דש שריר כלי דם מהונדס

המטרה הכוללת של הליך זה היא ליצור דש רקמה בעל כלי דם היטב שישמש לשחזור פגמים בדופן הבטן בעובי מלא. זה מושג על ידי הכנת פיגום חומצה פולילקטית פולילקטית מתכלה. לאחר מכן, נזרעים תאי אנדותל, תאי שריר ופיברובלסטים, והשתל מתורבת במבחנה כדי לאפשר לתאים להרכיב את עצמם.

לאחר מכן הרקמה המהונדסת מושתלת סביב עורק הירך והוורידים של העכבר, שם הוא עובר אנסטימוזה עם כלי הפונדקאי והופך לכלי דם גבוהים. לבסוף, הרקמה מועברת כדש פדיקל לפגם בדופן הבטן בעובי מלא. בסופו של דבר, כלי דם של השתל מוכחים על ידי אולטרסאונד, הזרקת דקסטרן T, וצביעה חיסונית ל-CD31, וקשיחות הדש נבדקת באמצעות מכשיר בדיקה ביודינמי.

היתרונות העיקריים של זה על פני השיטות הקיימות הם ניידות נמוכה יותר של אתר התורם והכדאיות הגבוהה של הדש המהונדס שניתן להשתמש בו לבניית רקמות רכות בעובי מלא. שיטה זו יכולה לעזור לחולים עם פגמים בדופן הבטן בעובי מלא. הדגמת ההליך תבוצע על ידי ד"ר דנה אגוזי, מנתחת פלסטית, בשיתוף פעולה עם המעבדה שלי, ואנינה פריימן תסייע לה.

לאחר הכנת פיגומים והטמעת תאים על פי פרוטוקול הטקסט, בצע חיטוי של כלי הניתוח הבאים: מספריים ישרים דקים קטנים, מספריים קפיציים, מלקחיים ישרים בעלי קצה עדין, מלקחיים משוננים, מלקחיים של הדסון, מחזיק מחט ואזמל להב מספר 15. מכינים תערובת של 425 מיקרוליטר קטמין ו -75 מיקרוליטר סילודסין בצינור מיקרוצנטריפוגה ומעבירים למזרק. לאחר מכן יש לדלל 0.3 מיליגרם למיליליטר של בופרנורפין אחד עד 20 במי מלח סטריליים.

לאחר הרדמת העכבר לפי פרוטוקול טקסט, הניחו אותו על במה, חממו אותו ל-37 מעלות צלזיוס, כדי לשמור על טמפרטורת גוף תקינה, והשתמשו בתחבושת דביקה כדי לאבטח אותו לבמה. עם קצות כותנה, השתמש ביוד ואחריו 70% אתנול כדי לנקות את מקום החתך כדי ליצור שדה עבודה אספטי. לאחר אימות רמת ההרגעה, השתמש באזמל כדי לבצע חתכים דרך העור מהברך לרצועה המפשעתית במקביל לכלי הירך עד לחשיפת עורק הירך וכלי הוורידים.

השתמש בקליפסים או במחטים כדי להחזיק את העור. לאחר מכן, בעזרת מספריים קפיציים ומלקחיים, החל מ-AV הירך מתחת לעומק ומעל ההסתעפות ל-AV הטיביאלי והפרונאלי, בודד בזהירות את עורק הירך וכלי הווריד מהרקמה שמסביב. השאירו את העומק ללא מגע על מנת לשמר את זרימת הדם לרגל ולמנוע דיסכמיה לאחר מכן.

לאחר מכן, קפלו את השתל המוכן הקודם סביב ה-AV החשוף של עצם הירך מתחת לעומק ומעל ההסתעפות ל-AV הטיביאלי והפרונאלי והשתמשו ב-8-0 תפרי משי להצטרף לקצותיו. כדי להבטיח כלי דם של השתל על ידי הנימים הנובטים מכלי ה-AV של עצם הירך בלבד, הניחו חתיכת לטקס מעוקר מתחת לשתל ואז עטפו אותה סביב השתל והתפר, באמצעות משי 6-0. לאחר מכן השתמש ב-4-0 תפרי משי כדי לסגור את העור שמעליו.

יש להזריק בופראורפין תת עורית פעמיים ביום למשך יומיים-שלושה. יש לעקוב מקרוב אחר העכבר עד להתאוששות מההרדמה וכל יום לאחר מכן עד להעברת השתל כדש. שבוע עד שבועיים לאחר ההשתלה, לאחר הרדמת העכבר, הניחו את החיה על הבמה המחוממת ואבטחו אותה.

לאחר ניקוי מקום החתכים כפי שהודגם קודם לכן בסרטון זה, השתמש במספריים ובמלקחיים כדי לפתוח בזהירות את התפרים בעור, ובעזרת אזמל בצע חתך בעור בניצב לרצועה המפשעתית, וממשיך דרך עור הגחון. בעזרת אזמל מבצעים חתך בדופן הבטן הגחונית. הסר בזהירות את חתיכת הלטקס וחשוף את הדש הוסקולרי.

ואז בעזרת מספריים ומלקחיים, נתח את דש הרקמה מהרקמה שמסביב. עם 8-0 תפר משי, קשר את הקצה הדיסטלי של ה-AV הירך כדי למנוע דימום מה-AV. לאחר מכן יש לצרוב את ה-AV בברך, דיסטלי לרקמה המושתלת המקופלת ול-8-0 התפרים. העבירו בעדינות את ה-AV של עצם הירך העטופה בשתל לכיוון דופן הבטן הגחונית, הימנעו מנזק לעורק, כדי לקבוע באיזה מרחק יש לבצע את הפגם בעובי המלא.

בעזרת מספריים קפיציים, בצע חתך בשריר הבטן הישר והסר קטע של כסנטימטר על 0.8 סנטימטר מהשריר עם העור שמעליו. העבר את ה-AV הירך העטוף בשתל כלי הדם כדש צירי לפגם בעובי המלא בדופן הבטן הגחונית, באמצעות 8-0 תפרי משי למניעת בקע. תפר את הדש לרקמת השריר שמסביב.

לאחר מכן עם 4-0 משי, תפר את עור הרגל. השאר את עור הגחון חשוף כדי לחקות את ההשפעה של פגם מלא בדופן הבטן. בעזרת גזה עם יוד ותחבושת סטרילית, מכסים את הפצע בעור כדי למנוע זיהום של האזור החשוף.

מתן בופרנורפין כפי שתואר קודם לכן בסרטון זה. עקוב אחר בעל החיים מקרוב עד להתאוששות מההרדמה וכל יום לאחר מכן עד לשחזור הדש למחקרים המתוארים בפרוטוקול הטקסט. שבוע ושבועיים לאחר ההשתלה, תצפית גסה על אזור השתל חשפה שתלי רקמה ברי קיימא ובעלי כלי דם גבוהים כפי שנקבע על ידי צביעה חיסונית חיובית של CD31.

השתלות הרקמה היו גם חדורות מאוד כפי שניתן לראות על ידי הזרקת וריד זנב FITC-dextran ומדידות אולטרסאונד. גרף זה מדגים כי כלי דם רבים נצפו כבר שבוע לאחר ההשתלה, מספר שעלה משמעותית לאחר שבוע נוסף בקרבת כלי ה-AV. כפי שניתן לראות כאן, סבלנות ושלמות פוסט-פמורלית לאחר השתלת השתל אושרו על ידי הדמיית אולטרסאונד במצב דופלר צבעוני.

הכחול והאדום מייצגים את זרימת הדם בשתל. יתר על כן, בדיקה גרפית אולטרסאונד חשפה זלוף באזור ההשתלה, שהיה מעט גבוה יותר לאחר ההשתלה בהשוואה לשבוע אחד. בדיקה גסה של הדשים שבוע לאחר ההעברה העלתה שהם עברו היצמדות חזקה לסביבתם.

כאשר משווים את דשי התאים המוטבעים לפני כלי הדם, השתלים הא-תאיים הלא וסקולריים הראשונים הראו תכונות מכניות מעולות, כולל נוקשות וחוזק, מה שגרם גם לפחות פירוק ובקע. לאחר שליטה, ניתן לבצע טכניקה זו תוך כ-30 דקות אם היא מבוצעת כראוי. לאחר פיתוחה, טכניקה זו סוללת את הדרך למנתחים פלסטיים לטפל בחולים הסובלים מפגם בדופן הבטן בעובי מלא וכן מומים מורכבים ומשמעותיים אחרים ברקמות רכות.