Name: כל הזגוגיות ההומור Dissection לניתוח Vitreodynamic (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-05-24T14:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 41 s
Description: למדו טכניקת ניתוח לבידוד הומור הזגוגי השלם מעיני חזיר לאחר המוות. שיטה זו שומרת על המבנה האנטומי ומאפשרת חקר תכונות פיזיקליות וביומכניות של הזגוגית.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

המחברים מכירים במקורות המימון הבאים: קרן וויטייר, קרן הרינגטון, המכונים הלאומיים לבריאות ומחקר למניעת עיוורון.

התקבלו כל עיני enucleated מבית שחיטה וכל הניסויים בוצעו בהתאם לחוקי בטיחות ביולוגית מוסדיים. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Secure עין enucleated מטה על משטח. לעשות זאת על ידי הצבת סיכות רקמה דרך הרקמה העודפת סביב העין ואבטחה אותו לתוך לוח קלקר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנתח ולנתק לחמית perilimbal מהעין. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שימוש במלקחי קנס (0.3 מלקחיים) וmicroscissors (מספריים Westcott) ללחתוך לחמית בימבוס ובוטות לנתח אותו בלובן העין. חותך את לחמית לאורך ימבוס כנתיחה הבוטה ממשיכה לאפשר נתיחה נוספת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר לחמית כל הדרך סביב העין (360 מעלות) לחשוף כמה שלובן עין ככל האפשר. הערה: זה מועיל להשאיר כמות קטנה של לחמית כדי להקל להתקבע עין עם הסיכות כירורגי או מלקחיים בהמשך ההליך. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צור דש scleral עובי מלא לאורך אחדצד של העין (להב סכין מנתחים 69). <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפוך מקביל חתך scleral ~ 5 מ&quot;מ לימבוס והאחורי 3 מ&quot;מ לימבוס בעדינות על ידי חיתוך ללובן העין עם אזמל (להב סכין מנתחים 11) עד דמית העין כהה פיגמנט גלוי. היזהר שלא לחתוך את דמית העין עצמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זהירות לנתח לאורך המטוס בין לובן העין ודמה העין, או במספריים (באמצעות נתיחה בוטה) או עם האזמל, עד שאפשר להגדיל את המרחב הפוטנציאלי בין רקמות אלה על ידי לחיצה על דמית העין בעדינות פנימה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעשות עוד חתך scleral בניצב לחתך scleral הראשון עם microscissors החד, יצירת חתך בצורת אות T. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר מכן להמשיך לנתח בצורה בוטה בצורה היקפית להסרת רקמת scleral מדמה העין הבסיסית ודחף בעדינות את דמית העין מהלובן העין כאמור לעיל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדלת דש scleral לפי צורך. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעדינות בוטה לנתח דמית העין מלובן העיןלאורך כל התהליך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדלת הדש עד החתך שנעשה בניצב לימבוס מגיע עצב הראייה והחתך שנעשה במקביל לימבוס הוא לפחות שליש מהיקף העין (45 מעלות). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש בדש scleral כמקור למינוף למניפולציה של העין במהלך נתיחה בוטה. נגד כוח המשיכה על הדש עושה את זה יותר קל לנתיחה בוטה. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור על השלב הקודם על דש scleral האחר. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחתוך את דשי scleral לחשוף שטח גדול של דמית העין. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> המשך החתך שנעשה בשלב 3 סביב ההיקף של העין (360 מעלות). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להסיר את הרקמה דמית העין-רשתית שנותרה. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באזור החשוף, להשתמש כותנה-טיפ לצחצח בעדינות את הרקמה דמית העין-רשתית שנותרה. לחלופין, בעדינות לתפוס את הרקמה עם מלקחיים ולקלף אותו מהגוף הזגוגי הבסיסי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם יש צורך לבצע חתך לתוך דמית העין רחarting מעצב הראייה. אז לקלף בעדינות דמית העין לחשוף את הרשתית וזגוגית קליפה. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> המשך בוטה לנתח דמית העין מלובן העין ולאחר מכן לקלף את דמית העין כדי לקבל את כל הזגוגית, ללא פגע. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש בשפת scleral המצורפת לקרנית למצב את כל הזגוגית במיקום רצוי. בשלב זה, הזגוגית מחוברת ללובן העין והעדשה הקדמי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בוטה לנתח הזגוגית מהחלק הפנימי של לובן העין, סביב העדשה, הסרת כל לובן העין. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש בכלי קהה כדי לגרוף את העדשה מהזגוגית אם יהיה בכך צורך. השתמש במדגם לניסויי vitreodynamic שונים. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח מדגם בכוס זכוכית עם פני שטח ידוע החשוף לאוויר. הנח בדיקה רגישה חמצן בקצה של המדגם. השתמש מיקרו-מניפולטור כדי להזיז את החללית למרחק ידוע (r) למדגם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש חוק הדיפוזיה של הפיק לקבל את משוואת דיפוזיה התיאורטית. עם דהת&quot;א נאספה בשלב 10.1, להשיג הטווח מקדם דיפוזיה הניסיונית / תגובה וכו &#39; </li></ol></li></ol>

<ol><li>Siggers, J. H., Ethier, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluid+Mechanics+of+the+Eye%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Fluid+Mechanics%22%5BJournal%5D)">Fluid Mechanics of the Eye.</a> Annual Review of Fluid Mechanics. 44 (1), 347-372 (2012).</li>
<li>Sebag, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-related+changes+in+human+vitreous+structure%5BTitle%5D)+AND+%22Graefes+Arch+Clin+Exp+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Age-related changes in human vitreous structure.</a> Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol. 225 (2), 89-93 (1987).</li>
<li>Grignolo, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fibrous+components+of+the+vitreous+body%5BTitle%5D)+AND+%22AMA+Arch+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Fibrous components of the vitreous body.</a> AMA Arch Ophthalmol. 47 (6), 760-774 (1952).</li>
<li>Gisladottir, S., Loftsson, T., Stefansson, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diffusion+characteristics+of+vitreous+humour+and+saline+solution+follow+the+Stokes+Einstein+equation%5BTitle%5D)+AND+%22G+Graefes+Arch+Clin+Exp+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Diffusion characteristics of vitreous humour and saline solution follow the Stokes Einstein equation.</a> G Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol. 247 (12), 1677-1684 (2009).</li>
<li>Xu, J., Heys, J. J., Barocas, V. H., Randolph, T. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Permeability+and+diffusion+in+vitreous+humor%3A+implications+for+drug+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Pharm+Res%22%5BJournal%5D)">Permeability and diffusion in vitreous humor: implications for drug delivery.</a> Pharm Res. 17 (6), 664-669 (2000).</li>
<li>Watts, F., Tan, L. E., Wilson, C. G., Girkin, J. M., Tassieri, M., Wright, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Investigating+the+micro-rheology+of+the+vitreous+humor+using+an+optically+trapped+local+probe%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Optics%22%5BJournal%5D)">Investigating the micro-rheology of the vitreous humor using an optically trapped local probe.</a> Journal of Optics. 16 (1), 015301(2014).</li>
<li>Skeie, J. M., Mahajan, V. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dissection+of+human+vitreous+body+elements+for+proteomic+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Dissection of human vitreous body elements for proteomic analysis.</a> J Vis Exp. (47), e2455(2011).</li>
<li>Abdallah, W., Ameri, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vitreal+oxygenation+in+retinal+ischemia+reperfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Vitreal oxygenation in retinal ischemia reperfusion.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 52 (2), 1035-1042 (2011).</li>
<li>Goldenberg, D., Trese, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacologic+vitreodynamics%3A+what+is+it%3F+Why+is+it+important%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Review+of+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Pharmacologic vitreodynamics: what is it? Why is it important.</a> Expert Review of Ophthalmology. 3 (3), 273-277 (2008).</li>
<li>Choonara, Y. E., Pillay, V., Danckwerts, M. P., Carmichael, T. R., du Toit, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+implantable+intravitreal+drug+delivery+technologies+for+the+treatment+of+posterior+segment+eye+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharm+Sci%22%5BJournal%5D)">A review of implantable intravitreal drug delivery technologies for the treatment of posterior segment eye diseases.</a> J Pharm Sci. 99 (5), 2219-2239 (2010).</li>
<li>Balachandran, R. K., Barocas, V. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Computer+modeling+of+drug+delivery+to+the+posterior+eye%3A+effect+of+active+transport+and+loss+to+choroidal+blood+flow%5BTitle%5D)+AND+%22Pharm+Res%22%5BJournal%5D)">Computer modeling of drug delivery to the posterior eye: effect of active transport and loss to choroidal blood flow.</a> Pharm Res. 25 (11), 2685-2696 (2008).</li>
<li>Smith, C. a, Newson, T. a, et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+framework+for+modeling+ocular+drug+transport+and+flow+through+the+eye+using+micro-CT%5BTitle%5D)+AND+%22Phys+Med+Biol%22%5BJournal%5D)">A framework for modeling ocular drug transport and flow through the eye using micro-CT.</a> Phys Med Biol. 57 (19), 6295-6307 (2012).</li>
<li>Quiram, P. A., Leverenz, V. R., Baker, R. M., Dang, L., Giblin, F. J., Trese, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microplasmin-induced+posterior+vitreous+detachment+affects+vitreous+oxygen+levels%5BTitle%5D)+AND+%22Retina%22%5BJournal%5D)">Microplasmin-induced posterior vitreous detachment affects vitreous oxygen levels.</a> Retina. 27 (8), 1090-1096 (2007).</li>
<li>Shui, Y., Holekamp, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+gel+state+of+the+vitreous+and+ascorbate-dependent+oxygen+consumption%3A+relationship+to+the+etiology+of+nuclear+cataracts%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">The gel state of the vitreous and ascorbate-dependent oxygen consumption: relationship to the etiology of nuclear cataracts.</a> Arch Ophthalmol. 127 (4), 475-482 (2009).</li>
<li>Burk, S. E., Da Mata, A. P., Snyder, M. E., Schneider, S., Osher, R. H., Cionni, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visualizing+vitreous+using+kenalog+suspension%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cataract+Refract+Surg%22%5BJournal%5D)">Visualizing vitreous using kenalog suspension.</a> J Cataract Refract Surg. 29 (4), 645-651 (2003).</li>
<li>Spaide, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visualization+of+the+Posterior+Vitreous+with+Dynamic+Focusing+and+Windowed+Averaging+Swept+Source+Optical+Coherence+Tomography%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Visualization of the Posterior Vitreous with Dynamic Focusing and Windowed Averaging Swept Source Optical Coherence Tomography.</a> Am J Ophthalmol. S0002-9394 (14), 00537-00536 (2014).</li>
<li>Domalpally, A., Gangaputra, S., Danis, R. P. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aDomalpally%2C+A+%22Diseases+of+the+Vitreo-Macular+Interface%22">Diseases of the Vitreo-Macular Interface</a>. 21, Springer. Berlin Heidelberg: Berlin, Heidelberg. 21-27 (2014).</li>
<li>Stocchino, R., Repetto, A., Cafferata, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+investigation+of+vitreous+humour+motion+within+a+human+eye+model%5BTitle%5D)+AND+%22Phys+Med+Biol%22%5BJournal%5D)">Experimental investigation of vitreous humour motion within a human eye model.</a> Phys Med Biol. 50 (19), 4729-4743 (2005).</li>
</ol>

למחברים אין מה לחשוף.

ישנם שני שלבים קריטיים שחייבות להתבצע בזהירות במהלך נתיחת זגוגית. שלב 3, יצירת דש scleral עובי מלא, הוא חיוני לכל הניתוח. יש להקפיד לא לחתוך לתוך דמית העין בעת ​​יצירת דש scleral בעובי מלא. השלב הקריטי האחר לנתח משם בלובן העין מדמה העין. צעד זה חייב להיעשות בזהירות כדי למנוע יצירת חורים מרובים בדמה העין שמן הזגוגית יכולה לשפוך החוצה. יש דרך לשנות את הפרוטוקול ועדיין לנתח הומור זגוגית כל פגע. שלב 6 יכול להתעכב עד ניתן להסיר צעד 8. דמית העין בסוף אחרי רקמת הזגוגית ממוקמת במיקום הרצו...

מטרתה של שיטה זו היא פירוט טכניקה לבודד את הגוף כולו, בשלמותה זגוגי, עם הליבה והקליפה שלמה זגוגי, מעין גופה, למטרות ניתוח vitreodynamic. כמו בתחום הפיסיולוגיה זגוגית גדל, חוקרים רב-תחומיים, כגון חוקרי מכניקת נוזלים, חוקרים את התכונות הפיזיות וביו-מכאניות של 1 הזגוגית. לשם כך, חיוני לפרטים טכניקה לבודד את כולה, בשלמות גוף הזגוגי כדי לסייע לחוקרים רב-תחומיים. סבג ואח &#39;. 2 ואחרים 3 ביצעו ניתוחי זגוגית כל אלגנטיים בעיני גופת אדם והראו איורים של התוצאות. עם זאת, הטכניקה המשמשת לא תיארה בפירוט ולא מומחים לא יהיה מסוגל לשכפל את השיטה באופן עצמאי. מחקרים אחרים שנקטפו מזגוגית עיני גופה באמצעות שיטות פשוטות כגון שאיפה או נתיחה חלקית,שניהם לא לגרום לגוף כולו, בשלמות זגוגית. Gisladottis et al. 4 ושו et al. 5 לחקור חדירות בהומור זגוגית שנקטפו מעיני גווייה. עם זאת, מאחר שלא שיטה של ​​מיצוי זגוגית תוארה, הונח כי הם להישאף הומור הזגוגית עם מזרק. ווטס et al. 6 הלך צעד אחד קדימה על ידי תיאור שיטה של בידוד הומור זגוגית ארנב עם טכניקה ניתוחית. עם זאת, שיטה זו גורמת לבידוד של רק ליבת הזגוגית ולא קליפת זגוגי. Skeie et al. 7 מאוחר יותר מאורגנים הזגוגית ל 4 אזורים ייחודיים ואלגנטיות תיארו שיטה לנתח את כל חלק לניתוח. טכניקה זו עם זאת, לא לגרום לזגוגית שלמה בכללותו. הטכניקה הנוכחית פותחה כדי להקל על ניסויים ביו-פיסיקליים שכיום מבוצעים רק בעיני גווייה. שיטות קודמות, כפי שתוארובוב, מוגבל בגלל) אף אחד 1 לבודד את כל הגוף הזגוגי לחלוטין, ליבת זגוגית 2) שנקטפו וקליפה הן הומוגני, 3) המבנה האנטומי זגוגית לא נשמר, או 4) טכניקות לנתיחה אינן מפורטות במידה מספקת לשכפול על ידי חוקרים בתחומים אחרים . בנוסף, בשל האטימות של לובן העין ודמיתי עין, הדמיה של הגוף הזגוגי מוגבל בגלגל העין בשלמותה. זה מגביל את הדיוק והיתכנות של מדידות שניתן לעשות בתוך כל עין. בנוסף, המבנים אנטומיים המקיפים את הזגוגית יכולים לבלבל את המחקר של מאפיינים ביוכימיים ופיסיים של הזגוגית. בשנים האחרונות, את גופתו של מדע הזגוגית גדלה מאוד ויש סיבה להאמין שיש לו את כל הגוף הזגוגי מאפיינים שונים מהחלקים הבודדים שלה. יש התעניינות גוברת בחוקרים את התכונות פיזיות, ביו-מכאניות, וכימיות של הזגוגית לresearc vitreodynamicsh, שבה יש יישומים ברפואה קלינית כגון משלוח סמים, חמצון זגוגית 8 וvitrectomy. vitreodynamics התרופתי, אשר עושה שימוש בסוכנים תרופתיים כדי לתפעל את הזגוגית, יכול לשמש כדי לשפר את תוצאות vitrectomy 9. מאפיינים ביו-מכאניים המשמשים למודל זרימת נוזל זגוגית, אשר יכול לשמש כדי לשפר את טכנולוגיות משלוח סמים זגוגית 10-12. תכונות פיסיקליות של מגזרים שונים של הזגוגית הן קריטיות להבנת תחבורת חמצן vitreo-רשתית 13. טכניקה לנתיחה זגוגית המוצעת יכולה לשמש כדי לחקור את המאפיינים שונים של הומור הזגוגית שלם. זה מאפשר ניסויי ספסל העליון להיעשות על גוף כולו, בשלמות זגוגית עם הדמיה טובה יותר. לסיכום, שיטות הנוכחיות למחקר של הזגוגית הם או לא תיארו כראוי, או לגרום לבידוד שלם הליבה וקליפת זגוגי. לכן, יש צורך לבצע דוארxperiments במודל העין שקוף תוך שמירה על האנטומיה של הזגוגית שקיים בעין הגופה.

<table><tbody><tr><td>0.3 מלקחיים</td><td>Storz Opthalmics</td><td>E1793</td><td></td></tr><tr><td>Westcott מספריים טנוטומיה מעוקלת ימין</td><td>Storz אופטלמיקה</td><td>E3320 R</td><td></td></tr><tr><td>ידית אזמל מס '3</td><td>VWR</td><td>25607-947</td><td></td></tr><tr><td>להב אזמל, #11, עבור ידית #3</td><td>VWR</td><td>470174-844</td><td></td></tr></tbody></table>

כל הזגוגיות ההומור dissection לניתוח vitreodynamic

Whole Vitreous Humor Dissection for Vitreodynamic Analysis

המחברים מציעים טכניקה יעילה לבידוד ליבת הזגוגית וקליפת המוח השלמה והשלמה מעיני חזיר עם גרעין לאחר המוות. בעוד שמחקרים קודמים הראו את התוצאות של נתיחות כאלה, השלבים המפורטים לא תוארו, מה שמנע מחוקרים מחוץ לתחום לשכפל את שיטותיהם. מחקרים אחרים קוצרים זגוגית באמצעות שאיפה, שאינה שומרת על אנטומיה של מבנה הזגוגית, או באמצעות דיסקציה חלקית, המבודדת רק את ליבת הזגוגית. השיטה המוצעת מבודדת את כל גוף הזגוגית, כאשר ליבת הזגוגית וקליפת המוח שלמות, תוך שמירה על אנטומיה ושלמות מבנית. בשיטה זו נוצר תחילה דש סקלרלי בעובי מלא בעין חזירית גרעינית ובאמצעותו ניתן להפריד את רקמת הכורואיד מהסקלרה. לאחר מכן מרחיב את הדש הסקלרלי והכורואיד מופרד לחלוטין מהסקלרה. לבסוף, רקמת הכורואיד-רשתית מתקלפת מהזגוגית כדי להשאיר גוף זגוגית מבודד שלם. ניתן להשתמש בטכניקת דיסקציה הזגוגית המוצעת כדי לחקור את התכונות הפיזיקליות של הומור הזגוגית. בפרט, לשיטה זו יש משמעות למחקרים ניסיוניים הכוללים מתן תרופות, הובלת חמצן זגוגית-רשתית והסעה תוך עינית.

בעקבות הפרוטוקול יוביל לנתיחת זגוגית מוצלחת עם הליבה וקליפת המוח (איור 3) בשלמותה. הדבר ניכר מן חתיכות השייר של רשתית דבקו בקליפת זגוגי. הומור זגוגית כל פגע ניתן להשתמש במספר דרכים לניסויי vitreodynamic ספציפיים. במקרה שלנו, שיעור דיפוזיה של חמצן בהומור זגוגית שלם וזה קבוע זמן מקביל נחקר (איור 2). זגוגית שהיה גזור (ליבה וקליפה) בשיטה שלנו הוצבה בכוס זכוכית עם ידוע פני שטח חשוף. זה היה בהשוואה לזגוגית שנקטפה בשיטה שפורסמה בעבר שרק מבודדת את ליבת זג...

מטרת פרוטוקול זה היא להראות טכניקה יעילה לבידוד ליבת הזגוגית וקליפת המוח השלמה והשלמה מעיני חזיר שעברו גרעין לאחר המוות.

כל הזגוגיות ההומור Dissection לניתוח Vitreodynamic

The authors propose an effective technique to isolate whole, intact vitreous core and cortex from post mortem enucleated porcine eyes. While previous ...

המטרה הכללית של פרוצדורה זו היא להדגים טכניקה יעילה לבידוד ליבות זגוגית (vitreous cores) וקליפות זגוגית (cortexes) שלמות ושלמות מעיני חזיר לאחר המוות ובעלות גרעינים. הדבר מושג תחילה על ידי הסרה בדיסקציה של הקשיית העין הפרי-לימבלית (peri limbal conjunctiva) וחשיפת הלובן (sclera). בשלב השני, נוצר ומורחב לסנפית לובן (scleral flap) בעובי מלא.לאחר מכן מפרידים את הכורויה (choroid) מהסקלרה (sclera) ומקלפים את רקמת הכורויה והרשתית מהזגוגית. בסופו של דבר, ניתן להשתמש בדיסקציה של כל ליבת הזגוגית וקליפתה השלמות כדי לחקור את התכונות הפיזיקליות, הביומכניות והכימיות של נוזל הזגוגית. היתרון המרכזי של טכניקה זו על פני שיטות קיימות אחרות, כגון דיסקציות חלקיות של הזגוגית, הוא שטכניקה זו מאפשרת בידוד של ליבת הזגוגית וקליפתה השלמות תוך שמירה על המבנה האנטומי של הזגוגית. התחילו בהצמדה של העין שהוצאה (enucleated eye) באמצעות סיכות, דרך רקמת העודף המקיפה אותה, אל לוח דיסקציה מסטירופורם.לאחר שהעין מקובעת, השתמש בפינצטה עדינה ובמיקרו-מספריים כדי להגריר את הלבדה (conjunctiva) בלימבוס ולנתח אותה בעדינות (blunt dissection) מהסקלרה. גזור את הלבדה לאורך הלימבוס תוך כדי התקדמות הניתוח העדין כדי לאפשר המשך של התהליך. לאחר מכן, הסר את כל הלבדה, למעט כמות קטנה, מסביב לעין כולה כדי לחשוף כמה שיותר מהסקלרה.בשלב הבא, השתמש בסקלפל כדי לבצע בעדינות חתך בסקלרה, כ-5 mm במקביל ו-3 mm מאחורי הלימבוס, עד להופעת הכורואיד בעל הפיגמנטציה הכהה, כדי ליצור סקלרה פלפ (scleral flap). לאחר מכן, בצע דיסקציה קהה בזהירות ברקמה לאורך המישור שבין הסקלרה לכורואיד, עד שניתן יהיה לדחוף את הכורואיד בעדינות פנימה כדי להרחיב את המרווח בין שתי הרקמות. באמצעות מיקרו-מספריים חדים, בצע חתך סקלרלי נוסף בניצב לחתך הראשון כדי ליצור חתך בצורת T.לאחר מכן, המשיכו בדיסקציה קהה היקפית כדי להסיר את רקמת הסקלרה מהכורואיד שמתחתיה, ודחפו בעדינות את הכורואיד הרחק מהסקלרה כדי להגדיל את השflap. בצעו דיסקציה קהה עדינה של הכורואיד מהסקלרה עד שהחתך שבוצע בניצב ללימבוס מגיע לעצב האופטי, והחתך שבוצע במקביל ללימבוס תופס לפחות 45 מעלות מהיקף העין. השתמשו ב-flap זה כדי לחזור על הדיסקציה הקהה בצדו השני של העין.לאחר מכן, חתכו את שני פתחי הלוביה (scleral flaps) כדי לחשוף שטח רחב של הכורואיד. כעת, המשיכו את החיתוך מסביב להיקף העין בצורה קהה. הפרדו את הכורואיד מהלוביה, והסירו את שאריות רקמת הכורואיד והרשתית בתוך האזור שנחשף.בצעו חתך בכורואיד החל מהעצב האופטי. לאחר מכן, השתמשו בפינצטה כדי לקלף בעדינות את הרקמה מגוף הזגוגית שמתחתיה. המשיכו בדיסקציה קהה ובקילוף של הכורואיד עד לקבלת גוף הזגוגית השלם והשלם.לאחר מכן, השתמש בשולי הלובן (scleral rim) המחוברים לקרנית כדי למקם את כל הגוף הזגוגית במיקום הרצוי. בנקודה זו, הגוף הזגוגית עדיין צריך להיות מחובר ללובן הקדמי ולעדשה. לבסוף, בצע הפרדה עמומה (blunt dissection) של הגוף הזגוגית מהחלק הפנימי של הלובן ומסביב לעדשה.כדי להסיר את כל הלובן (sclera), השתמש בכלי קהה כדי להרחיק את העדשה מהזגוגית במידת הצורך. ביצוע הפרוטוקול כפי שהודגם כעת יוביל לדיסקציה מוצלחת של הזגוגית, כאשר הליבה והקליפה נשארות שלמות, כפי שניכר מחלקי הרשתית שנותרו דבוקים לקליפת הזגוגית. בתמונה זו, ניתן להשתמש בנוזל הזגוגית השלם והשלם במספר דרכים עבור ניסויים וירמיים ספציפיים.לדוגמה, כאן נחקרו קצב הדיפוזיה של חמצן בגוף זגוגי שלם וקבוע הזמן התואם לו בנוכחות הקורטקס של הגוף הזגוגי. הדיפוזיה של החמצן התרחשה לאורך פרק זמן ארוך יותר. זכרו כי עבודה עם חפצים חדים עלולה להיות מסוכנת, ויש לנקוט תמיד באמצעי זהירות, כגון טיפול נכון וסילוק בטוח של חפצים חדים בעת ביצוע פרוצדורה זו.

whole-vitreous-humor-dissection-for-vitreodynamic-analysis

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

וידאו זה מראה טכניקה יעילה עבור מבדל ו בניתוח שונות שקוף למחצה מבנים בגוף האדם זגוגי בעיניים פוסט מורטם.

Dissection של גוף האדם אלמנטים הזגוגיות לניתוח proteomic

הטכניקה לנתיחה מדגים הוצאת הקרביים של הזגוגית, הרשתית, ואת העדשה מהעין העכבר, הפרדה על ידי צנטריפוגה, ואפיון עם מבחני חלבון.

הוצאת הקרביים של הזגוגיות עכבר רשתית עבור ניתוח proteomic

הפרימט הלא אנושי (NHP) הוא מודל אידיאלי לחקר טיפולי תאי רשתית אנושית בשל הדמיון האנטומי והגנטי. כתב יד זה מתאר שיטה להשתלה תת-עינית של תאי אפיתל פיגמנט רשתית בעין NHP ואסטרטגיות למניעת סיבוכים תוך ניתוחיים הקשורים למניפולציה מקולרית.

השתלת אפיתל פיגמנט רשתית במודל פרימטים לא אנושי למחלות רשתית ניוונית

מאמר זה מציג פרוטוקול למיקרו-דיסקציה עינית במכרסמים. התהליך כולל את האינקולציה של גלגל העין יחד עם הממברנה הניקטיבית (כלומר, העפעף השלישי). לאחר מכן מתבצעת הפרדה של המשקפיים האחוריים והקדמיים.

מיקרודיסקציה של עין המכרסם

כאן נקבע הליך להפקת DNA נטול תאים מהומור זגוגי ומימי לביצוע מחקרים מולקולריים לאבחון לימפומה זגוגית. השיטה מציעה את היכולת לחלץ במקביל DNA מהמרכיב התאי של הדגימה או לשמור אותו לבדיקות נלוות.

מיצוי DNA ללא תאים של דגימות הומור זגוגיות ומימיות לאבחון וניטור של לימפומה זגוגית

פרוטוקול זה מציג פלטפורמה משולבת של מאגר ביולוגי לאיסוף, ביאור וביו-בנקאות סטנדרטיים של הומור מימי אנושי באיכות גבוהה וביופסיות נוזליות בזגוגית עבור אנליזות מולקולריות במורד הזרם, כולל פרוטאומיקה, מטבולומיקה וגליקומיקה.

ביובנק של ביופסיות נוזליות מימיות וזגוגיות אנושיות לאנליזות מולקולריות

בדיקת הגנה פותחה כדי לעקוב אחר עמידות כלי הדם ברשתית למוות מעלבונות הקשורים לסוכרת / רטינופתיה סוכרתית כגון מתח חמצוני וציטוקינים.

בדיקה לגילוי הגנה על כלי הדם ברשתית מפני מוות הקשור לסוכרת בעכברים

חתך יסודי וסטנדרטי של גלובוס לא ניאופלסטי חשוב להשגת חתכים היסטופתולוגיים איכותיים הניתנים לשחזור. הנחיות להכנסה סטנדרטית של גלובוס לא ניאופלסטי למבוגרים ועוברים ניתנות כאן. אפשרויות שונות לחיתוך כדור הארץ מודגמות ונדונות, כולל קריטריונים לקבלת החלטות מבוססות מקרה.

ברוטו של גלובוס לא ניאופלסטי, כולל עיני עובר

כאן, אנו מספקים מתודולוגיה מפורטת לבידוד הרשתית מעין העכבר לניסויים ממושכים ex vivo . פרוטוקול זה מדגיש את הנגשת הגישה התובענית מבחינה טכנית לחוקרים המעוניינים לנצל את דרכי המחקר הניתנות על ידי שמירה על גליה ברשתית באתרה ברקמה חיה.

מודל ex vivo explant לחקר אינטראקציות גליה ברשתית העכבר

שיטה זו מדמיינת את המבנה הטבעי של סיבי קולגן בגוף הזגוגית באמצעות מיקרוסקופ רפלקטיבי קונפוקלי.

הכנת עיני חזיר למיקרוסקופיה רפלקטיבית קונפוקלית כדי להמחיש את רשת סיבי הקולגן הזגוגית

למדו טכניקת ניתוח לבידוד הומור הזגוגי השלם מעיני חזיר לאחר המוות. שיטה זו שומרת על המבנה האנטומי ומאפשרת חקר תכונות פיזיקליות וביומכניות של הזגוגית.

כל הזגוגיות ההומור Dissection לניתוח Vitreodynamic

גלה סרטונים נוספים