Name: Eliciting וניתוח זכר העכבר Ultrasonic ווקאליזציה (USV) שירים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-05-09T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 44 s
Description: למדו איך לאסוף ולנתח ווקליזציות אולטרסוניות בזכרי עכברים בקונטקסטים חברתיים שונים. פרוטוקול זה מאפשר חקר תקשורת קולית והפרעות נוירופסיכיאטריות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

עבודה זו נתמכה על ידי הווארד יוז רפואי קרן כספים EDJ. אנו מודים לפרו. סילבי גרנון (NeuroPSI - אוניברסיטת פריז דרום XI - צרפת) עבור ההלוואות לנו את החומרה דובר. אנו מודים גם לחברי ג&#39;ארביס מעבדה על תמיכתם, דיונים, תיקונים והערות על עבודה זו, במיוחד יהושע ג &#39;ונס Macopson לעזרה עם דמויות ובדיקות. אנו מודים לד&quot;ר Gustavo Arriaga לעזרה עם תוכנת העכבר Mouse Analyzer, לשדרג את זה לנו V1.3, וכן היבטים אחרים של פרוטוקול זה. V1.0 של התוכנה פותחה על ידי הקודש גואו, ו v1.1 ו v1.3 על ידי Arriaga.

<ol><li>Amato, F. R., Scalera, E., Sarli, C., Moles, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pups+call%2C+mothers+rush%3A+does+maternal+responsiveness+affect+the+amount+of+ultrasonic+vocalizations+in+mouse+pups%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Genet%22%5BJournal%5D)">Pups call, mothers rush: does maternal responsiveness affect the amount of ultrasonic vocalizations in mouse pups.</a> Behav. Genet. 35, 103-112 (2005).</li>
<li>Panksepp, J. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Affiliative+behavior%2C+ultrasonic+communication+and+social+reward+are+influenced+by+genetic+variation+in+adolescent+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+ONE%22%5BJournal%5D)">Affiliative behavior, ultrasonic communication and social reward are influenced by genetic variation in adolescent mice.</a> PloS ONE. 2, e351(2007).</li>
<li>Moles, A., Costantini, F., Garbugino, L., Zanettini, C., D'Amato, F. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasonic+vocalizations+emitted+during+dyadic+interactions+in+female+mice%3A+a+possible+index+of+sociability%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Ultrasonic vocalizations emitted during dyadic interactions in female mice: a possible index of sociability.</a> Behav. Brain Res. 182, 223-230 (2007).</li>
<li>Chabout, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adult+male+mice+emit+context-specific+ultrasonic+vocalizations+that+are+modulated+by+prior+isolation+or+group+rearing+environment%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+ONE%22%5BJournal%5D)">Adult male mice emit context-specific ultrasonic vocalizations that are modulated by prior isolation or group rearing environment.</a> PloS ONE. 7, e29401(2012).</li>
<li>Yang, M., Loureiro, D., Kalikhman, D., Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Male+mice+emit+distinct+ultrasonic+vocalizations+when+the+female+leaves+the+social+interaction+arena%5BTitle%5D)+AND+%22Front.+Behav.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Male mice emit distinct ultrasonic vocalizations when the female leaves the social interaction arena.</a> Front. Behav. Neurosci. 7, (2013).</li>
<li>Petric, R., Kalcounis-Rueppell, M. C. <a target="_blank" href="https://www.researchgate.net/publication/275453174_Female_and_male_adult_brush_mice_Peromyscus_boylii_use_ultrasonic_vocalizations_in_the_wild">Female and male adult brush mice (Peromyscus boylii) use ultrasonic vocalizations in the wild.</a> Behaviour. 150, 1747-1766 (2013).</li>
<li>Bishop, S. L., Lahvis, G. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+autism+diagnosis+in+translation%3A+shared+affect+in+children+and+mouse+models+of+ASD%5BTitle%5D)+AND+%22Autism+Res%22%5BJournal%5D)">The autism diagnosis in translation: shared affect in children and mouse models of ASD.</a> Autism Res. 4, 317-335 (2011).</li>
<li>Lahvis, G. P., Alleva, E., Scattoni, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Translating+mouse+vocalizations%3A+prosody+and+frequency+modulation%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Brain+%26+Behav%22%5BJournal%5D)">Translating mouse vocalizations: prosody and frequency modulation.</a> Genes Brain & Behav. 10, 4-16 (2011).</li>
<li>Scattoni, M. L., Gandhy, S. U., Ricceri, L., Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unusual+repertoire+of+vocalizations+in+the+BTBR+T%2Btf%2FJ+mouse+model+of+autism%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+ONE%22%5BJournal%5D)">Unusual repertoire of vocalizations in the BTBR T+tf/J mouse model of autism.</a> PloS ONE. 3, (2008).</li>
<li>Arriaga, G., Zhou, E. P., Jarvis, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Of+mice%2C+birds%2C+and+men%3A+the+mouse+ultrasonic+song+system+has+some+features+similar+to+humans+and+song-learning+birds%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+ONE%22%5BJournal%5D)">Of mice, birds, and men: the mouse ultrasonic song system has some features similar to humans and song-learning birds.</a> PloS ONE. 7, (2012).</li>
<li>Holy, T. E., Guo, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasonic+songs+of+male+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Biol%22%5BJournal%5D)">Ultrasonic songs of male mice.</a> PLoS Biol. 3, 2177-2186 (2005).</li>
<li>Portfors, C. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Types+and+functions+of+ultrasonic+vocalizations+in+laboratory+rats+and+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Amer.+Assoc.+Lab.+Anim.+Science%3A+JAALAS%22%5BJournal%5D)">Types and functions of ultrasonic vocalizations in laboratory rats and mice.</a> J. Amer. Assoc. Lab. Anim. Science: JAALAS. 46, 28-28 (2007).</li>
<li>Wohr, M., Schwarting, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Affective+communication+in+rodents%3A+ultrasonic+vocalizations+as+a+tool+for+research+on+emotion+and+motivation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Tissue+Res%22%5BJournal%5D)">Affective communication in rodents: ultrasonic vocalizations as a tool for research on emotion and motivation.</a> Cell Tissue Res. , 81-97 (2013).</li>
<li>Pasch, B., George, A. S., Campbell, P., Phelps, S. M. <a target="_blank" href="http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0003347211001795">Androgen-dependent male vocal performance influences female preference in Neotropical singing mice.</a> Animal Behav. 82, 177-183 (2011).</li>
<li>Asaba, A., Hattori, T., Mogi, K., Kikusui, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sexual+attractiveness+of+male+chemicals+and+vocalizations+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Front.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Sexual attractiveness of male chemicals and vocalizations in mice.</a> Front. Neurosci. 8, (2014).</li>
<li>Balaban, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bird+song+syntax%3A+learned+intraspecific+variation+is+meaningful%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+USA%22%5BJournal%5D)">Bird song syntax: learned intraspecific variation is meaningful.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 85, 3657-3660 (1988).</li>
<li>Byers, B. E., Kroodsma, D. E. <a target="_blank" href="http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S000334720800496X">Female mate choice and songbird song repertoires.</a> Animal Behav. 77, 13-22 (2009).</li>
<li>Hanson, J. L., Hurley, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Female+presence+and+estrous+state+influence+mouse+ultrasonic+courtship+vocalizations%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+ONE%22%5BJournal%5D)">Female presence and estrous state influence mouse ultrasonic courtship vocalizations.</a> PloS ONE. 7, (2012).</li>
<li>Pomerantz, S. M., Nunez, A. A., Bean, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Female+behavior+is+affected+by+male+ultrasonic+vocalizations+in+house+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+%26+Behav%22%5BJournal%5D)">Female behavior is affected by male ultrasonic vocalizations in house mice.</a> Physiol. & Behav. 31, 91-96 (1983).</li>
<li>White, N. R., Prasad, M., Barfield, R. J., Nyby, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((40-+and+70-kHz+Vocalizations+of+Mice+%28Mus+musculus%29+during+Copulation%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+%26+Behav%22%5BJournal%5D)">40- and 70-kHz Vocalizations of Mice (Mus musculus) during Copulation.</a> Physiol. & Behav. 63, 467-473 (1998).</li>
<li>Hammerschmidt, K., Radyushkin, K., Ehrenreich, H., Fischer, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Female+mice+respond+to+male+ultrasonic+%27songs%27+with+approach+behaviour%5BTitle%5D)+AND+%22Biology+Letters%22%5BJournal%5D)">Female mice respond to male ultrasonic 'songs' with approach behaviour.</a> Biology Letters. 5, 589-592 (2009).</li>
<li>Ey, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Autism+ProSAP1%2FShank2+mouse+model+displays+quantitative+and+structural+abnormalities+in+ultrasonic+vocalisations%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">The Autism ProSAP1/Shank2 mouse model displays quantitative and structural abnormalities in ultrasonic vocalisations.</a> Behav. Brain Res. 256, 677-689 (2013).</li>
<li>Chabout, J., Sarkar, A., Dunson, D. B., Jarvis, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Male+mice+song+syntax+depends+on+social+contexts+and+influences+female+preferences%5BTitle%5D)+AND+%22Front.+Behav.+Neurosci.+9%22%5BJournal%5D)">Male mice song syntax depends on social contexts and influences female preferences.</a> Front. Behav. Neurosci. 9. 76, (2015).</li>
<li>Hoffmann, F., Musolf, K., Penn, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Freezing+urine+reduces+its+efficacy+for+eliciting+ultrasonic+vocalizations+from+male+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+%26+Behav%22%5BJournal%5D)">Freezing urine reduces its efficacy for eliciting ultrasonic vocalizations from male mice.</a> Physiol. & Behav. 96, 602-605 (2009).</li>
<li>Roullet, F. I., Wohr, M., Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Female+urine-induced+male+mice+ultrasonic+vocalizations%2C+but+not+scent-marking%2C+is+modulated+by+social+experience%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Female urine-induced male mice ultrasonic vocalizations, but not scent-marking, is modulated by social experience.</a> Behav. Brain Res. 216, 19-28 (2011).</li>
<li>Barthelemy, M., Gourbal, B. E., Gabrion, C., Petit, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+the+female+sexual+cycle+on+BALB%2Fc+mouse+calling+behaviour+during+mating%5BTitle%5D)+AND+%22Die+Naturwissenschaften%22%5BJournal%5D)">Influence of the female sexual cycle on BALB/c mouse calling behaviour during mating.</a> Die Naturwissenschaften. 91, 135-138 (2004).</li>
<li>Byers, S. L., Wiles, M. V., Dunn, S. L., Taft, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+estrous+cycle+identification+tool+and+images%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+ONE%22%5BJournal%5D)">Mouse estrous cycle identification tool and images.</a> PloS ONE. 7, (2012).</li>
<li>Whitten, W. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modification+of+the+oestrous+cycle+of+the+mouse+by+external+stimuli+associated+with+the+male%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Modification of the oestrous cycle of the mouse by external stimuli associated with the male.</a> J. Endocrinol. 13, 399-404 (1956).</li>
<li>Whitney, G., Coble, J. R., Stockton, M. D., Tilson, E. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ULTRASONIC+EMISSIONS%3A+DO+THEY+FACILITATE+COURTSHIP+OF+MICE%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Physiolog.+Psych%22%5BJournal%5D)">ULTRASONIC EMISSIONS: DO THEY FACILITATE COURTSHIP OF MICE.</a> J. Comp. Physiolog. Psych. 84, 445-452 (1973).</li>
<li>Asaba, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+social+environment+imprints+female+preference+for+male+song+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+ONE%22%5BJournal%5D)">Developmental social environment imprints female preference for male song in mice.</a> PloS ONE. 9, 87186(2014).</li>
<li>Neunuebel, J. P., Taylor, A. L., Arthur, B. J., Egnor, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Female+mice+ultrasonically+interact+with+males+during+courtship+displays%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">Female mice ultrasonically interact with males during courtship displays.</a> eLife. 4, (2015).</li>
<li>Burkett, Z. D., Day, N. F., Penagarikano, O., Geschwind, D. H., White, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((VoICE%3A+A+semi-automated+pipeline+for+standardizing+vocal+analysis+across+models%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">VoICE: A semi-automated pipeline for standardizing vocal analysis across models.</a> Scientific Reports. 5, 10237(2015).</li>
<li>Grimsley, J. M., Gadziola, M. A., Wenstrup, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+classification+of+mouse+pup+isolation+syllables%3A+from+cluster+analysis+to+an+Excel-based+%22mouse+pup+syllable+classification+calculator%22%5BTitle%5D)+AND+%22Front.+Behav.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Automated classification of mouse pup isolation syllables: from cluster analysis to an Excel-based "mouse pup syllable classification calculator".</a> Front. Behav. Neurosci. 6, (2012).</li>
<li>Grimsley, J. M. S., Monaghan, J. J. M., Wenstrup, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+social+vocalizations+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+ONE%22%5BJournal%5D)">Development of social vocalizations in mice.</a> PloS ONE. 6, (2011).</li>
<li>Portfors, C. V., Perkel, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+ultrasonic+vocalizations+in+mouse+communication%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Opin.+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">The role of ultrasonic vocalizations in mouse communication.</a> Curr. Opin. Neurobiol. 28, 115-120 (2014).</li>
<li>Merten, S., Hoier, S., Pfeifle, C., Tautz, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+role+for+ultrasonic+vocalisation+in+social+communication+and+divergence+of+natural+populations+of+the+house+mouse+%28Mus+musculus+domesticus%29%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+ONE%22%5BJournal%5D)">A role for ultrasonic vocalisation in social communication and divergence of natural populations of the house mouse (Mus musculus domesticus).</a> PloS ONE. 9, 97244(2014).</li>
<li>Neilans, E. G., Holfoth, D. P., Radziwon, K. E., Portfors, C. V., Dent, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Discrimination+of+ultrasonic+vocalizations+by+CBA%2FCaJ+mice+%28Mus+musculus%29+is+related+to+spectrotemporal+dissimilarity+of+vocalizations%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+ONE%22%5BJournal%5D)">Discrimination of ultrasonic vocalizations by CBA/CaJ mice (Mus musculus) is related to spectrotemporal dissimilarity of vocalizations.</a> PloS ONE. 9, 85405(2014).</li>
<li>Holfoth, D. P., Neilans, E. G., Dent, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Discrimination+of+partial+from+whole+ultrasonic+vocalizations+using+a+go%2Fno-go+task+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Acoust.+Soc.+Am%22%5BJournal%5D)">Discrimination of partial from whole ultrasonic vocalizations using a go/no-go task in mice.</a> J. Acoust. Soc. Am. 136, 3401(2014).</li>
<li>Asaba, A., Kato, M., Koshida, N., Kikusui, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determining+Ultrasonic+Vocalization+Preferences+in+Mice+using+a+Two-choice+Playback%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Determining Ultrasonic Vocalization Preferences in Mice using a Two-choice Playback.</a> J Vis Exp. , (2015).</li>
</ol>

למחברים אין מה לחשוף.

פרוטוקול זה מספק גישות לאסוף, לכמת, ולחקור הזכרים חיזור wocalizations במעבדה על פני מגוון רחב של גירויים הקשורים בעיקר נקבה. כפי שהוצג בעבר Chabout, et al. 23 ובתוצאות המייצגות, השימוש בשיטה זו איפשר לנו לגלות קוליות ותלות תלויי הקשר, שחשובים לגבי הנקבות המקבלות. התקינה של גירויים אלה תספק אוסף של מספר אמין של USVs ולאפשר ניתוח מפורט של שירי החיזור של הגבר רפרטואר. כאשר נקבה חיה נמצאת עם הזכר, הפרוטוקול אינו מאפשר לנו לזהות בבירור את הפולט של הקול. עם זאת, מחקרים קודמים הראו כי רוב הקולות הנפלט בהקשר זה היו על ידי זכר 26 , 29 . רוב המחקרים באמצעות קונספסיפיק (זכר או נקבה)כגירוי לגברים מאמינים שכמות הקולות של נשים בהקשרים אלה היא זניחה 4 , 5 , 22 , 30 . עם זאת, לאחרונה נייר המשמש triangulation כדי למקם את הקול של הפולט בתנאים קבוצה מגורים 31 , והראה כי בתוך dyad, הנקבה תורמת ~ 10% של USVs. בפרוטוקול הנוכחי, השימוש בנשים הרדמה מאפשר למשתמש ללמוד את הזמרות הגבריות בנוכחות נקבה ללא הקול שלה. בניגוד לציפיות ממחקר זה 31 , לא מצאנו הבדל במספר ההברות הנפלטות בין ה - FE ל - AF 23 . זה אפשרי כי נשים לחיות לא תרמו באופן משמעותי להקלטות או כי הזכרים השמיעו פחות בנוכחות של נקבות חיות לעומת femed anaesthetizedאלס. עם זאת, אנו מאמינים כי ניסויים עתידיים צריכים לשקול את השימוש בשיטת טריאנגולציה זו כדי להעריך את ההשפעה הפוטנציאלית של התרומה הנשית. ישנן תוכנות אחרות הזמינות שיכולים לעשות כמה הצעדים שציינו, אם כי אנחנו לא מאמינים בצורה מספקת לשאלות שאלנו באמצעות שילוב של שלוש תוכניות: תוכנה, A השיר שיר Analyzer סקריפט תוכנה C באמצעות תוכנה B, תוכנת ניתוח תחביר באמצעות תוכנת גיליון אלקטרוני מותאם אישית D + E חישובים, ואת תחביר תחביר באמצעות R. לדוגמה, נייר שהוצע לאחרונה תוכנה בשם VoICE המאפשר למשתמש לחלץ משתנים אקוסטיים באופן אוטומטי מן sonograms או ישירות על יחידות שהיו ידנית שנבחר על ידי המשתמש 32 . אבל, אוטומטיות או חצי אוטומטיות ניתוח רצף אינם מפורטים כמו הגישה שלנו. תוכנות מסחריות מסוימות יכולות לנתח באופן אוטומטי את התכונות האקוסטיות, אך אינן מספקות אוטומציההסיווג האטי של ההברות; המשתמש צריך למיין את ההברות השונות לאחר מכן. Grimsley, Gadziola, et al. 33 פיתחה תוכנית וירטואלית המבוססת על טבלה של עכבר וירטואלי המבוססת על תכונות אקוסטיות משותפות, אך אינה מספקת זיהוי אוטומטי של ההברות. התוכנית שלהם 34 היא ייחודית בכך שהיא יוצרת רצפים חדשים מתוך שירים מוקלטים באמצעות מודלים מרקוב, ולכן יש תכונות מתקדמות יותר מאשר עריכה פשוטה. רוב מחקרים קודמים על תקשורת התמקדו בצד של emitter 35 , 36 . מחקרים מעטים בחנו את הצד של המקלט 30 , 37 , 38 . פרוטוקולי השמעה ואפליה מספקים בדיקה פשוטה כדי לחקור את הצד של המקלט, כמו זה המתואר גם לאחרונה על ידי Asaba, Kato, etאל. 39 . במחקר זה, המחברים השתמשו בתיבת בדיקה דו-ברירה שהופרדה עם קצף אקוסטי במקום בתיבה מבוך Y המתוארת כאן. שני setups הבחירה יש יתרונות וחסרונות. ראשית, ה- Y- מבוך לא מבודד את הצליל מזרוע אחת לאחרת, אבל תיבת הבחירה שתי עושה. עם זאת, באמצעות עיצוב Y- מבוך, החיה יכולה להעריך במהירות את שני השירים המופעלים בו זמנית, ולעבור לכיוון המועדף. עם זאת, ניסויים השמעה באופן כללי לעזור הניסויים לקבוע את המשמעות ואת הפונקציות ובכך של הזויות שנוצרו עבור בעלי חיים קונספסיפיק. לסיכום, לאחר מאסטרינג את הטכניקות של פרוטוקול זה וניתוחים, הקוראים צריכים להיות מסוגלים לענות על שאלות רבות המשפיעות על הקשר, גנטיקה, נוירוביולוגיה של USVs העכבר. באמצעות B6D2F1 / J עכברים, גירויים הקשורים נקבה כמעט תמיד להפעיל USVs מן הזכרים בדקנו במעבדה שלנו. זה קריטי כדי קולג &#39;Ct מספיק הברות (&gt; 100 ב 5 דקות) כדי להיות מסוגל לקבל ניתוח סטטיסטי חזק. לפתרון בעיות, אם לא נרשמו USVs (או לא מספיק), בדוק את התצורה כדי לוודא שהקלטות מוקלטות. לעשות בדיקה חיה של מה שקורה בכלוב במהלך ההקלטה על ידי מבט על sonogram בזמן אמת על מסך המחשב לאחר כניסתה של הגירוי. אחרת נסה לחשוף מחדש את הזכר לנקבה מינית / קולטנית מינית בן לילה ולאחר מכן הבית אותם לבד במשך כמה ימים או עד שבוע לפני ההקלטה שוב. בהתבסס על תצפיות אנקדוטיות, אנו מוצאים כי כמה זכרים לשיר הרבה ביום אחד (כמעט 5 דקות מלא), ולא הרבה למחרת, ואז שוב עוד יום. איננו יודעים מדוע הסיבה לכך מתרחשת בשונות משתנה, אך אנו מניחים שהיא כנראה מוטיבציה או עונתית עבור הזכרים, ומצב השתן עבור שתן נשית. אם לא USVs נרשמות, לנסות להקליט את החיה על מספר ימים כדי להרים את השפעות אלה משתנה. UnlIke בציפורי שיר, אנחנו לא ציינו הבדלים גלויים כמות השירה על פי השעה ביום. אנו מוצאים כי הזכרים אינם שרים הרבה (&lt;100 הברות ב 5 דקות) לפני שהם 7 שבועות. שיטות האיתור המוצגות כאן יכולות לחלץ אלפי הברות וכל הפרמטרים האקוסטיים תוך מספר דקות. אבל כמו כל שיטת זיהוי אוטומטי, הוא רגיש מאוד רעש רקע. באמצעות עכבר השיר Analyzer זיהוי תוכנה עם הקלטות רועש (למשל מבעלי חיים שנרשמו עם תשתית) עשויים לדרוש התאמת סף &quot;זיהוי&quot; כדי לאפשר גמישות רבה יותר. עם זאת, זה יגדיל גם את מספר ההברות חיוביות שווא ואת זיהוי אוטומטי עלול להיכשל. בנסיבות כאלה, ניתן להשתמש בקידוד ידני. כאמור, מספר, repertories, חביון של vocalizations משתנים באופן נרחב בהתאם לזן, ולכן ייתכן שיהיה צורך לשנות את הפרמטרים (אורך ההקלטה,גירוי, זיהוי הברה אוטומטית, וכו &#39; ) עבור כמה זנים כדי להבטיח הקלטות אופטימלי עבור ניתוחים סטטיסטיים.

יחסית לבני אדם, עכברים מייצרים הן קוליות בתדר נמוך והן בתדר גבוה, הנקראות מאוחר יותר בשם &quot;קולי קולי&quot; (USVs) מעל טווח השמיעה שלנו. USVs מיוצרים במגוון של הקשרים, כולל מ אחזור הגור אמא, אינטראקציות לנוער, על יחסי מין או יחסי מין למבוגרים אותו 4 , 12 . אלה USVs מורכבים רפרטואר multisyllabic מגוונים אשר ניתן לסווג ידנית 9 או באופן אוטומטי 10 , 11 . תפקידם של USVs אלה בתקשורת נמצא תחת חקירה גוברת בשנים האחרונות. אלה כוללים שימוש USVs כמו readouts של מודלים העכבר של הפרעות נוירופסיכיאטריות, התפתחותיות או התנהגותיות 7 , 8 , ומצבים מוטיבציוניים / רגשיים פנימיים 13 . USVs נחשבים להעביר מידע אמין על המצב של מיטר כי הוא שימושי עבור מקלט 14 , 15 . בשנת 2005, הקדוש ו Guo 11 , את הרעיון כי עכברים זכרים בוגרים USVs היו מאורגנים כמו רצף של אלמנטים להתקשר multisyllabic או הברות הדומות ציפורי שיר. במינים רבים, רפרטואר multisyllabic מאפשר emitter לשלב ולהזמין הברות בדרכים שונות כדי להגדיל את המידע הפוטנציאלי נשאו על ידי השיר. שינוי בתחביר זה הוא האמין כי יש רלוונטיות אתית עבור התנהגות מינית והזדווגות העדפות 16 , 17 . מחקרים שנערכו לאחר מכן הראו כי עכברים זכרים הצליחו לשנות את ההרכב היחסי של סוגי הברה שהם מייצרים לפני, במהלך ולאחר נוכחות של נקבה 5 , 18 . כלומר, עכברים זכרים בוגרים להשתמש USVs שלהם עבור התנהגות החיזור, או כדי למשוךאו לשמור על קשר קרוב עם נקבה, או כדי להקל על ההזדווגות 19 , 20 , 21 . הם גם נפלטים באינטראקציות בין גברים לגברים, כנראה כדי להעביר מידע חברתי במהלך אינטראקציות 4 . כדי ללכוד שינויים אלה רפרטואר, מדענים בדרך כלל למדוד את תכונות ספקטרלי (פרמטרים אקוסטיים, כגון משרעת, תדרים, וכו &#39; ), מספר USVs הברות או שיחות, ואת חביון הראשון USV. עם זאת, מעטים באמת להסתכל על רצף הדינמיקה של USVs אלה בפירוט 22 . לאחרונה הקבוצה שלנו פיתחה שיטה חדשנית למדידת שינויים דינמיים ברצף ההברה של USV 23 . הראינו כי הסדר הברה בתוך שיר (כלומר תחביר) אינו אקראי, כי הוא משתנה בהתאם להקשר החברתי, וכי בעלי החיים מקשיב לזהות שינויים אלה כמו רלוונטיים מבחינה אתית. אנו מציינים thבחוקרים רבים החוקרים תקשורת בבעלי חיים אינם מצרפים למונח &#39;תחביר&#39; בדיוק אותה משמעות כמו תחביר המשמש בדיבור האנושי. עבור לימודי התקשורת בבעלי חיים, אנו פשוט מתכוון רצף הורה, לא אקראי, של צלילים עם כמה כללים. עבור בני אדם, בנוסף, רצפים ספציפיים ידועים משמעויות ספציפיות. אנחנו לא יודעים אם זה המקרה של עכברים. במאמר זה ואת הווידאו הקשורים, אנו שואפים לספק פרוטוקולים אמינים כדי להקליט החיזור של עכברים USVs החיזור על פני הקשרים שונים, ולבצע פלייבקים. השימוש של שלושה תוכנות ברצף בשימוש עבור: 1) הקלטות אוטומטיות; 2) זיהוי הברה קידוד; ו 3) ניתוח מעמיק של תכונות ההברה תחביר הוא הפגינו ( איור 1 ). זה מאפשר לנו ללמוד יותר על עכברים זכר מבנה USV ופונקציה. אנו מאמינים כי שיטות אלה להקל על ניתוחים לנתונים יכול לפתוח אופקים חדשים באפיון תקשורת קול רגיל נורמלי ב mouמודלים של תקשורת והפרעות נוירופסיכיאטריות, בהתאמה.

<table><tbody><tr><td>מצנן חוף אטום לרעש</td><td>ראה לנייר גאס יש מידע נוסף על סוג</td><td></td> ספציפי <td>מידות פנימיות (L 27 x W 23 x H 47 ס"מ):</td></tr><tr><td>מיקרופון אולטרסאונד מעבה CM16/CMPA</td><td>Avisoft Bioacoustics, ברלין, גרמניה</td><td>#40011</td><td>כולל כבל מאריך&nbsp;</td></tr><tr><td>כרטיס קול אולטרסאונד שער 1216H</td><td>Avisoft Bioacoustics, ברלין, גרמניה</td><td>#34175</td><td>כרטיס קול 12 ערוצים</td></tr><tr><td>נגן שער אולטרסאונד 216H</td><td>Avisoft Bioacoustics, ברלין, גרמניה</td><td>#70117</td><td>נגן השמעה 2 ערוצים</td></tr><tr><td>רמקול אלקטרוסטטי אולטרסאונד ESS פולארויד</td><td>Avisoft Bioacoustics, ברלין, גרמניה</td><td>#60103</td><td>2 רמקולים השמעה</td></tr><tr><td>כלוב בדיקה&nbsp;</td><td>אס</td><td>#PC75J</td><td>גובה 30 x 8 x 13 ס"מ;</td></tr><tr><td>הפרדת פרספקס</td><td>פרספקס תוצרת בית</td> <td>-</td> <td>פרספקס 4 x 13 ס"מ פרספקס עם חורים של 1 ס"מ</td></tr><tr><td>מצלמת וידאו</td><td>Logitech</td><td>C920</td><td>logitech HD Pro מצלמת רשת C920</td></tr><tr><td>כרית חום&nbsp;</td><td>Sunbeam</td><td>722-810-000</td><td></td></tr><tr><td>מבוך Y&nbsp;</td><td></td> מידות <td>פנימיות תוצרת בית</td> <td>(אורך 30 x רוחב 11 x גובה 29 ס"מ):</td></tr> <tr><td>פינצטה</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td><חזקה>תוכנה</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>מקליט Avisoft (תוכנה א')</td><td>Avisoft Bioacoustics, ברלין, גרמניה</td> <td>#10101, #10111, #10102, #10112</td><td>http://www.avisoft.com</td></tr><tr><td>MATLAB R2013a (תוכנה ב)</td><td>MathWorks</td><td>-</td><td>MATLAB R2013a (8.1.0.604)</td></tr><tr><td>מנתח שירי עכבר v1.3 (תוכנה C)</td><td>תוכנן בהתאמה אישית על ידי Holy, Guo, Arriaga & ג'רביס; פועל עם תוכנה B</td><td></td><td>http://jarvislab.net/wp-content/uploads/2014/12/Mouse_Song_Analyzer_ v1.3-2015-03-23.zip</td></tr><tr><td>Microsoft Office Excel 2013 (תוכנה D)</td>מדריך ניתוח השירים <td>של</td> <td>Microsoft-Microsoft</td> <td>Office Excel</td></tr><tr><td>v1.1 (תוכנה E)</td><td>תוכנן בהתאמה אישית על-ידי Chabout & ג'רביס. גיליונות מחשבון אקסל, פועל עם תוכנה D</td><td></td><td>http://jarvislab.net/wp-content/uploads/2014/12/Song-analysis_Guided.xlsx</td></tr><tr><td>תחביר decorder v1.1 (תוכנה F)</td><td>בהתאמה אישית תוכנן על ידי Sakar, Chabout, Dunson, Jarvis - in R studio</td><td></td><td>https://www.rstudio.com/products/rstudio/download/</td></tr> <tr><td>Graphiz (Software G)</td><td>AT& T Research ואחרים&nbsp;</td><td></td><td>http://www.graphviz.org</td></tr><tr><td>Avisoft SASLab (תוכנה H)</td><td>Avisoft Bioacoustics, ברלין, גרמניה</td> <td>#10101, #10111, #10102, #10112</td><td></td></tr> <tr><td>http://www.avisoft.comReagents</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Xylazine (20 מ"ג/מ"ל)</td><td>Anased-Ketamine</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>HCl (100 מ"ג/מ"ל)</td><td>הנרי שיין</td><td>#045822</td><td></td></tr><tr>מים <td></td><td></td><td></td><td>מזוקקים</td></tr><tr><td>משחת עיניים&nbsp;</td><td>משחה וטרינרית Puralube&nbsp;</td><td>NDC 17033-211-38</td><td></td></tr><tr><td>צלחת</td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr><td>פטרי קצות</td><td></td><td></td><td></td>כותנה</tr></tbody></table>

eliciting וניתוח זכר העכבר ultrasonic ווקאליזציה (usv) שירים

Eliciting and Analyzing Male Mouse Ultrasonic Vocalization (USV) Songs

עכברים לייצר vocalizations קולי (USVs) במגוון של הקשרים חברתיים לאורך התפתחות ובגרות. אלה USVs משמשים אחזור אם אמא 1 , אינטראקציות לנוער 2 , מול אינטראקציות מין אותו 3 , 4 , 5 , אינטראקציות טריטוריאלית 6 . במשך עשרות שנים, USVs היו בשימוש על ידי חוקרים כמו proxies ללמוד נוירופסיכיאטרית והתפתחותית או הפרעות התנהגותיות 7 , 8 , 9 , ולאחרונה להבין מנגנונים ואבולוציה של תקשורת קולית בקרב חוליות 10 . בתוך אינטראקציות מיניות, עכברים זכרים בוגרים לייצר שירים USV, אשר יש כמה תכונות דומות שירי חיזור של ציפורי שיר 11 . שימוש כזה reper multisyllabicToires יכול להגדיל את הגמישות הפוטנציאלית ואת המידע שהם נושאים, כפי שהם יכולים להיות מגוונים כיצד אלמנטים מאורגנים recombined, כלומר תחביר. בפרוטוקול זה שיטה אמינה כדי לעורר שירים USV מעכברים זכרים בהקשרים חברתיים שונים, כגון חשיפה שתן נקבה טרי, בעלי חיים הרדים, ונקבות הנבלות הוא תיאר. זה כולל תנאים כדי לגרום כמות גדולה של הברות מן העכברים. אנו מפחיתים את ההקלטה של ​​רעשי הסביבה עם תאי קול זולים, ומציגים שיטת כימות כדי לזהות, לסווג ולנתח באופן אוטומטי את USVs. האחרונה כוללת הערכה של שיעור שיחה, רפרטואר קולי, פרמטרים אקוסטיים ותחביר. גישות שונות תובנה על שימוש השמעה ללמוד העדפה של בעלי חיים עבור סוגי שירים ספציפיים מתוארים. שיטות אלה שימשו לתיאור שינויים אקוסטיים ותחביר בין הקשרים שונים בעכברים זכריים, והעדפות שירים בעכברים הנשיים.

בפרוטוקול הנוכחי, שינויים התנהגות קולי ו תחביר של גברים B6D2F1 / J עכברים אופיינו. באופן כללי, באמצעות פרוטוקול זה הצלחנו להקליט, בממוצע לכל זכר לכל 5 דקות הפעלה, 675 ± 98.5 הברות מסווגות בתגובה אור נקבה, 615.6 ± 72 ב FE, 450 ± 134 ב AF, 75.6 ± 38.9 AM ו 0.2 ± 0.1 ב UR זכר (n = 12 גברים). השיעורים היו ~ 130 הברות / דקות עבור UR, ~ 120 הברות / דקות עבור FE, או ~ 100 הברות / דקות עבור הקשרים AF ( איור 5 א ). גברים מייצרים כמות הרבה יותר גדולה של הברות בתגובה לשתן שנאסף טרי יחסית לשתן שנאסף בן לילה 10 , 23 . גברים גם לשיר הרבה פחות נוכחות של גבר הרדים או שתן זכר טריים איור 5 א ). הזכרים גם משנים את הרפרטואר שלהם בהקשר 23 . לדוגמה, B6D2F1 / J גברים להגדיל באופן משמעותי הייצור של מספר רב של קפיצה המגרש "מ" קטגוריה הברות במצב השתן הנשי ( איור 5 ב ). הם גם משנים תכונות אקוסטיות של הברות בודדות על פני ההקשר. לדוגמה, הזכרים B6D2F1 / J מזמרים הברות במשרעת וברוחב פס גבוה יותר בהקשר של השתן הנשי, וטוהר ספקטרלי גבוה יותר בהקשר הנשי העולה בהשוואה לאחרים ( איור 6 ). פרוטוקול זה מספק גם אמצעי למדידת תכונות דינמיות של רצף ולכן שינויים תחביר. שימוש בשיטה מותאמת מ- Ey, et al. 22 , אנו משתמשים ISI כדי להגדיר את הפערים בין רצפים ( איור 7 א ) 23 , ולאחר מכן להשתמש פערים להבחין ולנתח תבניות זמניות של רצפים ההברה. הראינו אורך אורכים ארוכים יותר מיוצרים בהקשר נשית ער ( איור 7 ב ).23 טכניקה זו מאפשרת לנו לחשב את היחס בין רצפים מורכבים (המורכבים על - ידי לפחות 2 מופעים של סוג ה ה "מ") לעומת רצפים פשוטים (המורכבים מסוג אחד או ללא "m", ולכן בעיקר על ידי " ), מצאנו כי אצל B6D2F1 / J, הקשר בין השתן הנשי הפעיל יחס גבוה יותר בהשוואה לאחרים ( איור 7 ג ) 23 , דבר המצביע על כך שהפיקו הברות מורכבות יותר במצב השתן הנשי, אך גם כי הברות אלו מופצות על רצפים יותר. כמו כן, אנו מסוגלים לחשב את ההסתברות למעבר מותנה מסוג הברה אחת לאחרת (24 סוגי מעבר כולל המעברים מ - אל "השתיקה"). מצאנו כי בהקשרים שונים, הבחירה של סוגי העכברים בסוגי מעבר של הברות התחלתיות שונות, וכי יש יותר div תחבירErsity במצב השתן הנשי ( איור 8 ) 23 . התצפיות הללו תואמות את הדיווחים הקודמים שמראים שהגברים יכולים לשנות את התכונות האקוסטיות או את הרפרטואר של ההרכב שלהם בתגובה לגירויים ולחוויות שונים 4 , 5 , 24 . לבסוף, פרוטוקול זה מספק הדרכה כדי לבדוק את ההעדפות הנשיות עם פלייבקים. מצאנו כי בנות B6D2F1 / J מעדיפות שירים מורכבים יותר (המכילים 2 או יותר "הברות") ביחס לשירים פשוטים 23 . רוב הנשים בחרו להישאר לעתים קרובות יותר בצד של מבוך Y ששיחק את השירים המורכבים ( איור 4 ב ). <img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/54137/54137fig1.jpg"> איור 1: תרשים זרימה של SofTware השתמש וניתוח. כל תוכנית וקוד קשור מקבלים שם מכתב שיסייע להסביר את זהותם ואת השימוש שלהם בטקסט הראשי. ב () הם תוכניות ספציפיות אנו משתמשים בפרוטוקול שלנו. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54137/54137fig1large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של נתון זה.</a> <img alt="איור 2" src="/files/ftp_upload/54137/54137fig2.jpg"> איור 2: הגדר להקלטת שירי עכבר זכר. (A) תמונה של תיבת הקלטת הנחתה קול ולהגדיר להקלטות קול USV. (ב) דוגמה sonogram של הקלטה שנעשו עם תוכנה A ( טבלה 1 ), כולל תכונות ספקטרליות מפורט מחושב על ידי "עכבר Song Analyzer v1.3": משך, בין ההברה מרווח (ISI), תדר שיא דקות (PF דקות) שיא מקסימלי שיא (Pf מקסימום), תדר שיא להתחיל (התחלה PF), תדר שיא (סוף Pf), ואת רוחב הפס. (ג) סונוגרמות של שירה זכר נוספת אל נקבה חיה, בתוך תיבת הנחתה קול ומחוץ לקופסה על ספסל המעבדה באותו חדר. התצפיות האנקדוטיות שלנו מציינות שההקלטות בתיבה של אותה חיה מראות נפח גדול יותר (עוצמה חזקה יותר) ופחות הרמוניות, אך אין עדות להדים בתיבה ללא קצף קול. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54137/54137fig2large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של נתון זה.</a> <img alt="איור 3" src="/files/ftp_upload/54137/54137fig3.jpg"> איור 3: מסך של "שיר העכבר Analyzer v1.3" whis_gui חלון מציג את האפשרויות השונות הזמינות עבור ניתוח. הפרמטרים המוצגים הם אלה המשמשים כדי להקליט USVs זכר בנתונים ונתונים לנתח הציג (למעט משך הערה דקות היה 3 אלפיות השנייה). "לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו." Target = "_ blank" לחץ כאן כדי לראות גרסה גדולה יותר של דמות זו. <img alt="איור 4" src="/files/ftp_upload/54137/54137fig4.jpg"> איור 4: אפשרויות נקבות בין השמעת שירים מורכבים ופשוטים. (א) תמונה של המנגנון Y- מבוך המשמש מדידות מימד. (ב) הזמן המושקע על ידי הנקבות בכל זרוע, משחק או מתוך מורכבות (שתן נשית נקבה) או פשוט יותר (ערער נקבה הנפתחת) השיר מאותו זכר. הנתונים מוצגים עבור n = 10 B6D2F1J נקבה עכברים כמו ממוצע ± SE, עם ערכים בודדים מוצגים גם; 9 מתוך 10 הנקבות הראו העדפה לשיר ההברה / רצף המורכב יותר. * P &lt;0.05 זיווג סטודנט מבחן. איור שונה מ Chabout, et al. 23 ברשות. ריק "&gt; אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו. <img alt="איור 5" src="/files/ftp_upload/54137/54137fig5.jpg"> איור 5: מספר ההברות הנפלטות ורפרטואר מעבר לתנאים . (א) שיעור הייצור ההברה של זכרים בהקשרים שונים. (ב) יצירות רפרטואר של זכרים כאשר בנוכחות של שתן נקבה (UR), נקבה הרדים (AF), נשים ערות (FE), והקשר הרדים (AM) הרדים. הנתונים מוצגים כ ממוצע ± SEM. * P &lt;0.03; ** p &lt;0.005; *** p &lt;0.0001 עבור מבחן פוסט-הוק סטודנט לאחר פוסט-הוק לאחר תיקון בנג'מיני והוכברג (n = 12 גברים). איור מתוך Chabout, et al. 23 ברשות. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54137/54137fig5large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של נתון זה.</a> יחד .within-page = "1"&gt; <img alt="איור 6" src="/files/ftp_upload/54137/54137fig6.jpg"> איור 6: דוגמאות לתכונות ספקטרליות בהקשר שונה. (A) משרעת. * P &lt;0.025 עבור מבחן פוסט-הוק סטודנט משויך לאחר תיקון. (ב) טווח תדרים או רוחב פס. *: P &lt;0.041; **: p &lt;0.005; ***: &lt;0.0001 לאחר תיקון. (ג) טוהר ספקטרלי של ההברות. * P: &lt;0.025; **: p &lt;0.005; ***: &lt;0.0001 לאחר תיקון. קיצורים: שתן נקבה (UR), נקבה מורדמת (AF), נקבה ער (FE), ו הרדים זכר (AM). דמויות משופר מחברות, ואח '. 23 ברשות. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54137/54137fig6large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של נתון זה.</a> 37fig7.jpg "/&gt; איור 7: מדידות רצף. (א) שימוש של ה- ISI להפריד את רצף. ISI קצר (SI) ו ISI בינוני (MI) משמשים להפריד הברות בתוך רצף, ו- ISI ארוך מעל 250 ms (LI) להפריד שני רצפים. (ב) אורך הרצפים, הנמדדים כמספר ההברות לפי רצף, המיוצר על ידי זכרים בהקשרים שונים. *: P &lt;0.025; ** p &lt;0.005; *** p &lt;0.0001 לאחר תיקון. (ג) יחס של שירים מורכבים על שירים פשוטים המיוצרים על ידי זכרים בהקשרים שונים. * P &lt;0.041; ** p &lt;0.005; *** p &lt;0.0001 לאחר תיקון. הנתונים מוצגים כ ממוצע ± SEM (n = 12 גברים). איור מתוך Chabout, et al. 23 ברשות. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54137/54137fig7large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של נתון זה.</a> Ogether.within-page = "1"&gt; <img alt="הספרה 8" src="/files/ftp_upload/54137/54137fig8.jpg"> איור 8: הברה תחביר דיאגרמות של רצפים על בסיס הסתברות מותנה עבור כל ההקשרים. עובי החץ הוא פרופורציונלי להתרחשות ההסתברות המותנית של סוג המעבר בכל הקשר בממוצע מ- n = 12 זכרים: P (התרחשות של מעבר בהתחשב בהברה ההתחלתית). לשם הבהירות, מעברים נדירים מתחת להסתברות של 0.05 אינם מוצגים. איור מתוך Chabout, et al. 23 ברשות. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54137/54137fig8large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של נתון זה.</a>

עכברים לייצר רפרטואר multisyllabic מורכבים של vocalizations קולי (USVs). אלה USVs נמצאים בשימוש נרחב כמו readouts עבור הפרעות נוירופסיכיאטריות. פרוטוקול זה מתאר כמה מהנוהלים שלמדנו ופיתחנו כדי לעקב באופן עקבי, לאסוף ולנתח את התכונות האקוסטיות והתחביר של שירי העכבר.

Eliciting וניתוח זכר העכבר Ultrasonic ווקאליזציה (USV) שירים

Mice produce ultrasonic vocalizations (USVs) in a variety of social contexts throughout development and adulthood. These USVs are used for mother-pup ...

המטרה הכוללת של הליך זה היא לאסוף ולבצע באופן אמין ניתוח אקוסטי על קולות קוליים של עכבר זכר בוגר או USV במגוון הקשרים חברתיים. שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח לגבי תקשורת קולית והפרעות נלוות. כולל הפרעות נוירו-פסיכיאטריות והפרעות אוטיסטיות באמצעות מודלים של עכברים.אחד היתרונות העיקריים של טכניקה זו הוא שהיא מספקת אמצעי לעורר USV בהקשרים שונים. בדרך כלל, אנשים חדשים בשיטה זו עשויים להתקשות לגרום לעכברים שלהם להתנהג, ולכן עליכם לטפל בעכברים שלכם בזהירות ובעדינות כדי לגרום להם לשיר. דיור סטנדרטי לבעלי חיים מספיק לפרוטוקול זה.שלושה ימים לפני ביצוע ההקלטה בכלובים ניטרליים, חשפו את הזכרים לנקבה בוגרת מבחינה מינית במהלך הלילה. בכל כלוב ניתן לזווג עד שלושה זכרים לנקבה אחת. למחרת הוציאו את הנקבות.שמור את הזכרים בקבוצות שלהם לפחות יומיים נוספים לפני סשן ההקלטה הראשון. כדי להקליט USV מזכר מוכן העבירו בעדינות את החיה בזנב לכלוב נקי ללא מצעים. הנח את הכלוב הזה בתוך קופסה אטומה לרעש.לאחר מכן מכסים את הכלוב במכסה החוטי הפתוח. סגור את הקופסה ותן לבעל החיים להתרגל אליה למשך 15 דקות בינתיים הכינו חומר ממריץ לבדיקה כמתואר בסעיף הבא. כדי להשתמש בדגימות שתן טריות, אספו אותן תוך חמש דקות מרגע ההקלטה.ראשית תפסו עכבר בשרוול כמו בזריקת סמים. לאחר מכן, בעזרת קצה כותנה המוחזק בפינצטה, שפשפו בעדינות ודחפו את שלפוחית השתן של החיה כדי להוציא טיפת שתן ולספוג אותה לחלוטין עם הכותנה. לאחר מכן, בחר עכבר מכלוב אחר וחזור על התהליך באמצעות אותו קצה כותנה.חשוב להשתמש בתערובת של שתן טרי. אחסן את קצה הכותנה על כלי נקי עד שיהיה צורך בו כדי להכין נקבה ערנית כגירוי, בחר אחד שנמצא בשלב טרום הייחום או הייחום. לעכבר יהיה פתח נרתיק רחב ורקמה ורודה מסביב.יש לבודד נקבה כזו עד לצורך. כדי להכין עכבר מורדם פשוט לספק הרדמה כרגיל. אשר את מצב ההרדמה עם צביטה בבוהן ומרח משחה עיניים.עד לצורך, שמור את החיה המורדמת בכלוב נקי על מגבת נייר עם כרית חום מתחת לכלוב המוגדר למינימום חום. הקפידו לבדוק באופן קבוע את הנשימה וטמפרטורת הגוף של בעלי החיים. ניתן להשתמש בעכבר המורדם עד שלושה מפגשים רצופים.כאשר אתה מוכן להקליט, לחץ על כפתור ההקלטה בתוכנה תוך הצגת הגירוי בו-זמנית. כדי להציג שתן או חיה חיה, פשוט הניחו אחד מהם בתוך הכלוב. עם זאת, כדי להציג בעל חיים מורדם, הנח אותו על גבי מכסה הכלובים.לאחר מכן סגרו בשקט את הקופסה והקליטו USV למשך חמש דקות בערך. כדי לסיים הקלטה, לחץ על משבצת העצירה בתוכנה. בדוק את החיה המורדמת לפחות כל 15 דקות.עד שהוא יחזור לשכבת החזה. לאחר מכן ניתן להחזיר אותו לכלוב הביתי שלו. בין הבדיקות נקו את כלוב הבדיקה עם 70% אלכוהול ומים מזוקקים.עבד את ההקלטות האקוסטיות באמצעות תוכנת מנתח שירי העכבר. כך ניתן לנתח את ההברות, המבנה האקוסטי והתחביר שלהם ולבנות אותם מחדש להשמעה לפי הצורך. ראשית יש לשטוף את מכשיר ההשמעה עם 70% אלכוהול ואחריו מים מזוקקים.השתמש במבוך y אטום בצבע שחור עם זרועות של 30 סנטימטר. בקצוות הקיצוניים של שתי הזרועות יש חורים שנקדחו בגובה הרצפה המתאימים לרמקולי האולטרסאונד. לאחר הכביסה יש לייבש את המבוך במגבת.לאחר הייבוש, הגדר עם רמקולי ההפעלה ומצלמת וידאו עילית מותקנת. כדי להתחיל את המבחן, הכניסו תחילה את הנקבה למבוך לתקופת התרגלות של 10 דקות. לאחר 10 דקות אם הנקבה אינה בזרוע ההתחלה, דחף אותה בעדינות בחזרה לזרוע ההתחלה וסגור בעדינות את חלון ההפרדה מפלסטיק.לאחר מכן התחל את הקלטת הווידאו והתחל את הקלטות האודיו בהשמעה בלולאה. לדוגמה, השמיעו שיר שנקלט מגירוי שתן בזרוע אחת והשמיעו שיר שנלכד מגירוי נשי בזרוע השנייה. כעת אפשרו לנקבה לחקור את המבוך במשך חמש דקות.זה מהווה מפגש אחד. לאחר חמש דקות עצור את ההקלטה והחזיר את הנקבה לזרוע ההתחלה. השאירו אותה שם למשך דקה אחת בזמן הניקוי באמצעות מים מזוקקים כדי להסיר שתן או צואה.עשה זאת בין כל המפגשים. במפגש השני, העבירו את ההשמעה המוקלטת לזרועות הנגדיות והקליטו את הנקבה חוקרת את התרחיש הזה במשך חמש דקות. במפגש השלישי והרביעי חזור על שני הפרמטרים של המפגש הקודם בסך הכל 20 דקות של הקלטות מבחן.הפסק תמיד את הקלטת הווידאו בסוף כל המפגשים. שבוע לאחר מכן, בצע ניסוי נוסף על אותה קבוצה של בעלי חיים. אבל השתמש בדוגמאות שיר שונות.עשה זאת כדי לחזק את מהימנות הממצאים. לניתוח, מדדו את הזמן שבילו הנקבות בכל זרוע בכל מפגש. באמצעות הפרוטוקול שהוצג, אופיינו שינויים בהתנהגות הקולית ובתחביר של עכברים B6D2F1J זכרים.במהלך סשן הקלטה של חמש דקות, גבר ממוצע הגיב בצורה שונה מאוד לשלושת הגירויים. גברים גם שינו את הרפרטואר שלהם על פני הקשר. לדוגמה, בתגובה לשתן טרי, זכרים הפיקו חלק גבוה משמעותית של קולות מרובי הברות בשירים שלהם.זכרים גם שינו את המאפיינים האקוסטיים של הברות בודדות על פני הקשר. לדוגמה, הם שרו הברות מסוימות במשרעת וברוחב פס גבוהים יותר בהקשר של שתן נשי. ובטוהר ספקטרלי גבוה יותר בהקשר הנשי הער.במבחן העדפת שירים, נקבות במבוך y בחרו לבלות זמן רב יותר בזרוע עם שירים מורכבים המכילים שתי קולות מרובי הברות או יותר. בניגוד לזרוע הנגדית שבה נוגנו רק שירים פשוטים. לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד לאסוף USV של עכברים במגוון הקשרים חברתיים, כיצד להשמיע אותם בחזרה לעכברים וכיצד לבצע ניתוח אקוסטי ורצף של הקולות שלהם.לאחר השליטה, ניתן לבצע הקלטות התנהגות תוך חמש עד 10 דקות לכל עכבר. עליך להמתין מספר שעות לניתוח. והקפידו לטפל בעכברים בזהירות, כדי לא לשנות את התגובות ההתנהגותיות.

eliciting-and-analyzing-male-mouse-ultrasonic-vocalization-usv-songs

Research

JoVE Journal

Behavior

התנהגות

קולות אולטראסוניים (USVs) בעכברים משתנים בהתאם לגיל, מין, מצב ורקע גנטי. באמצעות שני פולטי אולטרסאונד המשדרים בו זמנית במקומות שונים, בדיקה דו-ברירה זו יכולה להעריך את זיהוי העכברים ואת תגובות ההעדפה למאפיינים שונים של USV.

קביעת העדפות Ultrasonic ניקוד בעכברים באמצעות מבחן השמעה דו בחירה

קולות קוליים של עכברים משמשים כפרוקסי למודל הבסיסים הגנטיים של ליקויים בתקשורת קולית במודלים של עכברים להפרעות נוירו-פסיכיאטריות. הפרוטוקול הנוכחי מתאר שלושה הקשרים ניסיוניים המעוררים באופן מהימן קולות קוליים מגורים (לאורך כל ההתפתחות) ועכברים בוגרים (אינטראקציות חד מיניות, אינטראקציות זכר-ייחום).

הקלטת עכבר Ultrasonic קולות של להערכת תקשורת חברתית

קולות אולטרסוניים של חולדות ועכבר במעבדה (USVs) שימושיות לחקר תפקוד קולי ועצבי. פרוטוקול זה מתאר פרדיגמת תגמול מזון שמעוררת באופן אמין את ה-USVs התיאבון ללא בלבולים הקשורים להזדווגות. הוא מפרט את התניה של בעלי חיים, הצגת גירויים, הקלטה וניתוח אקוסטי, ומספק שיטה ניתנת לשחזור ללימוד תפקוד רגשי-מוטיבציוני ותפקוד חושי מוטורי של הגולגולת.

עוררת תגמול מזון צפויה של קולות אולטרסוניים תיאבוניים בעכברים ועכברים במעבדה

מאמר זה מציג פרוטוקול לבדיקת אוויר קונטקסטואלי ורמז פחד באמצעות מערכת ניתוח וידאו על מנת להעריך פחד למידה וזיכרון בעכברים.

אוויר מבחן הקשר ורמז פחד באמצעות מערכת ניתוח וידאו בעכברים

מתוארת פרדיגמת הקישור של מסיח דעת-תגובה. ניתן להשתמש בו כדי לשפוך אור על ההשפעה שיכולה להיות לגירויים לא רלוונטיים, המתחרים ביעדים על תגובה, על הפעולה האנושית. ניתן לנתח הן את השפעות אחזור התגובה והן את השפעות עיכוב מסיח הדעת בתוך הפרדיגמה.

גירויים לא רלוונטיים ופעולת בקרה: ניתוח ההשפעה של גירויים שהתעלמו מן באמצעות המסיח-תגובת איגוד פרדיגמה

כתב יד זה מתאר פרוטוקול מבוך מים של מוריס (MWM) המותאם לשימוש עם מודל עכברי נפוץ של מחלת אלצהיימר. ה-MWM נמצא בשימוש נרחב במודלים של עכברים טרנסגניים. יישום הליך רגיש למתח הרקע של מודל העכבר חיוני לאיתור הבדלים בין קבוצות.

מבחן מוריס מים מבוך: אופטימיזציה לזני עכבר ובדיקת איכות סביבה

פרוטוקול שלב אחר שלב זה מנתח התנהגות שלילית geotaxis דרוזופילה באמצעות מערכת אוטומטית צילינדר רב מארח מאות זבובים ומסנכרן פעולתם על ידי מנוע חשמלי. בעת סינכרון, התנהגות לטוס geotaxis שלילי זה לבדיקה, דיגיטלית המוקלט ולאחר שנותחה שימוש בתוכנת RflyDetection בעיצוב עצמי.

וזמינותו אוטומטית מהירה Geotaxis שלילי איטרטיבי לניתוח התנהגות טיפוס למבוגרים מודל דרוזופילה הקשורים ניוון מוחיים

אנו מציגים זיהוי, רכישה, וניתוח eyeblink המחירים בזמן צפייה תוכן מדיה.

באמצעות מדידות אלקטרואנצפלוגרם הקלטת וידאו באיכות גבוהה עבור ניתוח התפיסה החזותית של תוכן מדיה

מאמר זה מציג את מנגנון T-maze אוטומטיות שהמצאנו, פרוטוקול מבוסס על זה מכשירי ניתוח החלטות המבוססות על עיכוב מאמץ החלטות המבוססות בחולדות לנוע חופשי.

T-maze אוטומטית המבוסס על המנגנון ופרוטוקול לניתוח עיכוב מאמץ מבוססות החלטות בחולדות העברה חינם

פרוטוקול זה מודד מרחבי למידה וזיכרון באמצעות המבוך בארנס. פרדיגמה עלמה במצוקה הרומן משמשת להערכת פעילות גינקולוגיות והתנהגות פרוסוציאלית בעכברים.

ניתוח מרחבי למידה והתנהגות פרוסוציאלית בעכברים באמצעות בארנס מבוך פרדיגמות עלמה במצוקה

למדו איך לאסוף ולנתח ווקליזציות אולטרסוניות בזכרי עכברים בקונטקסטים חברתיים שונים. פרוטוקול זה מאפשר חקר תקשורת קולית והפרעות נוירופסיכיאטריות.

Eliciting וניתוח זכר העכבר Ultrasonic ווקאליזציה (USV) שירים

גלה סרטונים נוספים