פרוטוקול והערכה תפקודית של ספריות mutagenesis רווית Whole-חלבון ניצול רצף תפוקה גבוהה

10.5K צפיות

צוטט 5 פעמים

11:36 דק׳

3 ביולי 2016

10.3791/54119-v

3 ביולי 2016

10.5K צפיות
 ,  ,  , 

אנו מציגים פרוטוקול עבור ההערכה התפקודית של ספריות mutagenesis רווי אתר יחיד המקיפות של חלבוני ניצול רצף תפוקה גבוהה. חשוב לציין, גישה זו משתמשת זוגות פריימר מאונכים לבצע ריבוב בניית רצף ספרייה. תוצאות נציג באמצעות TEM-1 β-lactamase שנבחר במינון רלוונטי קליני של אמפיצילין מסופקות.

גלה סרטונים נוספים

הערכת כשירות חלבון

Chapters in this video

0:05

כותרת

0:43

סינתזה של ספריות-משנה NNS עבור כל מיקום של חומצה אמינית באמצעות מוטגנזה מכוונת לאתר ב-PCR דו-שלבי

1:53

שיבוט של ספריות-משנה NNS לתוך וקטורי ברירה

3:47

ברירה של ספריית מוטגנזה לרוויה של חלבון TEM-1 שלם לעמידות לאנטיביוטיקה

5:51

ריצוף בתפוקה גבוהה לקביעת השפעות הכושר של מוטציות

8:44

תוצאות: ריצוף בתפוקה גבוהה ממוטגנזה לרוויה של חלבון שלם

10:16

סיכום

Related Videos