22 באוקטובר 2015
כאן אנו מציגים פרוטוקול להשראת אנורקסיה מבוססת פעילות (ABA) בעכברים מתבגרים. ABA הוא מצב של היפראקטיביות המתעורר על ידי הטלת הגבלת מזון על מכרסמים עם גישה לגלגל ריצה. תופעה זו משמשת כמודל לחקר הנוירוביולוגיה הבסיסית של אנורקסיה נרבוזה.
המטרה הכוללת של הליך זה היא לגרום לאנורקסיה מבוססת פעילות בעכברים נקבות מתבגרות. זה מושג על ידי הצגת העכברים תחילה לגלגל ריצה ובמשך שלושה ימים לפחות ניטור רציף של פעילות גלגל הריצה שלהם. לאחר מכן, ה-M מוכנסים ללוח זמנים מוגבל של גישה למזון ונרשמים שינויים בהפעלת הגלגלים הוולונטריים שלהם.
בסופו של דבר, מודל אנורקסיה מבוסס פעילות זה יכול להראות ששינויים נוירוביולוגיים קשורים לשינויים בהתנהגות של בעל חיים כאשר ניתנת להם גישה מוגבלת למזון. אני מקווה שמודל זה של אנורקסיה מבוססת פעילות יעזור בשיפור הטיפול באנורקסיה נרבוזה מכיוון שהוא יזהה הבדלים אינדיבידואליים נפרדים בנוירוכימיה ובנוירואנטומיה העומדים בבסיס החוסן והפגיעות לאנורקסיה נרבוזה. למרות ששיטה זו יכולה לספק תובנה לגבי אנורקסיה נרבוזה, ניתן ליישם אותה גם על מחלות אחרות שיש להן תחלואה נלווית לחרדה.
בדרך כלל, עירום אינדיבידואלי, שיטה זו תתקשה מכיוון שהפגיעות של כל בעל חיים לפעילות המבוססת על AIA משתנה מאוד. לפיכך נדרש מעקב צמוד אחר הירידה במשקל של בעל החיים, אכילה ופעילות, או שבעלי חיים יכולים להתחיל בהקמה. הנח את המחשב ורכזת ה-USB בחדר החיות הרחק ממים זורמים ותנועת הולכי רגל, אך בטווח המשדר של גלגלי הריצה.
השתמש גם בספק כוח לגיבוי עבור המחשב ורכזת ה- USB באמצעות מתגים ברכזת. הגדר את מספרי הערוצים כך שיתאימו למספרי הערוצים של כל גלגלי הריצה שהוא יפקח עליהם. כעת הפעל את תוכנת מנהל גלגל הריצה ואשר שהתוכנה מזהה כל משדר.
כל גלגל יופיע בחלון התוכנית. חיישני גלגל מתחת לכותרת. התוכנה תיתן באופן אוטומטי מספר זיהוי לכל גלגל.
זה עשוי להיות מועיל לציין את המספר הזה על הגלגל. אם גלגל אינו מזוהה, החלף את סוללות הגלגל. לאחר מכן, הכינו כלוב לכל נושא עכבר עם מצעים, גישה חופשית למים וגלגל ריצה.
גלגל הריצה חייב לנוע בחופשיות מבלי לגעת בקירות הכלוב, סל המזון או החלק העליון של הכלוב. כמו כן, ודא שהתוכנה מעדכנת את ספירת הגלגלים. כדי להתאקלם, בעלי החיים מאכלסים כל עכבר בנפרד בכלוב עם גלגל ריצה וגישה לכ-100 גרם מזון יבש ו-50 גרם מזון רטוב בכלוב.
בתוכנה. התחל את רכישת הנתונים והאחסון על-ידי בחירה באפשרות התחל רכישה. מתפריט הקובץ, בחר את הספרייה שבה יישמרו הנתונים עד להפסקתם.
התוכנה תקליט ברציפות כל יום ממש לפני תחילת השלב החשוך של מחזור האור. שקלו את החיה, שקלו מזון רטוב ושקלו מזון יבש. מלאו מחדש את מיכל המזון היבש אם הוא מכיל פחות מ-50 גרם והחליפו את מיכל המזון הרטוב.
אם האוכל מתייבש או מתלכלך במצעים, רשום ידנית את ספירת הגלגלים באותו זמן. כדי לגבות את הנתונים הדיגיטליים ביום הראשון להגבלת המזון, הוציאו את כל המזון הרטוב והיבש מהכלוב באמצע חלק מחזור האור של היום. מאוחר יותר בתחילת הזמן החשוך, רשום את משקל החיה ואת ספירת הגלגלים.
לאחר מכן הכניסו כ-50 גרם מזון יבש לתוך המיכל וספקו חמישה גרם מזון רטוב בסירה. לאחר מכן, הכינו כלוב טרי עם מצעים וקנים לכל בעל חיים. אחרי שעתיים עם העברת המזון, גלגל הריצה וכמה חופנים של מצעים מלוכלכים לכלוב המוכן.
העבירו את העכברים לכלובים החדשים ללא מזון. בתום תקופת הגישה למזון, רשום את משקל מזונות UNE ואת ספירת הגלגלים. חזור על תהליך זה מדי יום למשך הניסוי.
אם בשלב כלשהו בעל חיים יורד מתחת ל-75% ממשקלו ההתחלתי, הסר אותו מהניסוי. אינדיקציות אחרות לרעב מוגזם שיכולות להצביע על כך שיש להוציא את החיה מהניסוי כוללות יציבה כפופה וחוסר יכולת לנוע ברחבי הכלוב. החיה עלולה להיות קרה למגע ולא לאכול במהלך השעתיים של הגישה למזון.
לאחר שלושה ימים של הגבלת מזון, סיימו את הניסוי. או להמית את החיה כדי לקצור רקמות או לאפשר לבעלי החיים להתאושש. לבדיקות התנהגותיות נוספות בתוכנה, לחץ על אפשרות סיום הרכישה תחת תפריט הקובץ.
הנתונים נשמרים כעת בקובץ WLS בספרייה שנבחרה בתחילת הניסוי, הסר את גלגלי הריצה מהכלובים ולאחר מכן הסר את הסוללות שלהם. יש לאפשר לבעלי חיים מחלימים גישה למזון. כעת, ייצא את הנתונים לגיליון אלקטרוני.
בחר באפשרות הייצוא בתפריט הקובץ ובחר את קבצי ה-WLS הרצויים באפשרות קובץ נתוני המקור. לאחר מכן, בחר את תאריך ושעת ההתחלה והסיום, ולבסוף בחר כל חיישן גלגל לייצוא. ברשימת חיישני הגלגלים, ניתן לנתח את הנתונים לפי הצורך כדי לחקור את ההשפעה של b.
באוכלוסייה דומה לאנורקסיה נרבוזה אנושית, נקבות עכברים מתבגרים התאקלמו לגלגל ב-P 36. זמן קצר לאחר תחילת ההתבגרות המינית, החל מחסור במזון ב-P 40 ומשקל גופם ירד בחדות לבעלי חיים לא היו גלגלי ריצה או הגבלות מזון. החיות המורעבות רצו יתר על המידה לאחר תחילת הגבלת המזון.
ניתוח מפורט של פעילות הגלגלים הראה דפוס צירקדי. באופן מוזר, אפילו במהלך גישה למזון, בעלי חיים מורעבים בחרו להשתמש בגלגל הריצה. לאחר שהחלה הגבלת המזון, חלק מבעלי החיים הראו עלייה בפעילות ממש לפני זמן ההאכלה, מה שעשוי להיקרא פעילות ציפייה למזון ניתן להשיג תוך מספר שעות אם היא מבוצעת כראוי.
בעת ניסיון הליך זה, חשוב לזכור לרשום את ספירת הגלגלים באופן ידני לפחות פעם ביום. שיבוש בלתי צפוי של קו החשמל או התרוקנות הסוללות עלולים לשבש את ספירת הגלגלים שנוצרה על ידי המחשב ביצוע הליך זה. ניתן לבצע שיטות אחרות כגון כימיה חיסונית, אלקטרופיזיולוגיה ובדיקות התנהגותיות על מנת לענות על שאלות נוספות כגון כיצד אינדוקציה של אנורקסיה מבוססת פעילות משפיעה על האנטומיה של המוח, תכונות ביופיזיקליות והתנהגות.
מאמר זה מציג פרוטוקול להשראת אנורקסיה מבוססת פעילות (ABA) בעכברים נקבות בגיל ההתבגרות, המהווה מודל לחקר הנוירוביולוגיה של אנורקסיה נרובוזה. הפרוטוקול כולל הגבלה של מזון וניטור של פעילות בגלגל ריצה כדי לצפות בשינויים התנהגותיים.
מודל מכרסמים לאנורקסיה מבוססת-פעילות (ABA) מספק מערכת רלוונטית תרגומית לניתוח המנגנוים הנוירוביולוגיים העומדים בבסיס אנורקסיה נרווזה, הפרעה בעלת שיעורי תמותה גבוהים ואפשרויות טיפוליות מוגבלות. על ידי מתן אפשרות למניפולציה מבוקרת של הגישה למזון והפעילות, מודל זה תומך בהפחתת סיכונים מנגנונית ובתיקוף מטרות בממשק שבין נוירוביולוגיה התנהגותית למחלות פסיכיאטריות. התוצאות הכמותיות והשונות האישידית שלו מספקות מידע לביטחון חיזוי ולמיון פורטפוליו בשלבים מוקדמים של גילוי תרופות נוירופסיכיאטריות.
מודל ה-ABA משתלב ברצף הגילויים הנוירו-פסיכיאטריים, החל ממחקרי מנגנונים מוקדמים ועד להערכת מועמדים בשלב הפרה-קלניקה.