Isolation of CD146<sup>+</sup> Resident Lung Mesenchymal Stromal Cells from Rat Lungs

Jennifer J.P. Collins; Marius A. M&#246;bius; Bernard Th&#233;baud

doi:10.3791/53782

בידוד של CD146 + תאי סטרומה mesenchymal ריאות התושב מריאות העכברוש

JoVE Journal
Biology

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Biology

Isolation of CD146⁺ Resident Lung Mesenchymal Stromal Cells from Rat Lungs

בידוד של CD146 + תאי סטרומה mesenchymal ריאות התושב מריאות העכברוש

Full Text

8,734 Views

09:47 min

June 17, 2016

DOI: 10.3791/53782-v

Jennifer J.P. Collins^1,2, Marius A. Möbius^1,3,4, Bernard Thébaud^1,2,5

¹Sinclair Centre for Regenerative Medicine,Ottawa Hospital Research Institute, ²University of Ottawa, ³Department of Neonatology and Pediatric Critical Care Medicine, Medical Faculty and University Hospital Carl Gustav Carus,Technische Universität Dresden, ⁴DFG Research Center and Cluster of Excellence for Regenerative Therapies (CRTD),Technische Universität, Dresden, ⁵Children's Hospital of Eastern Ontario Research Institute

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

פרוטוקול זה מתאר טכניקת בידוד לקבלת תאי סטרומה mesenchymal תושב ריאה הראשית של חולדות, באמצעות עיכול אנזימטי, הפרדת שיפוע צפיפות, דבקות פלסטיק CD146 ⁺ מבחר חרוז מגנטי.

המטרה הכוללת של הליך זה היא לאפיין במבחנה תאי סטרומה מזנכימליים חיוביים ל-CD146 או MSCs המבודדים מריאת החולדה באמצעות שילוב של עיכול אנזימטי, הפרדת שיפוע צפיפות, היצמדות פלסטית ומיון חרוזים. שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום מחלות הריאות לגבי האופן שבו MSCs ריאות נדבקים במחלה וכיצד הם תורמים לאפנון חיסוני ולתיקון רקמות. היתרונות העיקריים של טכניקה זו הם שהיא מהירה, ניתנת לשחזור וניתנת ליישום בקלות על מינים שונים של חיות ניסוי או רקמות.

מי שידגים את השלבים הראשונים של ההליך יהיה ארול ואדיבל, עמית מחקר מהמעבדה שלי. כדי להסיר את הריאה מבית החזה, החזיקו את קנה הנשימה בעזרת מלקחיים קטנים והשתמשו במספריים כירורגיים כדי להפריד את קנה הנשימה בצד הרוסטרלי. לאחר מכן, תוך כדי משיכה עדינה של חבילת הריאות מבית החזה, חתכו כל רקמת חיבור בצד הגבי לאורך כלוב הצלעות.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos