הסרת יסודות קורט ידי Cupric תחמוצת חלקיקים מאורניום באתר שחזור Bleed מים והשפעתה על כדאיויות תא

המטרה הכוללת של הליך זה היא לבחון את הטיפול בננו-חלקיקי תחמוצת נחושתיות כתהליך הסרת מזהמים בייצור, דימום מים, ולהעריך את הציטוטוקסיות שלו באמצעות תאים אנושיים מתורבתים. זה מושג על ידי טיפול ראשון במי דימום ייצור עם ננו-חלקיקי תחמוצת נחושתית. שינויי הריכוז של אלמנטים בודדים מוערכים לפני ואחרי הטיפול.

לאחר מכן, אמצעי תרבית תאים מרוכז מדולל במי דימום ייצור לא מטופלים או בתחמוצת נחושתית. ייצור שטופל בננו-חלקיקים מדמם מים בנוסף לתוספי תרבית תאים סטנדרטיים להכנת מדיית הבדיקה דימום ייצור לא מטופל, מדיה מים ותחמוצת נחושתית, דימום ייצור שטופל בננו-חלקיקים. לאחר מכן מורחים מדיה של מים על תאי כליה וכבד אנושיים ותרביות, והכדאיות נמדדת במשך שבעה ימים.

בסופו של דבר, ה-M-T-T-S-A מדגים את הוצאת ארסן, סלניום, ונדיום ואורניום מהייצור. דימום מים על ידי ננו-חלקיקי תחמוצת נחושתיות קשור לעלייה בכדאיות של תאי כליה וכבד אנושיים. זהו המחקר הראשון שחקר את ההסרה של מזהמים ספציפיים באמצעות ננו-חלקיקי תחמוצת קופר תוך הערכת שינויים בציטוטוקסיות הקשורה להסרה בפורמט של תרבית תאים.

היתרון העיקרי של טכניקה זו על פני השיטות הקיימות הוא שהדגימה הסביבתית כפי שהיא קיימת בטבע, נבדקת לצד הננו-חלקיקים בפורמט הידרו פוט זול. ניתן ליישם ננו-חלקיקי תחמוצת נחושתיות שנבדקו במחקר זה על מערכות מי תהום אחרות כגון מי תהום ביתיים הקשורים לקהילות קטנות. התחדשות ננו-חלקיקי תחמוצת נחושתיות יוצרת פחות פסולת וממזערת את בעיות הפסולת לסילוק.

כדי להתחיל בהליך זה, הכינו ננו-חלקיקי תחמוצת נחושתיות ואספו את מי דימום הייצור או PBW כמתואר בפרוטוקול הטקסט לטיפול ב-PBW עם ננו-חלקיקי תחמוצת נחושתיות ב-50 מיליגרם של הננו-חלקיקים המוכנים לצינור חרוטי של 50 מיליליטר, ואחריו 50 מיליליטר של PBW אוטמים את הצינור ומגיבים במשך 30 דקות על שייקר מסלולי ספסל בצנטריפוגה של 250 סל"ד, צינורות הדגימה ב-250 פעמים G למשך 30 דקות משנים את מהירות הצנטריפוגה והזמן בהתאם לננו-חלקיק כדי להבטיח שהננו-חלקיקים הופכים קומפקטיים בצינור הצנטריפוגה לאחר הצנטריפוגה, מסננים את הסופרנטנט באמצעות מזרק של 0.45 מיקרון. לאחר מכן נשלחות דגימות סינון לניתוח יסודות להכנת אמצעי תרבית תאים. ראשית, השתמש במי RO מהמעבדה.

אלה כוללים PBW 100%75%50% ו-25% PBW או ננו-חלקיקים תחמוצת CIC לא מטופלים PBW Next ב-25 מיליליטר של 10 X-E-M-E-M מרוכזים עד 190 מיליליטר של ה-ro. כמו גם כל אחד מריכוזי ה-PBW המטופלים והלא מטופלים. התאם את ה-pH של כל תמיסה ל-7.4 עם נתרן הידרוקסיד או חומצה הידרוכלורית.

לאחר מכן השלם כל ריכוז של PBW פלוס מדיה לא מטופלת ומטופלת, כמו גם את מדיית בקרת ה-RO עם רכיבים סטנדרטיים המפורטים בפרוטוקול הטקסט. לאחר כל ריכוז של PBW לא מטופל ולא מטופל בתוספת מדיה כמו גם מים לבקרת RO בתוספת מדיה, האוסמולליות מותאמת. טיפה של כל תמיסה מוחלת על דיסק נייר חופשי מומס והדיסק מונח לתוך OSM לחץ אדים.

לאחר מכן מותאמת האוסמולליות בין 290 ל-310 מילי-אוסמול לק"ג על ידי הוספת מי RO. לבסוף, סנן כל תמיסה באמצעות יחידת מסנן ואקום של 22 מיקרון נקודת אפס ואחסן בארבע מעלות צלזיוס. הכינו תרבית של תאי כליה עובריים אנושיים ותאי קרצינומה הפטו-תאית אנושית יומיים-שלושה לפני שהם אמורים להיות מצופים.

בשנת 96. ובכן צלחות ליצרנים והוראות לאחר הוצאת התאים מכלי התרבות שלהם, שימוש בצנטריפוגה טריפסין ב 1000 פעמים G למשך חמש דקות ושפכו את הטריפסין. הוסף חמישה מיליליטר של מי מלח חוצץ פוספט או PBS וערבב את התאים לקבלת תמיסת תא בודד.

לאחר מכן יש למרוח 20 מיקרוליטר מתמיסת התא הבודד על ציטומטר המו כדי לקבל ספירת תאים למיליליטר תמיסה לאחר צנטריפוגה. שוב, כמו קודם והסילוק, ה-PBS נהג לשטוף את התאים בכמות המתאימה של X-E-M-E-M אחד כדי להתאים את ריכוז התאים ל-500 תאים ל-100 מיקרוליטר לבאר. לאחר מכן, מלאו את הבארות ההיקפיות של הצלחת ב -200 מיקרוליטר PBS כדי לשלוט באידוי.

הושיבו את התאים בצפיפות של 500 תאים לבאר, והוסיפו 100 מיקרוליטר לכל באר למעט הבארות ההיקפיות. דגרו על התאים למשך 24 שעות בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס, מה שמאפשר להם להתאושש לפני ביצוע קו הבסיס. קריאות MTT של צפיפות התאים.

בצע קריאות MTT בסיסיות של צפיפות התאים על ידי הסרת אמצעי הזריעה מהעמודה הראשונה והוספת 100 מיקרוליטר MTT לבארות למשך שעה. אחרי שעה. הסר את ה-MTT והוסף 100 מיקרוליטר של דימתיל סולפוקסיד כדי להמיס את ה-MTT Informason המיוצר על ידי תאים ברי קיימא.

לאחר מכן קרא את הצפיפות האופטית של העמודה הראשונה באורך גל ספיגה של 570 ננומטר. כדי לקבל קריאה בסיסית, הוספת פתרון אחד לכל צלחת. החלף את אמצעי הזריעה ב-100 מיקרוליטר של אמצעי בקרה X-E-M-E-M RO אחד וכן כל אחד מריכוזי המדיה המטופלים והלא מטופלים PPW.

לדגור את התאים בריכוזי הבדיקה שלהם או בתמיסות בקרה במשך שבעה ימים בסך הכל בכל יום. לאחר קריאת ה-MTT הבסיסית, הסר את פתרונות הבקרה והבדיקה מהעמודה הבאה של הצלחת המתאימה שלהם וחזור על פרוטוקול MTT. חזור על הפרוטוקול כל יום במשך שבעה ימים בממוצע.

תוצאות ה-OD היו כל שורה ודיווחו כנגד הזמן כדי ליצור עקומת צמיחה של שבעה ימים כדי להעריך את ההשפעה של כלציה נחושת על כדאיות התאים ותחמוצת הקופרית. PBW שטופל בננו-חלקיקים בתוספת מדיה עוקב אחר אותו נוהל למעט ב-100 מיקרו-מולרי d פניצילין כדי לשלוט ולבדוק תמיסות לפני הוספת התמיסות לצלחות המתאימות להן. כשלב אחרון, בצע ניתוח נתונים באמצעות תוכנת גרפים מדעית, טיפול בננו-חלקיקי תחמוצת נחושתיות הסיר ארסן, סלניום, אורניום ונדיום מהתמיינות PBW.

תוצאות המודלים תומכות בתוצאות האנליטיות המגינות כי ב-PBW 99% של ארסן, 94% של סלניום ו-99% של ונדיום קיימים כמינים שליליים המסוגלים להיספג לננו-חלקיקי תחמוצת נחושתית. עם זאת, רק 35.5% ממיני האורניום המומס הם בעלי מטען שלילי, מה שיגביל את ספיגת האורניום לתחמוצת נחושתית. כדאיות ננו-חלקיקים נפגעה באופן תלוי ריכוז בתאים שגדלו ב-PBW פלוס מדיה לא מטופלת, בעוד שטיפול בננו-חלקיקי תחמוצת נחושתיות שיפר את הכדאיות התאית בשני קווי התאים.

לעזאזל והפ צמיחה תאית ביום החמישי באמצעי בקרה מראים תאים מחוברים היטב בריאים למראה. לעומת זאת, לעזאזל ותאים גדלו ללא טיפול. PBW פלוס מדיה פחות מתכנסת מוצגת, מנותקת ונראית מעוגלת או לא בריאה.

יתר על כן, לעזאזל, והוא תאים שגדלו בתחמוצת הקפיקה. PBW שטופל בננו-חלקיקים בתוספת מדיה הראה שיפור בשטף, התקשרות ובריאות בהשוואה לתאים שגדלו ב-PBW לא מטופל בתוספת מדיה לאחר הליך זה. ניתן להשתמש בשיטות אחרות לבדיקת רעילות כגון זרימה ציטומטרית כדי לענות על שאלות נוספות לגבי שינויים מכניסטיים, ציטוטוקסיות של תערובות לפני ואחרי הטיפול.

לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להיות בעל הבנה טובה של בדיקת היעילות של חלקיקים קופריקיים וננו-חלקיקים בהסרת מים, מזהמים והשפעותיהם על תרבית תאים. עם זאת, חשוב לזכור לעקוב אחר ריכוזי הנחושת במים מטופלים.