Name: הדמיה לא פולשנית של התגובה החיסונית המולדת בדגם דג הזברה הזחל של Streptococcus iniae זיהום (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-04-21T14:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 16 s
Description: למדו הדמיה לא פולשנית של התגובה החיסונית המולדת בדגם דג הזברה הזחל של Streptococcus iniae זיהום. שיטה זו מאפשרת מחקר מפורט של אינטראקציות מארח-פתוגן בזמן אמת.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

המחברים מבקשים להודות לחברי מעבדה לטיפול ותחזוקה של דג הזברה. עבודה זו נתמכה על ידי המכונים לאומי לבריאות, שירות הלאומי לחקר פרס A155397 לEA Harvie וNIH R01GM074827 לאנה Huttenlocher.

<ol><li>Agnew, W., Barnes, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Streptococcus+iniae%3A+An+aquatic+pathogen+of+global+veterinary+significance+and+a+challenging+candidate+for+reliable+vaccination%5BTitle%5D)+AND+%22Vet.+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Streptococcus iniae: An aquatic pathogen of global veterinary significance and a challenging candidate for reliable vaccination.</a> Vet. Microbiol. 122 (1-2), 1-15 (2007).</li>
<li>Danilova, N., Steiner, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((B+cells+develop+in+the+zebrafish+pancreas%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci%22%5BJournal%5D)">B cells develop in the zebrafish pancreas.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. 99, 13711-13716 (2002).</li>
<li>Lam, S. H., Chua, H. L., Gong, Z., Lam, T. J., Sin, Y. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+maturation+of+the+immune+system+in+zebrafish%2C+Danio+rerio%3A+a+gene+expression+profiling%2C+in+situ+hybridization+and+immunological+study%5BTitle%5D)+AND+%22Dev.+Comp.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Development and maturation of the immune system in zebrafish, Danio rerio: a gene expression profiling, in situ hybridization and immunological study.</a> Dev. Comp. Immunol. 28 (1), 9-28 (2004).</li>
<li>Willett, C. E., Cortes, A., Zuasti, A., Zapata, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+Hematopoiesis+and+Developing+Lymphoid+Organs+in+the+Zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Dev.+Dyn%22%5BJournal%5D)">Early Hematopoiesis and Developing Lymphoid Organs in the Zebrafish.</a> Dev. Dyn. 214, 323-336 (1999).</li>
<li>Le Guyader, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Origins+and+unconventional+behavior+of+neutrophils+in+developing+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Origins and unconventional behavior of neutrophils in developing zebrafish.</a> Blood. 111 (1), 132-141 (2008).</li>
<li>Herbomel, P., Thisse, B., Thisse, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ontogeny+and+behaviour+of+early+macrophages+in+the+zebrafish+embryo%5BTitle%5D)+AND+%22Development%28Cambridge%2C+England%29%22%5BJournal%5D)">Ontogeny and behaviour of early macrophages in the zebrafish embryo.</a> Development(Cambridge, England). 126 (17), 3735-3745 (1999).</li>
<li>Neely, M. N., Pfeifer, J. D., Caparon, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Streptococcus-Zebrafish+Model+of+Bacterial+Pathogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Infect.+Immun%22%5BJournal%5D)">Streptococcus-Zebrafish Model of Bacterial Pathogenesis.</a> Infect. Immun. 70 (7), 3904-3914 (2002).</li>
<li>Jault, C., Pichon, L., Chluba, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toll-like+receptor+gene+family+and+TIR-domain+adapters+in+Danio+rerio%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Toll-like receptor gene family and TIR-domain adapters in Danio rerio.</a> Mol. Immunol. 40 (11), 759-771 (2004).</li>
<li>Meijer, A. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+analysis+of+the+Toll-like+receptor+and+TIR+domain+adaptor+families+of+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+immunol%22%5BJournal%5D)">Expression analysis of the Toll-like receptor and TIR domain adaptor families of zebrafish.</a> Mol. immunol. 40 (11), 773-783 (2004).</li>
<li>Seeger, A., Mayer, W. E., Klein, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Complement+Factor+B-Like+cDNA+clone+from+the+Zebrafish+%28Brachydanio+rerio%29%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+immunol%22%5BJournal%5D)">A Complement Factor B-Like cDNA clone from the Zebrafish (Brachydanio rerio).</a> Mol. immunol. 33, 511-520 (1996).</li>
<li>Hermann, A. C., Millard, P. J., Blake, S. L., Kim, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+respiratory+burst+assay+using+zebrafish+kidneys+and+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Immunol.+Methods%22%5BJournal%5D)">Development of a respiratory burst assay using zebrafish kidneys and embryos.</a> J. Immunol. Methods. 292 (1-2), 119-129 (2004).</li>
<li>Yoo, S. K., Huttenlocher, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatiotemporal+photolabeling+of+neutrophil+trafficking+during+inflammation+in+live+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Leukoc.+Biol%22%5BJournal%5D)">Spatiotemporal photolabeling of neutrophil trafficking during inflammation in live zebrafish.</a> J. Leukoc. Biol. 89 (5), 661-667 (2011).</li>
<li>Benard, E. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Infection+of+Zebrafish+Embryos+with+Intracellular+Bacterial+Pathogens%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Infection of Zebrafish Embryos with Intracellular Bacterial Pathogens.</a> J. Vis. Exp. , 1-9 (2012).</li>
<li>Carvalho, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+High-Throughput+Screen+for+Tuberculosis+Progression%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">A High-Throughput Screen for Tuberculosis Progression.</a> PLoS ONE. 6 (2), e16779(2011).</li>
<li>Veneman, W. J., Marín-Juez, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+and+Optimization+of+a+High+Throughput+Setup+to+Study+Staphylococcus+epidermidis+and+Mycobacterium+marinum+Infection+as+a+Model+for+Drug+Discovery%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Establishment and Optimization of a High Throughput Setup to Study Staphylococcus epidermidis and Mycobacterium marinum Infection as a Model for Drug Discovery.</a> J. Vis. Exp. (88), (2014).</li>
<li>Deng, Q., Harvie, E. A., Huttenlocher, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinct+signaling+mechanisms+mediate+neutrophil+attraction+to+bacterial+infection+and+tissue+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Cell.+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Distinct signaling mechanisms mediate neutrophil attraction to bacterial infection and tissue injury.</a> Cell. Microbiol. , (2012).</li>
<li>Sar, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+embryos+as+a+model+host+for+the+real+time+analysis+of+Salmonella+typhimurium+infections%5BTitle%5D)+AND+%22Cell.+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Zebrafish embryos as a model host for the real time analysis of Salmonella typhimurium infections.</a> Cell. Microbiol. 5 (9), 601-611 (2003).</li>
<li>Lin, A., Loughman, J. A., Zinselmeyer, B. H., Miller, M. J., Caparon, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Streptolysin+S+Inhibits+Neutrophil+Recruitment+during+the+Early+Stages+of+Streptococcus+pyogenes+Infection%5BTitle%5D)+AND+%22Infect.+Immun%22%5BJournal%5D)">Streptolysin S Inhibits Neutrophil Recruitment during the Early Stages of Streptococcus pyogenes Infection.</a> Infect. Immun. 77 (11), 5190-5201 (2009).</li>
<li>Volhard, C., Dahm, R. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aVolhard%2C+C+%22Zebrafish%3A+A+Practical+Approach%22">Zebrafish: A Practical Approach</a>. , Oxford University Press. New York, NY. (2002).</li>
<li>He, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophil-mediated+experimental+metastasis+is+enhanced+by+VEGFR+inhibition+in+a+zebrafish+xenograft+model%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Pathol%22%5BJournal%5D)">Neutrophil-mediated experimental metastasis is enhanced by VEGFR inhibition in a zebrafish xenograft model.</a> J. Pathol. 227 (4), 431-445 (2012).</li>
<li>Haldi, M., Ton, C., Seng, W. L., McGrath, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+melanoma+cells+transplanted+into+zebrafish+proliferate%2C+migrate%2C+produce+melanin%2C+form+masses+and+stimulate+angiogenesis+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Angiogenesis%22%5BJournal%5D)">Human melanoma cells transplanted into zebrafish proliferate, migrate, produce melanin, form masses and stimulate angiogenesis in zebrafish.</a> Angiogenesis. 9 (9), 139-151 (2006).</li>
<li>Davis, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Real-time+visualization+of+mycobacterium-macrophage+interactions+leading+to+initiation+of+granuloma+formation+in+zebrafish+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Immunity%22%5BJournal%5D)">Real-time visualization of mycobacterium-macrophage interactions leading to initiation of granuloma formation in zebrafish embryos.</a> Immunity. 17 (6), 693-702 (2002).</li>
<li>Wiles, T. J., Bower, J. M., Redd, M. J., Mulvey, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+Zebrafish+to+Probe+the+Divergent+Virulence+Potentials+and+Toxin+Requirements+of+Extraintestinal+Pathogenic+Escherichia+coli%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathog%22%5BJournal%5D)">Use of Zebrafish to Probe the Divergent Virulence Potentials and Toxin Requirements of Extraintestinal Pathogenic Escherichia coli.</a> PLoS Pathog. 5 (12), e1000697(2009).</li>
<li>Harvie, E. A., Green, J. M., Neely, M. N., Huttenlocher, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Innate+Immune+Response+to+Streptococcus+iniae+Infection+in+Zebrafish+Larvae%5BTitle%5D)+AND+%22Infect.+Immun%22%5BJournal%5D)">Innate Immune Response to Streptococcus iniae Infection in Zebrafish Larvae.</a> Infect. Immun. 81 (1), 110-121 (2013).</li>
<li>Haddon, C., Lewis, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+Ear+Development+in+the+Embryo+of+the+Zebrafish%2C+Danio+rerio%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Neurol%22%5BJournal%5D)">Early Ear Development in the Embryo of the Zebrafish, Danio rerio.</a> J. Comp. Neurol. 365, 113-128 (1996).</li>
<li>Whitfield, T. T., Riley, B. B., Chiang, M. -Y., Phillips, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+the+zebrafish+inner+ear%5BTitle%5D)+AND+%22Dev.+Dyn%22%5BJournal%5D)">Development of the zebrafish inner ear.</a> Dev. Dyn. 223 (4), 427-458 (2002).</li>
<li>Rosen, J. N., Sweeney, M. F., Mably, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microinjection+of+zebrafish+embryos+to+analyze+gene+function%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Microinjection of zebrafish embryos to analyze gene function.</a> J. Vis. Exp. (25), (2009).</li>
<li>Colucci-Guyon, E., Tinevez, J. Y., Renshaw, S. A., Herbomel, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strategies+of+professional+phagocytes+in+vivo%3A+unlike+macrophages%2C+neutrophils+engulf+only+surface-associated+microbes%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cell+Sci%22%5BJournal%5D)">Strategies of professional phagocytes in vivo: unlike macrophages, neutrophils engulf only surface-associated microbes.</a> J. Cell Sci. 124 (18), 3053-3059 (2011).</li>
<li>Gurskaya, N. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Engineering+of+a+monomeric+green-to-red+photoactivatable+fluorescent+protein+induced+by+blue+light%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Engineering of a monomeric green-to-red photoactivatable fluorescent protein induced by blue light.</a> Nat. Biotechnol. 24 (4), 461-465 (2006).</li>
<li>Deng, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Localized+bacterial+infection+induces+systemic+activation+of+neutrophils+through+Cxcr2+signaling+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Leukoc.+Biol%22%5BJournal%5D)">Localized bacterial infection induces systemic activation of neutrophils through Cxcr2 signaling in zebrafish.</a> J. Leukoc. Biol. 93 (5), 761-769 (2013).</li>
</ol>

המחברים מצהירים שאין להם אינטרסים פיננסיים מתחרים.

שיטת ההדבקה משמשת כאן היא שימושית עבור המחקר של התגובה החיסונית המארח לזיהום בתחילה מקומי ב2-3 עוברים וזחלי DPF. מוקד גירוי דלקתי, כגון זיהום, בחלל סגור כגון שלפוחית ​​otic מאפשר לחקר chemotaxis נויטרופילים ומקרופאג וphagocytosis. אזהרה אחת של הזרקת חיידקים לתוך שלפוחית ​​otic היא שהיכולת של נויטרופילים ליעילות חיידקי phagocytose בחללים מלאים בנוזל עשויה להיות תלויות בחיידק המסוים. למרות subtilis coli וBacillus Escherichia אינו phagocytosed בקלות על ידי נויטרופילים בשלפוח...

Streptococcus iniae הוא פתוגן המימי גדול, כי הוא מסוגל לגרום למחלות מערכתיות בשני דגים ובני אדם 1. בעוד ש &#39; iniae אחראי להפסדים גדולים בתעשיית החקלאות הימית, הוא גם פתוגן zoonotic פוטנציאלי, מסוגל לגרום למחלה באדם מארחי מדוכאי חיסון עם פתולוגיות קליניות דומות לאלו הנגרמים על ידי פתוגנים אנושיים סטרפטוקוקלי אחרים. בהתחשב בדמיון שלה עם פתוגנים אנושיים, חשוב ללמוד S. היווצרות המחלה iniae בהקשר של מארח טבעי. מודל דג הזברה מבוגרת של ס &#39; זיהום iniae חשף חדירה חזקה של לויקוציטים מארח לאתר המקומי של זיהום, כמו גם זמן מהיר לארח מוות, זמן קצר מדי כדי לערב את המערכת החיסונית אדפטיבית 7. כדי לזכות במבט מעמיק לתוך התגובה החיסונית המולדת S. iniae זיהום in vivo, יש צורך להשתמש במודל שהוא יותר נוח לnעל-פולשני הדמיה לחיות. יש דג הזברה הזחל מספר היתרונות שהופכים אותו מודל חוליות אטרקטיבי יותר ויותר ללימוד אינטראקציות מארח הפתוגן. דג הזברה היא יחסית זולה וקלים לשימוש ולתחזוקה בהשוואה לדגמים של יונקים. החסינות מסתגלת היא לא פונקציונלי בוגרת עד 4-6 שבועות לאחר הפריה, אבל יש לי זחלי מערכת חיסון מולדת חוליות השמורות ביותר עם ​​השלמה, Toll-like receptors, ציטוקינים, ונויטרופילים ומקרופגים עם יכולות מיקרוביאלית כולל phagocytosis ופרץ הנשימה 2-6, 8-11. בנוסף, נְהִילוּת הגנטית והשקיפות אופטית של השלבים העובריים וזחל של פיתוח לאפשר לדור של קווים מהונדסים יציבים עם תאים חיסוניים שכותרתו fluorescently כך שניתן לבחון אינטראקציות מארח הפתוגן בזמן אמת in vivo. הדור של קווים מהונדסים אלה באמצעות חלבון photoconvertible כגון Dendra2 מאפשר מעקב ממוצא תא מארח וגורל אדם במהלך הזיהום 12. בעת פיתוח מודל זיהום זחל דג הזברה, האתר הנבחר של microinjection יקבע אם זיהום הוא בתחילה מקומי או מערכתי. זיהומי דם מערכתיים לוריד הזנב או Duct של קיביה הם נפוצים ביותר ללמוד פתוגנים חיידקים בדג זברה ושימושיים לחקר אינטראקציות בין מארח ותאי חיידקים, תגובות ציטוקינים, והבדלים בארסיות בין זני הפתוגן. למיקרואורגניזמים צומחים לאט יותר, הזרקה מוקדם לצק החלמון של עובר בשלב 16-1,000 התא יכולה לשמש כדי ליצור זיהום מערכתי 13,14, עם השלב ההתפתחותי האופטימלי עבור microinjection של מיקרואורגניזם גדל לאט מצא להיות בין שלב 16-128 תא 15. עם זאת, חלמון זריקות שק של חיידקים רבים בשלבים מאוחר יותר של התפתחות מארח נוטה להיות קטלני לtהוא יארח בשל הסביבה עשירה בחומרים המזינים לחיידקים וחוסר חדירה לויקוציטים 16-18. זיהום מקומי גורם בדרך כלל להגירה בבימויו של לויקוציטים לאתר של זיהום שניתן לכמת בקלות עם הדמיה לא פולשנית. סוג זה של זיהום יכול לאפשר לנתיחה של המנגנונים אשר מתווכים הגירה לויקוציטים, כמו גם חקירה של יכולות נדידה וphagocytic שונות של אוכלוסיות שונות לויקוציטים. זיהומים מקומיים שימושיים גם כאשר בוחנים הבדלים בארסיות בין זני חיידקים, כמו גם לימוד מנגנוני פלישת חיידק מאז מחסומי מארח פיזיים צריכים לעבור לזיהום מקומי להפוך מערכתי. דג הזברה גדלות בדרך כלל בטמפרטורות של C ° 25-31 19, אבל הם גם יכולים להישמר בטמפרטורות גבוהות ככל C ° 34-35 ללימודים של הפולשנות של פתוגנים אנושיים מסוימים עם דרישות קפדניות טמפרטורהלארסיות 20, 21. אתרים רבים ושונים המשמשים ליצירת זיהום חיידקים בתחילה מקומי כוללים החדר למוח האחורי 22, שרירים גב זנב 18, חלל קרום הלב 23, ושלפוחית ​​otic (אוזן) 5, 16, 24. עם זאת, זה כבר נמצא הזרקה של חיידקים לתוך שריר זנב יכול לגרום נזק לרקמות ועצמאי דלקת של החיידקים, שעלול להטות את תוצאות כאשר חוקרים תגובה לויקוציטים 13. למרות שפחות נזק קשור להזרקה למוח האחורי ולמרות שזה בהתחלה נטול לויקוציטים בעוברים צעירים, החדר למוח האחורי בהתמדה זוכה תאים חיסוניים יותר לאורך זמן כמו מיקרוגליה להשתכן. החדר למוח האחורי הוא גם מיקום קשה יותר לתמונה. שלפוחית ​​otic היא חלל חלול סגור ללא גישה ישירה למערכת כלי הדם 25, 26. זה בדרך כלל נטול Leukocytes, אבל leukocytes ניתן לגייס לשלפוחית ​​otic בתגובה לגירויים דלקתיים כגון דלקת. כמו כן, אתר מועדף של microinjection של חיידקים בתוך 2-3 ימים לאחר הפריה דג הזברה גיל (DPF) בגלל הקלות של הדמיה ויזואליזציה של ההזרקה. לכן, בחרנו שלפוחית ​​otic כאתר של זיהום חיידקים המקומי שלנו.

<table><tbody><tr><td>1.7 מ"ל Eppendorfs</td><td>MidSci</td><td>AVSS1700</td><td></td></tr><tr><td>14 מ"ל שפופרת פלקון</td><td>BD Falcon</td><td>352059</td><td></td></tr><tr><td>27 גרם x &frac12; ב. מחט</td><td>BD Biosciences</td><td>305109</td><td></td></tr><tr><td>96 בארות צלחת</td><td>קורנינג משולבת</td><td>3596</td><td></td></tr><tr><td>Agar</td><td>BD Biosciences</td><td>214030</td><td></td></tr><tr><td>CellTracker בדיקות</td><td>מולקולריות אדומות, Invitrogen</td><td>C34552</td><td></td></tr><tr><td>CNA agar</td><td>Dot Scientific, Inc</td><td>7126A</td><td></td></tr><tr><td>צנרת העברה חד פעמית</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>13-711-7 מ'</td><td></td></tr><tr><td>היקף ניתוח</td><td>ניקון</td><td>SMZ745</td><td></td></tr><tr><td>DMSO</td><td>סיגמא אולדריץ'</td><td>D2650</td><td></td></tr><tr><td>אתנול 200 הוכחה</td><td>MDS</td><td>2292</td><td></td></tr><tr><td>פינצטה עדינה</td><td> Science Tools</td><td>11251-20</td><td></td></tr><tr><td>מסרק ג'ל</td><td>VWR</td><td>27372-482</td><td>רוחב 4.2 מ"מ, עובי 1.5 מ"מ</td></tr><tr><td>כלי</td><td></td><td></td> תחתית זכוכית <td>מיוצרים בהתאמה אישית על ידי קידוח חור של 16 - 18 מ"מ במרכז תחתית צלחת תרבית רקמה 35 מ"מ והנחת כיסוי עגול #1 22 מ"מ בחור ואיטום בשכבה דקה של דבק אופטי Norland 68 שנרפא על ידי אור UV.</td></tr><tr><td>גליצרול</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>G33-4</td><td></td></tr><tr><td>נמס גבוה אגרוז</td><td>דנוויל סיינטיפיק, בע"מ</td><td>CA3510-6</td><td></td></tr><tr><td>מי חמצן</td><td>Fisher Scientific</td><td>H325</td><td></td></tr><tr><td>סריקת לייזר מיקרוסקופ קונפוקלי</td><td>אולימפוס</td><td>עם מערכת</td><td></td>FV-1000</tr><tr><td>אגרוז נמס נמוך</td><td>פישר</td><td>BP165-25</td><td></td></tr><tr><td>מעמד מגנטי</td><td>Tritech (Narishige)</td> <td>GJ-1</td><td></td></tr><tr><td>מערכת מיקרו הזרקה</td><td>Parker</td><td>Picospritzer III</td><td></td></tr><tr><td>קצות פיפט מיקרו-מטען</td><td>Eppendorf</td><td>930001007</td><td></td></tr><tr><td>מיקרומניפולטור</td><td>Tritech (Narishige)</td> <td>M-152</td><td></td></tr><tr><td>חולץ מיקרופיפטה</td><td>Sutter Instrument Company</td><td>Flaming/Brown P-97</td><td></td></tr><tr><td>Nanodrop ספקטרופוטמטר</td><td>Thermo Scientific</td><td>ND-1000</td><td></td></tr><tr><td>N-Phenylthiourea (PTU)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P7629</td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldheyde</td><td>אלקטרונים מיקרוסקופיה Sciences</td><td>15710</td><td></td></tr><tr><td>צלחות פטרי</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>FB0875712</td><td>100 x 15 מ"מ</td></tr><tr><td>פנול</td><td>סיגמא אולדריץ'</td><td>P-4557</td><td></td></tr><tr><td>פנול אדום</td><td>ריקה כימואל חברה</td><td>572516</td><td></td></tr><tr><td>פוספט חוצץ מלח</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>BP665-1</td><td></td></tr><tr><td>אשלגן הידרוקסיד</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P-6310</td><td></td></tr><tr><td>Pronase</td><td>Roche</td><td>165921</td><td></td></tr><tr><td>פרוטאז פפטון</td><td>Fluka Biochemika</td><td>29185</td><td></td></tr><tr><td>צלחת תרבית תאים קטנים</td><td>Corning Incorporated</td><td>430165</td><td>35 x 10 מ"מ</td></tr><tr><td>סודאן שחור</td><td>Sigma Aldrich</td><td>S2380</td><td></td></tr><tr><td>מחטי הזרקה נימיות מזכוכית בעלת קיר דק</td><td>מכשירי דיוק עולמיים, בע"מ</td><td>TW100-3</td><td></td></tr><tr><td>טוד יואיט</td><td>סיגמא אולדריץ'/פלוקה אנליטי</td><td>T1438</td><td></td></tr><tr><td>טריקאין (אתיל 3-אמינובנזואט)</td><td>Argent Chemical Laboratory/Finquel</td><td>C-FINQ-UE-100G</td> Triton X-100G <td></td></tr><tr><td>Fisher</td><td>Scientific</td><td>BP151-500</td><td></td></tr><tr><td>Tween 20</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP337-500</td><td></td></tr><tr><td>תמצית שמרים</td><td>Fluka Biochemika</td><td>92144</td><td></td></tr></tbody></table>

הדמיה לא פולשנית של התגובה החיסונית המולדת בדגם דג הזברה הזחל של<em&gt; streptococcus iniae</em&gt; זיהום

Non-invasive Imaging of the Innate Immune Response in a Zebrafish Larval Model of Streptococcus iniae Infection

הפתוגן המימי, Streptococcus iniae, אחראי ליותר מ -100 מיליון דולרים בהפסדים שנתי לתעשיית החקלאות הימית ומסוגל לגרום למחלה מערכתית בשני דגים ובני אדם. הבנה טובה יותר של ס &#39; היווצרות המחלה iniae דורשת מערכת מודל מתאימה. נְהִילוּת הגנטית והשקיפות האופטית של שלבי התפתחות המוקדמים של דג הזברה מאפשרות ההדמיה הדור ולא פולשנית של קווים מהונדסים עם fluorescently מתויג תאי מערכת חיסון. המערכת החיסונית אדפטיבית אינה מתפקדת באופן מלא עד מספר שבועות לאחר הפריה, אבל יש לי זחלי דג הזברה מערכת חיסון מולדת חוליות נשמרים עם שני נויטרופילים ומקרופגים. כך, הדור של מודל זיהום זחל מאפשר הלימוד של התרומה הספציפית של מערכת חיסון מולדת בשליטה S. זיהום iniae. האתר של microinjection יקבע אם זיהום הואמערכתי או מקומי בתחילה. כאן, אנו מציגים הפרוטוקולים שלנו להזרקת otic שלפוחית ​​של 2-3 ימים לאחר הפריה בגיל דג הזברה, כמו גם הטכניקות שלנו להדמית confocal ניאון של זיהום. אתר זיהום מקומי מאפשר תצפית של פלישת חיידק ראשונית, גיוס של תאי מארח והפצה של זיהום. הממצאים שלנו תוך שימוש במודל זחל דג הזברה של ס &#39; זיהום iniae מצביע על כך שדג זברה יכולה לשמש כדי לבחון את התרומות השונות של נויטרופילים ומקרופגים מארח בזיהומים חיידקיים מקומיים. בנוסף, אנו מתארים כיצד photolabeling של תאי מערכת חיסון יכול לשמש כדי לעקוב אחר גורל תא מארח בודד במהלך הזיהום.

Microinjection של ס &#39; תוצאות iniae לתוך שלפוחית ​​otic (איור 1 ואיור 2) בתגובת מארח תחילה מקומית. כאשר הוא מוזרק בצורה נכונה, יש לראות את החיידקים רק בשלפוחית ​​otic ולא ברקמה או דם שמסביב. זה יכול להיות דמיין במהלך microinjection באמצעות צבע אדום פנול (איור 1 א). לחלופין, אם חיידקים שכותרתו מוזרקים, סריקה מהירה של זחלים נגועים לפרסם מייד הזרקה יכולה לאשר את החיידקים רק בשלפוחית ​​otic ולא הרקמה הסובבת (איור 1).</stro...

כאן, אנו מציגים פרוטוקול ליצירה והדמיה של זיהום חיידקי מקומי בשלפוחית האוטית של דג הזברה.

הדמיה לא פולשנית של התגובה החיסונית המולדת בדגם דג הזברה הזחל של<em&gt; Streptococcus iniae</em&gt; זיהום

The aquatic pathogen, Streptococcus iniae, is responsible for over 100 million dollars in annual losses for the aquaculture industry and is capable of ...

המטרה הכללית של פרוצדורה זו היא לבצע מיקרו-הזרקה של פתוגן חיידקי streptococcus IEA לתוך זחלי דגי זברה, לצורך דימות חי ולא פולשני של תגובת המערכת החיסונית של המארח. דבר זה מושג תחילה על ידי טעינת מחט המיקרו-הזרקה בתליה חיידקית וסידור של זחלי דגי זברה הרדומים על תבנית הזרקה של אגרוז.לאחר מכן, הזחלים המוזרקים מקובעים באגרוז בעלת נקודת התכה נמוכה. לבסוף, תאי מערכת החיסון של המאחס מסומנים פוטו-כימית למעקב קל, והזיהום נדגם באמצעות מיקרוסקופ קונפוקלי. בסופו של דבר, הזרקה מיקרוסקופית של streptococcus IEA אל תוך השקיק האוזני (otic vesicle), והסימון הפוטו-כימי והמיקרוסקופיה הקונפוקלית העוקבים, משמשים לחקר תגובת מערכת החיסון של זחלי דגי זברה.היתרון המרכזי של טכניקה זו על פני שיטות קיימות, כגון הזרקה לווריד הזנב, הוא שהזרקה לשקיק השמיעה (otic vesicle) יוצרת זיהום חיידקי מקומי המאפשר דימוי לא פולשני של אינטראקציות בין פתוגן למארח בזריעה של זבב-זגב (zebrafish) שקופה. כדי להתחיל, הכינו תמיסת agar בריכוז של 1.5% עד 2% מסוג high melt בתוך תווך E3, וחממו במיקרוגל עד שהתמיסה תהיה שקופה. לאחר הקירור, שפכו מעט מהאגר לפטריה, בכמות המספיקה רק לכיסוי תחתית הכלי, וסובבו אותה.לאחר שה-aros התמצק, הניחו על גביו מסרק ג'ל שטוף ויבש, כך שהקצה המוצק ינוח על שפת פטרי dish והקצה המשונן ייגע ב-aros. ודאו שהמסרק אופקי ככל האפשר, ויוצר זווית של 30 מעלות ביחס לשכבת ה-aros התחתונה. מזגו כמות קטנה נוספת של aros לממשק שבין המסרק לשכבת ה-aros התחתונה, כך ששכבת ה-aros הטריה תכסה את בארות המסרק.המתן לקירור מלא לפני הסרת המסרק. לאחר מכן, בעזרת טיפ של פיפטה, הסר כל שאריות בולטות של agarose מהבארים. שפוך מצע E three מעל תבנית ההזרקה ואחסן בטמפרטורה של 4 °C.לאחר הכנת אינוקולום ה-SNEA והזחלי zebrafish להזרקות בהתאם לפרוטוקול הכתוב, הפעילו את המיקרו-מזרק והגדירו את טווח הזמן למילישניות. פתחו את השסתום במיכל הפחמן הדו-חמצני כדי להזרים גז לקו. הלחץ במיקרו-מזרק צריך להיות כ-20 PSI. בצעו וורטקס לתרבית SNEA שהוכנה ב-phenol red ו-PBS, והשתמשו בקצה של מיקרו-לוודר כדי לטעון שני עד שלושה µL מהתרבית לתוך מחט הזרקה קפילרית שנמשכה. התקינו את המחט הטעונה על מיקרו-מניפולטור המחובר למעמד מגנטי ומקמו אותה תחת מיקרוסקופ סטריאוסקופי כך שהמחט תהיה בזווית של כ-45 עד 65 מעלות ביחס לבסיס המיקרוסקופ.ראשית, יש לשבור את קצה המחט באמצעות פינצטה עדינה, ולאחר מכן ללחוץ על דוושת הרגל של המיקרו-מזרק כדי להוציא טיפה של התחליל (inoculum) אל קצה המחט. השתמשו בסרגל המדידה בעדשת האוקולר של המיקרוסקופ כדי למדוד את קוטר הטיפה. קוטר הטיפה צריך להיות כ-0.10 millimeter, שזהו נפח של כ-nanoliter אחד.כדי לכוונן את גודל הטיפה, יש לכוונן את הגדרת משך הזמן במזרק המיקרו (micro injector) או להשתמש בפינצטה עדינה כדי לקצץ חלק גדול יותר מקצה המחט. זמן ההזרקה צריך להיות בין 20 ל-35 milliseconds כדי למנוע נזק מוגבר לרקמה. לאחר מכן, בעזרת פיפטת העברה פלסטית, העבירו דג אחד לכל באער בתוך 12 הבארים של תבנית ההזרקה.לאחר מכן, בעזרת מוט זכוכית, לולאת שיער או טיפ פלסטיק, מקמו בעדינות את הזחלים כך שהראשים יפנו לכיוון גב המיקרוסקופ ושקי החלמון יהיו צמודים לצד שמאל של הבאר. הפנו את האוזן השמאלית של הזחלים כלפי מעלה, לכיוון התקרה. כאשר הזחלים מוכנים להזרקה, השתמשו בכפתורים של המיקרו-מניפולטור כדי ליישר את המחט הטעונה עם השלפוחית האוזנית (otic vesicle), כך ששניהם יופיעו באותו שדה ראייה.בעזרת קצה המחט, נקב את השכבה האפיתליאלית החיצונית של שלפוחית השמיעה (otic vesicle) כך שהקצה יהיה ממש בתוך השלפוחית. כעת, תוך שימוש בלחץ נמוך מספיק כדי לא לפוצץ את החלל, לחץ על דוושת הרגל כדי להזריק ננוליטר אחד של המינון הרצוי של SNEA. אם ההזרקה הצליחה, שלפוחית השמיעה צריכה להתמלא בתוספת phenol red, אך לא הרקמה שסביבה.הוצאו בזהירות את המחט מהזחלים ותחת הגדלה של five x, הזיזו ביד את לוח ההזרקה כך שהזחל יהיה בשדה הראייה. במקרה של הזרקת חיידקים המסומנים פלואורסצנטית תחת מיקרוסקופ פלואורסצנטי, סרקו חזותית את הזחלים המוזרקים ושמרו רק את אלו שבהם שיקוע החיידקים התרחש אך ורק בתוך ה-otic vesicle, כדי להבטיח שנפח ההזרקה יישאר זהה לאורך הניסוי. לאחר הזרקה לכל עובר 48י, הזריקו טיפה של תרחיף חיידקים לתוך מבחנת צנטריפוגה של 1.7 milliliter המכילה 100 microliters של PBS סטרילי.לאחר מכן, פזרו 100 µL על צלחות THY plus P auger, והדגרירו בטמפרטורה של 37 °C למשך לילה. כדי לקבוע את ה-CFU בנפח ההזרקה, כאשר כולה של קבוצה של 12 זחלים על מסילת ההזרקה הוזרקה, השתמשו בזהירות בפיפטת העברה מפלסטיק כדי להוציא את הזחלים מהבארים ולהניחם בצלחת פטרי חדשה. הסירו את תמיסת ה-trica והחליפו אותה בכ-2 mL של מצע E three טרי כדי לאפשר לזחלים להתאושש.דגרו את העוברים בהתאם לפרוטוקול הכתוב. לאחר הכנת aro עם trica, בהתאם לפרוטוקול הכתוב על במה של מיקרוסקופ סטריאו, השתמשו בפיפט העברה כדי להעביר ארבעה עד חמישה זחלים שהורדמו לתוך צלחת עם תחתית זכוכית. הוציאו את תמיסת ה-trica וה-aro מאמבט המים בטמפרטורה של 55 °C והניחו לה להתקרר בטמפרטורת החדר למשך דקה עד שתי דקות.בינתיים, הסירו כ যতটা ניתן נוזלים מהזחלים המורדמים. לאחר מכן, שפכו את האגרוס המקורר לתוך הצלחת עד כי כמחצית מהשטח יהיה מכוסה. לאחר מכן, סובבו את הצלחת כדי לפרוס את האגרוס.אספו את הזחלים שצפו לדפנות הכלי והעבירו אותם באמצעות פיפט למרכז. לאחר מכן, תחת מיקרוסקופ סטריאו, השתמשו בקצה פיפט ארוך כדי למקם בעדינות את הזחלים בתנוחה הרצויה לצילום. עבור מיקום של השקיק השמיעתי (otic vesicle), מקמו את הזחלים כך שהשקיק השמיעתי הימני פונה כלפי מעלה והשקיק השמיעתי השמאלי צמוד לתחתית הכלי.הניחו לארוס להתקרר למשך כ-10 דקות לפני הזזת הצלחון. לאחר מכן, טפטפו בעדינות באמצעות פיפט מעט תמיסת trica ו-E three מעל שכבת הארוס כדי לשמור עליה לחה. לצורך ויזואליזציה של הדגימות, השתמשו ב-Zack scan עם לייזרים של 488 nanometer ו-543 nanometer.השתמשו בסריקת קו רציפה כדי להתאים את הספק הלייזר ואת הגבר הגלאי. ודאו שאין פלואורסצנציה אדומה שהומרה באופן מקרי פוטו-כימית בחלון הבקרה של רכישת התמונה. תחת הגדרות הגירוי, בחרו בכלי השבב הסורק (use scanner tool) ובחרו באפשרות main, בחרו בלייזר 405 nanometer והגדירו אותו ל-70% power.לאחר מכן, באמצעות אפשרות העיגול, הגדירו את אזור העניין (ROI) בשקיק האודי (odic vesicle); תחת הגדרת תחילת הגירוי, בחרו ב-activation in series עם pre activation של פריים אחד וזמן הפעלה של 60,000 milliseconds בחלון הגדרות הרכישה. תחת הכותרת time scan, בחרו שני מרווחים של דקה אחת כל אחד, אחד עבור pre ואחד עבור post photo conversion. התחילו את סדרת ה-time-lapse כדי להניע את ה-photo conversion של אזור העניין שהוגדר.לבסוף, סרקו את הדגימה באמצעות Zack ולייזרים באורכי גל של 488 ו-543 ננומטר. כדי להדגים את הפלואורסצנציה האדומה שעברה המרה פוטוכימית, כמו גם כל פלואורסצנציה ירוקה שנותרה, הזרקה מיקרוסקופית של SNEA ב-phenol red לתוך השלפוחית האוזנית (otic vesicle) גורמת לתגובה מקומית ראשונית של המארח, אשר כאשר ההזרקה מבוצעת נכון, צריכה להיראות רק בשלפוחית האוזנית ולא ברקמה מסביבה או בדם. לחלופין, אם מוזרקות חיידקים מסומנים, סריקה מהירה של זחלים נגועים מיד לאחר ההזרקה יכולה לאשר שהחיידקים נמצאים רק בשלפוחית האוזנית ולא ברקמה מסביבה.אתרי מיקרו-הזרקה של זיהום ממוקם בתחילה הם שימושיים לחקר כימותקסס של לוקוציטים, כפי שמוצג כאן. ניתן לכמת את גיוס הלוקוציטים באמצעות צביעת Sudan black של גרנולות נויטרופילים או קיבוע בפורמאלדהיד של קווי טרנסגנים פלואורסצנטיים, תוך שימוש בקווי דגי זהב טרנסגניים המבטאים את החלבון הפלואורסצנטי הירוק. Dendra two, באופן ספציפי במקרופאגים או בנויטרופילים, חשף כי הזרקה של NEA לתוך השקיק האוזני (otic vesicle) עוררה גיוס של נויטרופילים ומקרופאגים ופגוציטוזה של חיידקים בתוך 60 דקות לאחר הזיהום.באיור זה, שני מקרופגים מסומנים ב-DRA שגויסו לשקיק האוזני (otic vesicle) חמש שעות לאחר ההדבקה, עברו המרה פוטו-כימית ולאחר מכן נעקבו במהלך 24 השעות הבאות. למרות שחלק מהתאים שעברו המרה נותרו בשקיק האוזני או באזור הראש, חלקם נמצאו מפוזרים ברחבי גוף הזחלים, כפי שניתן לראות כאן. לאחר צפייה בסרטון זה, תהיו בעלי הבנה טובה לגבי אופן ההזרקה המיקרוסקופית של streptococcus n EEA לשקיק האוזני של דגי זברה בגיל שלושה ימים לאחר ההפריה.שלב ראשון כולל סידור של זחלים מורדמים על תבנית ההזרקה ומילוי המחט בתרבית החיידקים. שני, הזרקה מיקרוסקופית של חיידקים אל תוך השקיק האוטי (otic vesicle). שלושה, קיבוע של זחלים מזוהמים בג'ל אגרוז (agarose) בנקודת התכה נמוכה, וארבעה, שימוש במיקרוסקופ קונפוקלי לסימון פלואורסצנטי של לוקוציטים של המארח והדמיה של אינטראקציות בין לוקוציטים לפתוגנים in vivo.

non-invasive-imaging-innate-immune-response-zebrafish-larval-model

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

אימונולוגיה וזיהומים

עוברי דג הזברה שקוף הוכיחו המארחים מודל שימושי כדי לחזות אינטראקציות למידה תפקודית בין תאים חיסוניים מולדים פתוגנים חיידקיים תאיים,...

זיהום של עוברים דג הזברה עם פתוגנים חיידקיים תאיים

ההתפתחות המהירה, גודל קטן השקיפות של דג הזברה הם יתרונות עצומים למחקר שליטה החיסון המולדת של...

הדמיה לא פולשנית של פטרת מופצת הזחלים דג הזברה

מקור: Zhang, X., et al. מודל עובר דג זברה להדמיה in vivo וניתוח תוך-חיוני של זיהום סטפילוקוקוס זהוב הקשור לביו-חומר. J. Vis. Exp. (2019)סרטון זה מדגים הדמיה פלואורסצנטית של עוברי דג זברה שהוזרקו עם Staphylococcus aureus, המאפשר כימות של התקדמות הזיהום והתפלגות החיידקים כדי להעריך את ההשפעה של מיקרוספירות ביו-חומר על אינטראקציות מארח-פתוגן in vivo.

 הדמיה פלואורסצנטית של זיהום חיידקי הקשור לביו-חומר בעוברי דג זברה

מקור: Zhang, X. et al., מודל עובר של דג זברה להדמיה In Vivo וניתוח תוך-חיוני של זיהום סטפילוקוקוס זהוב הקשור לביו-חומר. J. Vis. Exp. (2019)סרטון זה מדגים מודל עוברי של דג זברה לחקר זיהומים הקשורים לביו-חומרים מושתלים. הזרקת סטפילוקוקוס זהוב עם מיקרוספירות פוליסטירן משפרת את הישרדות החיידקים, ומאשרת את תפקידם של חומרים מושתלים בקידום זיהום.

ניתוח in vivo של זיהומים חיידקיים הקשורים להשתלה באמצעות עוברי דג זברה

סרטון זה מדגים מעקב אחר גיוס לויקוציטים באמצעות זחלי דגי זברה טרנסגניים המבטאים חלבון פלואורסצנטי ירוק הניתן להמרה פוטו-מיטבית. הזרקה מראש של חיידקים בעלי תווית צבע פלואורסצנטי אדום לתוך שלפוחית העין וגרימת המרת אור מאפשרת תצפית על נדידת לויקוציטים, פגוציטוזה ופיזורם בכל הגוף, ומספקת תובנות חשובות לגבי דינמיקת התגובה החיסונית.

מעקב לויקוציטים מבוסס פוטו-המרה בדגי זברה טרנסגניים נגועים בחיידקים

הסרטון מדגים טכניקת פציעה ולכידה של דגי זברה לצפייה בזיהום פתוגן פטרייתי המסומן באופן פלואורסצנטי בזחלי דגי זברה. זיהום ראשוני מושך מקרופאגים, וככל שהזיהום נמשך, גיוס נויטרופילים מתקדם באתר ההזרקה.

טכניקת zWEDGI להמחשת זחלי זברה נגועים בפתוגן פטרייתי

התגובה החיסונית המולדת מגנה על אורגניזמים מפני זיהום הפתוגן. מרכיב קריטי של התגובה החיסונית המולדת, פרץ הנשימה תא בלען, מייצר מיני חמצן תגובתי שהורגים מיקרואורגניזמים פולשים. אנו מתארים assay פרץ נשימה שמכמת מיני חמצן תגובתי נוצרו כאשר התגובה החיסונית המולדת מושרה כימית.

כימות תגובת Burst נשימה כאינדיקטור של החיסון מולדת בריאות בדג הזברה

לומד את האירועים המוקדמים ביותר של התפתחות תא preneoplastic ואינטראקציה תא חיסון מולדת הוא מרכזי להבנה ולטיפול בסרטן. כאן אנו מתארים שיטה לגרום לתנאי תמורות תאי אפיתל והדמית החיה הבאה של אינטראקציה תא חיסון מולדת עם G12V HRAS לבטא בתאי עור בזחלי דג הזברה.

הדמיה חיה של אינטראקציות תא של מערכת חיסון המולדת וPreneoplastic שימוש מערכת ביטוי / כטב&quot;מ העין מתנהלת Gal4 בעור הזחל דג הזברה

עוברי דג זברה שקופים אופטית נמצאים בשימוש נרחב כדי לחקור ולדמיין בזמן אמת את האינטראקציות בין מיקרואורגניזמים פתוגניים לתאי החיסון המולדים. מיקרו-הזרקה של Mycobacterium abscessus, בשילוב עם הדמיה פלואורסצנטית, משמשת לבחינת מאפיינים פתוגניים חיוניים כגון היווצרות חבל בעוברי דג זברה.

פענוח ופתוגנזה הדמיה והשתרגות<em&gt; Abscessus Mycobacterium</em&gt; בעוברי דג הזברה

מודלים מערכתיים ומקומיים של זיהום דג זברה לנגיף שפעת אנושי A. באמצעות מודל זיהום מערכתי, ניתן להשתמש בדג הזברה לבדיקת תרופות אנטי-ויראליות. באמצעות מודל זיהום מקומי, ניתן להשתמש בדג הזברה כדי לאפיין את תגובות תאי החיסון של המארח.

באמצעות מודלי דג זברה של נגיף שפעת A האדם למסך תרופות אנטי ולאפיין מארח תגובות תא חיסון

המחקר הנוכחי מתאר מודל העובר דג זברה ויזואליזציה ויוו וניתוח intravital לזיהום הקשורים biomaterial לאורך זמן מבוסס על קרינה פלואורסצנטית מיקרוסקופ. מודל זה היא מערכת מבטיח משלימים מודלים בעלי חיים יונקים כגון עכבר מודלים לימוד הקשורים biomaterial זיהומים ויוו.

מודל העובר דג זברה, ויזואליזציה Vivo, ניתוח Intravital של Biomaterial-הקשורים Staphylococcus aureus זיהום

למדו הדמיה לא פולשנית של התגובה החיסונית המולדת בדגם דג הזברה הזחל של Streptococcus iniae זיהום. שיטה זו מאפשרת מחקר מפורט של אינטראקציות מארח-פתוגן בזמן אמת.

הדמיה לא פולשנית של התגובה החיסונית המולדת בדגם דג הזברה הזחל של

גלה סרטונים נוספים