על ידי קשירה עם תפר או על ידי מריחת קליפ קשירה. התוצאה היא התרחבות ניכרת של השופכן יחד עם זרימת דם כלייתית מופחתת וסינון גלומרולרי. היסטולוגיה של הכליות מדגימה התרחבות צינורית ודלקת כליות אינטרסטיציאלית ופיברוזיס. UUO בלתי הפיך הוא מודל שימושי ואומץ על ידי חוקרים רבים בחקר דלקת כליות ופיברוזיס. 1-4 למרות שהמודל הבלתי הפיך של UUO דורש מומחיות כירורגית מסוימת, הוא פשוט יחסית ומשמש לעתים קרובות כדי לחפש תובנות לגבי הפתוגנזה של פגיעה כלייתית אינטרסטיציאלית והפיברוזיס הנובע מכך. כמו כן מוצג מודל R-UUO בשימוש פחות תכוף המשתמש בשינוי של השיטה שתוארה במקור על ידי Tapmeier et al. 5 למודל R-UUO יש פוטנציאל עתידי רב לחקר תהליכים דלקתיים וחיסוניים, התחדשות תאים ורקמות, כמו גם עיצוב מחדש של רקמות לאחר הסרת גירוי מזיק. 
מודל ה-R-UUO המאתגר יותר שימש מספר מצומצם של חוקרים, כאשר קבוצות מסוימות השתמשו בטכניקה כירורגית שונה משמעותית מזו המתוארת כאן6,7 אם כי עם תוצאות מעניינות. במודל R-UUO המוצג, השופכן נקשר כדי לגרום לחסימה מלאה של השופכן לפרק זמן מספיק כדי לגרום לרמת הפציעה והפיברוזיס הרצויה: 7 ימים של UUO נבחרו בשיטה המתוארת כאן. חסימת השופכן מתהפכת והכליה מורשית לפרוק לחץ לפרק זמן שנקבע על ידי החוקר לפני הוצאת העכברים והוצאת הכליה לניתוח: 7 ימים של דקומפרסיה נבחרו בשיטה המתוארת כאן, אם כי תקופה ארוכה יותר הייתה נבחרת אם נחקר פתרון הדלקת והפיברוזיס. למרות שהשיטה המתוארת כאן דורשת מומחיות כירורגית משמעותית, היא מציעה מספר יתרונות על פני מודלים אחרים של R-UUO. מריחת צינורות פלסטיק רכים על השופכן החסום מונעת הרחבת שופכן מוגזמת וזה מקל על המניפולציה והאנסטומוזה שלאחר מכן של השופכן. יתר על כן, במודל R-UUO המתואר השופכן מחולק ובכך מאפשר הסרת כל משקעי שתן ופסולת שנותרו. זה מאשר כי לומן השופכן הנותר אינו חסום ופטנט לפני אנסטומוזה לשלפוחית השתן. 
ניסויים המשלבים את מודלי ה-UUO הבלתי הפיכים וההפיכים יכולים לספק לחוקרים תובנה רבת עוצמה לגבי המנגנונים המולקולריים והתאיים של הפציעה והפתרון וההתחדשות שלאחר מכן. לפיכך, המודל של R-UUO המתואר כאן יהיה רלוונטי מאוד לחוקרים המעוניינים בעיצוב מחדש של רקמות פוסט-דלקתיות וכיצד ניתן לווסת זאת.

<table><tbody><tr><td>מספריים לניתוח קהה</td><td>כלי מדע עדינים</td><td>14072-10</td><td></td></tr><tr><td>מספריים אביביים &ndash; כלי מדע עדינים ישרים</td><td></td><td>15000-10</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים עם שיניים</td><td>כלי מדע עדינים</td><td>11021-12</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים זוויתיים x 2</td><td>כלים מדעיים עדינים</td><td>00649-11</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים ישרים</td><td>כלי מדע עדינים</td><td>00632-11</td><td></td></tr><tr><td>Colibri 3 ס"מ מפסק תיל</td><td>Fine Science</td><td>Tools 17000-03</td><td></td></tr><tr><td>מחזיק מחט Castroviejo עם מנעול</td><td>Fine Science</td><td>Tools 12565-14</td><td></td></tr><tr><td>מוליך קליפ פצע</td><td>Fine Science</td><td>Tools 12031-07</td><td></td></tr><tr><td>7 מ"מ קליפס פצע</td><td>Fine Science Tools</td><td>12032-07</td><td></td></tr><tr><td>מחזיק מחט מיקרו Castroviejo עם מנעול</td><td>Fine Science Tools</td><td>12060-01</td><td></td></tr><tr><td>OPMI מיקרוסקופ פיקו</td><td>קארל זייס</td><td>S100</td><td></td></tr><tr><td>חום כרית אלקטרונית</td><td>Cozee Comfort</td><td>n/a</td><td></td></tr><tr><td>6/O תפר קלוע משי</td><td>הרווארד מנגנון</td><td>72-3287</td><td></td></tr><tr><td>9/O תפר דפילון (פוליאמיד)</td><td>B-Braun</td><td>G1111434</td><td></td></tr><tr><td>5/O תפר משי קלוע</td><td>הרווארד מנגנון</td><td>51-7680</td><td></td></tr><tr><td>מחט משופעת רגילה, 1 אינץ', 21 גרם</td><td>בקטון, דיקינסון ושות</td>' <td>305175</td><td></td></tr><tr><td>קצה החלקה של מזרק 1 מ"ל</td><td>Becton, Dickinson and Company</td><td>300184</td><td></td></tr><tr><td>Wypall ספוגיות נייר</td><td>קימברלי-קלארק</td><td>L40</td><td>מעוקר (חיטוי)</td></tr><tr><td>ניצני צמר גפן</td><td>ג'ונסון אנד ג'ונסון</td><td>n/a</td><td>מעוקרים (חיטוי)</td></tr><tr><td>וילונות רגילים</td><td>Guardian</td><td>CB03</td><td>מעוקר (חיטוי)</td></tr> <tr>צינורות <td></td><td></td><td>גומי סיליקון בקיר רך</td><td>צינורות סיליקון - קוטר פנימי 1.0 מ"מ; קוטר חיצוני 2.0 מ"מ; עובי דופן 0.6 מ"מ</td></tr> <tr><td>(Lacri-Lube) פרפין לבן רך 57.3%, שמן מינרלי 42.5% ואלכוהול לנולין 0.2%</td> <td>אלרגן בע"מ</td><td>21956GB10X</td><td></td></tr> <tr><td>(Videne) פובידון-יוד 10%</td> <td>Ecolab Ltd</td><td>PL 04509/0041</td><td></td></tr> <tr><td>(Vetalar V) קטמין הידרוכלוריד</td><td>Pfizer Animal Health</td><td>Vm 42058/4165</td><td>תמיסה של 100 מ"ג/מ"ל</td></tr> <tr><td>(דומיטור) Medetomidine hydrochloride</td><td>Orion Pharma</td><td>Vm 06043/4003</td><td>1 מ"ג/מ"ל</td></tr> <tr><td>(וטרינטרי) Bupernorphine hydrochloride</td><td>Alsto Animal Health</td><td>Vm 00063/4002</td><td>0.3 מ"ג/מ"ל</td></tr> <tr><td>(אנטיסדאן) Atipamezole hydrochoride</td><td>Orion Pharma</td><td>Vm 06043/4004</td><td>5 מ"ג/מ"ל</td></tr> <tr><td>(Adept) 4% Icodextrin</td><td>תמיסת הפחתת הידבקות</td> <td>בקסטר</td><td></td></tr><tr><td>NaCl 0.9%</td><td>בקסטר</td><td>FKE1323</td><td></td></tr></tbody></table>

דגם murine של חסימת ureteric חד-צדדית בלתי הפיכה והפיכה

A Murine Model of Irreversible and Reversible Unilateral Ureteric Obstruction

חסימה של הכליה עלולה להשפיע על כליות טבעיות או מושתלות ולגרום לפגיעה בכליות ולצלקות. מוצג כאן מודל של נפרופתיה חסימתית הנגרמת על ידי חסימת שופכן חד צדדית (UUO), שיכולה להיות בלתי הפיכה (UUO) או הפיכה (R-UUO). במודל ה-UUO הבלתי הפיך, השופכן עלול להיות חסום לפרקי זמן משתנים על מנת לגרום לדלקת כלייתית חמורה יותר ויותר ולהצטלקות פיברוטית אינטרסטיציאלית. במודל R-UUO הפיך השופכן נחסם כדי לגרום להידרונפרוזיס, התרחבות צינורית ודלקת. לאחר פרק זמן מתאים, חסימת השופכן מתהפכת בניתוח על ידי אנסטומוזה של השופכן המנותק שנחסם בעבר לשלפוחית השתן על מנת לאפשר דקומפרסיה מוחלטת של הכליה ושיקום זרימת השתן לשלפוחית השתן. מודל ה-UUO הבלתי הפיך שימש לחקירת היבטים שונים של דלקת כליות והצטלקות, כולל פתוגנזה של מחלה ובדיקת טיפולים אנטי דלקתיים או אנטי פיברוטיים פוטנציאליים. המודל המאתגר יותר של R-UUO שימש כמה חוקרים ואכן מציע פוטנציאל מחקרי משמעותי מכיוון שהוא מאפשר לחקור תהליכים דלקתיים וחיסוניים ועיצוב מחדש של רקמות בכליה פצועה ומצולקת לאחר הסרת הגירוי הפוגע. כתוצאה מכך, מודל R-UUO מציע לחוקרים את ההזדמנות לחקור את הרזולוציה של דלקת בכליות יחד עם היבטים מרכזיים של תיקון רקמות. מודלים ניסיוניים אלה רלוונטיים למחלות אנושיות מכיוון שחולים מציגים לעתים קרובות חסימה של דרכי הכליה הדורשת דקומפרסיה ובדרך כלל נותרים עם פגיעה משמעותית בכליות שאין לה אפשרויות טיפול נוכחיות ועלולה להוביל בסופו של דבר לאי ספיקת כליות בשלב סופי.

המראה של השינויים בכליות במידה ניכר בעקבות חסימת ureteric והוא הופך להיות חיוור ומתוח למישוש עם זמן (איור 1). יש הרחבה הולכת וגדל של הפרוקסימלי שופכן לחסימה ואגן הכליה. הכליות הופכת יותר ויותר מכולה כמשך עליות נפרופתיה חסימתית עם חסימה ממושכת וכתוצאה מכך דילול ניכר של קורטקס ומדולה הכליות. בעקבות ביטול חסימת ureteric, הצבע של הכליה הופך כהה יותר עם עלייה בזרימת דם ופותר בצקת רקמה. הרחבה של אגן הכליה שופכן ושל הכליה שוככת למרות שהם עשויים להישאר מעט &#39;רחבים&#39;...

מודל העכברים של חסימת שופכן חד צדדית בלתי הפיכה (UUO) מוצג יחד עם המודל של UUO הפיך שבו חסימת השופכן מוקלה על ידי אנסטומוזה של השופכן המנותק לשלפוחית השתן. מודלים אלה מאפשרים לחקור דלקת כליות וצלקות כמו גם עיצוב מחדש של רקמות.

דגם Murine של חסימת Ureteric חד-צדדית בלתי הפיכה והפיכה

Obstruction of the kidney may affect native or transplanted kidneys and results in kidney injury and scarring. Presented here is a model of obstructive ...

סרטון זה מציג מודל עכבר של נוירופתיה חסימתית המושרה על ידי חסימה חד-צדדית של השופכן, אשר יכולה להיות בלתי הפיכה או הפיכה; מוצגים נתונים היסטולוגיים המדגישים את הפגיעה המבנית הנובעת מכך ואת ההחלמה שלה בעקבות ביטול החסימה. איור סכמתי זה ממחיש את השלבים העיקריים של מודל זה. כאן אנו רואים את הכליה השמאלית, השופכן ושלפוחית השתן.חסימה חד-צדדית סטנדרטית של השופכן מושגית על ידי קשירה (ליגציה) של השופכן. השופכן הופך לדיססטנדד (מורחב) והכליה הופכת להידרונפרוטית עם הזמן. כדי לבצע חסימה חד-צדדית הפיכה של השופכן, השופכן נקשר קרוב לשלפוחית והשופכן מוקף בצינור פלסטיק בעל דופן רכה, המוצג באפור, בנקודת החסימה.על מנת להגביל התרחבות מופרזת של השופכן, הכליה הופכת להידרונפרוטית עם הזמן, ולאחר מכן מופסק החסימה בנקודת זמן המתאימה למחקר. ביום השביעי בניסוי זה, מוסר צינור הדופן הרכה והשופכן נחתך מעט מעל גובה הקישורה. השופכן שאינו חסום עובר אנסטומוזה אל השלפוחית כדי לאפשר זרימת שתן, והכליה תdecompressed בדרך כלל לאורך מספר ימים.ניתן להשתמש במודל של חסימה חד-צדדית של השופכנית, המכונה UUO, כדי לחקור את התפתחות הפגיעה הרקמית והפיברוזיס בעקבות נרפופתיה חסימתית. ניתן להשתמש במודל של חסימה הפיכה של השופכנית, המכונה RUUO, כדי להשיג תובנה לגבי השבב הרקמי שעשוי לבוא בעקבות פגיעה. להלן הצגה של ניסוי טיפוסי המשלב את הנהלי ה-UUL וה-UUL שלנו.עכברים עוברים UUL ביום אפס ושבעה ימים לאחר מכן. העכברים מוכרסים על מנת להעריך את רמת הפגיעה, או שחסימת השופכאות מוסרת כדי לבצע RUUR. לאחר מכן, הכליות נשארות במצב של דה-קומפרסיה למשך שבעה ימים לפני קצירת הרקמה.ניתן להעריך את הרקמה לצורך בדיקת נזק מבני, חדירת מקרופגים, הצטברות מיופיברובלסטים ופיברוזיס. להלן מערך כירורגי טיפוסי. הפרוצדורה מבוצעת באמצעות מכשירים ומוצרים מתכלים שעברו סטריליזציה באוטוקלאב וממוקמים בתוך שדה כירורגי סטרילי.אם מנתחים מספר בעלי חיים, יש לעקר את המכשירים בין הפרוצדורות באמצעות מכשיר עיקור בחרוזות (bead sterilizer), או להשתמש בסט מכשירים חדש עבור כל פרוצדורה. המנתחים לובשים חלוק סטרילי, מסכה, כובע וכפפות. עכבר זכר מסוג C 57 black six בן שמונה שבועות הorדם באמצעות זריקה תוך-peritoneal של ketamine, hydrochloride ו-xylazine.עומק ההרדמה אושש על ידי היעדר תגובה ללחיצה על בהוז. אזור הניתוח גולח וחומא באמצעות תמיסת כלורהקסידין מדוללת. סיכוך לעיניים הוחל כדי למנוע התייבשות של הקרנייה.המשכך בופרנורפין הידרוכלוריד (buprenorphine hydrochloride) ה diberikan באמצעות הזרקה תת-עורית. הפה הונח על פד כירורגי מחומם וסטרילי, והגפיים קובעו באמצעות מספרי הפרדת רקמות; בוצעו לפרוטומיה בקו האמצע וחיתוך לאורך המרפק הליניארי חסר כלי דם. פרק זה יפרט כיצד לבצע UUOA בלתי הפיך; רטרקטור קליבר (calibra retractor) הוכנס לחיתוך והעכבר כוסה בסדירים סטריליים.מעתיקים את המעיים ומכסים אותם בגזה סטרילית לחה כדי לחשוף את השופכן השמאלי. חושפים ומבודדים את השופכן באמצעות פינצטה זוויתית כדי להשריות חסימה. קושרים את השופכן פעמיים באמצעות תפר משי שחור קלוע במידה 6-0.ניתן לחסום את השופכן בכל נקודה בין שלפוחית השתן לאגן הכlye. לאחר מכן, השופכן מחולק בין התפרים. הפרק הבא יפ detail כיצד לבצע חסימת שופכן שניתן להפיק ממנה.זהו השלב הראשון של RUUL. השופכן נחשף ומבודד באמצעות פינצטה זוויתית כדי להשרות חסימה. השופכן נקשר פעמיים באמצעות תפר משי שחור קלוע במידה 6.0.יש לחסום את השופכן קרוב לשלפוחית השתן כדי לשמר אורך שופכן מתאים עבור האנסטומוזה לשלפוחית. במהלך פרוצדורת ההיפוך, התפרים נגזרים, אך תפר אחד נשאר ארוך לשימוש מאוחר יותר, ונקצית של צינור פלסטיק רך באורך של כ-5 מילימטר נחתכת. לאחר מכן מבוצע חריץ לאורכו כך שניתן יהיה להרחיב אותו כדי לאפשר את הצמדתו סביב השופכן.על פתיל הפלסטיק בעל הדופן הרכה להיות בעל קוטר פנימי של 1 מילימטר וקוטר חיצוני של 2 מילימטרים. פתיל הפלסטיק בעל הדופן הרכה מונח לאחר מכן בזהירות סביב השופכן, תוך הבטחה שעם סגירתו, התפר הארוך יבלוט ממרכז החריץ. לאחר מכן, עובר תפר משי שזור שחור במידה 6-0 סביב הפתיל ונקשר.לאחר מכן, התפר הארוך הבולט ממרכז הפיתול משולב בקשירה הבאה. פעולה זו מבוצעת כדי לעגן את השופכן ואת הפיתול למקומם באופן מאובטח. הפיתול סביב השופכן ימנע התרחבות מופרזת של השופכן בסיום תהליכי ה-UUO וה-RUUO.מחזירים את המעיים למקומם, תופרים את הפריטונאום וסוגרים את העור באמצעות מהדקי מתכת. כמו כן, מריקים יוד על אזור הניתוח. ההרדמה מבוטלת באופן חלקי באמצעות הזרקה תת-עורית של aamaz.הידרוכלוריד ונוזלים מוחדרים על ידי זריקה תת-עורית של 1 mL של תמיסת מלח מחוממת. העכברים נמצאים במעקב עד להסכמתם, ולאחר מכן הם מועברים להתאוששות בתיבת חימום השמורה ב-29 °C למשך 24 שעות. הכליות הופכות להידרונפרוטיות בימים העוקבים לחסימת השופכן.ניתן להקריב את העכברים בנקודות זמן שונות במהלך שלב הפגיעה או לאחר ביטול החסימה. פרק זה יפרט כיצד לבצע את ביטול החסימה, המהווה את השלב השני של הליך ה-RUUO. העכבר הרדום מוכן כפי שתואר בעבר.מסירים את סביבכי העור המתכתיים ומבצעים לפרוטומיה. מסירים את תפרי הפריטונאום, ואת הפריטונאום ניתן לפתוח בעדינות באמצעות פינצטה עם שיניים לעכברים. לאחר מכן מכינים את העכבר וחושפים את השופכן השמאלי כפי שתואר קודם לכן באמצעות פינצטה זוויתית.השופכה ופיתול הפלסטיק בעל הדפנות הרכות מבודלים מהרקמות הסובבות. התפרים המחזיקים את פיתול הדופן הרכה במקומו נגזרים באמצעות הסכין הכירורגית ואז מוסרים. פיתול הפלסטיק בעל הדפנות הרכות מוסר בזהירות, ולאחר מכן נראית שופכה מורחבת.השופכן שברירי בנקודת החסימה ועשוי להישבר מעל החסימה, כפי שקרה בסרטון זה. עם זאת, התפרים שהוצבו קודם לכן בקרבה לשלפוחית במהלך השלב הראשון של ה-UUO יישארו שלמים, ובכך יובטח ששתן לא ידלוף מהשלפוחית אל החלל הפריטוניאלי. פיסת גזה סטרילית מוצבת מתחת לשופכן כדי לאסוף כל משקע שתן שינקז מהשופכן שהיה חסום קודם לכן.יש לאפשר לחלק הנותר של השופכן שפונה מחסימה להתנקז עד להפרשת שתן צלול, כדי להבטיח שחלל השופכן נקי משאריות. לאחר ניקוז השופכן ואגן הכליה, יש להניח תפר משי שזור שחור במידה 6-0 בקצה השופכן. תפר זה ישמש לסיוע באנסטומוזיס (חיבור) העתידי בין השופכן לשלפוחית השתן.לאחר מכן מסובבים את השופכן כך שיהיה קדמי למיקומו המקורי וישכב מעל הכליה. תפר בודד מסוג nano polyamide monofilament TAing מוצב בקצה השופכן. יש להקפיד שהתפר יישאר בשכבה השרירית ולא יחדור אל תוך הלומן של השופכן.התפר השמש משמש לעיגון השופכית בשלפוחית השתן; מאוחר יותר, כדי להכין את שלפוחית השתן לאנסטומוזה, יוצרים תעלה דרך שלפוחית השתן על ידי העברת מחט gauge 21 באופן אלכסוני דרך השלפוחית. לאחר מכן משתמשים במחט ה-gauge 21 כדי להנחות מחט עם עין דרך שלפוחית השתן. תפר ה-Nino שהוצב קודם לכן בשופכית מועבר דרך החתך הראשון בשלפוחית השתן והחוצה דרך דופן השלפוחית בסמיכות לנקודת הכניסה, כדי להעביר את השופכית דרך שלפוחית השתן.תפר ה-6-0 הארוך שהוצב בקצה השופכן מועבר דרך עין המחט. לאחר מכן, עין המחט נמשכת באיטיות דרך השלפוחית, תוך הבטחה שהשופכן נמשך גם הוא אל תוך השלפוחית. ברגע שהשופכן ממוקם בתוך השלפוחית, התפרים הננויים שהוצבו בשופכן ובדופן השלפוחית נקשרים כדי לעגן את השופכן במקומו ולהבטיח את קיבועו.תפר otax שני מונח. תפר זה עובר שוב דרך השופכן, תוך הבטחה שיישאר בתוך המעטפת השרירית, לאחר מכן דרך החתך בשלפוחית השתן ומחוץ לדופן השלפוחית. לאחר מכן הוא נקשר באופן דומה.תפר nano tax שלישי ממוקם גם בחלק האחורי של השלפוחית. לאחר מכן, משתמשים בגבם של מספריים פתוחים כדי לדחוף מעט את דופן השלפוחית לאחור כדי לחשוף את אורך השופכן. לאחר מכן, השופכן מחולק מעל תפר הריאה.לאחר מכן, השתול השתן הצבוע יסוג לתוך השלפוחית בזווית. נעשה שימוש בארבעה קצוות כדי להבטיח שהשתול השתן נסוג במלואו אל תוך השלפוחית. לבסוף, פצע היציאה בשלפוחית נסגר באמצעות תפר פוליאמיד מונופילמנט במידה 9-0; לפני הסגירה, יש לוודא שהשתול השתן מעוגן באופן חזק בתוך השלפוחית.סגור את הפריטונאום והעור כפי שתואר בעבר, והענק טיפול לאחר הניתוח כפי שתואר בעבר. במחקר זה, כל העכברים עם UUO נותרו להתאושש במשך שבעה ימים כדי לאפשר לכליה ששוחררה מחסימה לעבור דה-קומפרסיה, אם כי ניתן לבחון נקודות זמן מוקדמות או מאוחרות יותר. להלן נתונים הממחישים את המראה של כליות חסומות וכליות ששוחררו מחסימה, ואת הפגיעה הנובעת מכך.איור זה ממחיש את המראה של כליות, אגן כליות ושופכנים במצב של U-U-L-U-U-O בהשוואה לכליה טבעית. הכליה במצב UUO, שהייתה חסומה במשך שבעה ימים, נראית כסובלת מהידרונפרוזיס ובעלת צבע חיוור. לאחר שבעה ימים של ביטול החסימה, הכליה במצב RUO הפכה לבלתי לחוצה, כאשר אגן הכליות והשופכן חזרו לגודל ולצבע הדומים לאלו של הכליה הטבעית.שימו לב כי השופכן ב-IUO קצר יותר מהשופכנים ב-UUO ובכליות טבעיות, וזאת בשל טכניקת הפירוק והאנסטומוזה לשלפוחית השתן. איור זה מציג תמונות מייצגות של חתכי כליה שנצבעו ב-H and E מכליות טבעיות, UUO ו-RUUO. האינטרסטיציום הבריא של הכליה התקינה מורכב מחתכי רוחב של תעלות בריאות ודחוסות.מספר צינוריות, המסומנות בחצים השחורים, מראות התרחבות דרמטית ביום השביעי. בעקבות QUL בצינור הביקורת, ההתרחבות פחתה באופן ניכר שבעה ימים לאחר ביטול ה-UUL. המודל העכברי של נפתופתיה חסימתית המוצג כאן משרה על ידי חסימה חד-צדדית של השופכן, שיכולה להיות בלתי הפיכה או הפיכה.המודל ההפיך המפורט כאן מאפשר את הסרת החסימה בשופכן ואת ביצוע אנסטומוזיס של השופכן לשלפוחית השתן כדי להחזיר באופן מלא את זרימת השתן. דה-קומפרסיה של הכליה הנובעת מכך מאפשרת לחקור עיצוב מחדש של הרקמה (tissue remodeling) בניסויי פוסט-פגיעה. שילוב של מודלים של נפרופתיה חסימתית בלתי הפיכה והפיכה מספק לחוקרים תובנה רבת עוצמה לגבי תהליכי מחלה וכיצד התערבויות טיפוליות משפיעות הן על התפתחות הפגיעה והן על עיצוב הרקמה העוקב.

a-murine-model-irreversible-reversible-unilateral-ureteric

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

סרטון זה מדגים את ההליך ליצירת מודל עכבר חסימת שופכה חד צדדי. ההליך כולל חיתוך אחד השופכנים של העכבר כדי לחסום את זרימת השתן.

חסימת שופכה חד צדדית מודל מורין: הליך כירורגי לחסימת זרימת השתן מכליה במודלים עכבריים

אנו מתארים שיטה להערכת ביטוי microRNA בכליות של עכברים עם חסימה חד צדדית שופכה (UUO) על ידי תגובת שרשרת פולימראז תמלול הפוך כמותי. פרוטוקול זה מתאים לחקר פרופילי ביטוי microRNA של כליה בעכברים עם UUO ובהקשר של תנאים פתולוגיים אחרים.

הערכת PCR בזמן אמת כמותית של ביטויי microRNA בכליות עכבר עם חסימה חד צדדית שופך

כאן אנו מציגים פרוטוקול המשתמש במיקרוסקופיה של 2 פוטונים בחולדות Wistar Fromter במינכן עם גלומרולי פני השטח כדי לכמת את ההשפעות של חסימת שופכה ממושכת על הדינמיקה והתפקוד של גלומרולרי.

שימוש במיקרוסקופיה של 2-פוטונים כדי לכמת את ההשפעות של חסימת שופכה חד-צדדית כרונית על תהליכים גלומרולריים

הפרוטוקול הנוכחי מתאר מודל צעד אחר צעד וניתן לשחזור של חסימת שופכן חד צדדית.

מודל עכברי לא בוגר של חסימת שופכה חד צדדית הפיכה

פרוטוקול זה מתאר שיטה לגרימת חסימת שופכן חד צדדית (UUO) בעכברים כדי לחקור את התקדמות פיברוזיס ברקמות בנפרופתיה חסימתית. הוא כולל הליכים כירורגיים, טיפול לאחר ניתוח ושיטות להערכת פיברוזיס.

מודל חסימת שופכה חד צדדית לחקירת פיברוזיס אינטרסטיציאלי בכליות

מאמר זה מספק הוראות מפורטות כדי לאפשר לחוקרים לבצע חסימת שופכן חד צדדית הפיכה בעכברים באמצעות מודל סטנדרטי המאפשר ניתוח של התוצאות המבניות והתפקודיות ארוכות הטווח לאחר היפוך חסימת שופכן ממושכת.

מודל עכבר להערכת התוצאות המבניות והתפקודיות ארוכות הטווח לאחר היפוך של חסימה חד צדדית ממושכת בשופכן

Cholestasis הוא מצב קליני נתקל בדרך כלל על ידי שני מנתחים גסטרואנטרולוגים. יצירה של מודל cholestatic הפיך עכברוש יכול להיות מאתגר לאור גודל קטן האנטומיה hepatopancreatobiliary ייחודי בחולדות. מאמר זה מדגים וידאו ויצירת מודל cholestatic הפיך.

יצירתו של מודל הפיך עכברוש Cholestatic

באופן אמין לשחזור לייצר פגיעה בחוט השדרה הצווארי חד צדדית באמצעות impactor אופק אינסופי מתואר. השיטה מנצלת את מסגרת שנועדה מותאם אישית לצבוט לייצב את עמוד השדרה. הליך סטנדרטי ופגיעה פרמטרים ביומכנית לגרום פציעות די מתמשכת.

דגם Contusive של פגיעה בחוט השדרה באמצעות צוואר הרחם חד צדדית Impactor אופק אינסופי

טראומה ניתוחית גורם לתגובה דלקתית. ציטוקינים ligands אנדוגניים ידועים לווסת את גודל האוטם בשריר הלב בעקבות איסכמיה ו reperfusion. אנו מציגים שונה סגור החזה מודל של איסכמיה reperfusion Murine באמצעות משקולות תלויות כדי למזער את ההשפעות של פתיחת בית החזה.

דגם Murine סגור החזה של איסכמיה של שריר הלב reperfusion

מודל עכברי של ריפוי פצע עורי שניתן להשתמש כדי להעריך את התרכובות טיפוליות בהגדרות פיסיולוגיות וpathophysiological.

מודל עכברי של ריפוי פצע

חקור מודל עכברים לחסימת שופרת חד-צדדית הפיכה ובלתי הפיכה לחקר פיזיולוגיה כליתית. שיטה זו מאפשרת ניתוח היסטולוגי של פציעה והתאוששות רקמתית בכליות.

דגם Murine של חסימת Ureteric חד-צדדית בלתי הפיכה והפיכה

גלה סרטונים נוספים