Nephrotoxin Microinjection in Zebrafish to Model Acute Kidney Injury

Robert A. McKee; Rebecca A. Wingert

doi:10.3791/54241

Nephrotoxin Microinjection דג הזברה למודל אי-ספיקת כליות חריפה

JoVE Journal
Biology

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Biology

Nephrotoxin Microinjection in Zebrafish to Model Acute Kidney Injury

Nephrotoxin Microinjection דג הזברה למודל אי-ספיקת כליות חריפה

Full Text

9,311 Views

07:58 min

July 17, 2016

DOI: 10.3791/54241-v

Robert A. McKee^1,2, Rebecca A. Wingert^1,2

¹Center for Zebrafish Research, Department of Biological Sciences,University of Notre Dame, ²Center for Stem Cells and Regenerative Medicine, Department of Biological Sciences,University of Notre Dame

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

פציעות כליות הנגרמות nephrotoxins, הכולל תרופות החל אנטיביוטיקה כימותרפיות, שיכולות לגרום להפרעות מורכבות בפתוגנזה ששרידיו מובנים. פרוטוקול זה מדגים כיצד דג הזברה יכול לשמש בסיס לפיתוח מודלים למחלות של תנאים אלה, אשר יכול להיות מיושם על זיהוי של צעדים renoprotective.

המטרה הכוללת של פרוטוקול זה היא להשתמש בדגי זברה כדי לצפות בהשפעה של נפרוטוקסינים כגון גנטמיצין או ציספלטין כדי לדגמן פגיעה כלייתית חריפה. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שמודל דג הזברה מאפשר הדמיה בזמן אמת של נזק והתחדשות לתאים לאחר פגיעה כלייתית חריפה. כדי להתחיל בהליך זה, הכינו כלי מניפולציה לעוברים למיקום העוברים להזרקת מיקרו על ידי הצמדת קצה טעינת ג'ל בקצה מחט חיתוך ישרה בגודל חמישה אינץ' ואבטחו אותו בעזרת סרט או דבק סופר.

לאחר מכן, הכינו כמה מחטי הזרקת מיקרו מחודדות עדינות על ידי משיכת כוסות הבורוסיליקט המלוטשות באש עם נימה באמצעות מושך פיפטה. לאחר מכן, השתמש בסכין גילוח או בקצה מלקחיים עדינים כדי לחתוך את קצות המחט כדי ליצור קצות הזרקה זוויתיים חדים. לאחר מכן, הניחו את המחטים על רצועת חימר דוגמנות בצלחת פטרי כדי להגן על קצות המחטים.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos