Name: רקמת 3D משולב תכנון הנדסי במבחנה / סיליקו דגם גידול ריאות לניבוי יעילות טיפול תרופתי רקעים מוטציוני ספציפיים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-04-06T14:00:00.000+00:00
Duration: 13 min 34 s
Description: למד מודל ריאות תלת-ממדי משולב in vitro/in silico לחיזוי יעילות טיפולים ממוקדים בסרטן ריאה שאינו קטין-תאי. שיטה זו משפרת בדיקות תרופות טרום-קליניות באמצעות סימולציות חישוביות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

מחקר זה מומן על ידי המרכז למחקר קליני הבינתחומי (IZKF, BD247 מהענק) של בית החולים האוניברסיטאי של וירצבורג ותכנית Fit באיירן (שהוענקה היקה וואלס).

<ol><li>Bhattacharjee, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biomedicine+Pharma+firms+push+for+sharing+of+cancer+trial+data%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Biomedicine Pharma firms push for sharing of cancer trial data.</a> Science. 338, 29(2012).</li>
<li>Kola, I., Landis, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Can+the+pharmaceutical+industry+reduce+attrition+rates%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Drug+Discov%22%5BJournal%5D)">Can the pharmaceutical industry reduce attrition rates?</a> Nat Rev Drug Discov. 3, 711-715 (2004).</li>
<li>Arrowsmith, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trial+watch%3A+Phase+II+failures%3A+2008-2010%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Drug+Discov%22%5BJournal%5D)">Trial watch: Phase II failures: 2008-2010.</a> Nat Rev Drug Discov. 10, 328-329 (2011).</li>
<li>Arrowsmith, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trial+watch%3A+phase+III+and+submission+failures%3A+2007-2010%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Drug+Discov%22%5BJournal%5D)">Trial watch: phase III and submission failures: 2007-2010.</a> Nat Rev Drug Discov. 10, 87(2011).</li>
<li>Arrowsmith, J., Miller, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trial+watch%3A+phase+II+and+phase+III+attrition+rates+2011-2012%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Drug+Discov%22%5BJournal%5D)">Trial watch: phase II and phase III attrition rates 2011-2012.</a> Nat Rev Drug Discov. 12, 569(2013).</li>
<li>Pampaloni, F., Reynaud, E. G., Stelzer, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+third+dimension+bridges+the+gap+between+cell+culture+and+live+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Mol+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">The third dimension bridges the gap between cell culture and live tissue.</a> Nat Rev Mol Cell Biol. 8, 839-845 (2007).</li>
<li>Hartung, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toxicology+for+the+twenty-first+century%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Toxicology for the twenty-first century.</a> Nature. 460, 208-212 (2009).</li>
<li>Stratmann, A. T., Dandekar, G., Nietzer, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+in+vitro+tumor+Models+as+an+Alternative+for+Animal+Models+in+Preclinical+Studies%5BTitle%5D)+AND+%22Pharm+Ind%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional in vitro tumor Models as an Alternative for Animal Models in Preclinical Studies.</a> Pharm Ind. 75, 485-489 (2013).</li>
<li>Stratmann, A. T., Dandekar, G., Nietzer, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+in+vitro+tumor+Models+as+an+Alternative+for+Animal+Models+in+Preclinical+Studies%5BTitle%5D)+AND+%22Pharm+Ind%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional in vitro tumor Models as an Alternative for Animal Models in Preclinical Studies.</a> Pharm Ind. 75, 675-680 (2013).</li>
<li>Gudjonsson, T., Ronnov-Jessen, L., Villadsen, R., Bissell, M. J., Petersen, O. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((To+create+the+correct+microenvironment%3A+three-dimensional+heterotypic+collagen+assays+for+human+breast+epithelial+morphogenesis+and+neoplasia%5BTitle%5D)+AND+%22Methods%22%5BJournal%5D)">To create the correct microenvironment: three-dimensional heterotypic collagen assays for human breast epithelial morphogenesis and neoplasia.</a> Methods. 30, 247-255 (2003).</li>
<li>Weaver, V. M., Fischer, A. H., Peterson, O. W., Bissell, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+importance+of+the+microenvironment+in+breast+cancer+progression%3A+recapitulation+of+mammary+tumorigenesis+using+a+unique+human+mammary+epithelial+cell+model+and+a+three-dimensional+culture+assay%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">The importance of the microenvironment in breast cancer progression: recapitulation of mammary tumorigenesis using a unique human mammary epithelial cell model and a three-dimensional culture assay.</a> Biochem Cell Biol. 74, 833-851 (1996).</li>
<li>Antoni, D., Burckel, H., Josset, E., Noel, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+cell+culture%3A+a+breakthrough+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional cell culture: a breakthrough in vivo.</a> Int J Mol Sci. 16, 5517-5527 (2015).</li>
<li>Kim, J., Tanner, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recapitulating+the+Tumor+Ecosystem+Along+the+Metastatic+Cascade+Using+3D+Culture+Models%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Oncol%22%5BJournal%5D)">Recapitulating the Tumor Ecosystem Along the Metastatic Cascade Using 3D Culture Models.</a> Front Oncol. 5, 170(2015).</li>
<li>Worthington, P., Pochan, D. J., Langhans, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peptide+Hydrogels+-+Versatile+Matrices+for+3D+Cell+Culture+in+Cancer+Medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Oncol%22%5BJournal%5D)">Peptide Hydrogels - Versatile Matrices for 3D Cell Culture in Cancer Medicine.</a> Front Oncol. 5, 92(2015).</li>
<li>Tanner, K., Gottesman, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beyond+3D+culture+models+of+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Beyond 3D culture models of cancer.</a> Sci Transl Med. 7, 283ps9(2015).</li>
<li>Stadler, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+complexity+in+carcinomas%3A+Analyzing+and+modeling+the+interaction+of+human+cancer+cells+with+their+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Cancer+Biol%22%5BJournal%5D)">Increased complexity in carcinomas: Analyzing and modeling the interaction of human cancer cells with their microenvironment.</a> Semin Cancer Biol. , (2015).</li>
<li>Stratmann, A. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+a+human+3D+lung+cancer+model+based+on+a+biological+tissue+matrix+combined+with+a+Boolean+in+silico+model%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Oncol%22%5BJournal%5D)">Establishment of a human 3D lung cancer model based on a biological tissue matrix combined with a Boolean in silico model.</a> Mol Oncol. 8, 351-365 (2014).</li>
<li>Mok, T. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gefitinib+or+carboplatin-paclitaxel+in+pulmonary+adenocarcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Gefitinib or carboplatin-paclitaxel in pulmonary adenocarcinoma.</a> N Engl J Med. 361, 947-957 (2009).</li>
<li>Maemondo, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gefitinib+or+chemotherapy+for+non-small-cell+lung+cancer+with+mutated+EGFR%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Gefitinib or chemotherapy for non-small-cell lung cancer with mutated EGFR.</a> N Engl J Med. 362, 2380-2388 (2010).</li>
<li>Rosell, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Erlotinib+versus+standard+chemotherapy+as+first-line+treatment+for+European+patients+with+advanced+EGFR+mutation-positive+non-small-cell+lung+cancer+%28EURTAC%29%3A+a+multicentre%2C+open-label%2C+randomised+phase+3+trial%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet+Oncol%22%5BJournal%5D)">Erlotinib versus standard chemotherapy as first-line treatment for European patients with advanced EGFR mutation-positive non-small-cell lung cancer (EURTAC): a multicentre, open-label, randomised phase 3 trial.</a> Lancet Oncol. 13, 239-246 (2012).</li>
<li>Sequist, L. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phase+III+study+of+afatinib+or+cisplatin+plus+pemetrexed+in+patients+with+metastatic+lung+adenocarcinoma+with+EGFR+mutations%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Oncol%22%5BJournal%5D)">Phase III study of afatinib or cisplatin plus pemetrexed in patients with metastatic lung adenocarcinoma with EGFR mutations.</a> J Clin Oncol. 31, 3327-3334 (2013).</li>
<li>Lee, J. M., Dedhar, S., Kalluri, R., Thompson, E. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+epithelial-mesenchymal+transition%3A+new+insights+in+signaling%2C+development%2C+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">The epithelial-mesenchymal transition: new insights in signaling, development, and disease.</a> J Cell Biol. 172, 973-981 (2006).</li>
<li>Wells, A., Yates, C., Shepard, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((E-cadherin+as+an+indicator+of+mesenchymal+to+epithelial+reverting+transitions+during+the+metastatic+seeding+of+disseminated+carcinomas%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Exp+Metastasis%22%5BJournal%5D)">E-cadherin as an indicator of mesenchymal to epithelial reverting transitions during the metastatic seeding of disseminated carcinomas.</a> Clin Exp Metastasis. 25, 621-628 (2008).</li>
<li>Janne, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AZD9291+in+EGFR+inhibitor-resistant+non-small-cell+lung+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">AZD9291 in EGFR inhibitor-resistant non-small-cell lung cancer.</a> N Engl J Med. 372, 1689-1699 (2015).</li>
<li>Moll, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+engineering+of+a+human+3D+in+vitro+tumor+test+system%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Tissue engineering of a human 3D in vitro tumor test system.</a> J Vis Exp. , (2013).</li>
<li>Funahashi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CellDesigner+3.5%3A+A+Versatile+Modeling+Tool+for+Biochemical+Networks%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+IEEE%22%5BJournal%5D)">CellDesigner 3.5: A Versatile Modeling Tool for Biochemical Networks.</a> Proceedings of the IEEE. 96, 1254-1265 (2008).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Auto+Threshold%28ImageJ%29v.v1.15%22">Auto Threshold(ImageJ)v.v1.15</a>. , Source: 
 <a target="_blank" href="http://fiji.sc/Auto_Threshold">http://fiji.sc/Auto_Threshold</a> (2013).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22BioVoxxel+Toolbox+%28ImageJ+%2F+Fiji%29%22">BioVoxxel Toolbox (ImageJ / Fiji)</a>. , Source: 
 <a target="_blank" href="http://fiji.sc/BioVoxxel_Toolbox">http://fiji.sc/BioVoxxel_Toolbox</a> (2015).</li>
<li>Buettner, R., Wolf, J., Thomas, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lessons+learned+from+lung+cancer+genomics%3A+the+emerging+concept+of+individualized+diagnostics+and+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Oncol%22%5BJournal%5D)">Lessons learned from lung cancer genomics: the emerging concept of individualized diagnostics and treatment.</a> J Clin Oncol. 31, 1858-1865 (2013).</li>
<li>Engelman, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MET+amplification+leads+to+gefitinib+resistance+in+lung+cancer+by+activating+ERBB3+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">MET amplification leads to gefitinib resistance in lung cancer by activating ERBB3 signaling.</a> Science. 316, 1039-1043 (2007).</li>
<li>Mukohara, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+effects+of+gefitinib+and+cetuximab+on+non-small-cell+lung+cancers+bearing+epidermal+growth+factor+receptor+mutations%5BTitle%5D)+AND+%22J+Natl+Cancer+Inst%22%5BJournal%5D)">Differential effects of gefitinib and cetuximab on non-small-cell lung cancers bearing epidermal growth factor receptor mutations.</a> J Natl Cancer Inst. 97, 1185-1194 (2005).</li>
<li>Noro, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gefitinib+%28IRESSA%29+sensitive+lung+cancer+cell+lines+show+phosphorylation+of+Akt+without+ligand+stimulation%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Cancer%22%5BJournal%5D)">Gefitinib (IRESSA) sensitive lung cancer cell lines show phosphorylation of Akt without ligand stimulation.</a> BMC Cancer. 6, 277(2006).</li>
<li>Gill, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+synthetic+matrix+with+independently+tunable+biochemistry+and+mechanical+properties+to+study+epithelial+morphogenesis+and+EMT+in+a+lung+adenocarcinoma+model%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">A synthetic matrix with independently tunable biochemistry and mechanical properties to study epithelial morphogenesis and EMT in a lung adenocarcinoma model.</a> Cancer Res. 72, 6013-6023 (2012).</li>
</ol>

החוקרים אין לי מה לחשוף.

הקמנו בשילוב במבחנה / במערכת מבחן הגידול סיליקון לתחזיות טיפול מונחה סמן ביולוגי. המודל במבחנת מעריכת היבטים חשובים שונים של פעולות תרכובת כגון שינויים של ריבוי תאים סרטניים אפופטוזיס על רקע מוטציה ספציפי שיכול לעבור סימולצית סיליקו 17. כאן, אנו מציגים פרוטוקול סטנדרטי עבור הדור מודל הגידול 3D ובדיקה המתחם כולל כימות של שגשוג אפופטוזיס ואת הקמתה של מידע צופה פני מודל סיליקון. המודל הגידול 3D מבוסס על שורות תאים סרטני...

תעשיית התרופות ניצבת בפני שיעורי תשה גבוהים של עד 95% בתחום הטיפול בסרטן בשלב הקליני גרימת עלויות עצומות 1-5. אחת הסיבות לגירעון זה היא העובדה כי כיום יעילות של תרכובות חדשות הפוטנציאל נבחנת בהקרנות בקנה מידה גדול על תרביות תאים 2D של שורות תאים סרטניים או במודלים של בעלי חיים. במודלים של בעלי החיים יש מורכבות גבוהות אבל יש הבדלים מכריעים בין עכברים ואנשים 6,7. בעשור האחרון, מודלים סרטן 3D באמצעות גישות שונות נוצרו כדי לגשר על הפער בין תרבות 2D של שורות תאים סרטניים מתחם 6,8,9 הגידול vivo. ההשפעה של סביבת 3D על התמיינות תאים וגם על איתות הוכחה במספר מחקרים שנים (למשל., על ידי מינה ביסל) 10,11. היום, מודלים 3D תרבית תאים רבים זמינים כתרביות אליפטית, הידרוג או שבבי microfluidic 12-16. למרות thesמודלי דואר לשפר מורכבים לעומת מערכות תרבות 2D קונבנציונליות, הוא בעיקר חסר microenvironment רקמות כי הוא ידוע כבעל השפעות תומכות גידול וגם יעילות תרופה משפיעה. כדי לטפל בבעיה זו, יצרנו מודל הגידול 3D מבוסס על פיגום ביולוגי הנקרא SISmuc (קטן-המעי-submucosa + רירית) כי נגזר מְעִי צָם חזירי decellularized. ובכך, ארכיטקטורת רקמות מרכיבים חשובים של ECM כגון collagens השונה, כמו גם את מבנה הקרום במרתף נשמרות 17. תכונה ייחודית זו היא קריטית עבור דור מודל גידול של קרצינומות העולות epithelia ומהווים כ -80% של גידולים מוצקים. יתר על כן, קצב התפשטות במודל גידול רקמות מהונדסות שלנו מצטמצם לעומת שיעור גבוה באופן מלאכותי מושגת בתרבות 2D. כמו התפשטות הוא פרמטר חשוב בהערכת יעילות התרופה, בדיקות סמים מופעלת במודל שלנו יותר דומהתנאי in vivo גידולי 17. על מנת להעריך את הפוטנציאל של המודל שלנו לחזות יעילות התרופה תלויי סמן ביולוגי כראוי, אנחנו כאן מוצגים נתונים עבור שתי שורות תאים שונות ריאות סרטן שונים במעמד -biomarker EGFR שלהם. מצב מוטציוני זו החל שייקבע באופן שיגרתי בחולי NSCLC. טיפולים ממוקדים עם TKIs כגון EGFR -inhibitor gefitinib נגד גידולים הנושאים תוצאות טובות יותר צג מוטציה ב- EGFR הפעיל בהשוואה לאלו עם כימותרפיה על בסיס פלטינה 18-21. הקמנו כמה טכניקות לקריאה החוצה שרלוונטיות להערכת יעילות מתחמת. יתר על כן, לאחר גירוי TGF-beta-1 אנו מסוגלים לחקור פעולות מתחמות בתאי גידול שהחלו בתהליך EMT, אשר נחשב צעד חשוב שינוי ממאיר 22,23 ואשר מחובר סמים ההתנגדce 24. מודל גידול 3D לאפשר ניטור תגובות תא ספציפי לטיפולים ממוקדים, כימותרפיה, או שילובי תרופות עם ניגודים טובים. כדי לשפר עוד יותר ולהאיץ הקרנת סמים להיתקל בהתנגדות, זה הוא השלים ידי סימולציה סיליקון. בהתבסס על כמה ניסויים, תגובת הגידול ניתן לחזות ב סיליקו לגבי התוצאות עבור מגוון רחב של תרופות ושילובים שלהם.

<table><tbody><tr>יו"ר <td>ביו-ריאקטורים</td><td>להנדסת רקמות ורפואה רגנרטיבית, W&uuml; rzburg (GER)</td><td></td><td>הגדרת Bioreactor</td></tr><tr><td>ארגז כלים BioVoxxel (ImageJ / Fiji)</td><td>יאן ברוכר, תורסטן וגנר, https://github.com/biovoxxel/BioVoxxel_Toolbox</td><td></td><td></td></tr><tr><td>כתרי</td><td>תאים יו"ר הנדסת רקמות ורפואה רגנרטיבית, W&uuml; rzburg (GER)</td><td></td> <td>לתרבית תלת מימד סטטית</td></tr><tr><td>CellDesigner</td><td>http://www.celldesigner.org/</td><td>-</td><td>תוכנה זו שימשה לציור הרשת.</td></tr><tr><td>תמיסת מלאי חיץ ציטראט (10x)</td> <td>בייצור</td><td></td> ביתי <td>42 גרם/ליטר חומצת לימון מונוהידרט, 17.6 גרם/ליטר כדורי נתרן הידרוקסיד במים נטולי יונים, pH 6.0, מאוחסנים ב-RT.&nbsp;</td></tr><tr><td>פתרון עבודה של מאגר ציטראט</td><td>בייצור</td><td></td> ביתי <td>10% תמיסת מלאי חיץ ציטראט במים דה-מינרליים, המאוחסנים ב-RT.</td></tr><tr><td>חומצת לימון מונוהידראט</td><td>VWR, דרמשטדט (GER)</td><td>1002441000</td><td>המשמש למאגר הציטראט</td></tr><tr><td>תלושי כיסוי</td><td>VWR, דרמשטדט (GER)</td><td>631-1339</td><td></td></tr><tr><td>DAPI Fluoromount-GTM</td><td>SouthernBiotech, ברמינגהם (ארה"ב)</td><td>SBA-0100-20</td><td></td></tr><tr><td>מסדי נתונים כגון KEGG, HPRD ו-QIAGEN (גנים & Pathways)</td><td>http://www.genome.jp/kegg/pathway.html; http://www.hprd.org/; https://www.qiagen.com/de/geneglobe/</td><td>-</td><td>מאגרי מידע ידועים שונים שימשו ליצירת טופולוגיית הרשת.</td></tr><tr><td>טי שירט נקבה Luer Lug Style</td><td>Mednet, M&uuml; nster (GER)</td> <td>FTLT-1</td><td>הגדרת Bioreactor</td></tr><tr><td>נקבה סגנון חוט Luer עם משושה 5/16 אינץ' ל-1/4-28 UNF Thread</td><td>Mednet, M&uuml; nster (GER)</td><td>SFTLL-J1A&nbsp;</td><td>הגדרת ביו-ריאקטור</td></tr><tr><td>סרום עגל עוברי</td><td>Bio& SELL, Feucht (GER)</td><td>FCS. ADD.0500</td><td>לא מופעל בחום</td></tr><tr><td>Gefitinib</td><td>Absource Diagnostics GmbH, M&uuml; nchen (GER)</td> <td>S1025-100 מ"ג</td><td>100 מ"ג תמיסת מלאי עם בקבוק DMSO</td></tr><tr><td>Glas (שוט, GER) מסופק עם חיבור צינור glas</td><td>Weckert, Kitzingen (GER)</td> <td>בהתאמה</td><td></td>אישית</tr><tr><td>Histofix 4% (Paraformaldehyd)</td> <td>קארל רות', קרלסרוהה (GER)</td> <td>P087.1</td><td></td></tr><tr><td>צימוד צינור</td><td>Mednet, M&uuml; nster (GER)</td><td>CC-9</td><td>חממת הקמת ביו-ריאקטור</td></tr><tr><td>לביו-ריאקטורים</td><td>יו"ר הנדסת רקמות ורפואה רגנרטיבית, W&uuml; rzburg (GER)</td><td></td><td>הגדרת Bioreactor</td></tr><tr><td>M30 CytoDeathTM ELISA</td><td>Peviva, Bromma (SWE)</td><td>10900</td><td></td></tr><tr><td>Male Luer טבעת נעילה אינטגרלית</td><td>Mednet, M&uuml; nster (GER)</td><td>MTLL230-J1A</td><td>הגדרת ביו-ריאקטור</td></tr><tr><td>תא לחות</td><td>בהתאמה</td><td></td><td></td>אישית</tr><tr><td>עכבר אנטי פאן-ציטוקרטין</td><td>סיגמא-אולדריץ', מינכן (GER)&nbsp; &nbsp;</td><td>C2562-2ML</td><td>שיבוט C-11 + PCK-26 + CY-90 + KS-1A3
+M20+A53-B/A2, משמש 1/100 עבור אימונופלואורסצנציה</td></tr><tr><td>שסתום ספוג ללא מחטים נקבה Luer</td><td>Mednet, M&uuml; nster (GER)</td><td>NVFMLLPC</td><td>הגדרת ביו-ריאקטור, לדגימה, טבעת O מעוקרת גמא</td></tr><tr><td>MVQ 10 אדום 37 x 3 מ"מ</td><td>Arcus Dichtelemente, Seevetal (GER)</td><td>21444</td><td>טבעת O גדולה, הגדרת Bioreactor</td></tr><tr><td>טבעת O MVQ 70 אדום 27 x 2.5 מ"מ</td><td>Arcus Dichtelemente, Seevetal (GER)</td><td>19170</td><td>טבעת O קטנה, הגדרת Bioreactor</td></tr><tr><td>עט PAP</td><td>Dako, המבורג (GER)</td><td>S002</td><td></td></tr><tr><td>פרפין</td><td>קארל רות', קרלסרוהה (גרמניה)</td><td>6642.6</td><td></td></tr><tr><td>משאבה פריסטלטית</td><td>Ismatec, Wertheim-Mondfeld (GER)</td><td></td><td>מערך ביו-ריאקטור</td></tr><tr><td>פוספט חוצץ</td><td>מלח סיגמא-אולדריץ', מינכן (GER)&nbsp; &nbsp;</td><td>קלטת צינורות משאבה D8537-6x500 מ"ל</td><td></td></tr><tr><td>Ismatec</td><td>, Wertheim (GER)</td> <td>IS 3710</td><td>הגדרת ביו-ריאקטור</td></tr><tr><td>ארנב אנטי Ki67</td><td>Abcam, קיימברידג' (בריטניה)</td> <td>ab16667</td><td>Clone SP6, משמש עבור 1/100 עבור IF</td></tr><tr><td>ארנב אנטי וימנטין</td><td>Abcam, קיימברידג' (בריטניה)</td> <td>ab92547</td><td>שימש 1/100 עבור IF</td></tr><tr><td>RPMI-1640 טכנולוגיות חיים בינוניות</td><td>, דרמשטדט (GER)</td> <td>61870-044</td><td>חם ב 37 מעלות; אמבט מים C לפני השימוש</td></tr><tr><td>צינור סיליקון</td><td>Carl Roth GmbH, קרלסרוהה (GER)</td><td>HC66.1</td><td>הגדרת ביו-ריאקטור</td></tr><tr><td>נתרן הידרוקסיד</td><td>סיגמא-אולדריץ', M&uuml; nchen (GER)</td><td>30620-1KG-R</td><td>שימש עבור מאגר הציטראט</td></tr><tr><td>SQUAD</td><td></td> <td>http://sbos.eu/docu/docu/SQUAD/doku.php.htm-תוכנה</td> <td>זו שימשה לביצוע הסימולציות הכמותיות למחצה.</td></tr><tr><td>מסנן אוויר סטרילי, גודל נקבוביות 0.2 ומיקרו; מ</td><td>Sartorius Stedium Biotech, G&ouml; ttlingen (GER)</td><td>16596-HYK</td><td>הגדרת ביו-ריאקטור</td></tr><tr><td>מזרק Luer Lok 5 מ"ל</td><td>BD Biosciences, היידלברג (GER)</td><td>309649</td><td>לדגימת ביו-ריאקטור</td></tr><tr><td>לוחות בדיקת תרבית רקמות: 6-,&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 12-, 24-, 96- באר</td><td>TPP טכנו מוצרי פלסטיק AG, Trasadingen (GER)</td> <td>92006, 92012, 92024, 92048&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>גורם גדילה טרנספורמטיבי - בטא 1 (TGF-&beta; 1) עם איתות תא מוביל</td><td>, פרנקפורט (GER)</td> <td>8915LC</td><td>תמיסת מלאי במאגר ציטראט סטרילי pH 3.0</td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Sigma-Aldrich, M&uuml; nchen (GER)</td><td>X100-1L</td><td></td></tr><tr><td>Tween-20</td><td>Sigma-Aldrich, M&uuml; nchen (GER)</td> <td>P7949-500 מ"ל</td><td>לשטיפת מאגר של צביעה אימונופלורסנט</td></tr></tbody></table>

רקמת 3d משולב תכנון הנדסי<em&gt; במבחנה</em&gt; /<em&gt; סיליקו</em&gt; דגם גידול ריאות לניבוי יעילות טיפול תרופתי רקעים מוטציוני ספציפיים

A Combined 3D Tissue Engineered In Vitro/In Silico Lung Tumor Model for Predicting Drug Effectiveness in Specific Mutational Backgrounds

במחקר הנוכחי, שילבנו מודל גידול במבחנת 3D ריאות עם במודל סיליקון כדי לייעל תחזיות תגובת תרופה המבוססת על רקע מוטציה ספציפי. המודל שנוצר על פיגום חזירי decellularized שמעתיק מאפיינים רקמות ספציפיות לגבי הרכב תאי מטריקס ואדריכלות כולל קרום המרתף. קבענו סטנדרט פרוטוקול המאפשר דור רקמת גידול מלאכותי תוך 14 ימים, כולל שלושה ימים של טיפול תרופתי. המאמר שלנו מספק כמה תיאורים מפורטים של 3D לקריאה החוצה טכניקות הקרנה כמו הקביעה של מכתים Ki67 מדד התפשטות, אפופטוזיס מן supernatants ידי M30-ELISA והערכת אפיתל מעבר mesenchymal (EMT), אשר הם כלים שימושיים עבור הערכה האפקטיבית תרכובות טיפוליות. נוכל להראות לעומת תרבות 2D הפחתה של התפשטות במודל הגידול 3D שלנו כי הוא relatאד למצב הקליני. למרות התפשטות נמוכה זה, המודל ניבא EGFR תגובות סמי -targeted כראוי בהתאם למצב הסמן הביולוגי, כפי שמוצג על ידי השוואה של שורות תאי סרטן הריאות HCC827 (EGFR -mutated, KRAS wild-type) ו- A549 (wild-type EGFR, KRAS - מוטציה) שטופלו במעכבי קינאז-טירוזין (gefitinib TKI). כדי לחקור תגובות תרופה של תאים סרטניים מתקדמים יותר, אנו מושרה EMT על ידי טיפול ארוך טווח עם TGF-beta-1 לפי הערכת vimentin / פאן-cytokeratin מכתים immunofluorescence. A-bioreactor תזרים הועסק להתאים תרבות לתנאים פיסיולוגיים, אשר שפרו דור רקמות. יתר על כן, אנו מציגים שילוב של תגובות התרופה על טיפול gefitinib או גירוי TGF-beta-1 - אפופטוזיס, מדד התפשטות EMT - לתוך בוליאני במודל סיליקון. בנוסף, אנו מסבירים כיצד תגובות תרופה של תאים סרטניים עם רקע מוטציה ספציפי וספירהerstrategies כנגד התנגדות ניתן לחזות. אנו בטוחים כי 3D שלנו בגישה במבחנה במיוחד עם צמיחתה סיליקון מספק ערך מוסף עבור בדיקות סמים פרה-קליניות בתנאים מציאותיים יותר מאשר תרבית תאי 2D.

על בסיס פיגום SISmuc (איור 2 א ל C), הקמנו פרוטוקול הפעלה סטנדרטי עבור הדור, הגירוי והטיפול של מערכת בדיקת גידול 3D (איור 2 ד). מודל זה מאפשר קביעת מדד התפשטות כימות של אפופטוזיס באמצעות M30-ELISA כפי שמוצג באיור 1 ואיור 3, בהתאמה. איור 3 מראה נציג H &amp; E מכתים של דגמי A549 ו HCC827 ומדידת אפופטוזיס נציג אחד עם gefitinib. המודל המוצג כאן נועד באמצעות הדוגמא של N...

אנו מציגים מודל תלת מימדי (תלת מימדי) של סרטן ריאות המבוסס על פיגום קולגן ביולוגי כדי לחקור את הרגישות לטיפולים ממוקדי תאים לא קטנים-סרטן-ריאות (NSCLC). אנו מדגימים טכניקות קריאה שונות לקביעת מדד ההתפשטות, האפופטוזיס ומצב המעבר האפיתלי-מזנכימלי (EMT). הנתונים שנאספו משולבים במודל סיליקו לחיזוי רגישות לתרופות.

רקמת 3D משולב תכנון הנדסי<em&gt; במבחנה</em&gt; /<em&gt; סיליקו</em&gt; דגם גידול ריאות לניבוי יעילות טיפול תרופתי רקעים מוטציוני ספציפיים

In the present study, we combined an in vitro 3D lung tumor model with an in silico model to optimize predictions of drug response based on a specific ...

המטרות הכוללות של מודל סרטן ריאות משולב זה במבחנה/בסיליקו הן לחקור את הרגישות של טיפולים ממוקדים לסרטן ריאות של תאים לא קטנים ולחזות את יעילותם של חומרים חדשים. מערכת מודל תלת מימד זו מאפשרת ניטור של תגובות ספציפיות לתאים לטיפולים ממוקדים או שילובים ישירים. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שתחזיות המכוסות בסיליקו יכולות להקל על בדיקות תרופות פרה-קליניות בסביבה רלוונטית פיזיולוגית יותר.ההשלכות של טכניקה זו משתרעות על טיפול בישויות גידול שונות, שכן ניתן להשתמש בה כדי לייעל את תחזיות התגובה לתרופות על סמך רקע מוטציוני ספציפי. מי שתדגים את ההליך תהיה, פרנציסקה שמיט, עוזרת מחקר, מהמעבדה שלנו. כדי להקים תרבית דינמית, התחל בתרבית מודל הגידול בתנאי תרבית סטטית, בכתר תא ב-37 מעלות צלזיוס ו-5% CO2, באינקובטור קונבנציונלי.לאחר שלושה ימים, הרכיבו ביו-ריאקטור אוטוקלאב, והכניסו למערכת תת-רירית ביולוגית של המעי הדק בתוספת פיגום רירית. לאחר מכן, הוסף 45 מיליליטר של RPMI, בתוספת הכמות המתאימה של FCS לבקבוק וחבר את מכשיר הדגימה ללא מחט למערכת הצינורות בין הביוריאקטור לבקבוק המדיום. הכניסו את הביוריאקטור לתוך החממה וחברו אותו למשאבה כדי לתרבית את מודל הגידול, למשך 14 ימים נוספים, עם זרימה בינונית קבועה של שלושה מיליליטר לדקה.כדי לטפל במודל גידול סטטי עם, גפיטיניב, ביום ה -11 לתרבית בחממה הקונבנציונלית, השתמש תחילה בפיפט פסטר כדי להסיר את המדיום הישן, מהבארות. לאחר מכן, הוסף מיליליטר אחד של RPMI טרי, בתוספת FCS וגפיטיניב, לחלק הפנימי של כל כתר תא ו -1.5 מיליליטר לתחתית כל באר. כדי לאסוף את הדגימות של אליסה מתרבית דינמית, בימים 11 עד 14 של התרבית, חבר את המזרק למכשיר הדגימה והסר מיליליטר אחד של מדיום ממערכת הביוריאקטור.לאחר מכן אחסן את הדגימות בטמפרטורה של מינוס 80 מעלות צלזיוס, עד לביצוע האליסה. כדי לקבוע את מספר הגרעינים החיוביים של Ki67, השתמש תחילה במיקרוסקופ הפוך כדי לקבל חמש תמונות פלואורסצנטיות של DAPI וחמש Ki67 של תרביות דו-ממדיות בהגדלה של פי 20 מכל מצב, מחלקים לא חופפים של הדגימה. כדי לספור ידנית את הגרעינים החיוביים של Ki67, פתח את התמונה שהופיעה בפיג'י ובחר, תוספים ומונה תאים, ולאחר מכן, לחץ על אתחול, בחר סוג מונה ולחץ על כל גרעין חיובי של Ki67.מספר התאים שנלחצו יופיע לצד סוג המונה שנבחר. לספירת תאים אוטומטית של המספר הכולל של הגרעינים בתמונות הדו-ממדיות, הפעל את מקליט המאקרו, פתח תמונת DAPI ולחץ על תמונה, הקלד ו-8 סיביות, ולאחר מכן לחץ על שפר ניגודיות והגדר את הפרמטר הרווי לאחד ונרמל. לחידוד התמונה, קבעו את המסיכה שאינה מחודדת ברדיוס של 1 וברדיוס של 60.כדי לאגד את התמונה, לחץ על סף אוטומטי ובחר בשיטת רני/אנטרופיה עם אובייקטים לבנים על רקע שחור. לאחר מכן, לחץ על תוספים, ואחריו BioVoxxel, ותכונה לא סדירה של קו פרשת המים, עם רדיוס שחיקה של חמש כדי להפריד בין התאים. לחץ על ניתוח, ונתח חלקיקים והגדר את הגודל ל-02 אינסוף וסמן סיכום.מספר התאים יוצג בטבלת הסיכום כספירת. לאחר מכן, לחץ על צור, כדי לשמור את המאקרו כדי לאפשר ספירה אוטומטית של גרעינים, בתמונות נוספות של תרבית תאים דו-ממדית. לאחר שימוש במאגרי מידע ליצירת רשת גידולים, פתח את תוכנת ניתוח הרשת המתאימה, לחץ על קובץ וחדש, והזן מודלים של גידול.לחץ על אישור, כדי ליצור רשת חדשה, ולאחר מכן לחץ על ריבוע תקריב צפון ואישור, כדי לדמיין את הקולטן בממברנה כפולה. כדי להציג באופן חזותי את הצמתים כמלבנים, לחץ על חלבון כללי ולאחר מכן על EGFR ולאחר מכן Ok.To להוסיף תווית לצמתים ברשת, לחץ באמצעות לחצן העכבר הימני כדי לשנות צבע וצורה והגדר את קודי הצבע של הצומת כפי שצוין. כדי להציג באופן חזותי את פרמטרי הקריאה כמשושים, בחר פנוטיפ, הזן התפשטות ולחץ על OK.לאחר מכן, לחץ לחיצה ימנית ובחר שוב שנה צבע וצורה כדי להגדיר את קוד הצבע ל-255, 204, 204. כדי להציג באופן חזותי את הקצוות של אינטראקציות בין צומתים, לחץ על מעבר מצב עבור חיצי הפעלה, ועיכוב עבור חיצי עיכוב קהים. לאחר מכן, לחץ על קובץ ושמור בשם, ושמור את רשת האיתות שנוצרה, כמו models.xml גידול.לניתוח מצב יציב של שיווי המשקל של המערכת, פתח את תוכנת SQUAD, לחץ על טען רשת והעלה את קובץ models. xml הגידול jove. לחץ, הפעל ניתוח.כדי לכתוב פרוטוקול סימולציה, לחץ על מתקדם ו-pertubator, ולאחר מכן לחץ על ערוך פרוטוקול, כדי לדמות את ההתנגדות ל-anit-EGFR. לאחר מכן, לחץ, פרטובציה ובחר את המצב ההתחלתי הסטנדרטי שווה למצב יציב ארבע. לחץ על הוסף, כדי להוסיף את הדופק הקבוע החדש, ולאחר מכן בחר את פרמטר המצב והגדר את היעד ל-FLIP, את הזמן לאפס ואת הערך ל-4.לחץ, בסדר, והגדר את המצבים עבור c-MET ו-Gefitinib, באותו אופן. כדי להגדיר ערך מצב לצומת EGFR הפעיל, לחץ על צומת פעיל ולאחר מכן לחץ על ערוך. הגדר את המצב ל-8 ולחץ על אישור.לחץ על אישור כדי לשמור את הפרוטוקול. כדי להציג את העקומות הספציפיות, תחת לוח האפשרויות, בחר EGF-EGFR, כוכב EGF-EGFR, כוכב Mek, קספאזות, PI3K, Gegitinib, אפופטוזיס, התפשטות, מעכב MEk ומעכב PI3K. לאחר מכן, לחץ על אתחול והפעל כדי להתחיל סימולציה מלאה של תגובת המערכות.כדי לדמות טיפול משולב במעכבי PI3K ו-Mek, לחץ על ערוך פרוטוקול. לאחר מכן, תוך שימוש באותו פרמטר צומת כפי שהודגם זה עתה, לחץ על צינור, ואחריו הוסף, כדי להוסיף פולס קבוע חדש. לאחר מכן, בחר פרמטר מצב, והגדר את היעד למעכב PI3K, את הזמן לאפס ואת הערך לאחד, ולחץ על אישור.לחץ על הוסף, שוב, כדי להוסיף עוד פולס קבוע חדש ותחת פרמטר המצב, הגדר את היעד למעכב Mek, הגדר את הזמן לאפס ואת הערך לאחד, ולחץ על אישור, ואחריו אישור שוב, כדי לשמור את הפרוטוקול. תחת לוח האפשרויות, תוך שימוש באותם צמתים לייצוג הגרפי כפי שהודגם זה עתה, לחץ על אתחול והפעל כדי להתחיל סימולציה מלאה של תגובת המערכות. לאחר מכן, כדי לסיים את הסימולציה, לחץ על איפוס.מערכת בדיקת גידול תלת מימדית זו, מקלה על קביעת מדד ההתפשטות. וכימות האפופטוזיס באמצעות M30 Elisa. בניסוי מייצג זה, למשל, רק תאי גידול HCC827 שעברו מוטציה ב-EGFR, שהודגרו בתנאי תרבית סטטית, הגיבו לעיכוב גורם גדילה אפידרמלי.על ידי מעכב טירוזין-קינאז, גפיטיניב, כפי שמעידה העלייה באפופטוזיס שנצפתה במערכת מודל הגידול HCC827. כאן מוצגות תמונות מייצגות של מודלים סטטיים של גידולים תלת מימדיים, עם או בלי, משרה מעבר אפיתלי-מזנכימלי, סימולציה TGF-beta-1. שימו לב לעלייה בביטוי הווימנטין, בתרביות תאי הגידול המטופלות.בתנאים דינמיים, גפיטיניב מפעיל השפעה חזקה על תאי HCC827 שעברו מוטציה ב-EGFR, כפי שמעידה הירידה במבנים דמויי רקמה, בנוכחות מעכב טירוזין-קינאז, בהשוואה לתרבית מבוקרת שלא טופלה. בגרף זה, נצפתה סימולציה של הדחף הידוע במוטציה, הפעלה משותפת של EGFR ו-c-MET, וקצב התפשטות מוגבר, ושיעור אפופטוזיס מופחת בתאי HCC827, לאורך זמן, המשקף עמידות המושרה על ידי גפיטיניב המתואמת עם הפעלת MEK ו-PI3K. ואכן, מידול של מעכבי PI3K ו-MEK המשולבים מביא להיפוך של אפקט העמידות נגד EGFR, הפחתה בהתפשטות ואינדוקציה של אפופטוזיס.בעקבות הליך זה, ניתן לבצע שיטות אחרות כמו Western Blot או כדי לחקור מסלולי איתות במורד הזרם. יתר על כן, מערכות תרבית משותפת עם סוגי תאים שונים עשויות לשמש גם לניתוח הדיבור ההדדי בין תאים שונים בסביבת המיקרו של הגידול. טכניקה זו סוללת את הדרך לחוקרים בתחום פיתוח התרופות לחקור את יעילות התרופות בסיליקו.לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד לחזות את יעילות התרופות בקבוצות חולים מרובדות, על ידי הדמיית שינויי איתות וניתוח תגובות המערכת המתקבלות במוטציות ורקעים שונים.

a-combined-3d-tissue-engineered-vitroin-silico-lung-tumor-model-for

Research

JoVE Journal

Bioengineering

הנדסה ביולוגית

שיטות ליצירת רקמות גידול 3D אדם כמערכות בדיקה מתוארות. טכנולוגיות אלה מבוססות על ביולוגי vascularized פיגום decellularized (BioVaSc), תאים אנושיים יסודיים ושורת תאים סרטניים, אשר יכול להיות מתורבת תחת סטטי, כמו גם בתנאים דינאמיים בזרימת bioreactor.

הנדסת רקמות של 3D אדם<em&gt; במבחנה</emמערכת מבחן גידול&gt;

אנו מתארים שיטה כדי לשפר באופן משמעותי את engraftment orthotopic של סרטן ריאות תאים לריאות מאתר על ידי מיזוג מראש את דרכי הנשימה עם פציעה. גישה זו ויכול להיות מיושם גם ללמוד אינטראקציות סטרומה בתוך הריאות microenvironment, הפצתו גרורתי, morbidities משותף של סרטן ריאות, לייצר ביעילות רבה יותר החולה נגזר xenografts.

מיזוג מראש את דרכי הנשימה של עכברים עם Bleomycin מגדיל את היעילות של Orthotopic ריאות סרטן תא Engraftment

כאן, אנו מציגים עבור ex-vivo ריאות סרטן מודל מחקה את השלבים של התקדמות הגידול ומסייעת לבודד גידול ראשוני, פרוטוקול מחזורי תאים סרטניים נגעים גרורתי.

דגם לונג acellular וסלולריות ללמוד גרורות הגידול

כאן אנו מציגים פרוטוקול כדי לבדוק את היעילות של טיפולים ייעודיים שנבחרו על בסיס האיפור גנומית של הגידול. הפרוטוקול מתאר זיהוי ואימות של הסדרים מבניים של ה-DNA, חרט גידולים של חולים לתוך עכברים והתגובות בדיקה לתרופות המתאימות.

בדיקת טיפולים ייעודיים בסרטן באמצעות ניתוח שינוי DNA מבנית והמטופל נגזר Xenografts

בעידן האימונותרפיה והפרופיל הגנומי של התא הבודד, ביולוגיה של סרטן דורשת כלים חדשניים במבחנה וחישוביים לחקר הממשק הגידולי-חיסוני בהקשר מרחבי-זמני נכון. אנו מתארים פרוטוקולים לניצול תרביות מיקרופלואידיות מיקרופלואידיות של גידולים חיסוניים בסביבות דו-ממדיות ותלת-ממדיות, התואמים לניטור דינמי ורב-פרמטרי של תפקודים תאיים.

מודלים של תרבית משותפת מיקרופלואידית לניתוח התגובה החיסונית במיקרו-סביבות גידוליות במבחנה

מאמר זה מתאר שיטות לדור, טיפול תרופתי וניתוח של explants נגזרים על ידי המטופל להערכת תגובות לתרופות גידול במערכת מודל חי, רלוונטי למטופל, פרה-קלינית.

גידול שמקורו במטופל explants כפלטפורמה פרה-אקלינית "חיה" לחיזוי עמידות לתרופות בחולים

בדיקה זו משתמשת בתאי גזע עובריים של עכברים המתמיינים לגופי עובר בתרבית בג'ל קולגן תלת-ממדי כדי לנתח את התהליכים הביולוגיים השולטים באנגיוגנזה נובטת במבחנה. הטכניקה יכולה להיות מיושמת לבדיקת תרופות, מידול מחלות, ולחקר גנים ספציפיים בהקשר של מחיקות קטלניות עוברית.

במבחנה בדיקת הנבטה תלת מימדית של אנגיוגנזה באמצעות תאי גזע עובריים של עכבר לצורך מידול מחלות כלי דם ובדיקות סמים

פרוטוקול זה מתאר הערכה מתוקננת של רגישויות לתרופות למעכבי איתות ממוקדים במודלים אורגנויד שמקורם בחולה NSCLC.

רגישות ליצירת פרופילים לטיפולים ממוקדים באורגנוידים שמקורם ב-EGFR-Mutant NSCLC

פרוטוקול זה מספק שיטות ליצירת רקמות שרירי לב ושלד מהונדסות-תלת-ממדיות ומתאר את השימוש בהן בשיטות סינון תרופות פרה-קליניות. השיטות המתוארות משתמשות במערכת חישה מגנטית כדי להקל על הערכה בו זמנית של 24 רקמות במקביל.

בדיקות פרה-קליניות של תרופות ברקמות שריר מהונדסות תלת-ממדיות ניתנות להרחבה

מאמר זה מדגים שיטה סטנדרטית לבניית ספרואידים תלת מימדיים של גידולים. כמו כן מתוארת אסטרטגיה לתצפית ספרואידית וניתוח למידה עמוקה מבוססת תמונה באמצעות מערכת הדמיה אוטומטית.

יצירת ספרואידים תלת ממדיים להערכת תרופות

מחקר זה מציג מודל אורתוטופי של סרטן ריאות מסוג תאים לא קטנים (NSCLC) המבוסס על חיסון תוך ריאתי של ספרואידים רב-תאיים של תאי A549-iRFP פלואורסצנטיים. המודל משחזר שלבים קליניים של NSCLC ומגיב לציספלטין, על פי ניטור דינמי in vivo של פלואורסצנטיות באורך גל ארוך.

בניית מודל קסנוגרפט אורתוטופי של סרטן ריאה מסוג תאים לא קטנים המחקה את התקדמות המחלה ומנבא פעילויות תרופתיות

למד מודל ריאות תלת-ממדי משולב in vitro/in silico לחיזוי יעילות טיפולים ממוקדים בסרטן ריאה שאינו קטין-תאי. שיטה זו משפרת בדיקות תרופות טרום-קליניות באמצעות סימולציות חישוביות.

רקמת 3D משולב תכנון הנדסי

גלה סרטונים נוספים